Methodenartikel

Vergelijkende studie van het gehalte aan polysachariden en de antioxiderende werking van Hippophae rhamnoides subsp. sinensis en Hippophae gyantsensis

DOI:

10.3791/68855

⸱

15 augustus 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 2School of Ethnic Medicine, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine

In dit artikel

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Deze studie vergeleek het polysacharidegehalte van Hippophae rhamnoides subsp. sinensis Rousi en Hippophae gyantsensis (Rousi) Y. S. Lian verkregen door warmwaterextractie en gekwantificeerd door fenol-zwavelzuurcolorimetrie. We onderzochten ook in vitro antioxidante activiteiten van polysacchariden van deze twee Hippophae-soorten door middel van 2,2-difenyl-1-picrylhydrazyl vrije radicalen opruimingsexperimenten.

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dit artikel rapporteert een goed ontworpen en diepgaande vergelijkende studie naar de polysacharideopbrengsten, inhoud en antioxiderende activiteiten van twee Hippophae-soorten van grote onderzoekswaarde, namelijk Hippophae rhamnoides subsp. sinensis Rousi en Hippophae gyantsensis (Rousi) Y. S. Lian. De totale polysachariden van H. rhamnoides subsp. sinensis en H. gyantsensis werden verkregen door extractie met heet water. De opbrengsten werden vergeleken en het gehalte aan polysachariden werd nauwkeurig bepaald door middel van fenol-zwavelzuurcolorimetrie en vergeleken. Ondertussen werd de antioxiderende werking van de polysacchariden geëvalueerd door middel van 2,2-difenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) vrije radicalenopvang. De resultaten toonden aan dat de polysacharidenopbrengst (percentage ruw extract ten opzichte van de grondstof) van H. rhamnoides subsp. sinensis (1,18% ± 0,02%) significant lager was dan die van H. gyantsensis (3,12% ± 0,06%) (P < 0,01). Het gehalte aan polysachariden (gedefinieerd als pure polysachariden in het extract) van H.rhamnoides subsp. sinensis (352,97±1,07 mg/g) was significant hoger dan dat van H. gyantsensis (300,21 ± 1,49 mg/g) (P < 0,01). De halfremmende concentratie van de DPPH-activiteit voor het wegvangen van vrije radicalen van H. rhamnoides subsp. sinensis polysacchariden (0,026 ± 0,004 mg/ml) was iets lager dan die van H. gyantsensis-polysacchariden (0,021 ± 0,004 mg/ml). Er werd echter geen significant verschil gevonden tussen de twee Hippophae-soorten (P > 0,05). Dit experiment verduidelijkte de verschillen in polysacharideopbrengst, gehalte en antioxiderende activiteit tussen H. rhamnoides subsp. sinensis en H. gyantsensis. Dit werk kan een wetenschappelijke basis bieden voor de kwaliteitsevaluatie van duindoorn en de verdere ontwikkeling van polysacharide actieve componenten.

Inleiding

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Duindoorn is de gedroogde rijpe vrucht van planten uit de Elaeagnaceae-familie. Het is een veelgebruikt medicinaal en eetbaar materiaal in China, evenals een belangrijke bron van voedingssupplementen en gezondheidsproducten in India, Rusland, Finland en andere Europese landen vanwege de eigenschappen van het stimuleren van de milt om de spijsvertering te bevorderen, hoest te verlichten en slijm te verdrijven, de bloedcirculatie te bevorderen en bloedstasis te verdrijven1. Duindoorn bevat een rijk scala aan bioactieve componenten, zoals flavonoïden, fenolische verbindingen, polysachariden, glycosiden en organische zuren, en heeft een lange geschiedenis van toepassing in de traditionele Chinese geneeskunde 2,3. Over het algemeen worden flavonoïden beschouwd als de belangrijkste bioactieve stoffen van duindoorn. Van polysacchariden is echter onlangs erkend dat ze ook uitstekende fysiologische en farmacologische activiteiten hebben en daarom de aandacht hebben getrokken van wetenschappelijke onderzoekers. Van duindoornpolysacchariden is aangetoond dat ze actief zijn bij het reguleren van het immuunsysteem, het beschermen van de lever en het reguleren van stoornissen in het lipidenmetabolisme en de darmmicrobiota, evenals antioxiderende, ontstekingsremmende, antitumor- en hypoglykemische effecten 4,5,6. Ze kunnen fungeren als natuurlijke antioxidanten en zo de ontwikkeling van nieuwe functionele voedingsmiddelen en geneesmiddelen mogelijk maken. Ondertussen zijn duindoornpolysacchariden ook vatbaar voor afbraak door maagzuur, wat gunstig is voor de opname en het gebruik van voedingsstoffen in het menselijk lichaam 7,8.

Warmwaterextractie (HWE), microgolf-geassisteerde extractie en ultrasoon-geassisteerde extractie zijn de meest gebruikte methoden voor de extractie van duindoornpolysacchariden9. De structuren van polysachariden die door verschillende extractiemethoden worden verkregen, variëren10in termen van monosacharidesamenstelling, molecuulgewicht (Mw), vertakkingsgraad, uronzuurgehalte, glycosidische bindingstypen en trihelixconformatie11,12. Over het algemeen hebben polysacharideoplossingen met een hoog Mw-gehalte een hoge viscositeit en een lage oplosbaarheid, wat van invloed kan zijn op hun biologische activiteiten en toepassingen13. HWE is de meest gebruikte techniek voor polysacharide-extractie in laboratorium- en industriële omgevingen vanwege het voordeel van eenvoud14,15. Bovendien is het een van de meest gebruikte extractiemethoden voor duindoornpolysacchariden9. Daarom werden in deze studie polysacchariden geëxtraheerd via HWE. De primaire methoden voor het bepalen van het polysacharidegehalte zijn de fenol-zwavelzuur- en anthrone-zwavelzuurmethoden 16,17,18,19. De fenol-zwavelzuurmethode wordt op grote schaal toegepast vanwege de eenvoudige detectieprocedure, goede stabiliteit en hoge gevoeligheid20. Wen et al. bepaalden het gehalte aan polysachariden geëxtraheerd uit duindoorn door middel van de fenol-zwavelzuurmethode21. Daarom werd in dit experiment het gehalte aan polysacchariden bepaald met behulp van de fenol-zwavelzuurmethode. De diepte van de oranje samengestelde oplossing die wordt gevormd na de fenol-zwavelzuurreactie is evenredig met het gehalte aan polysachariden en kan worden bepaald bij een golflengte van 490 nm22.

Natuurlijke polysachariden vertonen opmerkelijke antioxiderende activiteiten in vivo en in vitro. Frambozenpolysacchariden kunnen oxidatieve stress in vetrijke dieetmodellen verlichten door de darmmicrobiota te reguleren23. Polysacchariden zijn de belangrijkste actieve componenten in Pueraria lobata en vertonen diverse biologische activiteiten, waaronder antioxidatie24. Dou et al. ontdekten dat bramenpolysacchariden fysiologische functies hebben, zoals antioxidatie25. De antioxiderende werking van polysacchariden wordt meestal beoordeeld op basis van hun vermogen om verschillende vrije radicalen op te vangen, waaronder 2,2-difenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), hydroxyl en superoxide anionradicalen, evenals hun ABTS-vermogen om radicale kationen op te vangen26. DPPH-analyse wordt veel gebruikt omdat het het vermogen van antioxidanten meet om violette DPPH-radicalen te reduceren tot lichtgele, stabiele moleculen door middel van waterstofatoomoverdracht27. De resterende violette DPPH-radicalen worden gekwantificeerd met behulp van een ultraviolette (UV)-zichtbare (Vis) spectrofotometer bij ongeveer 515-520 nm om de antioxidantactiviteitte bepalen 28,29.

Eerdere studies hebben de inhoud en antioxidantactiviteit van duindoornpolysacchariden onderzocht21. De overgrote meerderheid van deze studies beperkte zich echter tot Hippophae rhamnoides subsp. sinensis. Het is de meest gebruikte en wijdverspreide Hippophae-soort in China en is officieel vastgelegd in de Chinese Farmacopee. Studies naar Hipphophae gyantsensis, een soort die endemisch is in Xizang, China, die vaak wordt gebruikt in de Tibetaanse geneeskunde en gedocumenteerd is in de Sichuan Provincial Catalogue of Tibetan Medicinal Materials, zijn zelden gerapporteerd. Bovendien is er geen onderzoek gedaan naar de inhoud en antioxiderende werking van polysacchariden van verschillende Hippophae-soorten , namelijk H. rhamnoides subsp. sinensis en H. gyantsensis. Daarom vergelijkt deze studie eerst het polysacharidegehalte van H. rhamnoides subsp. sinensis en H. gyantsensis, geëxtraheerd via HWE en gekwantificeerd door fenol-zwavelzuurcolorimetrie. De antioxiderende werking van polysacchariden van deze twee Hippophae-soorten werd verder onderzocht door middel van DPPH-tests voor het opruimen van vrije radicalen. De huidige studie zal naar verwachting wetenschappelijke gegevens opleveren voor de kwaliteitsevaluatie en verdere ontwikkeling van de actieve polysacharidecomponenten van de bovengenoemde twee Hippophae-soorten .

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Monsters en materialen

  1. Verzamel duindoornmonsters van verschillende Hippophae van het Qinghai-Xizang-plateau.
    OPMERKING: De monsters werden geïdentificeerd door universitair hoofddocent Yue Liu van de Chengdu University of Traditional Chinese Medicine. Voucher-exemplaren werden gedeponeerd in de School of Ethnic Medicine, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine. De informatie over de bemonstering wordt weergegeven in tabel 1. De details van de reagentia en apparatuur die in dit onderzoek zijn gebruikt, staan vermeld in de materiaaltabel.
  2. Droog de monsters gedurende 72 uur in een oven op 40 °C.
  3. Maal 20 g van elk duindoornmonster tot poeder en passeer het door een zeef nr. 3. Verwerk elk monster met drie parallelle replicaten. Ga door met het pletten van de monsters die niet door de zeef zijn gegaan en zeef ze vervolgens totdat ze allemaal zijn gezeefd.
  4. Bewaar de monsters bij -20 °C voor vervolgonderzoek.

2. Extractie van duindoornpolysacchariden

OPMERKING: Deze studie heeft de eerder vastgestelde extractiemethode voor duindoorn overgenomen met enkele aanpassingen om polysacchariden30 te verkrijgen.

  1. Weeg 5,0 g duindoornmonsterpoeder af en doe dit in een kolf van 250 ml met ronde bodem. Voeg 50 ml watervrije ethanol toe aan het poeder en week het 24 uur bij kamertemperatuur (RT; 25 °C) om lipofiele componenten te verwijderen. Verwerk elk monster met drie parallelle replicaten.
  2. Filtreer het monsterpoeder, dat een nacht is geweekt, met behulp van een Buchner-trechter en gooi het filtraat vervolgens weg om het filterresidu te verkrijgen. Was de filterresten driemaal met 50 ml gedeïoniseerd water en droog het tot een constant gewicht bij 40 °C.
  3. Breng het ontvette filterresidu over in een gedroogde kolf van 250 ml met ronde bodem, voeg 150 ml gedeïoniseerd water toe in een vaste: vloeistofverhouding van 1:30 (g/ml) en voer refluxextractie uit in een waterbad van 80 °C tweemaal gedurende 2 uur per keer. Scheid het filtraat om de ruwe oplossing van duindoornpolysacharide te verkrijgen.
  4. Concentreer het extract met behulp van een roterende verdamper gedurende 1,5 uur bij 50 °C. Bewaar de geconcentreerde oplossing in de koelkast bij 4 °C voor later gebruik.
  5. Voeg Sevage-reagens (CHCl3:C4H9OH = 4:1, v:v) toe aan de ruwe polysacharideoplossing in een volumeverhouding van Sevage-reagens: ruwe polysacharideoplossing van 1:4. Roer het mengsel met een magnetische roerder gedurende 20 minuten op een snelheid van 1050 tpm.
  6. Breng de vloeistof over in een centrifugebuis van 50 ml en centrifugeer deze gedurende 15 minuten op 4000 × g en vang vervolgens het bovenstaande op. Herhaal de bovenstaande handeling drie keer totdat er geen wit vlokkig neerslag meer verschijnt op het grensvlak tussen de twee fasen.
  7. Concentreer het duindoornpolysacharide-extract na verwijdering van het eiwit. Voeg watervrije ethanol toe in een volumeverhouding van 1:3 voor watervrije ethanolprecipitatie en zet het mengsel een nacht op 4 °C.
  8. Verwijder de bovenste laag watervrije ethanol, breng het mengsel over in een centrifugebuis van 50 ml en centrifugeer het gedurende 15 minuten bij 4000 × g om het neerslag te verkrijgen. Vriesdroog het neerslag om totale polysachariden te verkrijgen.
  9. Bereken de totale polysacharideopbrengsten met behulp van vergelijking (1) hieronder:
    figure-protocol-1
    OPMERKING: In vergelijking (1) staat m voor het gewicht (g) van duindoornpolysacchariden en M voor de massa (g) van het duindoornmonster.

3. Bepaling van het polysacharidegehalte

  1. Voorbereiding van de oplossing
    1. Bereiding van de fenolreagensoplossing
      1. Weeg nauwkeurig 3 g fenol af en doe het in een bruine maatkolf. Voeg 50 ml gedeïoniseerd water toe om fenol op te lossen.
      2. Schud het mengsel grondig tot het homogeen is. Label de kolf en bewaar deze voor later gebruik.
    2. Bereiding van glucosestandaardoplossing
      1. Weeg nauwkeurig 10 mg watervrije glucose af en doe dit in een maatkolf van 10 ml. Voeg gedeïoniseerd water toe om glucose op te lossen en schud het mengsel goed.
      2. Verdun het mengsel tot het gewenste volume met gedeïoniseerd water om een glucosestandaardoplossing te verkrijgen.
    3. Bereiding van de oplossing van het analysemonster.
      1. Weeg nauwkeurig 5 mg gevriesdroogde duindoornpolysacchariden (ZG1-ZG5 en JZ1-JZ5) af in volumetrische kolven (n = 10). Voeg gedeïoniseerd water toe aan elke kolf tot een eindvolume van 50 ml.
      2. Sonificeer het mengsel gedurende 20 minuten tot de polysacchariden volledig zijn opgelost. Verwerk elk monster met drie parallelle replicaten.
  2. Opbouw van de standaardcurve
    OPMERKING: Bij de fenol-zwavelzuurmethode reageren polysacchariden met geconcentreerd zwavelzuur om furfuralderivaten te genereren, die vervolgens condenseren met fenol om een oranjegele verbinding te vormen. De maximale absorptiegolflengte van deze verbinding is ongeveer 490 nm. Daarom werd de detectiegolflengte voor dit experiment vastgesteld op 490 nm22.
    1. Verdun de standaard glucoseoplossing met gedeïoniseerd water tot een concentratie van 0,1 mg/ml. Breng met behulp van een micropipet voorzichtig 200, 300, 400, 500, 600 en 700 μL van de glucosestandaardoplossing over in zes afzonderlijke, schone reageerbuisjes. Voeg zuiver water toe tot een totaal volume van 1,0 ml en meng vervolgens elke oplossing voorzichtig om een gelijkmatige verdunning te garanderen.
    2. Voeg 1,0 ml 6% fenoloplossing en 5,0 ml zwavelzuur toe aan de bovengenoemde reageerbuisjes. Meng goed, laat afkoelen en laat dan 30 minuten op RT staan.
      OPMERKING: Fenol is een giftige chemische verbinding en geconcentreerd zwavelzuur is bijtend. Handschoenen moeten worden gedragen bij het bereiden van fenol- en zwavelzuuroplossingen en de procedure moet worden uitgevoerd in een zuurkast.
    3. Breng de bovengenoemde monsters over in cuvetten en gebruik zuiver water als blanco in plaats van het monster. Meet hun absorptie bij 490 nm met een UV-VIS-spectrofotometer en drie replicaten.
    4. Zet de standaardcurve uit met glucoseconcentraties als x-as en extinctiewaarden als y-as. Verkrijg de regressievergelijking en bereken de correlatiecoëfficiënt (R²).
      OPMERKING: De UV-VIS spectrofotometer moet een half uur van tevoren worden voorverwarmd. Bij het meten van de extinctie in deze stap moet de extinctie tussen 0,2 en 0,8 liggen. Daarom moet de concentratie van het monster worden gekwantificeerd.
  3. Methodologie studie
    1. Precisie test:
      1. Neem JZ2 en bereid de testoplossing volgens de methode beschreven in stap 3.1.3. Voer fenol-zwavelzuurcolorimetrie uit volgens de methode beschreven in stap 3.2.2.
      2. Bepaal vervolgens de extinctie volgens de procedure beschreven in stap 3.2.3. Herhaal deze procedure zes keer en bereken de relatieve standaarddeviatie (RSD).
    2. Stabiliteitstest:
      1. Bereid de JZ2-monsteroplossing voor volgens de methode die wordt beschreven in stap 3.1.3. Voer 0, 2, 4, 6, 8 en 10 uur na de monstervoorbereiding fenol-zwavelzuurkleurimetrie uit volgens de in stap 3.2.2 gespecificeerde methode.
      2. Bepaal vervolgens de extinctie door de procedure te volgen die wordt beschreven in stap 3.2.3 en bereken de RSD.
    3. Herhaalbaarheid test:
      1. Bereid de JZ2-monsteroplossing voor volgens de methode die wordt beschreven in stap 3.1.3. Bereid zes replicaten parallel voor. Voer fenol-zwavelzuurcolorimetrie uit volgens de in stap 3.2.2 beschreven methode.
      2. Bepaal daarna de extinctie door de procedure te volgen die wordt beschreven in stap 3.2.3 en bereken de RSD.
    4. Hersteltest:
      1. Neem JZ2 en bereid de testoplossing volgens de methode beschreven in stap 3.1.3. Bereid negen replicaten parallel voor. Voeg de referentieoplossingen toe die overeenkomen met 80%, 100% en 120% van het totale polysacharidegehalte in het monster en bereid drie parallelle monsters voor.
      2. Voer fenol-zwavelzuurcolorimetrie uit volgens de in stap 3.2.2 gespecificeerde methode. Bepaal vervolgens de extinctie door de procedure te volgen die wordt beschreven in stap 3.2.3 en bereken het herstelpercentage met behulp van vergelijking (2).
        figure-protocol-2
        OPMERKING: In vergelijking (2) staat A voor de hoeveelheid glucose in de duindoornmonsteroplossing, B voor de hoeveelheid toegevoegde glucose en C voor de gemeten waarde van de glucosehoudende oplossing en de duindoornmonsteroplossing.
  4. Bepaling van de inhoud
    1. Bereid de monsteroplossing voor zoals beschreven in stap 3.1.3 en voer fenol-zwavelzuurkleuring uit volgens de in stap 3.2.2 beschreven methode.
    2. Bepaal de extinctie door de procedure te volgen die wordt beschreven in stap 3.2.3 en bereken het polysacharidegehalte met behulp van de standaardcurvemethode. Voer deze bewerkingen drie keer parallel uit voor elk monster.

4. DPPH radicale opruimingsactiviteit31,32

  1. Weeg nauwkeurig 2,7 mg DPPH af in een lege maatkolf van 50 ml. Los het op in 50 ml watervrije ethanol om een DPPH-stockoplossing te bereiden met een concentratie van 0,054 mg/ml en verkrijg de DPPH-werkoplossing.
    OPMERKING: De DPPH-oplossing moet in het donker worden bewaard.
  2. Weeg nauwkeurig 5 mg vitamine C (Vc) af in een lege maatkolf van 10 ml en los deze op in 10 ml gedeïoniseerd water om een Vc-oplossing te bereiden met een concentratie van 0,5 mg/ml. Verdun het achtereenvolgens om Vc-testoplossingen te bereiden met concentraties van 0,5, 0,125, 0,03125, 0,0078125 en 0,001953 mg/ml.
  3. Weeg nauwkeurig 5 mg van elke duindoornpolysacharide (ZG1-ZG5 en JZ1-JZ5) af. Los elk monster op in 10 ml gedeïoniseerd water om duindoornpolysaccharide-monsteroplossingen te bereiden met een concentratie van 0,5 mg/ml. Verdun de bovenstaande oplossingen achtereenvolgens om duindoornpolysaccharidetestoplossingen te bereiden met concentraties van 0,5, 0,125, 0,03125, 0,0078125 en 0,001953 mg/ml.
  4. Gebruik de DPPH-oplossing als substraat en bereid de volgende groepen op een plaat met 96 putjes: negatieve controlegroep A0 (150 μl water en 50 μl DPPH-oplossing), monstergroep A1 (150 μl monster of Vc-oplossing en 50 μl DPPH-oplossing) en monstercontrolegroep A2 (150 μl monster en 50 μl watervrije ethanol). Voer deze procedure in drievoud uit.
  5. Laat de reactie 30 minuten in het donker doorgaan. Meet vervolgens de extinctie bij 517 nm. Herhaal het experiment drie keer en bereken de DPPH-snelheid voor het opvangen van vrije radicalen met behulp van vergelijking (3).
    OPMERKING: De extinctie van de DPPH-oplossing moet op 0,7 ± 0,02 worden gehouden. Te hoge en lage concentraties kunnen leiden tot onnauwkeurige extinctiemetingen, waardoor de uiteindelijke experimentele resultaten worden beïnvloed.
    figure-protocol-3
    In vergelijking (3) is A0 de absorptie van gedeïoniseerd water en DPPH-oplossing, A1 is de absorptie van het monster of Vc- en DPPH-oplossing en A2 is de absorptie van het monster en watervrije ethanol.
  6. Berekening van de halfremmende concentratie (Ic50)
    1. Genereer een visueel geordende gegevenstabel die de correlatie illustreert tussen de concentraties van reactietestverbindingen (0,5, 0,125, 0,03125, 0,0078125 en 0,001953 mg/ml) en de bijbehorende procentuele reactiewaarden.
    2. Gebruik niet-lineaire curve-fitting (met GraphPad Prism) om de IC50 en standaardfout te bepalen.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Opbrengst van ruwe polysachariden
Polysacchariden werden geëxtraheerd via HWE. De reflux van het waterbad wordt weergegeven in aanvullende figuur 1. De concentratie van de polysacharide-extractoplossing wordt geïllustreerd in aanvullende figuur 2. Het gelaagdheidseffect van centrifugatie na deproteïnering wordt weergegeven in aanvullende figuur 3. De vijf batches van H. rhamnoides subsp. sinensis heb...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Duindoorn is een traditioneel Tibetaans medicijn. Polysacchariden zijn belangrijke componenten van duindoorn. Er zijn veel onderzoeken gedaan naar de bepaling van het gehalte aan polysachariden en de antioxiderende activiteit21. Slechts enkelen hebben echter het gehalte aan polysachariden en de antioxiderende werking van verschillende Hippophae-soorten vergeleken, zoals de geneeskrachtige soorten H. rhamnoides subsp. sinensis en H. g...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De auteurs hebben geen belangenconflicten te onthullen.

Dankbetuigingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dit werk werd financieel ondersteund door de National Natural Science Foundation of China (nr. 82374145), de Natural Science Foundation van de provincie Sichuan (nr. 2025ZNSFSC0608) en de National Natural Science Foundation of China (nr. U23A20520)

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Analytical balance (met een precisie van 0,0001 g)Sartorius Scientific Instruments (Beijing) Co., Ltd.BSA224S-CW
Analytical balance (met een precisie van 0,00001 g)Sartorius Scientific Instruments (Beijing) Co., Ltd.CPA225D
Benchtop laagsnelheidscentrifugeShanghai Zigui Instrument Co., Ltd.TD4K-Z
DPPHShanghai Yuanye Bio-Technology Co., Ltd.CAS 1898-66-4
EthanolChengdu Kelong Chemical Products Co., Ltd.CAS 64-17-5
EP tubeHunan BKMAK Holding Co., Ltd.BS-20-M2 mL
VriesdrogerLabconco CorporationLABCONCO
Glucose anhydrousChengdu Kelong Chemical Products Co., Ltd.CAS 50-99-7Referentiestandaard
GraphPad  Prim 9.5.0 GraphPad SoftwareN/ABepaal de IC50-waarde en de P-waarde.
HeteluchtcirculatiedrogerShanghai Yiheng Technology Instrument Co., Ltd.NB-DGG-9070A
L-AscorbinezuurBeijing Labgic Technology Co., Ltd.CAS 50-81-7Positieve controledrug
MicroplaatlezerShanghai Shanpu Biotechnology Co., Ltd.Read Max 1500
96-well plateBeijing Labgic Technology Co., Ltd.11512
OriginPro 2025OriginLabN/AMaak een clearantiepercentage-lijngrafiek
PIPETTIPJESBeijing Labgic Technology Co., Ltd.BS-200-T200 μL
PIPETTIPJESBeijing Labgic Technology Co., Ltd.T-1000-B1000 μL
FenolChengdu Kelong Chemical Products Co., Ltd.CAS 108-95-2
Roterende verdamper BUCHI Laboratory Equipment Trading (Shanghai) Ltd.Buchi R-100
Standaard Reagens Type Zuiver Water SysteemQingdao Flom Technology Co., Ltd.FBZ2001-up-p
Thermostaat digitaal weergave waterbadGuan'an Scientific Instruments (Zhejiang) Co., Ltd.WB100-6F
UV-Visible SpectrophotometerShanghai Mapada Instruments Co., Ltd. V-1100D
UltrasoonreinigerSheng Zheng ChaoJie Industrial Co.,Ltd.CJ-060SDUltrasoonreiniger 360 W 50 Hz

Referenties

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Chinese Pharmacopoeia Committee. Pharmacopoeia of the People's Republic of China. 1, Chinese Medical Science and Technology Press. (2025).
  2. Su, S. Y., et al. Structure elucidation, immunomodulatory activity, antitumor activity and its molecular mechanism of a novel polysaccharide from Boletusreticulatus Schaeff. Food Sci Hum Wellness. 12 (2), 647-661 (2023).
  3. Wang, Y. X., et al. Utilizing relative ordered structure theory to guide polysaccharide purification for structural characterization. Food Hydrocoll. 115, 106603(2021).
  4. Zhang, W., et al. Seabuckthorn berry polysaccharide protects against carbon tetrachloride-induced hepatotoxicity in mice: via anti-oxidative and anti-inflammatory activities. Food Funct. 8 (9), 3130-3138 (2017).
  5. Wang, X., et al. Seabuckthorn berry polysaccharide extracts protect against acetaminophen induced hepatotoxicity in mice via activating the Nrf-2/HO-1-SOD-2 signaling pathway. Phytomedicine. 38, 90-97 (2018).
  6. Zhao, L., et al. Proteomic analysis reveals the molecular mechanism of Hippophae rhamnoides polysaccharide intervention in LPS-induced inflammation of IPEC-J2 cells in piglets. Int J Biol Macromol. 164, 3294-3304 (2020).
  7. Chen, J. H., Chen, X., Zhou, G. H., Xu, X. L. Ultrasound: a reliable method for regulating food component interactions in protein-based food matrices. Trends Food Sci Technol. 128, 316-330 (2022).
  8. Pundir, S., et al. Ethnomedicinal uses, phytochemistry and dermatological effects of Hippophae rhamnoides L.: A review. J Ethnopharmacol. 266, 113434(2021).
  9. Teng, H., He, Z. G., Hong, C. Z., Xie, S. Z., Zha, X. Q. Extraction, purification, structural characterization and pharmacological activities of polysaccharides from sea buckthorn (Hippophae rhamnoides L.): A review. J Ethnopharmacol. 324, 117809(2024).
  10. Niu, H., et al. Pectin-stabilized emulsions: Structure-emulsification relationships, covalent and non-covalent modifications, and future trends. Trends Food Sci Technol. 159, 104986(2025).
  11. Dou, Z. M., Chen, C., Huang, Q., Fu, X. The structure, conformation, and hypoglycemic activity of a novel heteropolysaccharide from the blackberry fruit. Food Funct. 12 (12), 5451-5464 (2021).
  12. Niu, H., et al. Multiscale combined techniques for evaluating emulsion stability: A critical review. Adv Colloid Interface Sci. 311, 102813(2023).
  13. Yuan, D., Li, C., Huang, Q., Fu, X. Ultrasonic degradation effects on the physicochemical, rheological and antioxidant properties of polysaccharide from Sargassum pallidum. Carbohydr Polym. 239, 116230(2020).
  14. Chen, R., et al. Extraction, structural characterization and biological activities of polysaccharides from mulberry leaves: A review. Int J Biol Macromol. 257, 128669(2024).
  15. Lei, J., et al. Pressurized hot water extraction, structural properties, biological effects, and in vitro microbial fermentation characteristics of sweet tea polysaccharide. Int J Biol Macromol. 222 (Pt B), 3215-3228 (2022).
  16. Chen, F., Huang, G. L. Antioxidant activity of polysaccharides from different sources of ginseng. Int J Biol Macromol. 125, 906-908 (2019).
  17. Chen, Y. F., Yang, H., Shen, Z. Z., Ye, J. R. Whole-genome sequencing and potassium-solubilizing mechanism of Bacillus aryabhattai SK1-7. Front Microbiol. 12, 722379(2022).
  18. Yun, Y. H., et al. A green method for the quantification of polysaccharides in Dendrobium officinale. RSC Adv. 5, 105057-105065 (2015).
  19. Kim, J. M., et al. Quantitative determination of fucoidan using polyion-sensitive membrane electrodes. Anal Chim Acta. 877, 1-8 (2015).
  20. Ogura, I., Sugiyama, M., Tai, R., Mano, H., Matsuzawa, T. Optimization of microplate-based phenol-sulfuric acid method and application to the multi-sample measurements of cellulose nanofibers. Anal Biochem. 681, 115329(2023).
  21. Wen, J., et al. Polysaccharides from sea buckthorn - Ultrasound-assisted enzymatic extraction, purification, structural characterization, and antioxidant activity analysis. Food Chem X. 26, 102265(2025).
  22. Yue, F. F., et al. Effects of monosaccharide composition on quantitative analysis of total sugar content by phenol-sulfuric acid method. Front Nutr. 9, 963318(2022).
  23. Dou, Z. M., et al. Pectin-type polysaccharides from raspberry (Rubus idaeus L.): structure characterization and activity against DSS-induced colitis. Carbohydr Polym. 364, 123710(2025).
  24. Li, Q., et al. α-D-1,3-glucan from Radix Puerariae thomsonii improves NAFLD by regulating the intestinal flora and metabolites. Carbohydr Polym. 299, 120197(2023).
  25. Dou, Z. M., Chen, C., Fu, X. Digestive property and bioactivity of blackberry polysaccharides with different molecular weights. J Agric Food Chem. 67 (45), 12428-12440 (2019).
  26. Zhou, S. Y., Huang, G. L., Huang, H. L. Extraction, derivatization and antioxidant activities of onion polysaccharide. Food Chem. 388, 133000-133009 (2022).
  27. Musa, K. H., Abdullah, A., Kuswandi, B., Hidayat, M. A. A novel high throughput method based on the DPPH dry reagent array for determination of antioxidant activity. Food Chem. 141 (4), 4102-4106 (2013).
  28. Garcia, E. J., et al. Antioxidant activity by DPPH assay of potential solutions to be applied on bleached teeth. Braz Dent J. 23 (1), 22-27 (2012).
  29. Wei, A., Shibamoto, T. Antioxidant/lipoxygenase inhibitory activities and chemical compositions of selected essential oils. J Agric Food Chem. 58 (12), 7218-7225 (2010).
  30. Song, Y. C. Extraction, purification and modulation of mice gut microbiota by sea buckthorn polysaccharides. , Xihua University. (2022).
  31. Dong, N., et al. Exploring quality variations of Polygonati Rhizoma during nine-steaming and nine-drying process through color-polysaccharides-antioxidant activity linkages. Chin Tradit Herbal Drugs. 56 (2), 476-486 (2025).
  32. Rumpf, J., Burger, R., Schulze, M. Statistical evaluation of DPPH, ABTS, FRAP, and Folin-Ciocalteu assays to assess the antioxidant capacity of lignins. Int J Biol Macromol. 233, 123470(2023).
  33. Zhang, C. C., et al. Research progress in microevolutionary process of excellent traits and quality of Dao-di herbs. Chin Mater Med. 48 (22), 6021-6029 (2023).
  34. Li, X. W., Zhang, H. T., Zhang, Z. J. The relation between contents of flavonoids in leaves of Hippophae tibetana Schlecht. and ecological factors. J Ecological Environ. 27 (02), 239-245 (2018).
  35. Li, C., et al. Characterization, antioxidant and immunomodulatory activities of polysaccharides from Prunella vulgaris Linn. Int J Biol Macromol. 75, 298-305 (2015).
  36. Cao, C., et al. Physicochemical characterization, potential antioxidant and hypoglycemic activity of polysaccharide from Sargassum pallidum. Int J Biol Macromol. 139, 1009-1017 (2019).
  37. Li, Q. Y., et al. A comparison study on structure-function relationship of polysaccharides obtained from sea buckthorn berries using different methods: antioxidant and bile acid-binding capacity. Food Sci Hum Wellness. 13 (1), 494-505 (2024).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

PolysaccharidegehalteAntioxidante activiteitDuindoornExtractie met heet waterFenol zwavelzuurmethodeDPPH assayVrije radicaalvangerPolysaccharideopbrengst

Gerelateerde artikelen