Methodenartikel

Massale ovulatie bij zoogdieren: Technieken voor het analyseren van natuurlijke spontane polyovulatie en geïnduceerde polyovulatie bij Lagostomus maximus

DOI:

10.3791/69653

⸱

6 februari 2026

 ,  ,  ,  ,  , 
1Centro de Estudios Biomédicos Básicos, Aplicados y Desarrollo (CEBBAD), Universidad Maimónides, 2Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET)

In dit artikel

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dit protocol beschrijft methoden voor het analyseren van natuurlijke en geïnduceerde ovulatie in Lagostomus maximus, inclusief oocytherstel na spontane, hormonaal geïnduceerde of zaadplasma-geïnduceerde ovulatie. Het biedt een uitgebreid kader voor het bestuderen van de ovariumrespons en voortplantingsfysiologie in een sterk polyovulatief zoogdiermodel.

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De vizcacha van de Zuid-Amerikaanse vlaktes, Lagostomus maximus, wordt erkend als de zoogdiersoort met het hoogste ovulatiepercentage, dat kan oplopen tot wel 300 eicellen. Dit opmerkelijke polyovulatiefenomeen kan worden onderzocht via verschillende methodologische benaderingen die de kenmerkende voortplantingsfysiologie weerspiegelen. Natuurlijke ovulatie wordt beoordeeld door het vrijlaten van de eieren tijdens het broedseizoen, wat inzicht geeft in de spontane ovulatiemechanismen van de soort, waarbij de eieren worden teruggevonden door het doorspoelen van de eierleider en de baarmoederhoorns. Daarnaast maakt experimentele inductie van ovulatie met exogene hormonen, zoals gonadotropinen, een gecontroleerde evaluatie van de ovariumrespons mogelijk en biedt het een waardevol model voor het begrijpen van endocriene regulatie bij hystricognath knaagdieren. Een derde benadering omvat het gebruik van autoloog zaadplasma als fysiologische trigger van ovulatie, waarmee de coëxistentie van geïnduceerde en spontane mechanismen bij deze soort wordt benadrukt. Samen verduidelijken deze technieken niet alleen de dynamiek van folliculaire rekrutering en oocytvrijstelling, maar vestigen ze L. maximus ook als een vergelijkend model voor voortplantingsbiologie, met mogelijke translationele implicaties voor het begrijpen van ovulatiecontrole bij zoogdieren.

Inleiding

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De Zuid-Amerikaanse vlaktevizcacha (Lagostomus maximus) is een hystricognath-knaagdier dat zich onderscheidt door zijn uitzonderlijke voortplantingsfysiologie, gekenmerkt door een buitengewone ovulatiesnelheid die meer dan 300 oocyten per cyclus 1,2 kan overschrijden. Dit kenmerkende kenmerk heeft L. maximus gepositioneerd als een natuurlijk model voor het bestuderen van eierstokfunctie en ovulatiecontrole bij zoogdieren 3,4,5,6,7,8,9,10,11.

In tegenstelling tot typische spontane ovulatoren vertoont L. maximus zowel spontane als geïnduceerde ovulatiemechanismen2. Deze dualiteit, gecombineerd met massale follikelgroei en asynchrone ovulatie, daagt conventionele benaderingen uit die uitsluitend gebaseerd zijn op endocriene of histologische eindpunten 4,12,13,14. Daarom is het gebruik van directe, kwantitatieve technieken essentieel om het tijdstip en de omvang van de oocytafgifte nauwkeurig te bepalen.

Volwassen vrouwelijke vizcachas werden verkregen uit een natuurlijke residentiële populatie die werd onderhouden in de Estación de Cría de Animales Silvestres (ECAS), Parque Pereyra Iraola, Berazategui, provincie Buenos Aires, Argentinië (34°49′57" Z, 58°06′12" W). Wij erkennen dat soevereine rechten over natuurlijke hulpbronnen exclusief eigendom zijn van de provincie Buenos Aires. Het aantal gevangen dieren werd goedgekeurd door het Ministerie van Landbouw van de provincie Buenos Aires. Vrouwtjes werden gevangen met levende vallen die op verschillende tijdstippen gedurende het jaar bij de ingangen van de holen werden geplaatst.

Vangstperiodes werden geselecteerd volgens de natuurlijke voortplantingscyclus van de soort, vastgesteld door Llanos & Crespo15, en verfijnd op basis van onze veldwerkervaring 7,8,10,14. De soort kent een hoofdvoortplantingsseizoen dat loopt van eind zomer (maart) tot het begin van de lente eindseptember 16, 17, 18, en een secundaire broedperiode die in oktober plaatsvindt, vooral bij vrouwtjes die hunnakomelingen hebben verloren. Dienovereenkomstig werden de volgende werkgroepen vastgesteld: a) Groep I (N= 27): eind februari-begin april (niet-zwanger, aanvang van het hoofdvoortplantingsseizoen); b) Groep II (N= 26): midden september-eind oktober (niet-zwanger, post-lactatie oestus); Groep III (N= 35): December-januari (niet-zwanger, door hormonen geïnduceerde ovulatie); Groep IV (N= 7): december-januari (niet-zwanger, door sperma geïnduceerde ovulatie).

Deze studie presenteert en valideert verschillende methodologische benaderingen voor het analyseren van ovulatie bij L. maximus: (1) beoordeling van natuurlijke ovulatie via directe oocytenherstel; (2) inductie van ovulatie met exogene gonadotropines; en (3) inductie van ovulatie met autoloog zaadplasma. Elke techniek biedt complementaire inzichten in follikeldynamica, oocytrijping en de regulerende mechanismen die de ovulatie regelen.

Het doorspoelen van de eierleiders en baarmoederhoorns maakt directe terugwinning van oocyten en nauwkeurige kwantificering van de ovulatie mogelijk, waardoor correlatie met follikelontwikkeling en oocytenmorfologiemogelijk is 19,20,21. Hormonale stimulatie met exogene gonadotropinen, aangepast van protocollen gebruikt bij laboratoriumknaagdieren22, maakt gecontroleerde evaluatie van de ovariumrespons en het tijdstip van oocytenafgifte mogelijk. Ondertussen biedt het gebruik van autoloog zaadplasma als fysiologische trigger van de ovulatie – eerder beschreven bij geïnduceerde ovulatoren zoals konijnen en kameelen 23,24,25 – een innovatieve manier om de endocriene en paracriene factoren die bij de ovulatie betrokken zijn te onderzoeken.

Door deze complementaire methodologieën te integreren, biedt het huidige werk een reproduceerbaar kader voor het onderzoeken van ovulatiemechanismen bij L. maximus. De combinatie van natuurlijke en geïnduceerde modellen maakt differentiatie mogelijk tussen spontane folliculaire rekrutering, ovulatoire efficiëntie en door sperma gemedieerde plasma-responsen. Bovendien onthullen deze benaderingen fenomenen zoals spontane parthenogenetische oocytactivatie en het coëxisteren van "defecte" en "euovulatieve" oocyten, wat bijdraagt aan het begrip van follikelselectie en oocytencompetentie2.

Naast de soortspecifieke implicaties biedt het vizcacha-model bredere relevantie voor vergelijkende voortplantingsbiologie. De gemengde ovulatiestrategie verbindt kenmerken van geïnduceerde en spontane ovulatoren, wat waardevolle parallellen biedt met voortplantingsprocessen bij andere zoogdieren, waaronder gedomesticeerde soorten en mensen 7,14,26,27.

De hier beschreven methodologische protocollen zijn ontworpen om reproduceerbaarheid te waarborgen en hun aanpassing aan diverse experimentele contexten te vergemakkelijken met follikeldynamica, ovulatieregulatie en hormonale manipulatie.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De hier beschreven experimentele protocollen zijn beoordeeld en goedgekeurd door het Institutioneel Comité voor het Gebruik en de Verzorging van Proefdieren (CICUAE, Universidad Maimónides, protocolnummer #6184). Vangen, hanteren en euthanasie werden uitgevoerd door getraind technisch personeel in overeenstemming met alle lokale, staats- en federale regelgeving voor de verzorging en het gebruik van proefdieren. Veeteelt volgde de richtlijnen van de National Institutes of Health (NIH) voor de verzorging en het gebruik van proefdieren28 en de richtlijnen van de American Society of Mammalogists (ASM) voor het gebruik van wilde zoogdieren in onderzoek29. Alle experimenten voldeden aan de ARRIVE 2.0 richtlijnen30. Er werd alles aan gedaan om het aantal gebruikte dieren te minimaliseren. De Zuid-Amerikaanse vlaktevizcacha (Lagostomus maximus) wordt niet als een bedreigde soortbeschouwd 31.

1. Hormonale inductie van ovulatie

OPMERKING: Deze sectie presenteert hormonale inductie van ovulatie bij niet-zwangere vrouwen van gevangen vizcacha's. Er worden drie verschillende protocolopties besproken.

  1. Protocol A:
    1. Geef 200 IE paardchoriongonadotropine (eCG) intramusculair om 0 uur en 24 uur, gevolgd door 500 IE humaan choriongonadotrofine (hCG) na 48 uur.
    2. Rust vrouwtjes tot euthanasie.
    3. Euthanaser vrouwen 60-132 uur na hCG toediening (zie sectie 3).
  2. Protocol B:
    1. Geef 200 IE eCG intramusculair om 0 uur en 24 uur, gevolgd door 1.000 IE hCG om 72 uur.
    2. Rust vrouwtjes tot euthanasie.
    3. Euthanaser vrouwen 60-132 uur na hCG toediening (zie sectie 3).
  3. Protocol C:
    1. Geef 250 IE eCG intramusculair om 0 uur, 24 uur en 48 uur, gevolgd door 2 mg varkens-luteïniserend hormoon (pLH) na 72 uur.
    2. Rust vrouwtjes tot euthanasie.
    3. Euthanaser vrouwen 60-132 uur na toediening van pLH (zie sectie 3 en Tabel 1).
      OPMERKING: De dieren in elke groep werden op verschillende tijdstippen geëuthanaseerd (variërend van 60 uur tot 132 uur na hCG-toediening). Deze temporele verspreiding was essentieel om de verlengde aard van de ovulatieperiode bij deze soort te bevestigen. Specifiek voor experimenten gericht op de exclusieve verzameling van rijpe eicellen, werd euthanasie consequent uitgevoerd 120 uur na hCG.

2. Inductie van ovulatie door zaadplasma

OPMERKING: Test het vermogen van zaadplasma om ovulatie te induceren door intramusculaire toediening bij hormonaal geactiveerde vrouwen.

  1. Spermaverzameling en -bereiding
    1. Verzamel sperma van reproductief actieve mannen door elektro-ejaculatie, zoals beschreven door Giacchino32.
    2. Centrifugeer sperma op 200 × g gedurende 10 minuten op kamertemperatuur om zaadcellen en cellulair afval te pelletten.
    3. Vul supernatanten (zaadplasma) aan met penicilline en streptomycine en bewaar bij -20 °C tot gebruik.
  2. Inductie van ovulatie bij niet-zwangere vrouwen door zaadplasma
    1. Geef 200 IE eCG intramusculair om 0 uur en 24 uur per vrouw.
    2. Injecteer zaadplasma intramusculair 48 uur na de laatste eCG-dosis.
    3. Rust vrouwtjes tot euthanasie.
    4. Euthanaser dieren 72 uur na zaadplasma-injectie (zie sectie 3).
      OPMERKING: Neem controlevrouwen mee die met zoutoplossing worden geïnjecteerd in plaats van zaadplasma.

3. Anesthesie, euthanasie en verzameling van de voortplantingskanaal

OPMERKING: Gebruik anesthesie- en humane euthanasiemethoden om intacte voortplantingskanalen te verkrijgen voor oocyt- en histologische analyses.

  1. Induceer euthanasie via een enkele, berekende intramusculaire injectie van 13,5 mg/kg ketaminechlorhydraat en 0,6 mg/kg xylazinechlorhydraat, toegediend volgens de aanbevelingen van de fabrikant en vastgestelde institutionele protocollen.
  2. Bevestig diepe anesthesie door de afwezigheid van pijnrespons (pedaalreflexen).
  3. Plaats het dier in rugligging en steriliseer de buik.
  4. Open chirurgisch de buikholte om alle buikorganen volledig bloot te leggen.
  5. Voer een algemene inspectie uit om de algehele toestand van het dier te bepalen en bevestig natuurlijke of door hormonen veroorzaakte ovulatie aan de hand van ovulatorische stigmata.
  6. Neem een bloedmonster door directe perforatie van de vena cava superior voor serologisch onderzoek.
  7. Voer euthanasie uit op het dier door 0,5 mL/kg natriumpentobarbital intracardiaal toe te dienen.
  8. Ontleed en verwijder zorgvuldig de eierstokken, oviducten en baarmoederhoorns, waarbij je erop let dat je hun structuren niet beschadigt.
  9. Bewaar de weefsels in ijskoude, fosfaatgeborrelde zoutoplossing (PBS) tot verwerking (≤15 min).

4. Oocytenherstel

OPMERKING: Herstel eicellen uit de eileiders en baarmoederhoorns door zacht doorspoelen om volledige verzameling van vrijgekomen gameten te waarborgen en weefselschade te minimaliseren.

  1. Bereid het spoelapparaat voor door een stomp 26-G naald aan een 1 mL spuit te bevestigen gevuld met 0,9% NaCl, aangevuld met 4 mg/mL BSA, 100 μg/mL penicilline G en 100 IE/mL streptomycine.
  2. Steek de naald voorzichtig in het infundibulum van elke eileider en injecteer langzaam de spoeloplossing.
  3. Verzamel het afvalwater van het distale eileider en de baarmoederhoorn in steriele petrischaaltjes.
  4. Herhaal het spoelen totdat de teruggewonnen vloeistof helder en vrij is van zichtbare eicellen of cellulair afval.
  5. Transplanteer de eieren naar 100 μL druppels M2-medium met 4 mg/mL BSA en antibiotica onder minerale olie.
  6. Bevestig het succesvolle herstel door druppels onder een stereomicroscoop te inspecteren; Verwacht vrije oözyten zonder cumuluscellen te zien die verspreid zijn in de vloeistof.
  7. Blijf spoelen totdat het effluent helder lijkt en er geen extra oöcyten onder de stereomicroscoop worden waargenomen (meestal 3-5 spoelingen per eileider).
    OPMERKING: Teruggevonden oözyten moeten bolvormig en doorschijnend lijken bij lage vergroting.
  8. Classificeer oööten volgens morfologische integriteit zoals beschreven in sectie 6.

5. Oocytmorfologische beoordeling

OPMERKING: Evalueer de kwaliteit van teruggevonden oocyten op basis van cytoplasmatisch uiterlijk, uniformiteit van zona pellucida en nucleaire rijpingsfase.

  1. Identificeer oocyten als normaal als ze een bolvormige vorm vertonen, een uniforme zona pellucida, homogeen doorschijnend cytoplasma en een zichtbaar kiemblaasje of eerste polaire lichaam.
  2. Identificeer oocyten als abnormaal als het cytoplasma donker, korrelig of gefragmenteerd lijkt, of als de zona pellucida onregelmatig is.
  3. Registreer de nucleaire rijpingsfase als kiemblaasje (GV), ontkiemblaasje (GVBD) of metafase II (MII).

6. Evaluatie van oöcytenkernrijping en de integriteit van de meiotische spil

OPMERKING: Beoordeel de kernrijping en de spindelmorfologie door immunofluorescentiekleuring van α-tubuline en chromatine tegenkleuring.

  1. Fixeer de eicellen in 2% paraformaldehyde (PFA) gedurende 20 minuten.
  2. Permeabiliseer in 0,2% Triton X-100 in PBS gedurende 40 minuten.
  3. Na de fix in 2% PFA voor 20 minuten en drie keer wassen met PBS (30 minuten per stuk).
  4. Blok met 2% geitenserum, 2% BSA, 2% melkpoeder, 0,1 miljoen glycine en 0,01% Triton X-100 in PBS gedurende ≥ 1 uur.
  5. Incubeer de eiercellen 's nachts bij 4 °C met een muisanti-α-tubuline-antilichaam (1:200).
  6. Was 30 minuten in PBS en broed 1 uur in het donker met fluoresceïne isothiocyanaat (FITC)-geconjugeerde geitenanti-muis IgG (1/1000).
  7. Tegenkleuring met 10 μg/mL Hoechst 33324 gedurende 10 minuten en was met PBS met 2% BSA.
  8. Plaats de eicellen in een antifade-medium en beeld af met een confocale microscoop.
  9. Beelden vastleggen en verwerken met EZ-C1 software (EZ-C1 versie 3.90); Pas contrast en helderheid aan in beeldverwerkingssoftware naar behoefte.
    OPMERKING: Succesvolle kleuring wordt aangegeven door een helder groen fluorescentiepatroon van de meiotische spil (FITC) en blauwe nucleaire tegenkleuring met Hoechst 33324.

7. Statistische analyse

OPMERKING: Analyseer kwantitatieve gegevens om ovulatieresponsen en oocytkwaliteit tussen experimentele groepen te vergelijken.

  1. Druk data uit als gemiddelde ± SD.
  2. Gebruik de Student's t-test voor tweegroepsvergelijkingen.
  3. Pas eenrichtings-ANOVA toe, gevolgd door Bonferroni's post hoc-test voor meerdere vergelijkingen.
  4. Beschouw p < 0,05 als statistisch significant.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Natuurlijke ovulatie

Twaalf van de 27 vrouwtjes (groep I) die van eind februari tot half april werden gevangen, samenvallend met het primaire paringsseizoen, werden waargenomen als ovulerend, terwijl tijdens het secundaire paringsseizoen (september/oktober) (groep II) 10 van de 26 gevangen vrouwtjes ovulatie vertoonden. Een vergelijkbaar succespercentage van ongeveer 40% van de ovulerende vrouwtjes werd waargenomen tijdens beide vangstperiodes. Er werd in geen enkel geval zwel...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Het hier gepresenteerde protocol voor het bestuderen van ovulatie in de vlaktes vizcacha biedt een reproduceerbaar kader voor het beoordelen van zowel natuurlijke als experimenteel geïnduceerde ovulatiegebeurtenissen. Een groot voordeel van dit protocol ligt in het vermogen om direct het buitengewoon hoge aantal oocyten dat door de vlakte vizcacha wordt vrijgegeven direct te kwantificeren en karakteriseren, een kenmerk dat in andere zoogdiermodellen ongeëvenaard is. In tegenstelling tot ...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De auteurs stellen dat er geen belangenconflict is dat kan worden gezien als een benadeelde factor voor de onpartijdigheid van het gerapporteerde onderzoek.

Dankbetuigingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dit werk werd ondersteund door de intramurale financiële steun van de Universidad Maimónides, Argentinië, en het agentschap FONCYT-AMPCYT, Argentinië (PICT-2018-04619, toegekend aan NPL). De auteurs zijn vooral dankbaar aan het Ministerie van Landbouw van de provincie Buenos Aires, Argentinië, voor het autoriseren van de vangst van dieren; aan het personeel van de Estación de Cría de Animales Silvestres (ECAS, provincie Buenos Aires, Argentinië) voor hun onschatbare hulp bij het vangen en omgaan met de dieren; en aan DVM Sergio Ferraris en DVM Fernando Lange van CCV-Universidad Maimónides voor hun hulp tijdens de narcose en chirurgische ingrepen.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Adobe PhotoshopAdobe Systems Inc., USAN/ABeeldverwerking
Bovine Serum Albumin (BSA)Sigma-Aldrich, USAA9647Gebruikt in spoelmedium en blokkeerbuffer
Centrifuge (voor sperma verwerking)Eppendorf, Duitsland5417RSeminale plasma voorbereiding
Confocale microscoop (C1 Eclipse E800)Nikon Ltd., JapanN/AOöcyten beeldvorming
Elektro-ejaculatorOntworpen in het laboratorium; aangepast van huisdieren voor gebruik in caviomorph knaagdierenN/ASpermaverzameling
Euthanyl (natrium pentobarbital, natrium difenylhydantoine)Brouwer S.A., ArgentiniëN/AEuthanasie
FITC-geconjugeerd geit anti-muis IgG (AP124F)Chemicon, USAAP124FSecundaire antilichaam
Hematoxyline-Eosine kleuringskitSigma-Aldrich, USAVerschillendeHistologie
Hoechst 33324Thermo Fisher Scientific, USAH3570Kernkleuring
Ketamine chloorhydraatHolliday Scott S.A., ArgentiniëN/AAnesthesie
Laminaire flow kapThermo Scientific, USAN/AAseptische handeling
LichtmicroscoopOlympus, JapanBX51Histologie
Lutropin-V (pLH)Bioniche Animal Health Care, CanadaN/AHormonale inductie
M2 mediumSigma-Aldrich, USAM7167Oöcyt herstel
Mineraal olieSigma-Aldrich, USAM8410Oöcyten cultuur
Novormon 5000 (eCG)Syntex S.A., ArgentiniëN/AHormonale inductie
Ovusyn (hCG)Syntex S.A., ArgentiniëN/AHormonale inductie
Paraformaldehyde (PFA, 2% en 4%)Sigma-Aldrich, USA158127Fixatie
Penicilline GSigma-Aldrich, USAP3032Antibiotica voor media
StereomicroscoopLeica Microsystems, DuitslandM80Oöcyten identificatie
StreptomycineGibco, Thermo Fisher Scientific, USA11860038Antibiotica voor media
Spuit met stompe puntnaald (1 mL)BD Biosciences, USA305219Spelen van eileiders/baarmoeder
Triton X-100Sigma-Aldrich, USAT8787Permeabilisatie
VectaShield montage mediumVector Laboratories, USAH-1000Montering voor fluorescentie
Xylazin chloorhydraatRichmond Laboratories, ArgentiniëN/AAnesthesie
XyleenSigma-Aldrich, USA534056Ontwassing paraffine secties
α-tubuline monoklonaal antilichaam (muis anti-α-tubuline, sc-5286 B7)Santa Cruz Biotechnology, USAsc-5286 B7Voor immunokleuring van meiotische spindel

Referenties

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Weir, B. J. The reproductive physiology of the plains viscacha, Lagostomus maximus. J Reprod Fertil. 25, 355-363 (1971).
  2. Leopardo, N. P., Inserra, P. I. F., Giacchino, M., Caram, D. A., Willis, M. A., Vitullo, A. D. Polyovulation in the South American plains vizcacha, revisited: coexistence of spontaneous and induced ovulation. J Exp Zool A Ecol Integr Physiol. 343 (6), 724-739 (2025).
  3. Caram, D. A., Inserra, P. I. F., Vitullo, A. D., Leopardo, N. P. Autophagy favors survival of corpora lutea during the long-lasting pregnancy of the South American plains vizcacha, Lagostomus maximus (Rodentia Caviomorpha). Sci Rep. 14 (1), 11220(2024).
  4. Cortasa, S. A., et al. Achieving full-term pregnancy in the vizcacha relies on a reboot of luteal steroidogenesis in mid-gestation (Lagostomus maximus, Rodentia). PLoS One. 17, e0271067(2022).
  5. Flamini, M. A., Barbeito, C. G., Gimeno, E. J., Portiansky, E. L. Histology, histochemistry and morphometry of the ovary of the adult plains viscacha (Lagostomus maximus) in different reproductive stages. Acta Zool (Stockh). 90, 390-400 (2009).
  6. Fraunhoffer, N. A., et al. Hormonal behavior correlates with follicular recruitment at mid-gestation in the South American plains vizcacha, Lagostomus maximus (Rodentia, Caviomorpha). Gen Comp Endocrinol. 250, 162-174 (2017).
  7. Jensen, F., Willis, M. A., Albamonte, M. S., Espinosa, M. B., Vitullo, A. D. Naturally suppressed apoptosis prevents follicular atresia and oocyte reserve decline in the adult ovary of Lagostomus maximus (Rodentia, Caviomorpha). Reproduction. 132, 301-308 (2006).
  8. Jensen, F., Willis, M. A., Leopardo, N. P., Espinosa, M. B., Vitullo, A. D. The ovary of the gestating South American plains vizcacha (Lagostomus maximus): suppressed apoptosis and corpora lutea persistence. Biol Reprod. 79, 240-246 (2008).
  9. Leopardo, N. P., Jensen, F., Willis, M. A., Espinosa, M. B., Vitullo, A. D. The developing ovary of the South American plains vizcacha, Lagostomus maximus (Mammalia, Rodentia): massive proliferation with no sign of apoptosis-mediated germ cell attrition. Reproduction. 141, 633-641 (2011).
  10. Leopardo, N. P., Vitullo, A. D. Early embryonic development and spatiotemporal localization of mammalian primordial germ cell-associated proteins in the basal rodent Lagostomus maximus. Sci Rep. 7 (1), 594(2017).
  11. Leopardo, N. P., Velazquez, M. E., Cortasa, S., González, C. R., Vitullo, A. D. A dual death/survival role of autophagy in the adult ovary of Lagostomus maximus (Mammalia-Rodentia). PLoS One. 15 (5), e0232819(2020).
  12. Weir, B. J. Reproductive Characteristics of Hystricogmorph Rodents. The Biology of Hystricomorph Rodents. , Symposia of the Zoological Society of London. London, UK. (1974).
  13. Dorfman, V. B., et al. Variation in progesterone receptors and GnRH expression in the hypothalamus of the pregnant South American plains vizcacha Lagostomus maximus (Mammalia, Rodentia). Biol Reprod. 89 (5), 115(2013).
  14. Inserra, P. I. F., Leopardo, N. P., Willis, M. A., Freysselinard, A. L., Vitullo, A. D. Quantification of healthy and atretic germ cells and follicles in the developing and postnatal ovary of the South American plains vizcacha, Lagostomus maximus: evidence of continuous rise of the germinal reserve. Reproduction. 147, 199-209 (2014).
  15. Llanos, A. C., Crespo, J. A. Ecología de la vizcacha (Lagostomus maximus maximus Blainv.) en el nordeste de la provincia de Entre Ríos. Rev Investig Agríc. 6, 289-378 (1952).
  16. Weir, B. J. The management and breeding of some more hystricomorph rodents. Lab Anim. 4 (1), 83-97 (1970).
  17. Branch, L. C., Villarreal, D., Fowler, G. S. Recruitment, dispersal, and group fusion in a declining population of the plains viscacha (Lagostomus maximus; Mammalia, Chinchillidae) in scrub habitat of central Argentina. J Mammal. 74 (1), 9-20 (1993).
  18. Spotorno, A. E., Patton, J. L. Superfamily Chinchilloidea Bennett 1833. Mammals of South America. , University of Chicago Press. Chicago, IL, USA. (2015).
  19. Baker, T. G. A quantitative and cytological study of germ cells in human ovaries. Proc R Soc Lond B Biol Sci. 158 (972), 417-433 (1963).
  20. Forabosco, A., Sforza, C., De Pol, A., Vizzotto, L., Marzona, L., Ferrario, V. F. Morphometric study of the human neonatal ovary. Anat Rec. 231, 201-208 (1991).
  21. Hirshfield, A. N. Development of follicles in the mammalian ovary. Int Rev Cytol. 124, 43-101 (1991).
  22. Suzuki, O. Sequence comparison of gonadotropin subunits in laboratory animals for improvement of superovulation techniques. Kansai J Lab Anim. 27, 72-75 (2006).
  23. Chen, B. X., Yuen, Z. X., Pan, G. W. Semen-induced ovulation in the Bactrian camel (Camelus bactrianus). J Reprod Fertil. 73, 335-339 (1985).
  24. El Allali, K., El Bousmaki, N., Ainani, H., Simonneaux, V. Effect of the camelid's seminal plasma ovulation-inducing factor/β-NGF: a Kisspeptin target hypothesis. Front Vet Sci. 4, 99(2017).
  25. García-García, R. M., et al. β-Nerve growth factor identification in male rabbit genital tract and seminal plasma and its role in ovulation induction in rabbit does. Ital J Anim Sci. 17, 442-453 (2017).
  26. Weir, B. J. The reproductive organs of the female plains viscacha, Lagostomus maximus. J Reprod Fertil. 25, 365-373 (1971).
  27. Vitullo, A. D., Inserra, P. I. F., Leopardo, N. P., Halperin, J., Dorfman, V. B. The Plains Vizcacha. Assisted Reproduction in Wild Animals of South America. , CRC Press. Boca Raton, FL, USA. (2023).
  28. National Research Council Committee for the Update of the Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , 8th edn, National Academies Press. Washington, DC, USA. (2011).
  29. Sikies, R. S., et al. Guidelines of the American Society of Mammalogists for the use of wild mammals in research. J Mammal. 92 (1), 235-253 (2011).
  30. Percie du Sert, N., et al. The ARRIVE guidelines 2.0: updated guidelines for reporting animal research. PLoS Biol. 18 (7), e3000410(2020).
  31. Roach, N. Lagostomus maximus. The IUCN Red List of Threatened Species. , (2016).
  32. Giacchino, M. Caracterización del proceso de implantación en Lagostomus maximus: un mamífero con poliovulación y reabsorción embrionaria selectiva. [Doctoral thesis]. , Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad de Buenos Aires. Argentina. (2017).
  33. Kershaw-Young, C. M., Druart, X., Vaughan, J., Maxwell, W. M. C. β-Nerve growth factor is a major component of alpaca seminal plasma and induces ovulation in female alpacas. Reprod Fertil Dev. 24, 1093-1097 (2012).
  34. Kubiak, J. Z. Mouse oocytes gradually develop the capacity for activation during the metaphase II arrest. Dev Biol. 136, 537-545 (1989).
  35. Soede, N. M., Noordhuizen, J. P. T. M., Kemp, B. The duration of ovulation in pigs, studied by transrectal ultrasonography, is not related to early embryonic diversity. Theriogenology. 38 (4), 653-666 (1992).
  36. Nicoll, M. E., Racey, P. A. Follicular development, ovulation, fertilization and foetal development in tenrecs (Tenrec eucaudatus). J Reprod Fertil. 74, 47-55 (1985).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Polyovulatieanalysenatuurlijke ovulatiege nduceerde ovulatieoocytenrecoverygonadotropine stimulatieseminale plasmatriggerfolliculaire rekruteringreproductieve fysiologiezoogdierovulatie
Video binnenkort beschikbaar

Gerelateerde artikelen