Een muismodel van lymfatische ablatie van het donorhart via elektrocauterisatie voor transplantatieonderzoek

Samenvatting

We ontwikkelden een nieuw muismodel van donor-hartlymfatische ablatie bij harttransplantatie. Dit model toont aan dat de verstoring van donorlymfekaten acute afstoting vermindert, myocardschade vermindert en de overleving van transplantaties verlengt, wat nieuwe inzichten biedt in de lymfatische functie van het hart in transplantatie-immuniteit.

Samenvatting

Hoewel hartlymfatische vaten de laatste jaren steeds meer aandacht hebben gekregen, moet de relatie tussen het lymfestelsel van het donorhart en acute afstoting bij harttransplantatie nog worden opgehelderd.

De elektrofysiologische activiteit van het hart werd beoordeeld via elektrocardiografie (ECG) bij normale muizen, zowel vóór als na de lymfatische ablatie van het hart. Belangrijke lymfevaten van donorharten werden zichtbaar gemaakt met een Evans Blue-injectie en vervolgens geableerd via elektrocauterisatie. Er werd een harttransplantatiemodel ontwikkeld met donor cardiale lymfatische dysfunctie met harten die lymfatische ablatie ondergingen. De functie van het harttransplantaat werd beoordeeld via echocardiografie, western blotting en ELISA. De impact van donorlymfatische ablatie op acute afstoting werd beoordeeld door middel van hematoxyline-eosine (HE) kleuring en monitoring van de overlevingstijd van de transplantatie.

ECG-resultaten toonden geen significante veranderingen in de elektrofysiologie van het hart vóór en na lymfatische ablatie, wat bevestigde dat grote hartvaten onbeschadigd bleven. Evans Blue werd in de hartapex geïnjecteerd om de lymfevaten te labelen. Grote lymfecellen werden vervolgens geableerd met elektrocauterisatie. Na afronding van de ablatieprocedure werden de muizen hepariniseerd en werden hun harten vervolgens geoogst. De aorta en de longslagader werden doorgesneden, en de superieure/inferieure vena cava, samen met de longaderen, werden geligeerd. De voorbereide (geableerde) donorharten werden vervolgens getransplanteerd. Niveaus van cTnI en ejectiefractie toonden aan dat lymfatische ablatie het hartletsel niet verergerde. De HE-kleuring toonde aan dat ablatie van donorhartlymfekaten acute afstoting verlichtte, myocardschade verminderde en de overleving van de transplantatie verlengde.

We hebben met succes een model voor muisharttransplantatie met donorhartlymfatische dysfunctie ontwikkeld en aangetoond dat ablatie van donorhartlymfekaten acute afstoting kan verminderen, myocardschade kan verminderen en de overleving van transplantaten kan verlengen. Deze bevindingen bieden nieuwe inzichten en een basis voor het begrijpen van de rol van het lymfestelsel van het hart bij harttransplantatie.

Inleiding

Afstoting van hartallograften blijft een van de meest voorkomende en ernstigste complicaties na harttransplantatie, voornamelijk ingedeeld in acute cellulaire afstoting en antilichaam-gemedieerde afstoting. Hoewel moderne immunosuppressieve therapieën de overlevingskansen van transplantaties aanzienlijk hebben verbeterd, blijft afstoting een belangrijke bepalende factor voor transplantatie-uitkomsten. Volgens de literatuur ervaart ongeveer 12% van de patiënten minstens één episode van matige of ernstige acute afstoting in het eerste jaar na transplantatie¹.

Het lymfestelsel van het h....

Protocol

Mannelijke C57BL/6J- en BALB/c-muizen (mannelijk, 6-8 weken oud, 25-28 g lichaamsgewicht) werden onder specifieke ziekteverwekkervrije omstandigheden gehouden. Alle experimentele procedures werden uitgevoerd volgens protocollen goedgekeurd door de Animal Ethics Committee van het Fuwai Ziekenhuis (Goedkeuringsnummer: 0108-7-800-ZX(X)-019).

Visualisatie en ablatie van hartlymfevaten bij muizen
Om hartlymfatische dysfunctie te simuleren, werden grote lymfevaten van het hart geableerd via elektrocauterie.

Alle muizen werden verdoofd via intraperi....

Resultaten

Beoordeling van de functie van het harttransplantaat
Muizenmodellen van harttransplantatie werden opgesteld in zowel controle- als experimentele groepen volgens het beschreven protocol. De functionele status van de transplantaties werd 24 uur na transplantatie geëvalueerd. Het expressieniveau van serum cardiale troponine I (cTnI) was hoger in de experimentele groep dan in de controlegroep, maar het verschil was niet statistisch significant (Figuur.......

Discussie

Het lymfestelsel van het hart vormt een essentieel onderdeel voor het in stand houden van de homeostase van weefselvloeistof en het ondersteunen van de immuunfunctie in het hart. Door het faciliteren van interstitiële vloeistofreabsorptie, lipidentransport en het transport van immuuncellen zorgt het voor de hartprestaties onder zowel fysiologische als pathologische omstandigheden. In de afgelopen jaren heeft groeiend bewijs de cruciale betrokkenheid van het hartlymfestelsel bij meerdere .......

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel

Naam	Bedrijf	Catalogusnummer	Opmerkingen
Electrocoagulatiepen	Weitai	V70
Microscopische pincetten	Jinzhong	WA3030
Microscopische pincetten	Jinzhong	WA2040
Microscopische naaldhouder	Jinzhong	YZE010
Microscopische naaldhouder	Jinzhong	YZE020
Microscopische schaar	Jinzhong	YBC010
Microscopische schaar	Jinzhong	YBC020
Naaldhouder	Jinzhong	J32010
Schaar	Jinzhong	Y00010
Kleindierventilator	Zhuodi	DW-300