Methodenartikel

Een efficiënte en snelle HPLC-QQQ-MS-methode voor de kwantificatie van tropaanalkaloïden in medicinale planten

DOI:

10.3791/70510

⸱

12 juni 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1College of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 2Innovative Institute of Chinese Medicine and Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine

In dit artikel

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Deze studie ontwikkelde een hoogpresterende vloeistofchromatografie in combinatie met triple quadrupole mass spectrometry (HPLC-QQQ-MS) methode om tropaanalkaloïden (hyoscyamine, anisomine, scopolamine) in Anisodus tanguticus te identificeren en te kwantificeren. De methode bleek snel, nauwkeurig en betrouwbaar voor high-throughput analyse van medicinale planten.

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Anisodus tanguticus is een belangrijke Tibetaanse medicinale plant. De tropaanalkaloïden (TA's), zoals hyoscyamine, anisodamine en scopolamine, vertonen aanzienlijke pijnstillende en kalmerende farmacologische activiteiten, waardoor deze soort een waardevolle natuurlijke bron is voor het extraheren van deze bioactieve verbindingen. De chemische samenstelling van A. tanguticus is echter zeer complex. Het bevat een groot aantal verbindingen zonder verduidelijkte structuren, waardoor systematische identificatie en structurele karakterisering van de actieve bestanddelen bijzonder belangrijk is. Hoewel high-performance vloeistofchromatografie (HPLC) veel wordt gebruikt voor het scheiden van extracten uit deze plant, blijven veel onbekende componenten moeilijk nauwkeurig te identificeren, zelfs met spectrale databasematching.

Deze studie stelde een analytische methode vast gebaseerd op high-performance vloeistofchromatografie in combinatie met triple quadrupole mass spectrometry (HPLC-QQQ-MS) voor de bepaling van tropaanalkaloïden in A. tanguticus. De methode omvat een reeks systematische procedures, waaronder gestandaardiseerde monstervoorbereiding, configuratie van massaspectrometrische parameters, LC-pre-equilibratie, methode-opbouw, verzameling van MS-gegevens, multitraps massaspectrometrie (MSⁿ) scanning en handmatige data-interpretatie. Met deze strategie identificeerden we met succes drie representatieve tropaanalkaloïden in A. tanguticus: hyoscyamine, anisodamine en scopolamine. Daarnaast valideert het de precisie van de gevestigde HPLC-QQQ-MS-methode, waarmee wordt bevestigd dat de methode snel, gevoelig, haalbaar en nauwkeurig is voor de kwantitatieve bepaling van tropaanalkaloïden (TA's) in A. tanguticus. De gevestigde aanpak toont goede veelzijdigheid en betrouwbaarheid, en is geschikt voor de high-throughput identificatie en kwantificering van tropaanalkaloïden in A. tanguticus en andere medicinale planten.

Inleiding

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De therapeutische effectiviteit van traditionele Chinese geneeskunde (TCM) hangt grotendeels af van de secundaire metabolieten, zoals alkaloïden, flavonoïden, terpenoïden en andere actieve bestanddelen 1,2,3. Daarom is de precieze en gevoelige kwalitatieve en kwantitatieve analyse van specifieke doelmetabolieten in deze complexe mengsels een belangrijke stap om de kwaliteit van TCM te waarborgen, de materiële basis van de effectiviteit te verduidelijken en modern onderzoek vooruitte helpen 3. De diversiteit en complexiteit van TCM-componenten, gecombineerd met de extreem lage concentraties van veel belangrijke actieve ingrediënten, vormen echter aanzienlijke uitdagingen voor het bereiken van efficiënte en nauwkeurige detectie.

Anisodus tanguticus (Maxim.) Pascher is een belangrijke botanische bron van tropaanalkaloïden (TAs)4, bekend om zijn rijke gehalte aan farmacologisch actieve tropane-type verbindingen. Belangrijke kenmerkende alkaloïden zijn anisodamine, scopolamine en hyoscyamine, die een gemeenschappelijke tropaankern delen maar verschillende functionele groepssubstituties vertonen (Figuur 1), wat leidt tot uiteenlopende farmacologische profielen 6,7,8. Hoewel hun structurele overeenkomsten de chromatografische resolutie bemoeilijken, bieden ze ook een waardevol model voor vergelijkende fytochemische en metabole onderzoeken. Recente studies hebben de chemische samenstelling en geografische variaties van A. tanguticus onderzocht met behulp van metabolomics en netwerkfarmacologische benaderingen 9,10. Huidige analytische benaderingen voor A. tanguticus-metabolieten zijn voornamelijk afhankelijk van high-performance liquid chromatography (HPLC)11. Desalkaloïde in zaailingstadium A. tanguticus kunnen echter tropaanalkaloïden zo laag zijn als 0,01% (één deel per tienduizend), en conventionele HPLC-methoden worden vaak beperkt door beperkte resolutie, gevoeligheid en analytische doorstroming. Deze beperkingen belemmeren de volledige scheiding van structureel analoge alkaloïdehomologen en belemmeren de detectie van spoorcomponenten, waardoor de analytische nauwkeurigheid wordt aangetast en de ondersteuning voor meer geavanceerde onderzoekstoepassingen wordt beperkt. In de afgelopen jaren hebben ontwikkelingen in HPLC in combinatie met tandem-massaspectrometrie krachtige hulpmiddelen opgeleverd om deze analytische knelpunten aan te pakken. Met name hoogwaardige vloeistofchromatografie-triple quadrupool-massaspectrometrie (HPLC-QQQ-MS) biedt een duidelijk verbeterde chromatografische resolutie, scheidingsefficiëntie en uitzonderlijke gevoeligheid 12,13,14. Deze technologie is uitgegroeid tot een ultramodern platform voor het onderzoek van secundaire metabolieten in TCM, waardoor efficiënte en nauwkeurige kwalificatie en kwantificatie van sporen-doelanalyten binnen ingewikkelde biologische matrices 11,15,16,17 mogelijk is. Als zodanig biedt het een robuuste technische basis voor uitgebreide chemische profilering en kwaliteitsbeoordeling van medicinale planten zoals A. tanguticus. In deze studie behandelen we de aanhoudende uitdagingen bij het detecteren van tropaanalkaloïden in A. tanguticus, met nadruk op de nauwkeurige identificatie en kwantificering van sporenniveau-bestanddelen. Door systematisch chromatografische en massaspectrometrische condities te optimaliseren, ontwikkelden en valideerden we een nieuwe HPLC-QQQ-MS-methode voor de gelijktijdige bepaling van meerdere belangrijke tropaanalkaloïden. De geoptimaliseerde aanpak verhoogt de gevoeligheid, selectiviteit en methodologische robuustheid aanzienlijk, waardoor veelvoorkomende beperkingen die gepaard gaan met conventionele op massaspectrometrie gebaseerde assays worden overwonnen – zoals onvoldoende gevoeligheid, matrixeffecten en co-elutie-interferentie – vaak voorkomen bij de analyse van sporenalkaloïdeverbindingen.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Monstervoorbereiding

  1. Voorbereiding van standaardoplossingen
    1. Weeg nauwkeurig elk 10,0 mg hyoscyamine, anisodaminehydrobromide en scopolaminehydrobromide referentiestandaarden met behulp van een analytische balans van een tienduizendste en plaats deze respectievelijk in aparte 10 ml volumetrische kolven.
    2. Voeg chromatografisch methanol toe aan de gemarkeerde lijn en los de standaarden grondig op met ultrasone behandeling om enkelvoudige standaardoplossingen met een concentratie van 1,0 mg/mL te bereiden.
    3. Doe de bouillonoplossingen over in flessen bruine reagens, bewaar ze in het donker op 4 °C.
      OPMERKING: De gebruikte alkaloïden zijn zeer giftig. Neem veiligheidsmaatregelen bij het hanteren van de standaardmonsters. Alle oplossingen werden vers voorbereid vóór de analyse en in het donker bij 4 °C bewaard om degradatie te voorkomen.
  2. Bereiding van gemengde werkoplossingen
    1. Pipetteer 100 μL van elke genoemde standaardoplossing in een volumetrische kolf van 10 mL en verdun tot de gemarkeerde lijn met chromatografisch methanol om een gemengde standaard tussenoplossing van 10 μg/mL te bereiden.
    2. Volgens de lineaire bereik vereisten, verdun de tussenoplossing verder stapsgewijs met methanol om een reeks gemengde werkoplossingen te verkrijgen.
    3. Neem respectievelijk 50 μL, 200 μL en 500 μL. Verkrijg concentraties van 0,5 μg/mL, 2 μg/mL, 5 μg/mL en 10 μg/mL. Bereid het vers voor gebruik.
    4. Breng 100 μL van de 10 μg/mL tussenoplossing over in een volumetrische kolf van 1 mL om een verdunde oplossing van 1 μg/mL te bereiden.
    5. Vervolgens overbreng je 100 μL van de 1 μg/mL oplossing naar een andere 1 mL volumetrische kolf en verdun deze tot het volume met methanol.
  3. Voorbeeld voorbehandeling
    1. Voer vriesdroog uit van verse materialen van Sophora flavescens en maal vervolgens tot een homogeen poeder met een hogesnelheidsmolen.
    2. Zeef het poeder door een standaard testzeef van 0,25 mm. Weeg nauwkeurig 20 mg van dit poeder, doe het over in een 100 mL volumetrische kolf en voeg chromatografisch methanol toe aan bijna de gemarkeerde lijn.
    3. Voer ultrasone extractie uit bij kamertemperatuur gedurende 30 minuten. Na extractie haal je de volumetrische kolf eruit, laat je deze afkoelen tot 25 °C bij kamertemperatuur, vul chromatografisch methanol aan tot de gemarkeerde 100 mL lijn, en mix je vortex gedurende 2 minuten.
    4. Pipetteer 1 mL van bovenstaande extractie in een volumetrische kolf van 100 mL en verdun tot de gemarkeerde lijn met methanol (100-voudige verdunning). Na goed geschud dient het als moederoplossing voor HPLC-injectie (Figuur 2).
      OPMERKING: Bij het bedienen van de hogesnelheidsslijpmachine is het essentieel om beschermende bril en een stofmasker te dragen; Beheers de hoeveelheid maaltijd en -duur om oververhitting te voorkomen.
  4. Monsterfiltratie en opslag
    1. Bereid een 1 mL wegwerpspuit zonder naald voor (chromatografie-gespecialiseerd, niet-adsorptief) en een 0,22 μm organische fase microporeus membraan.
    2. Aspireer 1,2 mL van de moederoplossing voor injectie en druk langzaam voor filtratie.
    3. Verzamel het volgende filtraat in een 2 mL monsterflesje met een binnenste insert en sluit het stevig af met een dop.
      OPMERKING: De frequentie van de ultrasone reiniger is vastgesteld op 40 kHz. Vermijd het losmaken van de volumetrische kolfdop tijdens extractie om oplosmiddelverdamping te voorkomen. Pas de verdunningsfactor aan volgens de steekproefpiekrespons in het pre-experiment om ervoor te zorgen dat het doelpiekgebied binnen het lineaire bereik van de standaardcurve valt. Alle monsters moeten onmiddellijk in een koelkast worden bewaard op 4 °C.

2. HPLC prerun, methode-opbouw en MS-acquisitie

  1. Voorbereiding van mobiele fasen
    1. Bereid mobiele fase A voor: Meet 1000 mL ultrazuiver water, voeg 1,0 mL chromatografisch mierenzuur toe (volumefractie: 0,1% v/v), en meng gelijkmatig met een magnetische roerer gedurende 10 minuten.
    2. Bereid mobiele fase B voor: Gebruik chromatografische methanol direct zonder extra behandeling.
    3. Giet respectievelijk de mobiele fasen A en B in ultrasone ontgassingsapparaten en voer ultrasone ontgassing uit op 40 kHz gedurende 15 minuten.
    4. Onmiddellijk de ontgassde mobiele fasen na het ontgassen overbrengen naar oplosmiddelflessen, deze afdichten en aansluiten op de overeenkomstige A- en B-oplosmiddellijnen van het HPLC-systeem.
      OPMERKING: Alle oplosmiddelen zijn van chromatografisch gehalte en moeten vóór gebruik door een 0,45 μm organische fase microporeus membraan worden gefilterd. Houd de systeemdruk regelmatig in de gaten. Als de drukfluctuatie meer dan ±±5% is, controleer dan op mogelijke kolomverstopping of luchtbellen in de leiding.
  2. Vaststelling van HPLC-voorwaarden
    1. Gebruik een C₁₈-kolom (2,1 mm × 100 mm, 2,7 μm) voor chromatografische scheiding. Evenwicht de kolom met methanol: water = 80:20 (v/v) gedurende 30 minuten vóór gebruik, met een debiet van 0,3 mL/min tijdens de evenwicht. Stel de kolomoventemperatuur in op 30 °C en begin 10 minuten van tevoren met voorverwarmen.
    2. Optimaliseer een gradiënt-elusieprogramma als volgt: 0–10,0 min, 5% tot 10% B; 10,0–15,0 min, 10% tot 35% B; 15,0–20,0 min, 35% tot 60% B; 20,0–25,0 min, 60% tot 95% B. Stel de debiet in op 0,60 mL/min, het injectievolume op 2 μL en de detectiegolflengte op 210 nm.
  3. Massaspectrometrische voorwaarden
    1. Voer massaspectrometrische (MS) detectie uit met een triple quadrupole (QQQ) massaspectrometer uitgerust met een elektrospray-ionisatie (ESI) bron die werkt in positieve ionisatiemodus (ESI+).
    2. Stel de operationele parameters als volgt in: vernevelaarsdruk: 15 psi; capillaire spanning: 4000 V; gastemperatuur: 300 °C; en gasstroom: 11 L/min.
    3. Optimaliseer systematisch de MS/MS-parameters voor elke analyte.
      1. Eerst identificeer je precursorionen door individuele standaardoplossingen direct in MS2 SCAN-modus te infuseren.
      2. Optimaliseer de fragmentorspanning voor elk precursor-ion tot maximale signaalintensiteit met behulp van MS2 SIM-modus.
      3. Vervolgens gebruik je de Product Ion Scan-modus om de karakteristieke productionen te bepalen. Optimaliseer systematisch de botsingsenergie (CE) voor het precursorion om de product-ionsignaalintensiteit te maximaliseren.
      4. Kies het meest intense production voor kwantificatie en gebruik het op één na meest intense ion voor kwalitatieve bevestiging.
        OPMERKING: Identificeer precursorionen via directe infusie van individuele standaardoplossingen in MS2 SCAN-modus. Zorg ervoor dat de concentratie van standaardoplossing geschikt is om signaalverzadiging te voorkomen. Kalibreer het instrument regelmatig om parameterdrift te voorkomen.
  4. Methodevalidatie
    1. Specificiteit
      1. Injecteer het blanco oplosmiddel (methanol), de gemengde standaardwerkoplossing en het monsterextract afzonderlijk en vergelijk de chromatogrammen.
      2. Zorg ervoor dat aan de volgende eisen wordt voldaan: Geen storende pieken in het blanke oplosmiddel; De retentietijd van doelcomponenten in het monster is consistent met die van de standaard (afwijking ≤ ±±0,1 min); De piekoppervlakteverhouding van kwantor-ion tot kwalificatie-ion komt overeen met die van de standaard (afwijking ≤ ±±10%).
    2. Lineariteit
      1. Injecteer de reeks gemengde werkoplossingen die in stap 1.1 (0.1, 0.5, 2, 5, 10 μg/mL) zijn bereid, achtereenvolgens onder de eerder genoemde HPLC-MS-omstandigheden, met 3 injecties per concentratie.
      2. Plot de standaardcurve met de concentratie (x, μg/mL) van elk component als abscissa en het gemiddelde piekoppervlak (y) van het kwantoratieion als ordinaat. Voer lineaire regressieanalyse uit, waarbij een correlatiecoëfficiënt (R2) ≥ 0,995 vereist is.
    3. Precisie en nauwkeurigheid
      1. Intraday precisie (herhaalbaarheid): Analyseer 6 replicaten van kwaliteitscontrolemonsters (QC) op drie concentratieniveaus (2 μg/mL, 5 μg/mL en 10 μg/mL) binnen één dag, en bereken de relatieve standaarddeviatie (RSD%).
      2. Interdagprecisie (inter precisie): Onafhankelijk QC-monsters voorbereiden van dezelfde batch gedroogde plantaardige grondstoffen en analyseren door verschillende operators op drie opeenvolgende dagen. en bereken RSD%. Zorg dat RSD% ≤ 10% voor beide zorgen.
      3. Evalueer de nauwkeurigheid met een spike-recovery test en druk het uit als een herstelpercentage (%). Zorg ervoor dat het gemiddelde herstelpercentage van lage, middelmatige en hoge concentraties varieert van 85% tot 115%, met RSD% ≤ 5%.
        OPMERKING: Het lineaire bereik moet het verwachte concentratiebereik van doelcomponenten in daadwerkelijke monsters (inclusief lage, middelhoge en hoge niveaus) omvatten om de praktische toepasbaarheid te weerspiegelen. Alle validatie-experimenten werden driemaal uitgevoerd en de resultaten werden uitgedrukt als de gemiddelde waarde.

3. Dataverwerving

  1. Voer gegevensverzameling uit in multiple reaction monitoring (MRM) modus. Zie Tabel 1 voor de geoptimaliseerde MRM-parameters - inclusief precursorion, productionovergangen, fragmentorspanning en botsingsenergie (CE) - voor elke analyte.
  2. Bereken de dwell-tijd om een voldoende aantal datapunten te garanderen over elke chromatografische piek voor elke overgang, terwijl een geschikte cyclustijd behouden blijft.

4. Data-analyse

  1. Start de kwalitatieve analysesoftware, klik op Bestand > Gegevens importeren en importeer alle verzamelde databestanden (.d-formaat).
  2. Extractie van geëxtraheerde ionenchromatogrammen (EICs): Selecteer in de Quantitatiemodule MRM Transition, voer de precursor ion-product ionenparen van elke component in en extraheer de bijbehorende EICs.
  3. Piekvalidatie en integratie: Controleer de pieksymmetrie en consistentie van retentietijd (afwijking ≤ ±±0,1 min vergeleken met de standaard) van de doelpieken in elke EIC.
  4. De software voert standaard automatische integratie uit; Als er baseline drift of storende pieken zijn, pas dan handmatig de integratieparameters aan (start- en eindpunten van de integratie) om een nauwkeurige integratie te garanderen.
  5. Bereken de concentratie van elke component in onbekende monsters met behulp van de standaardcurve. Klik op Rapport > Rapport genereren, selecteer Excel-formaat om het rapport te exporteren. Het rapport bevat de naam van de verbinding, retentietijd, piekgebied, concentratie, RSD%, enzovoort.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

HPLC-QQQ-MS chromatografische scheiding en identificatie van TA's
Een typisch MRM-chromatogram verkregen uit de analyse van een standaardmengsel en een A.tanguticus wortelextract wordt weergegeven in Figuur 3 en Figuur 4. Onder de geoptimaliseerde HPLC-omstandigheden werden alle drie de doel-tropaanalkaloïden: hyoscyamine, anisodamine en scopolamine, binnen 20 minuten succesvol gescheiden, wat de hog...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Met de groeiende interesse in plantsecundaire metabolieten hebben analytische technieken voor alkaloïdedetectie veel aandacht gekregen. Hoewel er een fundamenteel chromatografisch systeemis opgesteld voor de analyse van tropaanalkaloïden (TA's), benadrukken recente ontwikkelingen, zoals de adoptie van capillaire elektroforese (CE), verbeterde instrumentele prestaties bij GC–MS en HPLC–MS, en de identificatie van nieuwe structurele verbindingen, waaronder convolvin...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De auteurs hebben geen belangenconflicten om te melden.

Dankbetuigingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dit werk wordt ondersteund door de Provinciale Administratie van Traditionele Chinese Geneeskunde van Sichuan (nr. 2024MS562) en het Xinglin Talent Program van de Universiteit van Chengdu van TCM (nr. MPRC2022035). We waarderen de steun van het Innovative Institute of Chinese Medicine and Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, enorm.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Agilent MassHunter softwareAgilent Technologies
Agilent ZORBAX SB-C18 kolomAgilent Technologies880975-902C18 omgekeerde fase kolom, 4,6 × 250 mm, 5 μm
Anisodamine hydrobromideChengdu glip Biotechnology Co., Ltd101-31-5HPLC>98%
Formic AcidSigma-Aldrich5.33002
vriesdrogerEYELA, Tokyo, JapanFDU-2110
Hogesnelheid universele molenTaisite Instrument Co., Ltd., Tianjin, China6010210100FW-100, 24.000 rpm, 100 g capaciteit, 80 mesh
HyoscyamineChengdu glip Biotechnology Co., Ltd55449-49-5HPLC>98%
MethanolThermo Fisher Scientific022909.K2
Microporeuze membraan 0,22μmMilliporeSLGV033RB
Milli-Q Direct 8 watersysteemMilliporeSigma, Burlington, MA, USAZRQSVP0JP
Scopolamine hydrobromideChengdu glip Biotechnology Co., Ltd114-49-8HPLC>98%

Referenties

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Ji, P., Yang, X., Zhao, X. Application of metabolomics in quality control of traditional Chinese medicines: a review. Front Plant Sci. 15, 1463666(2024).
  2. Li, S. -S., et al. Phytochemical variation among the traditional Chinese medicine mu dan pi from Paeonia suffruticosa (tree peony). Phytochemistry. 146, 16-24 (2018).
  3. Wang, N., et al. Pinelliae rhizoma alleviated acute lung injury induced by lipopolysaccharide via suppressing endoplasmic reticulum stress-mediated NLRP3 inflammasome. Front Pharmacol. 13, 883865(2022).
  4. Pughaih, T., et al. Tropane Alkaloids: Sources, Chemistry, Pharmacology and Biotechnology. , Nature, Springer. Singapore. (2025).
  5. Chen, C., Wang, B., Xiao, Y., Xiong, F., Zhou, G. Geographical origin discrimination of Anisodus tanguticus (Maxim.): chemometrics methods applied to ICP-OES analysis. Arab J Chem. 17 (5), 105730(2024).
  6. Cardillo, R., et al. Scopolamine, anisodamine and hyoscyamine production by Brugmansia candida hairy root cultures in bioreactors. Process Biochem. 45 (9), 1577-1581 (2010).
  7. Yuan, B., Zheng, C., Teng, H., You, T. Simultaneous determination of atropine, anisodamine, and scopolamine in plant extract by nonaqueous capillary electrophoresis coupled with electrochemiluminescence and electrochemistry dual detection. J Chromatogr A. 1217 (1), 171-174 (2010).
  8. Zhang, P., et al. Simultaneous determination of atropine, scopolamine, and anisodamine from Hyoscyamus niger L. in rat plasma by high-performance liquid chromatography with tandem mass spectrometry and its application to a pharmacokinetics study: liquid chromatography. J Sep Sci. 37 (19), 2664-2674 (2014).
  9. Chen, C., Wang, B., Li, J., Xiong, F., Zhou, G. Multivariate statistical analysis of metabolites in Anisodus tanguticus (Maxim.) Pascher to determine geographical origins and network pharmacology. Front Plant Sci. 13, 927336(2022).
  10. Chen, C., et al. Multivariate statistical analysis of tropane alkaloids in Anisodus tanguticus (Maxim.) Pascher from different regions to trace geographical origins. Acta Chromatogr. 34 (4), 422-429 (2022).
  11. Sawabe, Y., et al. Rapid determination of atropine and scopolamine content in Scopolia extract powder by HPLC. J Nat Med. 65 (2), 395-399 (2011).
  12. Baj, J., et al. Application of HPLC-QQQ-MS/MS and new RP-HPLC-DAD system utilizing the chaotropic effect for determination of nicotine and its major metabolites cotinine,and trans-3′-hydroxycotinine in human plasma samples. Molecules. 27 (3), 682(2022).
  13. Chen, D., et al. Qualitative and quantitative analysis of the major constituents in Shexiang tongxin dropping pill by HPLC-Q-TOF-MS/MS and UPLC-QqQ-MS/MS. Molecules. 20 (10), 18597-18619 (2015).
  14. Huang, Y. -F., et al. Simultaneous determination of twenty-nine active compounds in Fuzhengjiedu granules by HPLC-QQQ-MS/MS. Heliyon. 9 (2), e13675(2023).
  15. Zhang, K. -X., et al. Improved quality control method for prescriptions of Polygonum capitatum through simultaneous determination of nine major constituents by HPLC coupled with triple quadruple mass spectrometry. Molecules. 18 (10), 11824-11835 (2013).
  16. Ding, M., et al. Comprehensive chemical profiling and quantification of Shexiang xintongning tablets by integrating liquid chromatography-mass spectrometry and gas chromatography-mass spectrometry. Arab J Chem. 16 (3), 104527(2023).
  17. Zhu, L., et al. The QuEChERS method coupled to HPLC-QQQ-MS/MS for the determination of 25 banned pesticide residues in ethnic medicines. Res Sq. , (2022).
  18. Cinelli, M. A., Cline, J., Watson, T. Applications of liquid chromatography-tandem mass spectrometry in natural products research: Tropane alkaloids as a case study. J Vis Exp. (205), e66620(2024).
  19. Pang, Y., Huang, Y. -K., Li, F., Yang, F. -Q., Xia, Z. -N. Rapid screening and evaluation of antioxidants in alkaloid natural products by capillary electrophoresis with chemiluminescence detection. Anal Methods. 8 (35), 6545-6553 (2016).
  20. Voeten, R. L. C., Ventouri, I. K., Haselberg, R., Somsen, G. W. Capillary electrophoresis:trends and recent advances. Anal Chem. 90 (3), 1464-1481 (2018).
  21. Pellati, F., Benvenuti, S. Chromatographic and electrophoretic methods for the analysis of phenetylamine alkaloids in Citrus aurantium. J Chromatogr A. 1161 (1), 71-88 (2007).
  22. Cirlini, M., et al. A sensitive UHPLC-ESI-MS/MS method for the determination of tropane alkaloids in herbal teas and extracts. Food Control. 105, 285-291 (2019).
  23. Wojakowska, A., et al. Structural analysis and profiling of phenolic secondary metabolites of Mexican lupine species using LC-MS techniques. Phytochemistry. 92, 71-86 (2013).
  24. Shimizu, T., Watanabe, M., Fernie, A. R., Tohge, T. Targeted LC-MS analysis for plant secondary metabolites. Methods Mol Biol. 1778, 171-181 (2018).
  25. Mennickent, S., De Diego, M. Analytical Method Validation as the First Step in Drug Quality Control. Quality Management and Quality Control - New Trends and Developments. , IntechOpen. London, UK. (2019).
  26. Yang, S. H., Wang, J., Zhang, K. Validation of a two-dimensional liquid chromatography method for quality control testing of pharmaceutical materials. J Chromatogr A. 1492, 89-97 (2017).
  27. Zhang, X., et al. HPLC with chiral stationary phase for separation and kinetics study of aspartic acid epimerization in peroxiredoxin 2 active site peptide. J Pharm Biomed Anal. 247, 116247(2024).
  28. Lu, W., et al. Metabolite measurement: pittfalls to avoid and practices to follow. Annu Rev Biochem. 86, 277-304 (2017).
  29. Leopold, J., Popkova, Y., Engel, K. M., Schiller, J. Recent developments of useful MALDI matrices for the mass spectrometric characterization of lipids. Biomolecules. 8 (4), 173(2018).
  30. Parasuraman, S., et al. An overview of liquid chromatography-mass spectroscopy instrumentation. Pharm Methods. 5 (2), 47-55 (2014).
  31. Alanazi, S. Recent advances in liquid chromatography–mass spectrometry (LC–MS) applications in biological and applied sciences. Anal Sci Adv. 6 (1), e70024(2025).
  32. Cortese, M., et al. Compensate for or minimize matrix effects? Strategies for overcoming matrix effects in liquid chromatography-mass spectrometry technique: A tutorial review. Molecules. 25 (13), 30-47 (2020).
  33. Wang, L., et al. The interplay between herbal medicines and gut microbiota in metabolic diseases. Front Pharmacol. 14, 1105405(2023).
  34. Musharraf, S. G., et al. Screening of inhibitors of angiotensin-converting enzyme (ACE) employing high performance liquid chromatography-electrospray ionization triple quadrupole mass spectrometry (HPLC-ESI-QqQ-MS). Eur J Pharm Sci. 101, 182-188 (2017).
  35. Liu, H., et al. Integrating qualitative and quantitative assessments of Yougui pill, an effective traditional Chinese medicine, by HPLC-LTQ-orbitrap-MSn and UPLC-QqQ-MS/MS. Anal Methods. 9 (23), 3485-3496 (2017).
  36. Parks, H. M., et al. Redirecting tropane alkaloid metabolism reveals pyrrolidine alkaloid diversity in Atropa belladonna. New Phytol. 237 (5), 1810-1825 (2023).
  37. Yan, Z., et al. Triterpenoid saponins profiling by adducts-targeted neutral loss triggered enhanced resolution and product ion scanning using triple quadrupole linear ion trap mass spectrometry. Anal Chim Acta. 819, 56-64 (2014).
  38. Sosa-Ferrera, Z., Mahugo-Santana, C., Santana-Rodríguez, J. J. Analytical methodologies for the determination of endocrine disrupting compounds in biological and environmental samples. Biomed Res Int. 2013, 674838(2013).
  39. Heyde, B. J., Barthel, A., Siemens, J., Mulder, I. A fast and robust method for the extraction and analysis of quaternary alkyl ammonium compounds from soil and sewage sludge. PLoS One. 15 (8), e0237020(2020).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Anisodus tanguticuskwantificering van hyoscyaminedetectie van anisodamineanalyse van scopolaminemonstervoorbereidingtriple quadrupool massaspectrometriemultiple reaction monitoring

Gerelateerde artikelen