Method Article

Technische benadering voor structurele analyse van een onbekende verbinding in Huoxiang Zhengqi orale vloeistof gebaseerd op lineaire ionenvangmassaspectrometrie

DOI:

10.3791/70672

⸱

April 3rd, 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1General Surgery, Chongqing Traditional Chinese Medicine Hospital, The First Affiliated Hospital of Chongqing College of Traditional Chinese Medicine, 2Department of Cardiology, Chongqing Traditional Chinese Medicine Hospital, The First Affiliated Hospital of Chongqing College of Traditional Chinese Medicine, 3Chongqing Taiji Industry, 4Chongqing Clinical Research Center for Dermatology, Department of Dermatology, Chongqing Traditional Chinese Medicine Hospital, The First Affiliated Hospital of Chongqing College of Traditional Chinese Medicine

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hier tonen we een standaardprotocol dat multi-fase massaspectrometriebomen combineert met een fragmentatieproces gebaseerd op Huoxiang Zhengqi orale vloeistof.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Chinese kruidenverbindingen (CHC's) spelen een onvervangbare rol in de Chinese geneeskunde, en het identificeren van hun complexe bestanddelen is de afgelopen jaren een belangrijk onderzoeksaandachtspunt geweest. Huoxiang Zhengqi orale vloeistof is een klassiek Chinees patentmedicijn waarvan de chemische samenstelling verder onderzoek op moleculair niveau vereist. Traditionele massaspectrometers, zoals time-of-flight en Orbitrap, leveren doorgaans alleen secundaire fragmentatie-informatie. Op basis van een lineaire ionenval-massaspectrometer konden verbindingen grondiger worden afgebroken, waardoor diepere fragmentinformatie werd verkregen. Dit artikel ontwikkelt een structurele exploratietechniek voor onbekende verbindingen in CHC's, waaronder voorbehandeling van monsters, ultra-performance vloeistofchromatografiepreparatheid, massaspectrometrievoorbereiding, full-spectrum testen, secundaire massaspectrometrietesten, multi-niveau massaspectrometrietesten en resultaatanalyse. Representatieve resultaten tonen het afleidingsproces van de samengestelde structuur aan. We bespreken factoren die de experimentele techniek beïnvloeden, zoals isomeren, polyhydroxyverbindingen en instrumentresolutie. Gebaseerd op de afleiding van de microscopische moleculaire structuur van onbekende verbindingen via fragmentatie van multistadium massaspectrometrie, is de gevestigde experimentele methode veelzijdig en toepasbaar voor structurele karakterisering van bioactieve kleine moleculen in de traditionele Chinese geneeskunde en hun koppeling aan farmacologische mechanismen.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Chinese kruidenverbindingen (CHC's), als onschatbare bezittingen van de traditionele Chinese geneeskunde (TCM), hebben millennia aan gevalideerde klinische ervaring opgedaan1. Ze vervullen een onvervangbare rol in ziektepreventie, therapeutische interventie en revalidatie2. Door multi-kruidensynergisme behandelen CHC's het menselijk lichaam holistisch, waarbij de kernprincipes van holisme en op syndroomdifferentiatie gebaseerde therapieoperationeel worden toegepast 3. Binnen hedendaagse medische kaders krijgen CHC's wereldwijde erkenning voor hun polyfarmacologische mechanismen die multi-target routesbetrekken, met brede toepassingen die zich bevatten bij spijsverteringsstoornissen, luchtweginfecties en immunomodulatie5. Huoxiang Zhengqi orale vloeistof (HXZQ) belichaamt klassieke CHC-formuleringen6. De samenstelling omvat meerdere medicinale kruiden zoals patchouli, perillablad, angelica dahurica, atractylodes, poria en gedroogde mandarijnenschil. Het staat bekend om zijn vermogen om vochtige, warmteverlichtende, vochtverzachtende en maagversterkende eigenschappen te geven7. HXZQ wordt klinisch ingezet tegen vocht-geïnduceerde influenza-achtige syndromen, epigastrische uitzetting, braken en diarreeaandoeningen8. Technologische vooruitgang heeft het CHC-onderzoek verschoven van fenomenologische observatie naar moleculaire, mechanistische en verbindingsniveau-onderzoeken9, zoals het gebruik van proteomica en metabolomica-technieken om de actieve componenten te identificeren, waarmee de wetenschappelijke basis ligt voor de globalisering van TCM. Daardoor bevordert een rigoureuze analyse van de chemische bestanddelen en farmacodynamiek van HXZQ niet alleen de standaardisatie van de CHC, maar katalyseert het ook innovatieve geneesmiddelenontdekking.

De HXZQ is een multi-kruidenformulering waarvan de inherente chemische complexiteit voortkomt uit de samengestelde botanische bestanddelen11. Gekenmerkt door een diverse reeks fytochemische klassen—waaronder vluchtige oliën, coumarinen, lignanen, polysachariden en alkaloïden—bevat HXZQ zowel goed gekarakteriseerde bioactieve verbindingen als een aanzienlijke pool van structureel niet-geannoteerde bestanddelen12. Dynamische fluctuaties in belangrijke componenten (bijv. vluchtige oliën, flavonoïden, alkaloïden) kunnen optreden door variaties in extractieprotocollen en opslagomstandigheden, wat de cruciale noodzaak van systematische chemische profileringonderstreept 6. Binnen het kader van de modernisering van traditionele Chinese geneeskunde (TCM) verduidelijkt diepgaande compositieanalyse van klassieke formuleringen zoals HXZQ niet alleen de materiële basis achter hun therapeutische effectiviteit, maar biedt ook empirische ondersteuning voor kwaliteitscontrole, gestandaardiseerde productie en monitoring van bijwerkingen10. Hoewel verbindingen met hoge hoeveelheden in HXZQ uitgebreid zijn gedocumenteerd, blijft een aanzienlijk deel van de chemische component ongekarakteriseerd13. De structurele diversiteit van de bestanddelen, gecombineerd met de lage hoeveelheid potentieel bioactieve moleculen, vormt enorme uitdagingen voor een alomvattende identificatie met conventionele analytische technieken zoals chromatografie en spectroscopie14. Opmerkelijk is dat isomerie veel voorkomt in meerdere fytochemische klassen in HXZQ, waaronder coumarinen, lignanen en polysacchariden, wat structurele differentiatie verder bemoeilijkt15. Aanvullende barrières voor nauwkeurige compoundannotatie zijn onder meer een lage analytenabundantie en matrixinterferentie-effecten. Gezamenlijk benadrukken deze factoren een belangrijk grensgebied in HXZQ-onderzoek: de ontwikkeling van robuuste analytische strategieën om nauwkeurige, hoogdekkende identificatie van het volledige chemische complement te bereiken.

Hedendaagse massaspectrometrie (MS)-platforms ondervinden inherente beperkingen bij het karakteriseren van complexe matrices, waaronder ionenco-elutionartefacten en onvolledige spectrale databasedekking16. In deze context zijn tandemmassaspectrometrie (MS/MS) en multi-traps massaspectrometrie (MSn) naar voren gekomen als onmisbare analytische strategieën voor de novo structurele opheldering van onbekende verbindingen17. Hoewel conventionele hoogresolutie MS-systemen zoals quadrupole time-of-flight (Q-TOF) MS en Orbitrap MS hoogwaardige MS/MS-fragmentdata genereren, is hun nut beperkt tot enkelvoudige fragmentatiegebeurtenissen. Ondanks deze beperking leveren deze platforms rijke structurele inzichten met uitzonderlijke gevoeligheid en resolutie, vooral bij het analyseren van complexe mengsels18. Daarentegen maakt lineaire ionenval (LIT) MS gebruik van een meerfasige botsings-geïnduceerde dissociatiemodus (CID) die sequentiële, iteratieve fragmentatie van moleculaire ionen mogelijk maakt. Deze unieke mogelijkheid maakt stapsgewijze dissectie van samengestelde skeletten en functionele groepen mogelijk, waardoor de ondubbelzinnige kwalitatieve identificatie van structureel diverse onbekende analytenmogelijk wordt 19. Om in te spelen op de onvervulde behoefte aan een uitgebreide karakterisering van complexe CHC-matrices, presenteert deze studie een LIT-MS-gebaseerde analytische workflow die is afgestemd op de identificatie van onbekende verbindingen. Door gebruik te maken van de hoge ionenvangstefficiëntie en snelle scansnelheid van de LIT, verbetert deze aanpak de doorvoer en nauwkeurigheid van de novo structurele annotatie. De toepassing van deze workflow op HXZQ heeft als doel om: (1) bestaande methodologieën voor het profileren van niet-gekarakteriseerde chemische bestanddelen in HXZQ aan te vullen; (2) een technisch kader opzetten ter ondersteuning van standaardisatieonderzoek voor andere CHC-formuleringen; en (3) de vertaling van TCM van empirische praktijk naar evidence-based, precisiegeneeskunde te versnellen.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Voorbeeld van voorbehandeling

  1. Open de verpakking van de commerciële HXZQ. Breng nauwkeurig 0,1 mL HXZQ over in een 2 mL monsterfles en voeg vervolgens 0,9 mL water toe. Schud de oplossing tot het goed gemengd is.
  2. Bereid een injectiespuit voor (1 mL) en een microporeus membraanfilter (0,22 μm). Filter de oplossing in een nieuwe 2 mL monsterfles.
    OPMERKING: Neem passende persoonlijke voorzorgsmaatregelen tijdens experimentele procedures.

2. Ultra-performance vloeistofchromatografie (UPLC) voorbereiding

  1. Dubbelklik op de Xcalibur-software . Klik op Klaar om te downloaden en klik vervolgens op de Direct Control-knop . Klik op de kolom Pompmodule in het pop-upvenster, stel %B in op 50, %C op 0 en %D op 0 (Figuur 1).
  2. Klik op de Motorknop om hem naar de Aan-stand te zetten. Klik op de knop Meer Opties , stel de Flow in op 5 [mL/min] en de Tijd op 180 [s] in het pop-upvenster. Klik op de Purge knop en vervolgens op de OK-knop in het pop-upvenster.
    OPMERKING: De mobiele fase is constant van 0,3 mL/min met 50% A (0,1% mierenzuuroplossing) en 50% B (acetonitril) zonder kolomtemperatuur bij afwezigheid van een chromatografische kolom. Het standaard injectievolume is meestal 1 μL.

3. MS-voorbereiding

  1. Ga terug naar het hoofdvenster van de software, klik op de knop Sequence Setup View . Klik op de Open-knop om het reeds bewerkte sjabloon te importeren, klik met de rechtermuisknop op de Methodenaam en klik op de knop Open Bestand om het methodebestand te openen.
  2. In het pop-up Instrument Setup-venster zet je de Eerste Mis (m/z) op 100 en de Laatste Mass (m/z) op 1200. Klik op de knop Opslaan om de methode op te slaan.
    OPMERKING: De standaard MS-condities omvatten een ionenbrontemperatuur van 350 °C, een initiële MS-bereik van 80 – 1200 Da, botsingsmodus bij botsingsgeïnduceerde dissociatie (CID) en botsingsenergie van 35.

4. Volledige MS-test

  1. Klik op de knop 'Run sequence ' en vervolgens op de OK-knop in het pop-upvenster. Wacht tot de monsterinjectie is voltooid (Figuur 2).
    OPMERKING: Plaats vóór de test de 2 mL monsterfles in het monsterbakje van het instrument.
  2. Klik op de knop Roadmap View en op het Qual Browser-icoon om het Qual Browser-venster te openen. Klik op de Open-knop , selecteer het Databestand met .raw formaat in de map en dubbelklik erop om het bestand te openen.
  3. Klik met de rechtermuisknop op het Chromatogram-venster en klik vervolgens op de Range-knop . Selecteer in de sectie Scanfilter ESI Full MS. Kies in de sectie Plottype TIC. Klik op de OK-knop , en dan toont het venster het totale ionenchromatogram van het monster.
  4. Klik op de Pushpin-knop rechtsboven in het massaspectrumvenster.
  5. Klik en schuif in het chromatogramvenster om een tijdgebied met de sterkste relatieve hoeveelheid te selecteren. Het massaspectrumvenster toont de bijbehorende massaspectrumionen. Noteer de m/z-waarden voor het volgende niveau van massaspectrometrie.

5. MS/MS-test

  1. Keer terug naar het venster Instrumentinstelling. In de kolom Parent Mass van de n=2-rij voer je de m/z-waarde van de verbinding in de vorige stap in. Klik op de knop Opslaan om de methode op te slaan.
  2. Keer terug naar het softwarevenster. Klik op de knop Sequence Setup View , verander de bestandsnaam en klik vervolgens op de Opslaan-knop om de sequentie op te slaan.
  3. Klik op de knop 'Run sequence ' en vervolgens op de OK-knop in het pop-upvenster. Wacht tot de monsterinjectie is afgerond.
  4. Keer terug naar het Qual Browser-venster. Klik op de Open-knop , selecteer het Databestand met .raw formaat in de map en dubbelklik erop om het bestand te openen
  5. Klik met de rechtermuisknop op het Chromatogram-venster en klik vervolgens op de Range-knop . Selecteer in de sectie Scanfilter ESI Full MS. Kies in de sectie Plottype TIC. Klik op de OK-knop , en dan toont het venster het totale ionenchromatogram van het monster.
  6. Klik op de Pushpin-knop rechtsboven in het massaspectrumvenster.
  7. Klik en schuif in het chromatogramvenster om een tijdgebied met de sterkste relatieve hoeveelheid te selecteren. Het massaspectrumvenster toont de bijbehorende massaspectrumionen. Noteer de m/z-waarden voor het volgende niveau van massaspectrometrie.

6. MSn test

  1. Keer terug naar het instrumentenconfiguratievenster. In de kolom Parent Mass van de n=3-rij voer je de m/z-waarde van de verbinding in de vorige stap in. Klik op de knop Opslaan om de methode op te slaan.
  2. Herhaal stappen 4.2 tot 4.5 om de sample-injectie en gegevensweergave te voltooien. Stop de MSn-analyse zodra er geen stabiele fragmentionen meer zijn waargenomen.

7. Parameteroptimalisatie

  1. Keer terug naar het instrumentenconfiguratievenster. Klik in de kolom met acttype-actie op CID en selecteer vervolgens PQD of ETD om de botsingsmodus te wijzigen.
  2. Klik in de kolom met genormaliseerde botsingsenergie op 35 en zet vervolgens op 20 of 50 om de botsingsenergie te veranderen.
    OPMERKING: Combineer alle chemische resten en oplosmiddelen in de organische afvalcontainer.

8. Resultaatanalyse

  1. Teken handmatig het moederion en fragmentatie-ion in de tekensoftware, inclusief moederionstructuur, verbinding naam en massa-lading verhouding (m/z) waarde.
  2. Bijvoorbeeld, voor de onbekende verbinding met m/z=623,21, observeer de resulterende fragmentatie. Hier had het fragmentintermediair een m/z=461,15 bij MS/MS. Het massaverschil was 162,06 Da, wat overeenkomt met een hexosestructuur.
  3. Analyseer dit verder, het fragment intermediair met m/z=461,15 werd opnieuw gefragmenteerd tot neobyakangelicol met m/z=315,09 bij MS3. Het massaverschil was 146,06 Da, wat overeenkomt met een deoxyhexamethylosestructuur. Dat wil zeggen, het tussenproduct met m/z=461,15 had één deoxyhexamethylose-eenheid meer dan neobyakangelicol.
  4. In de structuur van neobyakangelicol analyseer je de binding positie. Hier was de blootgestelde hydroxylgroep de meest waarschijnlijke positie om verbonden te zijn met een deoxyhexamethylose. Evenzo was de hydroxylgroep bij C1 op de deoxyhexamethylose-eenheid het meest waarschijnlijk verbonden met een hexose. Ten slotte verkrijg je de structuur van de onbekende verbinding met m/z=623,21.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

We stelden voor dat alle m/z-informatie eerst gecolleerd moest worden, en vervolgens de massaverschil tussen het moederion en het fragmention werd berekend. Ik vond de verbinding die in de database of literatuur werd gerapporteerd, en leidde vervolgens de onbekende verbindingsstructuur omgekeerd af op basis van deze bekende structuur.

Alle gedetecteerde verbindingen en hun bijbehorende fragmentionen werden gepresenteerd door m/z-waarden. Een subset van deze fragmentionen kon worden gekoppeld a...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De combinatie van LIT-MS en de MSn fragmentatietechnologie biedt een methode om onbekende verbindingen in CHC's te identificeren. In tegenstelling tot traditionele tandem MS-modi in Orbitrap en Q-TOF MS, kan lineaire ionenval specifiek doelionen opvangen, waardoor interferentie door co-eluerend ionen23 effectief wordt voorkomen. Deze methode bereikt moleculaire precisie en levert relatief nauwkeurige chemische structurele informatie, waarmee het gedeelt...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De auteurs geven geen concurrerende financiële belangen aan.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dit werk werd gefinancierd door een speciaal project voor prestatie-stimulans en begeleiding van het Chongqing Wetenschappelijk Onderzoeksinstituut (cstc2022jxjl120005). Wetenschappelijk en technologisch onderzoeksproject van de Chongqing Gemeentelijke Onderwijscommissie (KJZD-K202315102). Chongqing Medisch Wetenschappelijk Onderzoeksproject (Gezamenlijk project van de Chongqing Gezondheidscommissie en het Wetenschaps- en Technologiebureau (2022DBXM007)). Ziekenhuis Special van Xinglin Scholar van de Chengdu Universiteit van TCM (YYZX202160).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
AcetonitrileThermo ScientificCAS 75-05-8Vloeibare toestand
MierenzuurThermo ScientificCAS 64-18-6Vloeibare toestand
Huoxiang Zhengqi oraal vloeibaarChongqing Taiji Industry (Group) Co., Ltd.Staat Drug Standaard Code Z50020409Object van studie
Lineaire ionenval massaspectrometerThermo ScientificLTQ XLIT-MS instrument
VloeistofchromatograafThermo ScientificU3000UPLC instrument
XcaliburThermo Scientificversie 2.0UPLC-IT-MS operationele software

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Chao, J., et al. Major achievements of evidence-based traditional Chinese medicine in treating major diseases. Biochem Pharmacol. 139, 94-104 (2017).
  2. Zou, Q., et al. The role and mechanism of TCM in the prevention and treatment of infectious diseases. Front Microbiol. 14, 1286364(2023).
  3. Zhou, X., et al. Synergistic effects of Chinese herbal medicine: a comprehensive review of methodology and current research. Front Pharmacol. 7, 201(2016).
  4. Li, X., et al. Advancing traditional Chinese medicine research through network pharmacology: strategies for target identification, mechanism elucidation, and innovative therapeutic applications. Am J Chinese Med. 53 (07), 2021-2042 (2025).
  5. Li, B. H., Li, Z. Y., Liu, M. M., Tian, J. Z., Cui, Q. H. Progress in traditional Chinese medicine against respiratory viruses: a review. Front Pharmacol. 12, 743623(2021).
  6. Xu, Q., et al. An evaluation strategy of high-quality traditional Chinese patent medicines with consistency as the core: A case study of Huoxiang Zhengqi Shui. Arabian J Chem. 18, 1302024(2025).
  7. Li, L., et al. Huoxiang Zhengqi dropping pills alleviate exertional heat stroke–induced multiple organ injury through sustaining intestinal homeostasis via regulating MAPK/NF-κB pathway and gut microbiota in rats. Front Pharmacol. 15, 1534713(2025).
  8. Wu, Y., et al. Unlocking the therapeutic potential of Huoxiang Zhengqi San in cold and high humidity-induced diarrhea: Insights into intestinal microbiota modulation and digestive enzyme activity. Heliyon. 10 (12), e32789(2024).
  9. Hua, H., et al. From traditional medicine to modern medicine: the importance of TCM regulatory science (TCMRS) as an emerging discipline. Chinese Med. 20 (1), 92(2025).
  10. Zhang, C., et al. Multi-component Chinese medicine formulas for drug discovery: state of the art and future perspectives. Acta Mater Med. 2 (1), 106-125 (2023).
  11. Li, X., et al. Integration of non-targeted multicomponent profiling, targeted characteristic chromatograms and quantitative to accomplish systematic quality evaluation strategy of Huo-Xiang-Zheng-Qi oral liquid. J Pharma Biomed Anal. 236, 115715(2023).
  12. Chen, Y., et al. Identification and quality control of isomers in Huo-Xiang-Zheng-Qi Mixture using ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole time-of-flight mass spectrometry and inductive effects analysis. J Pharma Biomed Anal. 255, 116646(2025).
  13. Guo, H., Pang, X., Zhang, W., Jiang, W., Pang, X. Dissolution determination of five components in Huoxiang Zhengqi tablets using partitioned dispersive liquid-liquid microextraction combined with HPLC-UV. Anal Meth. 5 (11), 2674-2678 (2013).
  14. Bhadange, Y. A., Carpenter, J., Saharan, V. K. A comprehensive review on advanced extraction techniques for retrieving bioactive components from natural sources. ACS Omega. 9 (29), 31274-31297 (2024).
  15. Silva, A. S., et al. Evaluation of the status quo of polyphenols analysis: Part I—phytochemistry, bioactivity, interactions, and industrial uses. Comp Rev Food Sc Food Safety. 19 (6), 3191-3218 (2020).
  16. Kaufmann, A., Teale, P. Capabilities and Limitations of High-Resolution Mass Spectrometry (HRMS): Time-of-flight and Orbitrap. Chem Anal Non-antimicrob Vet Drug Resid Food. , 93-139 (2016).
  17. Vaniya, A., Fiehn, O. Using fragmentation trees and mass spectral trees for identifying unknown compounds in metabolomics. TrAC Trends Anal Chem. 69, 52-61 (2015).
  18. Belov, M. E., et al. From protein complexes to subunit backbone fragments: a multi-stage approach to native mass spectrometry. Anal Chem. 85 (23), 11163-11173 (2013).
  19. Ma, X. Recent advances in mass spectrometry-based structural elucidation techniques. Molecules. 27 (19), 6466(2022).
  20. Ridder, L., et al. Substructure-based annotation of high-resolution multistage MSn spectral trees. Rapid Comm Mass Spectr. 26 (20), 2461-2471 (2012).
  21. Tao, Y., et al. Abelmoschus manihot (L.) medik. seeds alleviate rheumatoid arthritis by modulating JAK2/STAT3 signaling pathway. J Ethnopharmacol. 325, 117641(2024).
  22. Liu, J., et al. Qi-Sai-Er-Sang-Dang-Song decoction inhibits pyroptosis and inflammation in THP-1 cells and alleviates rheumatoid arthritis by inhibiting the NLRP3-pyroptosis signaling pathway. Phytomedicine. 148, 157481(2025).
  23. Jian, W. Modern liquid chromatography and mass spectrometry for targeted biomarker quantitation. Target Biomarker Quantitat LC–MS. , 45-63 (2017).
  24. Zeng, P., Li, J., Chen, Y., Zhang, L. The structures and biological functions of polysaccharides from traditional Chinese herbs. Progr Mol Biol Transl Sci. 163, 423-444 (2019).
  25. Abdel Tawab, M., et al. Electrospray mass spectrometry with consecutive fragmentation steps (ESI-MSn) as a tool for rapid and sensitive analysis of ginsenosides and their galactosyl derivatives. Helvetica Chim Acta. 83 (4), 739-747 (2000).
  26. Zhang, A., Sun, H., Yan, G., Wang, X. Recent developments and emerging trends of mass spectrometry for herbal ingredients analysis. TrAC Trends Anal Chem. 94, 70-76 (2017).
  27. Vukics, V., Guttman, A. Structural characterization of flavonoid glycosides by multi-stage mass spectrometry. Mass Spectr Rev. 29 (1), 1-16 (2010).
  28. Cortese, M., Gigliobianco, M. R., Magnoni, F., Censi, R., Di Martino, P. Compensate for or minimize matrix effects? Strategies for overcoming matrix effects in liquid chromatography-mass spectrometry technique: a tutorial review. Molecules. 25 (13), 3047(2020).
  29. Gerothanassis, I. P., Troganis, A., Exarchou, V., Barbarossou, K. Nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy: basic principles and phenomena, and their applications to chemistry, biology and medicine. Che Edu Res Pract. 3 (2), 229-252 (2002).
  30. Kumar, N., Jaitak, V. Recent advancement in NMR based plant metabolomics: techniques, tools, and analytical approaches. Crit Rev Anal Chem. 56 (1), 1-25 (2026).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Linear Ion TrapMass SpectrometryStructural AnalysisUnknown CompoundChinese Herbal CompoundsHuoxiang ZhengqiUltra Performance Liquid ChromatographyMultistage FragmentationMolecular Structure DerivationBioactive Small Molecules

Related Articles