Waterkwaliteitanalyse via indicatororganismen

1. Colilert Presence – Absence (P – A) Test

1. Open de 100 mL plastic Colilert fles. De fles bevat een kleine hoeveelheid poedervormig reagens dat nodig is voor de juiste reacties, gooi dit poeder niet weg.
2. Voeg 100 mL watermonster toe aan de Colilert fles.
3. Open de kussenbuis met het voedingssubstraat en giet de inhoud in het watermonster in de Colilert fles.
4. Doe de dop op de Colilert fles en sluit deze af. Schud de fles krachtig, draai de fles herhaaldelijk om totdat het substraat volledig is opgelost.
5. Incubeer het reagens/watermonstermengsel in de fles bij 35 ± 0,5 °C gedurende 24 uur.
6. Observeer de gele kleurverandering in het reagens/watermonstermengsel. De gele kleur geeft aan dat colivormen aanwezig zijn. Helder water of geen kleurverandering geeft aan dat colivormen afwezig zijn.
7. Stel het reagens/watermonster bloot aan ultraviolet licht en observeer de blauwe fluorescentie. Blauwe fluorescentie geeft aan dat E. coli aanwezig is. Geen fluorescentie geeft aan dat E. coli afwezig is (Figuur 3).

Figuur 3. P-A test negatief (links), colivormen positief (midden), en E. coli positief (rechts).

2. Colilert MPN: Quanti-tray 2000

1. Open de Colilert fles, en 100 mL watermonster in de Colilert fles.
2. Open de kussenbuis met voedingssubstraat en giet de inhoud in het watermonster in de Colilert fles.
3. Doe de dop op de Colilert fles en sluit deze af. Schud de fles krachtig, draai de fles herhaaldelijk om totdat het substraat volledig is opgelost.
4. Open de Quanti-tray 2000 voorzichtig door de randen aan de bovenkant van de tray te knijpen en de papieren tab terug te trekken. Blijf knijpen zodat de tray open blijft.
5. Giet het reagens/watermonstermengsel in de tray, en incubeer vervolgens het monster in de tray bij 35 ± 0,5 °C gedurende 24 uur.
6. Observeer de gele kleurverandering in het reagens/watermonstermengsel. Tel het aantal grote en kleine putjes dat een positieve aanwezigheid voor colivormen signaleert. De gele kleur geeft aan dat colivormen aanwezig zijn. Helder water of geen kleurverandering geeft aan dat colivormen afwezig zijn.
7. Stel het reagens/watermonster bloot aan ultraviolet licht en observeer blauwe fluorescentie. Tel het aantal grote en kleine putjes dat een positieve aanwezigheid voor E. coli signaleert. De blauwe fluorescentie geeft aan dat E. coli aanwezig is. Geen fluorescentie geeft aan dat E. coli afwezig is.
8. Gebruik de Quanti-tray 2000 MPN sheet (Figuur 4) om de concentratie voor elke indicatororganisme aanwezig in 100 mL water te kwantificeren. Gebruik de spreadsheet om de verhouding van grote: kleine positieve putjes te vergelijken om de aanwezigheid voor beide indicatororganismen te enumereren.

Figuur 4. Quanti-tray negatief (links), colivormen positief (midden), en E. coli positief (rechts).