Name: Elektrofysiologische opname in de Drosophila Embryo (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-05-21T00:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 31 s
Description: Leer elektrofysiologische opname in Drosophila-embryo's voor neurowetenschap en ontwikkelingsbiologie. Deze methode karakteriseert synaptogenese aan neuromusculaire en centrale synapsen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

KB wordt ondersteund door NIH subsidie ​​GM54544.

De auteurs hebben niets te melden.

Elektrofysiologische opname van Drosophila embryo&#39;s moet handmatig manipulatie en dissectie. De gezondheid van de voorbereiding, en de daaruit voortvloeiende de kwaliteit van de opnames, hangt af van een in staat om snel en netjes voor te bereiden de kwetsbare embryonale weefsels voor het opnemen, en voer vervolgens het experiment. Onderzoekers moet bedreven zijn in zowel de embryonale ontledingen en patch clamp electrofysiologie voordat je probeert om zowel aan te pakken tegelijk. <p class="jove_conten...

elektrofysiologische opname in de drosophila embryo

Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo

Drosophila is een vooraanstaande genetisch model voor de studie van zowel de embryonale ontwikkeling en functionele neurowetenschappen. Traditioneel worden deze velden geïsoleerd nogal van elkaar, met grotendeels onafhankelijke geschiedenis en wetenschappelijke gemeenschappen. Echter, de interface tussen deze vaak uiteenlopende terreinen is de ontwikkelingsprogramma&#39;s ten grondslag liggen aan de verwerving van functionele elektrische signaal-eigenschappen en de differentiatie van de functionele chemische synapsen tijdens de laatste fasen van neurale circuit formatie. Deze interface is een uitermate belangrijk gebied voor onderzoek. In Drosophila, deze fasen van de functionele ontwikkeling optreden tijdens een periode van &lt;8 uur (bij 25 ° C) tijdens het laatste derde deel van de embryogenese. Deze late ontwikkelingsfase werd lang beschouwd als hardnekkige het onderzoek als gevolg van de afzetting van een zware, ondoordringbare epidermale cuticula. Een doorbraak van tevoren was de toepassing van de water-polymeriseren chirurgische lijm die lokaal kan worden toegepast op de cuticula om gecontroleerde dissectie van de laat-stadium embryo&#39;s mogelijk te maken. Met een dorsale longitudinale incisie, kan het embryo te plat, waardoor de ventrale zenuw snoer en de lichaamswand spieren aan experimenteel onderzoek. Whole-cell patch-clamp technieken kunnen dan worden gebruikt om op te nemen van individueel herkenbare neuronen en somatische spieren. Deze opname configuraties zijn gebruikt om het uiterlijk en de rijping van de ionische stromen en actiepotentiaal voortplanting in zowel neuronen en spieren te volgen. Genetische mutanten die deze elektrische eigenschappen werden gekenmerkt om de moleculaire samenstelling van ionenkanalen en de bijbehorende signalering complexen onthullen, en om de verkenning van de moleculaire mechanismen van functionele differentiatie te beginnen. Een bijzondere focus is de montage van synaptische verbindingen, zowel in het centrale zenuwstelsel en periferie. De glutamaat neuromusculaire junctie (NMJ) is het meest toegankelijk is voor een combinatie van optische beeldvorming en elektrofysiologische opname. Een glas zuig elektrode wordt gebruikt om de perifere zenuw te stimuleren, met prikkelende knooppunt huidige (EJC) opnames gemaakt in de voltage-opgespannen spieren. Deze opname configuratie is gebruikt om de functionele differentiatie van de synaps grafiek en het uiterlijk en de rijping van presynaptische glutamaat afgifte eigenschappen track. Daarnaast kunnen postsynaptische eigenschappen onafhankelijk van elkaar worden getest via iontoforetische of druk de toepassing van glutamaat rechtstreeks naar de spier oppervlak, het uiterlijk en de rijping van de glutamaat receptor velden te meten. Zo kunnen zowel pre-en postsynaptische elementen afzonderlijk of in combinatie worden gevolgd tijdens de embryonale synaptogenese. Dit systeem is zwaar gebruikt voor het isoleren en karakteriseren van genetische mutanten dat embryonale synapsvorming aantasten, en dus onthullen de moleculaire mechanismen voor de specificatie en differentiatie van synaps verbindingen en functionele synaptische signalering eigenschappen.

Elektrofysiologische opnamen van<em&gt; Drosophila</em&gt; Embryo&#39;s laten analyses van de ontwikkeling van spier-en neuron elektrische eigenschappen, evenals karakteriseren van functionele synaptogenese op de glutamaat neuromusculaire verbinding en centrale cholinerge en GABA-erge synapsen.

Elektrofysiologische opname in de Drosophila Embryo

*Drosophila* is een vooraanstaand genetisch model voor de studie van zowel de embryonale ontwikkeling als de functionele neurowetenschappen. Traditioneel zijn deze vakgebieden vrij ...

Elektrofysiologische registraties van spieren en motorneuronen kunnen worden verkregen uit een correct geprepareerde lichaamswand van een oph-embryo. Spieren 6, 7, 12 of 13 kunnen eenvoudig worden geregistreerd met de whole-cell registratieconfiguratie, en robuuste miniatuuramplitude-stromen kunnen worden gemeten nadat een giga-ohm seal is bereikt om registraties van de neuromusculaire overgang uit te voeren. Een zuigelektrode kan worden gebruikt om een motorische zenuw nabij het uitgangspunt van het CZS op te zuigen en presynaptische stimulatie toe te dienen, terwijl whole-cell stromen worden gemeten in de postsynaptische spier.Als alternatief kan een pipet worden gebruikt om exciterende neurotransmitters nabij de registratie-elektrode toe te dienen via iontoforese of drukinjectie. Hoi, ik ben Ton van het laboratorium van Dave in de afdeling Biological Sciences aan de University of Illinois at Chicago. Vandaag laat ik u zien hoe u elektrofysiologische registraties uitvoert bij de neuromusculaire junctie in het salate-stadium van het embryo en bij de centrale neuronen.Deze procedures gebruiken we om de functie en ontwikkeling van het neuromusculaire systeem van de joof te bestudere

electrophysiological-recording-in-the-drosophila-embryo

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

Deze video toont de procedure voor het isoleren van hele hersenen van volwassen Drosophila als voorbereiding voor het opnemen van enkele neuronen met behulp van standaard hele cel-technologie. Het bevat beelden van GFP gelabelde cellen en neuronen bekeken tijdens het opnemen.

Hele Cell Opnamen van Brain van Adult Drosophila

Hier beschrijven we elektrofysiologische methoden voor het meten van synaptische transmissie bij de neuromusculaire junctie van Drosophila larve. Evoked release wordt kunstmatig geïnitieerd door het stimuleren van de motorische neuron axonen, en de transmissie door middel van de NMJ kan worden gemeten door de postsynaptische respons opgeroepen in de spier.

Elektrofysiologische methoden voor opname Synaptic Potentials van de NMJ van Drosophila Larven

Deze techniek onthult de Drosophila embryonale neuromusculature voor immunohistochemie of elektrofysiologische opname. Het is handig voor het bestuderen van vroege gebeurtenissen in neuromusculaire ontwikkeling of het uitvoeren van elektrofysiologie in mutanten die niet kan uitkomen.

Oogsten en voorbereiden Drosophila Embryo&#39;s voor elektrofysiologische opname en andere procedures

We presenten verschillende manieren om de hartfunctie in de larve van Drosophila te monitoren voor het beantwoorden van vragen over de functie van gap junctions, ionkanaalmutaties, modulatie van pacemakeractiviteit en farmacologische studies.

Monitoring Heart Functie in larvale Drosophila melanogaster Voor Fysiologische Studies

De Giant Fiber System is een eenvoudige neuronale circuit van de...

Elektrofysiologische opnames van de Giant Fiber Pathway van D. melanogaster</em

This video outlines the protocol for electrophysiological recording of photoreceptor activity in the eye of an immobilized Drosophila, enabling precise measurement of voltage changes in response to light stimuli.

Electrophysiological Recording of Voltage Responses of Drosophila Retinal Photoreceptors to Light Stimuli

The video demonstrates the extracellular recording of neuronal activity from the central nervous system (CNS) of Drosophila larvae. The transected CNS is positioned in a recording chamber, and the electrical activity from a descending nerve is recorded to establish the baseline firing frequency. A test agent is then introduced, and the change in firing frequency is recorded to determine the agent's excitatory or inhibitory effect.

Extracellular Recording of Electrical Activity in the Drosophila Central Nervous System

Dit protocol beschrijft extracellulaire van de actiepotentiaal reacties afgevuurd door labellar smaak neuronen in Drosophila.

Elektrofysiologische Opnemen vanaf<em&gt; Drosophila</em&gt; Labellar Proef sensilla

Scherpe micro-elektroden maken nauwkeurige elektrofysiologische karakterisering van fotoreceptor en visuele interneuron-output in levende Drosophila mogelijk. Hier laten we zien hoe je deze methode kunt gebruiken om hoogwaardige spanningsresponsen van individuele cellen op gecontroleerde lichtstimulatie op te nemen. Deze methode is ideaal voor het bestuderen van neurale informatieverwerking in samengestelde ogen van insecten.

Elektrofysiologische Methode voor opname intracellulaire Voltage Reacties van<em&gt; Drosophila</em&gt; Fotoreceptoren en Interneurons naar Light Stimuli<em&gt; In Vivo</em

Whole-cell opnames van Drosophila melanogaster fotoreceptoren maken het mogelijk om spontaan donkere stoten, kwantumstoten, macroscopische reacties op licht en spanningsrelaties onder verschillende omstandigheden te meten. In combinatie met D. melanogaster genetische manipulatie instrumenten, deze methode maakt het mogelijk om de alomtegenwoordige inositol-lipide signalering weg en zijn doel, het TRP kanaal te onderzoeken.

Elektrofysiologische methode voor opname van volledige spanningsklemmen van<em&gt; Drosophila</em&gt; Photoreceptors

Dit protocol beschrijft een methode om vast te leggen van de aflopende elektrische activiteit van het centrale zenuwstelsel van Drosophila melanogaster zodat de kosten-efficiënte en handige testen van farmacologische agenten, genetische mutaties van neurale eiwitten, en/of de rol van onontgonnen fysiologische trajecten.

Elektrofysiologische opname van de activiteit van het centrale zenuwstelsel van derde-Instar Drosophila Melanogaster

Leer elektrofysiologische opname in Drosophila-embryo's voor neurowetenschap en ontwikkelingsbiologie. Deze methode karakteriseert synaptogenese aan neuromusculaire en centrale synapsen.

Elektrofysiologische opname in de Drosophila Embryo

Meer video's verkennen