Name: Cultuur van Mouse Neurale Stem Cell Voorlopers (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-02-25T00:00:00.000+00:00
Duration: 27 min 44 s
Description: Leer neuroprecursor-isolatie uit de embryonale cortex van muizen voor neurobiologisch onderzoek. Deze methode omvat weefseldissectie, enzymatische digestie en celkweek op laminine.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li> Muis neurale precursoren (NPC&#39;s) werden geïsoleerd uit embryo E12.5 cortex. </li><li> Huid-en mesenchymale lagen werden verwijderd uit ontleed telencephalic blaasjes. </li><li> Blaasjes werden geïncubeerd in 0,05% trypsine met 0,02% EDTA en 0,2% BSA in HBSS gedurende 20 minuten bij 37 ° C. </li><li> Trypsinisatie werd gestopt door een gelijk volume van 1 mg / ml soja trypsine-remmer (Sigma # T6522) in HBSS. </li><li> Tissue digesten werden losgemaakt met behulp van verschillende rondes van tritureren met vuur gepolijst pasteurpipetten. </li><li> Cellen werden eenmaal gewassen met 0,2% BSA in HBSS en uitgeplaat op 50.000 cellen / ml op laminine-gecoate dekglaasjes in de media met 20 ng / ml EGF, 10 ng / ml FGF2 (R &amp; D Systems of Peprotech), en 2 ug / ml heparine ( Sigma). </li></ol>

<ol><li>Currle, D., Cheng, X., Hsu, C., Monuki, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+and+indirect+roles+of+CNS+dorsal+midline+cells+in+choroid+plexus+epithelial+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Direct and indirect roles of CNS dorsal midline cells in choroid plexus epithelial formation.</a> Development. 132 (15), 3549-3559 (2005).</li>
<li>Flanagan, L., Rebaza, L., Derzic, S., Schwartz, P., Monuki, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+human+neural+precursor+cells+by+laminin+and+integrins%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">Regulation of human neural precursor cells by laminin and integrins.</a> J Neurosci Res. 83, 845-856 (2006).</li>
</ol>

Grote vooruitgang in ons begrip van CNS ontwikkeling en stamcelbiologie zijn mogelijk gemaakt door ons vermogen om te oogsten, te isoleren en cultuur embryonale neurale stamcellen. Deze video toont de ontleding van E12.5 muis hersenschors en de daaropvolgende disaggregatie en het kweken van embryonale neurale stamcellen. Veel andere andere, soortgelijke middelen zijn succesvol toegepast door andere onderzoekers.

<table><tbody><tr><td>Rechte irisschaar</td><td>Instrument</td><td>Fine Science Tools</td><td>14060-11</td><td></td></tr><tr><td>Medium schaar</td><td>Instrument</td><td>Fine Science Tools</td><td>15024-10</td><td></td></tr><tr><td>Microschaar</td><td>Instrument</td><td>Fine Science Tools</td><td>15002-08</td><td></td></tr><tr><td>Gebogen pincet</td><td>Instrument</td><td>Fine Science Tools</td><td>11251-35</td><td></td></tr></tbody></table>

cultuur van mouse neurale stem cell voorlopers

Culture of Mouse Neural Stem Cell Precursors

Primaire neurale stamcellen culturen zijn nuttig voor het bestuderen van de mechanismen die ten grondslag liggen aan het centrale zenuwstelsel ontwikkeling. Stamcelonderzoek zal ons begrip van het zenuwstelsel en kan ons in staat stellen om behandelingen voor momenteel ongeneeslijke hersenziekte ziekten en verwondingen te ontwikkelen. Daarnaast moet stamcellen worden gebruikt voor stamcelonderzoek gericht op de gedetailleerde studie van de mechanismen van neurale differentiatie en transdifferentiatie en de genetische en omgevingsfactoren signalen die direct de specialisatie van de cellen in bepaalde celtypes. Deze video demonstreert een techniek die gebruikt wordt om cellen van de embryonale dag 12,5 muis dorsale voorhersenen splitsen. De dissectie procedure omvat het oogsten E12.5 muis embryo&#39;s uit de baarmoeder, het verwijderen van de &quot;skin&quot; met fijne ontleden tang en uiteindelijk het isoleren van stukjes van de cerebrale cortex. Na de dissectie, is het weefsel verteerd en mechanisch gescheiden. De geresuspendeerde gescheiden cellen worden vervolgens gekweekt in &quot;stamcel&quot; media dat de groei van neurale stamcellen gunsten.

Deze video beschrijft de methode die wordt gebruikt voor het isoleren van neuroprecursors uit de ontwikkelingslanden cortex van embryonale muizen. De procedure voor het verwijderen van embryo&#39;s uit de baarmoeder, het ontleden van de corticale weefsel, en verteren de geïsoleerde cerebrale cortex wordt weergegeven.

Cultuur van Mouse Neurale Stem Cell Voorlopers

Primaire neurale stamcelculturen zijn nuttig voor het bestuderen van de mechanismen die ten grond liggen aan de ontwikkeling van het centrale zenuwstelsel. Stamcelonderzoek zal toenemen ...

Dit is de eerste stap in de isolatie, dissociatie en het kweken van neurale precursorcellen. Eerst ga ik een 24-wells plaat coaten. Deze is niet behandeld voor weefselkweek.Ik ga het coaten met laminine zodat de cellen hechten. Eerst coat ik het met een mengsel van water en poly-D-lysine. Ik voeg ongeveer 450 µL per well toe.Ik heb de helft van de plaat, deze twee rijen hier, gecoat met de poly-D-lysine-oplossing. Ik laat dit vijf minuten incuberen bij kamertemperatuur, gewoon hier in de zuurkast. Het heeft nu vijf minuten geïncubeerd.Ik ga nu de PDL-oplossing hier met een vacuüm verwijderen. Gebruik van een huishoudelijke stofzuiger. Nu ga ik de wells opnieuw spoelen met water, ongeveer 450 µL.Er is werkelijk geen incubatietijd nodig voor het spoelen met water. Ik zal nu direct het water afzuigen. Vervolgens voeg ik de laminaatoplossing toe.Laminaten zijn opgelost in EM EM-medium tegen een concentratie van 2 µg/ml. Ik ga nu 450 µL van de laminaatoplossing aan elke well toevoegen; momenteel gebruik ik plastic coating. U zou ook gecoate dekglasplaatjes in deze wells kunnen hebben.Ik zal de cellen minstens vier uur lang incuberen bij 37 °C in een weefselkweekincubator. Ik heb twee fi

culture-of-mouse-neural-stem-cell-precursors

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

Hier laten we onze methode om de muis epidermale neurale stamcellen (EPI-NCSC) te isoleren. Techniek houdt in micro-ontleden whisker follikels, het isoleren van de verdikking en placeing het in weefselkweek. EPI-NCSC beginnen om van uitstulping explantaten op de ondergrond emigreren binnen 3 - 4 dagen.

Muis Epidermale neurale lijst Stem Cell (EPI-NCSC) culturen

Deze video toont protocol de toepassing van de neurosphere test voor de isolatie en de uitbreiding van neurale stamcellen van het ganglionisch eminenties van embryonale dag 14-hersenen van muizen.

Tot vaststelling van Embryonale Mouse Neural Stem Cell Culture Met behulp van de Neurosphere Assay

Isolatie van embryonale neurale lijst van de neurale buis vergemakkelijkt het gebruik...

Isolatie en Cultuur van neurale lijst cellen van embryonale Murine Neural Tube

This video demonstrates a detailed protocol for isolating the lateral ventricle walls from the adult mouse brain and performing enzymatic tissue dissociation to obtain single cells. These cells are then subjected to specific culture conditions that selectively enhance the proliferation of neural stem cells and promote their differentiation into co-cultures of oligodendrocytes and astrocytes.

Obtaining a Mixed Oligodendrocyte and Astrocyte Culture From Adult Mouse Neural Stem Cells

This video demonstrates a method for the in vitro generation of neural progenitor cells (NPCs) from mouse embryonic stem cells (mESCs). The mESCs are cultured in suspension to form embryoid bodies (EBs), which are then guided to differentiate into NPCs via retinoic acid treatment in an adherent culture.

A Technique for Generating Neural Progenitor Cells from Mouse Embryonic Stem Cells

Hier beschrijven we een gedetailleerd protocol voor het gelijktijdig opwekken van neurale precursoren celculturen, hetzij als hechtende monolagen of neurosferen, uit de subventriculaire zone en dentate gyrus van individuele volwassen muizen.

Een muis, twee culturen: Isolatie en Cultuur van adulte neurale stamcellen uit de Twee Neurogeen Zones van individuele muizen

Dit protocol beschrijft in detail de methode voor het genereren van neurale progenitoren uit embryonale stamcellen met behulp van een serumvrije monolaagmethode. Deze progenitoren kunnen worden gebruikt om rijpe neurale celtypen te verkrijgen of om het proces van neurale specificatie te bestuderen en is geschikt voor schaalvergroting in multiwell-formaat voor compound screening.

Neurale differentiatie van muis embryonale stamcellen in serum-vrije monolaagkweek

Het opzetten van cultuursystemen voor de expansie van volwassen neurale stamcellen (aNSCs) maakt het mogelijk om aNSCs te onderzoeken en toe te passen voor therapie. De subcallosale zone (SCZ) is onlangs herkend als een nieuwe neuroblastvormende regio in volwassen muizen. Hier worden methoden beschreven voor de isolatie, expansie en differentiatie van SCZ-aNSCs.

Isolatie en cultuur van de volwassen neurale stamcellen van de muis Subcallosal Zone

Hier introduceren wij een nieuwe microchirurgische techniek voor de isolatie van neurale stamcellen uit de E13 muis embryo ganglionaire eminentie.

Isolatie en cultuur van muis embryonale neurale stamcellen

We beschrijven de procedure voor de in vitro differentiatie van embryonale stamcellen van muizen in neuronale cellen met behulp van de hanging drop-methode. Verder voeren we een uitgebreide fenotypische analyse uit via RT-qPCR, immunofluorescentie, RNA-seq en flowcytometrie.

Differentiatie en karakterisering van neurale voorlopercellen en neuronen uit embryonale stamcellen van muizen

Leer neuroprecursor-isolatie uit de embryonale cortex van muizen voor neurobiologisch onderzoek. Deze methode omvat weefseldissectie, enzymatische digestie en celkweek op laminine.

Cultuur van Mouse Neurale Stem Cell Voorlopers

Meer video's verkennen