Name: Vaste Volume of vaste druk: een muizenmodel van hemorragische shock (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-06-06T12:00:00.000+00:00
Duration: 16 min 31 s
Description: Leer een chirurgische methode om hemorragische shock bij muizen te induceren voor traumagerelateerd immunologisch onderzoek. Dit model maakt gecontroleerde monitoring van fysiologische veranderingen en orgaanfunctie mogelijk.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Financiering Bron / Aantal Moleculaire Biologie van hemorragische Shock GM053789

1. Instrument en chirurgische veld Bereiding: 1. Instrument Voorbereiding. Alle chirurgische ingrepen worden uitgevoerd met behulp van aseptische technieken. Een chirurgische blauwe pad en steriele veld verband worden gebruikt. Alle materialen en instrumenten worden gesteriliseerd voor gebruik. 6-0 Suture, katoen tip applicators, gaas, man-man 3-weg kranen, en instrumenten worden autoclaaf gesteriliseerd. Transducers, PE-50 en PE-10 buizen zijn ethyleenoxide gesteriliseerd. Alle 3-weg kranen, spuiten en naalden worden ontvangen steriel. 6-0 Suture is gesneden in 1-inch stukken (6 stuks / dier) en in kleine zakjes sterilisatie. Katoen-tip applicators, 4x4 gaas pleinen, en man-man 3-weg kranen worden in kleine of middelgrote sterilisatieverpakkingen en geautoclaveerd. Onze chirurgische instrumenten zijn autoclaaf gesteriliseerd elke avond. Ze worden gewassen na de operatie met behulp van antibacteriële zeep en leidingwater. Ze mogen te drogen op een schone chirurgische blauwe pad. Vervolgens worden ze zorgvuldig geplaatst in een sterilisatie zakje en gesteriliseerd voor gebruik de volgende dag. Omdat de sensoren en slangen zijn voorzien van kunststof onderdelen, moeten ze worden gesteriliseerd met behulp van gas, dat wil zeggen ethyleenoxide. PE-10 buizen wordt gesneden in 5-inch stukken en geplaatst in een klein zakje sterilisatie. PE-50 buizen wordt gesneden in 18-inch stukken en geplaatst in een medium sterilisatie zakje. 2. Chirurgische Field. Aan set-up het operatiegebied de eerste plaats zet de hete kraal sterilisator om ervoor te zorgen bereikt de juiste temperatuur-300-350 ° C vóór het begin van operaties. Dan naar de volgende stappen verder door het plaatsen van chirurgische blauwe kussentjes neer op een alcohol afgeveegd benchtop. Een pad gaat onder de microscoop en de ander gaat op de circulerende verwarming pad waar de BP-analysers zijn gevestigd. Plaats een steriel veld dressing over zowel chirurgisch blauwe pads. Vul een roestvrijstalen instrument lade 1 / 3 van de weg met 70% alcohol. Gebruik voldoende 70% EtOH om alle chirurgische instrumenten te dekken. Gebruik een aparte steriele veld dressing en leg deze naast de microscoop. Plaats alle steriele instrumenten, hechtdraad, gaas, en katheters op dit steriele veld. Wees voorzichtig bij het openen van steriele instrumenten en hechtmateriaal niet ze kunnen worden besmet door het aanraken van hen. Het beste is om steriele handschoenen te gebruiken bij het uitvoeren van deze installatie procedure. 2. Mechanische set-up en procedures: 1. Catheter Set-up. Aan set-up het rechterbeen murine katheter gebruikt om BP, eerste, op steriele handschoenen te meten. Krijgen dan de steriele PE-10 buizen van de geautoclaveerde zakje. Pak het midden van de buis met wijsvinger en duim waardoor ongeveer een centimeter tussen hen. Stretch dit deel van de slang gewoon een beetje om het dunner in diameter om te helpen met katheter inbrengen. Na het strekken van de buis snijd het in half met behulp van steriele schaar. De 5-inch buis moet nu twee stukken van ongeveer 2 ½-inch in lengte. Zorg ervoor dat u het bevel uitgerekt einde. * NIET hoek van de schuine kant te veel want dit kan de kans op het verlaten van de lumen te verhogen door steken via de onderkant van de vaatwand. Plaats een 30G naald in de niet-uitgerekte stompe uiteinde van de slang. Hier krijg je een steriele 1cc spuit en een 3-weg kraan. Gebruik een alcoholdoekje om de top van de 10cc steriele flacon met de gehepariniseerde zoutoplossing (0,1 ml Heparin/9.9ml Saline) steriliseren. Vul de spuit met 0,6-0.7cc van de heparine-oplossing. Bevestig de 30G naald en katheter aan het einde van de 3-weg die direct ligt aan de overkant van de mannelijke einde. Vul de kraan, 30G naald en PE-10 buis met de heparine-oplossing. Zorg ervoor dat alle luchtbellen te halen uit het systeem. De meest effectieve manier om alle luchtbellen te verwijderen is het gebruik van de zwaartekracht. Richt de naald naar de grond terwijl ze de slang bengelen aan de stationaire. Geef de naald hub een beweging van de vingers en de belletjes zal drijven naar de top van de heparine-oplossing. Verwijder de 30G naald uit de 3-weg en verwijder de bubbels. Trekken vloeistof in de 3-weg terug in de 1cc spuit om eventuele luchtbellen die gevangen zitten in de 3-weg te verwijderen en de slang vast aan de 3-weg. Ongeveer 1cc van het mengsel moet blijven in de spuit. De muis krijgt over 0.05cc van dit mengsel (als gevolg van het doorspoelen van de katheter doorgankelijkheid te houden bij het plaatsen) gelijk aan ongeveer 1U heparine / muis. Plaats deze voltooid katheter op het steriele veld dressing met de chirurgische instrumenten. Aan set-up het linker been muizen katheter dezelfde procedure worden gevolgd als hierboven beschreven, met uitzondering van de 3-weg kraan. Het linkerbeen wordt gebruikt om het bloed af te nemen en de 3-weg kraan is niet nodig. Vul een andere steriele 1cc spuit met 0,15-0.2cc van de gehepariniseerde zoutoplossing mengsel. Sluit de 30G naald en PE-10 Tubing rechtstreeks naar de 1cc spuit. Vul deze linkerbeen katheter systeem met de oplossing. Verwijder de luchtbellen uit dit systeem, ook. Leg de katheter klaar op het steriele veld dressing met de steriele instrumenten. 2. Transducer Set-up. Sluit een steriel transducer op de digi-med BPA 400 analyzer volgens de micro-med specificaties. Bevestig een 3-weg kraan aan beide uiteinden van de transducer. Vul een 10cc spuit met Ringerlactaat (LR) en voeg het bij de 3-weg, zodat de transducer zal plat liggen op het werkblad. Plaats een 23G naald in beide uiteinden van het stuk voorgesneden presterilized 18-inch PE-50 buizen. Bevestig een uiteinde van de PE-50 slang aan op de 3-weg met de 10cc spuit bevestigd. Vul de 3-weg-en PE-50 set-up met LR. Zorg ervoor dat alle luchtbellen te halen uit het systeem zoals beschreven in de vorige paragraaf. Bevestig de 3-weg naar de transducer en vul de transducer en de 2 e 3-weg met LR. Tot slot, bevestigt u de metalen mannetje-mannetje Leur-lock kraan om de 23G naald van de PE-50 buizen voor bevestiging aan het rechterbeen murine katheter. * Het is cruciaal dat vloeibaar blijven in de transducer bij het in werking is. * Volg de kalibratie en nul procedures volgens de Micro-med protocol. 3. Chirurgische en experimentele procedures: 1. Chirurgische ingrepen. Begin met het toedienen van een intraperitoneale injectie van Pentobarbitol Natrium (Nembutol) (70mg/kg @ 01:10 verdunning). Deze procedure wordt bereikt door, enerzijds, het plukken van de muis omhoog uit zijn kooi met behulp van de basis (meest proximale einde) van zijn staart. Plaats vervolgens het dier op de top van de kooi, terwijl nog steeds met zijn staart. Pak de nek scruff van de muis met de duim en middelvinger aan beide zijden van de muis net achter de voorpoten. De wijsvinger wordt gebruikt om de huid terug te trekken op het hoofd / halsgebied in de richting van de scruff aan het hoofd te immobiliseren. Van de muis staart is vervolgens verpakt en plaats tussen de pink en de ringvinger, terwijl de ringvinger is gedrukt in de lumbale regio van de wervelkolom van de muis. De muis moet in slaap binnen 5 minuten. Nadat het dier is verdoofd plaats ze op de metalen plaat in de chirurgische rugligging. De losse lus tape techniek wordt gebruikt om de dieren te immobiliseren door taping hun uiteinden. De losse lus techniek met zich meebrengt gewoon snijden van dunne stroken tape en verpakking van de tape losjes rond elk van de voorpoten inferieur aan de poot en rond elk van de achterpoten inferieur aan de poot. De tape is dan weer vast aan zichzelf en de overgebleven tape is bevestigd aan het bestuur. Dit maakt de uiteinden van de muizen aan te nemen een meer natuurlijke anatomische positie. Van het dier buik-en liesstreek gebieden worden dan geschoren met behulp van Oster A5 klippers maat 40 mes. Een 4x4 gaas is overgoten met betadine en de chirurgische gebied is dan afgeveegd voor steriliteit. Na immobilisatie en sterilisatie, is een neus met een 1cc van isofluraan geplaatst over de neus van de muis een paar seconden voordat de eerste incisie. De neus kegel bestaat uit een 50cc conische buis gevuld met een gaasje. De helft van de bodem van de buis is uitgesneden het creëren van een ruimte voor de neus van de muis om binnen te rusten zonder contact. Een cap (bodem van een weefsel opslag container) is geplaatst op het einde van de 50 cc conische om ervoor te zorgen de isofluraan dampen niet ontsnappen. Zodra het dier ademhaling begint te vertragen, is een klein 4-5mm incisie gemaakt in de huid parallel aan de linker interne schuine spieren van de onderbuik en de linker dwarse abdominus spier. Dissectie van de femorale ader en slagader volgt. Zorg ervoor dat niet aan de omringende spieren of zenuwen raken beschadigd. Om te beginnen deze dissectie, scheid de vetweefsel van de schuine en dwarse buikspieren door grijpen het vetweefsel met de dumonts op de buik-verbinding. Trek dit weefsel uit de buurt van de spierwand. Dan, stompe ontleden langs de buikspieren pesten weg fascia en het vetweefsel met behulp van het andere paar van de dumonts. Gewoon liggen onder dit vetweefsel de femorale ader en slagader, samen met de femorale zenuw. * Zorg ervoor dat u de vastus intermedius, medialis en lateralis spier van de quadriceps femoris of de rectus femoris schade. Er is echt niet nodig om nog te pakken of aanraken van deze spieren. * NIET AANRAKEN de nervus femuralis Ontleden weg de zenuw door grijpen het vetweefsel dat ligt ernaast. Zijwaarts te trekken dit weefsel uit de ader en slagader en de zenuw zal volgen als het is ingebed in dit weefsel. Omdat de zenuw is lateraal getrokken, stompe ontleden de fascia door het plaatsen van de andere dumonts, punt naar beneden, tegen de slagader en het openen en sluiten ze. De schepen zijn zeer oppervlakkig dus zorg ervoor dat niet tegraven in de onderliggende spieren. Nadat de zenuw wordt gescheiden, gebruik dan de dumonts om de fascia die de vaten naar de spieren te scheiden. Houd de dumonts gesloten en zet de dumonts dorsaal van de schepen. Als het topje van de dumonts verschijnt aan de andere kant van de ader, open te stellen voor stompe de fascia ontleden. Houd de dumonts dorsaal van het schip en pak de eerste hechting. Zet de hechting in de dumonts en terug te trekken van de hechting door de opening tussen de schepen en de onderliggende spieren. Nogmaals, er is geen behoefte aan een omgeving spierschade. Leg een totaal van 3, 6-0 hechtingen rond de ader en slagader. Suture 1 is het meest proximaal van de buikspieren. Legt een knoop, maar laat het los en hemostat het uit. De concave rand van het hemostaat moet rusten op de buik van het dier holte. Suture 2 is de meest distale in locatie. Deze hechtingen kan worden afgebonden onmiddellijk ligeren van de schepen en hemostated, opnieuw concave kant naar beneden. De distale en proximale hechtingen worden gebruikt om de schepen strak (om bloedverlies te voorkomen) te trekken en ze lift een beetje om te helpen bij katheter inbrengen. Hechtdraad 3 is een katheter ondersteuning van hechtdraad. Plaats deze hechting tussen de distale en proximale hechtingen. Das een losse knoop die gebruikt zal worden om de katheter veilig binnen in het schip na het inbrengen. Nadat de hechtingen zijn veilig, identificatie van de slagader door de dikke vaatwand. Het is erg wit. Maak een kleine incisie aan de bovenkant van de slagader met behulp van de microscissors. Maak dit gat dicht bij de distale hechting, dus er is een ruime hoeveelheid van de slagader voor de eerste katheter inbrengen. Gebruik de dumonts om het gat te openen door het plaatsen van het ene uiteinde van de dumonts in het arteriële lumen vat en sluiten ze over de vaatwand. Zorg ervoor dat het midden hechtdraad is proximaal van de arteriële gat, zodat het kan worden gebruikt om de katheter op zijn plaats na de initiële inbrengen. Terwijl u de slagaderwand de katheter te duwen in het lumen terwijl u het schip op de katheter. Lichtjes binden in het midden te ondersteunen hechtdraad tot de katheter op zijn plaats. Laat de proximale hemostaat. Deze release zal los van de proximale hechtdraad en de heropening van de hechtdraad rond de schepen. Op dit punt moet de arteriële druk terug te duwen bloed in de katheter. Pulserende bloed moeten zichtbaar zijn in de katheter. Houd de schepen rond de katheter met een dumont en gebruik de andere om de katheter te duwen in het vat ongeveer 4-5mm. Houd het schip rond de katheter helpt bij het voorkomen scheuren van de slagader. Het uiteinde van de katheter moet gewoon rust onder de interne schuin en dwars abdominus spieren. Voor bloedstolsel preventie in de arteriële lijn, terug te trekken bloed in de katheter en duw het terug in de muis een paar keer naar gehepariniseerde vloeistof trekken. Herhaal deze procedure voor het andere been voor bilaterale arteria femoralis canulatie. Haak het dier tot aan de fysiologische parameters te controleren, dat wil zeggen de BPA-400 analyzer en spoel het arteriële lijnen. Doe 1 of 2 druppels steriele zoutoplossing in de chirurgische opening naar het omliggende weefsel vochtig te houden. Zorg ervoor dat dit gebied verzadigd Tijdens de gehele procedure te houden. Plaats een steriel veld dressing over het dier gedurende de procedure voor het behoud van steriliteit. Plaats chirurgische instrumenten in 70% alcohol en veeg ze met steriel gaasje. Doe ze in de hete kraal sterilisator voor ~ 20 seconden voor sterilisatie tussen de dieren. Verwijder de chirurgische instrumenten en spuit ze met 70% alcohol om hen te helpen af ​​te koelen. Plaats ze op het steriel gaasje. Zorg ervoor dat er geen alcohol links op de instrumenten die terug komt in de volgende dieren. 2. Hemorragische Shock. Meer dan een 15min. termijn, is ongeveer 1 / 2 van het bloed van de muis het volume teruggetrokken het bereiken van een gemiddelde arteriële druk van 28-32mm Hg. * Voor een 25-27g muis het oorspronkelijke volume van het bloed onttrokken om de gewenste druk te bereiken is ongeveer 0.6cc Deze procedure is een vaste druk methode, in tegenstelling tot een vast volume. Deze procedures kunnen echter worden gevolgd voor zowel vaste druk en vast volume bloeding. Terwijl hij voortdurend gecontroleerd, zal het dier blijven in hemorragische shock voor 1,5-3 uur. Als het dier probeert te compenseren en de gemiddelde arteriële druk weer begint te lichte stijging (zichtbaar via de BP / HV analyzer) trekken meer bloed naar de gewenste druk te bereiken. Hoewel de voedingssupplementen (0.05cc Nembutol IP) zijn zelden nodig zijn tijdens het HS procedure zal dierlijke ademhaling, snorhaar beweging, reflex tests, en de digitale BP / HR lezen te helpen bepalen wanneer een dier heeft behoefte aan een aanvulling van de anesthesie. Dieren worden gehouden onder lamp en op een circulerende verwarming pad om te helpen handhaven van een temperatuur van 36-37 ° C door middel van de hemorragische Shock procedure. Temperatuur wordt gecontroleerd via een rectale probe. 3. Reanimatie. Na de schok tijd elapses, is het dier gereanimeerd (R) met behulp van lactaat Ringers (LR) oplossing op een vast volume van 3x per dier vergoten bloed volume. De LR volume is toegediend via een spuitpomp set af te zien, met een constante snelheid, het volume over een 15min. interval. Verwijder de katheter en ligeren van de vaartuigen die met de drie hechtingen. Trek de katheter net voorbij de proximale hechtdraad en bind deze hechtdraad volledig uit te schakelen. Dat wordt voorkomen dat bloedverlies. Collateral stroom voorkomt dat de achterste ledematen van ischemische worden. 4. Bericht Rescitation. Na R beide achterste ledematen openingen zijn genaaid met behulp van steriele 4-0 PDSII hechtdraad. De losse lus tape is verwijderd en de dieren worden geplaatst in een schone kooi, die is gehouden op een circulerende verwarming pad voor een paar uur na herstel. Pijnstillende moet worden toegediend als de dieren beginnen te ontwaken uit de narcose goed beheer pijn. Buprenorfine (0.1mg/kg) wordt subcutaan geïnjecteerd als de dieren beginnen fysieke activiteit, maar niet eerder, om niet te ademhalingsfunctie compromis. Gebruik van agressieve post-operatieve monitoring gerechtvaardigd wordt door IACUC goedgekeurde protocol, dier gedrag en de huidige medische toestand wordt aanbevolen. 4. Geheimen voor succes: <ol><li> Wanneer het ontleden van de schepen, Zorg dat u de femorale zenuw TOUCH </li><li> Zorg ervoor dat u de rectus femoris, rectus lateralis, en de vastus medialis spieren beschadigen. Er is echt niet nodig om nog te pakken of aanraken van deze spieren. </li><li> Maak niet de hoek van de schuine kant van de katheter te scherpe, omdat dit zal leiden tot de katheter het verlaten van de lumen en ongecontroleerde bloeden </li><li> Zorg ervoor dat de extra inspanning te blijven zo steriel mogelijk te maken. </li><li> Zorg ervoor dat er geen luchtbellen in een van de katheter of transducer systemen. </li><li> Zorg ervoor dat LR vocht hebben transducer, terwijl deze in werking is. Een droge run kan schade aan de BP-systeem. </li><li> Maak de arteriële gat klein. </li><li> Maak de arteriële gat dicht bij de distale hechtdraad. </li><li> Push katheter tegelijkertijd trekken vat, over het voor katheter inbrengen om te voorkomen dat het rippen van de slagader. </li><li> Zorg ervoor dat de chirurgische openingen te houden in de benen verzadigd met steriele zoutoplossing om ongecontroleerde weefselbeschadiging of het vochtverlies te voorkomen. </li><li> Geduld en finesse zijn van cruciaal belang. </li><li> Let goed op de fysiologie van het dier gedurende het experiment. </li></ol> 5. Post-operatieve Betreft: <ol><li> Controleer op ischemie in de benen. Hoewel onderpand stroom zou moeten voorkomen. </li><li> Dier zou kunnen hebben problemen met het gebruik achterste ledematen als gevolg van chirurgische manipulatie en bijbehorende ontsteking. Passende wijze te beheren pijn. </li><li> Het aanraken en vervolgens beschadiging van de zenuw kan leiden tot het onvermogen van het dier te mobiliseren. </li></ol>

<ol><li>Baker, C. C., Oppenheimer, L., Stephens, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+of+trauma+deaths%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Surg%22%5BJournal%5D)">Epidemiology of trauma deaths.</a> Am J Surg. 140, 44-50 (1980).</li>
<li>Hierholzer, C., Billiar, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+mechanisms+in+the+early+phase+of+hemorrhagic+shock%5BTitle%5D)+AND+%22Langenbeck%27s+Arch+Surg%22%5BJournal%5D)">Molecular mechanisms in the early phase of hemorrhagic shock.</a> Langenbeck's Arch Surg. 386, 302-308 (2001).</li>
<li>Dutton, R. P., Stansbury, L. G., Leone, S., Kramer, E., Hess, J. R., Scalea, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trauma+Mortality+in+Mature+Trauma+Systems%3A+Are+We+Doing+Better%3F+An+Analysis+of+Trauma+Mortality+Patterns%5BTitle%5D)+AND+%22J+Trauma%22%5BJournal%5D)">Trauma Mortality in Mature Trauma Systems: Are We Doing Better? An Analysis of Trauma Mortality Patterns.</a> J Trauma. , Forthcoming (2010).</li>
<li>Frink, M., van Griensven, M., Kobbe, P., Brin, T., Zeckey, C., Vaske, B., Krettek, C., Hildebrand, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-+6+predicts+organ+dysfunction+and+mortality+in+patients+with+multiple+injuries%5BTitle%5D)+AND+%22Scand+J+Trauma+Resusc+Emerg+Med%22%5BJournal%5D)">IL- 6 predicts organ dysfunction and mortality in patients with multiple injuries.</a> Scand J Trauma Resusc Emerg Med. 17, 49-49 (2009).</li>
<li>DeCamp, M. M., Demling, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Posttraumatic+multisystem+organ+failure%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Posttraumatic multisystem organ failure.</a> JAMA. 260, 530-534 (1988).</li>
<li>Faist, E., Baue, A. E., Dittmer, H., Heberer, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+Organ+Failure+in+Polytrauma+Patients%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Trauma%22%5BJournal%5D)">Multiple Organ Failure in Polytrauma Patients.</a> Journal of Trauma. 23, 775-787 (1983).</li>
<li>Kalff, J. C., Hierholzer, C., Tsukada, K., Billiar, T. R., Bauer, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemorrhagic+shock+results+in+intestinal+muscularis+intercellular+adhesion+molecule+%28ICAM-1%29+expression%2C+neutrophil+infiltration%2C+and+smooth+muscle+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Orthop+Trauma+Surg%22%5BJournal%5D)">Hemorrhagic shock results in intestinal muscularis intercellular adhesion molecule (ICAM-1) expression, neutrophil infiltration, and smooth muscle dysfunction.</a> Arch Orthop Trauma Surg. 119, 89-93 (1999).</li>
<li>Kobbe, P., Stoffels, B., Schmidt, J., Tsukamoto, T., Gutkin, D., Bauer, A., Pape, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-10+deficiency+augments+acute+lung+but+not+liver+injury+in+hemorrhagic+shock%5BTitle%5D)+AND+%22Cytokine%22%5BJournal%5D)">IL-10 deficiency augments acute lung but not liver injury in hemorrhagic shock.</a> Cytokine. 45, 26-31 (2009).</li>
<li>Ulloa, L., Tracey, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+%27cytokine+profile%27+a+code+for+sepsis%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Mol.+Med%22%5BJournal%5D)">The 'cytokine profile' a code for sepsis.</a> Trends in Mol. Med. 11, 56-63 (2005).</li>
<li>Darwiche, S., Kobbe, P., Pfeifer, R., Kohut, L., Pape, H. C., Billiar, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pseudofracture%3A+an+acute+peripheral+tissue+trauma+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Pseudofracture: an acute peripheral tissue trauma model.</a> J Vis Exp. , (2010).</li>
<li>Tsukamoto, T., Pape, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+trauma+research%3A+what+are+the+options%5BTitle%5D)+AND+%22Shock%22%5BJournal%5D)">Animal models for trauma research: what are the options.</a> Shock. 31, 3-10 (2009).</li>
<li>Moochhala, S., Wu, J., Lu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemorrhagic+shock%3A+an+overview+of+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Biosci%22%5BJournal%5D)">Hemorrhagic shock: an overview of animal models.</a> Front Biosci. 14, 4631-469 (2009).</li>
<li>Chaudry, I. H., Ayala, A., Ertel, W., Stephan, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemorrhage+and+resuscitation%3A+immunological+aspects%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Regulatory+Integrative+Comp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Hemorrhage and resuscitation: immunological aspects.</a> Am J Physiol Regulatory Integrative Comp Physiol. 259, 663-678 (1990).</li>
<li>Lagoa, C. E., Bartels, J., Baratt, A., Tseng, G., Clermont, G., Fink, M. P., Billiar, T. R., Vodovotz, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+initial+trauma+in+the+host%27s+response+to+injury+and+hemorrhage%3A+insights+from+a+correlation+of+mathematical+simulations+and+hepatic+transcriptomic+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Shock%22%5BJournal%5D)">The role of initial trauma in the host's response to injury and hemorrhage: insights from a correlation of mathematical simulations and hepatic transcriptomic analysis.</a> Shock. 26, 592-600 (2006).</li>
<li>Prince, J. M., Levy, R. M., Yang, R., Mollen, K. P., Fink, M. P., Vodovotz, Y., Billiar, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toll-like+receptor-4+signaling+mediates+hepatic+injury+and+systemic+inflammation+in+hemorrhagic+shock%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Surg%22%5BJournal%5D)">Toll-like receptor-4 signaling mediates hepatic injury and systemic inflammation in hemorrhagic shock.</a> J Am Coll Surg. 202, 407-417 (2006).</li>
<li>Meng, Z. H., Dyer, K., Billiar, T. R., Tweardy, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Essential+role+for+IL-6+in+postresuscitation+inflammation+in+hemorrhagic+shock%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">Essential role for IL-6 in postresuscitation inflammation in hemorrhagic shock.</a> Am J Physiol Cell Physiol. 280, C343-C351 (2001).</li>
<li>McCloskey, C. A., Kameneva, M. V., Uryash, A., Gallo, D. J., Billiar, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+Hypoxia+activates+JNK+in+the+liver+during+hemorrhagic+shock%5BTitle%5D)+AND+%22Shock%22%5BJournal%5D)">Tissue Hypoxia activates JNK in the liver during hemorrhagic shock.</a> Shock. 22, 380-386 (2004).</li>
<li>Li, Y., Xiang, M., Yuan, Y., Xiao, G., Zhang, J., Jiang, Y., Vodovotz, Y., Billiar, T. R., Wilson, M. A., Fan, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemorrhagic+shock+augments+lung+endothelial+cell+activation%3A+role+of+temporal+alterations+of+TLR4+and+TLR2%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Phsyiol+Regul+Integr+Comp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Hemorrhagic shock augments lung endothelial cell activation: role of temporal alterations of TLR4 and TLR2.</a> Am J Phsyiol Regul Integr Comp Physiol. 297, 1670-1680 (2009).</li>
<li>Xu, Y. X., Ayala, A., Chaudry, I. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prolonged+immunodepression+after+trauma+and+hemorrhagic+shock%5BTitle%5D)+AND+%22J+Trauma%22%5BJournal%5D)">Prolonged immunodepression after trauma and hemorrhagic shock.</a> J Trauma. 44, 335-341 (1998).</li>
<li>Abraham, E., Chang, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Haemorrhage-induced+alterations+in+function+and+cytokine+production+of+T+cells+and+T+cell+subpopulations%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Exp.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Haemorrhage-induced alterations in function and cytokine production of T cells and T cell subpopulations.</a> Clin. Exp. Immunol. 90, 497-502 (1992).</li>
<li>Peitzman, A. B., Billiar, T. R., Harbrecht, B. G., Kelly, E., Udekwu, A. O., Simmons, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemorrhagic+Shock%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Probl+Surg%22%5BJournal%5D)">Hemorrhagic Shock.</a> Curr Probl Surg. 32, 925-1002 (1995).</li>
<li>Angele, M. K., Knoferl, M. W., Schwacha, M. G., Ayala, A., Cioffi, W. G., Bland, K. I., Chaudry, I. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+steriods+regulate+pro-+and+anti-+inflammatory+cytokine+release+by+macrophages+after+trauma-hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Sex steriods regulate pro- and anti- inflammatory cytokine release by macrophages after trauma-hemorrhage.</a> Am. J. Physiol. 277, C35-C42 (1999).</li>
<li>Takashi, K., Hubbard, W. J., Choudhry, M. A., Schwacha, M. G., Bland, K. I., Chaudry, I. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trauam-+Hemorrhage+induces+depressed+splenic+dendritic+cell+function+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">Trauam- Hemorrhage induces depressed splenic dendritic cell function in mice.</a> J of Immunology. 177, 4514-4520 (2006).</li>
<li>Lenz, A., Franklin, G. A., Cheadle, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+inflammation+after+trauma%5BTitle%5D)+AND+%22Injury%2C+Int.+J.+Care+Injured%22%5BJournal%5D)">Systemic inflammation after trauma.</a> Injury, Int. J. Care Injured. 38, 1336-1345 (2007).</li>
<li>Frei, R., Steinle, J., Birchler, T., Loeliger, S., Roduit, C., Steinhoff, D., Seibl, R., Buchner, K., Seger, R., Reith, W., Lauener, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MHC+class+II+molecules+enhance+Toll-like+receptor+mediated+innate+immune+responses%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">MHC class II molecules enhance Toll-like receptor mediated innate immune responses.</a> PloS One. 5, 8808-8808 (2010).</li>
<li>Matsutani, T., Anantha Samy, T. S., Kang, S. C., Bland, K. I., Chaudry, I. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+genetic+background+influences+severity+of+immune+responses+following+trauma-hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Cytokine%22%5BJournal%5D)">Mouse genetic background influences severity of immune responses following trauma-hemorrhage.</a> Cytokine. 30, 168-176 (2004).</li>
<li>Prince, J. M., Levy, R. M., Bartels, J., Baratt, A., Kane, J. M., Lagoa, C., Rubin, J., Day, J., Wei, J., Fink, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+silico+and+in+vivo+approach+to+elucidate+the+inflammatory+complexity+of+CD14-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Med%22%5BJournal%5D)">In silico and in vivo approach to elucidate the inflammatory complexity of CD14-deficient mice.</a> Mol Med. 12, 88-96 (2006).</li>
<li>Kobbe, P., Stoffels, B., Schmidt, J., Tsukamoto, T., Gutkin, D. W., Bauer, A. J., Pape, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-10+deficiency+augments+acute+lung+but+not+liver+injury+in+hemorrhagic+shock%5BTitle%5D)+AND+%22Cytokine%22%5BJournal%5D)">IL-10 deficiency augments acute lung but not liver injury in hemorrhagic shock.</a> Cytokine. 45, 26-31 (2009).</li>
<li>Prince, J. M., Ming, M. J., Levy, R. M., Liu, S., Pinsky, D. J., Vodovotz, Y., Billiar, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+Growth+Response+1+mediates+the+systemic+and+hepatic+inflammatory+response+initiated+by+hemorrhagic+shock%5BTitle%5D)+AND+%22Shock%22%5BJournal%5D)">Early Growth Response 1 mediates the systemic and hepatic inflammatory response initiated by hemorrhagic shock.</a> Shock. 27, 157-164 (2007).</li>
<li>Matsutani, T., Samy, A. nantha, Kang, T. S., Bland, S. -C., Chaudry, K. I., H, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+genetic+background+influences+severity+of+immune+responses+following+trauma-hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Cytokine%22%5BJournal%5D)">Mouse genetic background influences severity of immune responses following trauma-hemorrhage.</a> Cytokine. 30, 168-176 (2005).</li>
<li>Rushing, G. D., Britt, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reperfusion+injury+after+hemorrhage%3A+a+collective+review%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Reperfusion injury after hemorrhage: a collective review.</a> Ann Surg. 247, 929-937 (2008).</li>
<li>Makley, A. T., Goodman, M. D., Friend, L. W., Bailey, S. R., Lentsch, A. B., Pritts, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Damage+control+resuscitation+with+fresh+blood+products+attenuates+the+systemic+inflammatory+response+following+hemorrhagic+shock%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Damage control resuscitation with fresh blood products attenuates the systemic inflammatory response following hemorrhagic shock.</a> J Surg Res. 158, 423-423 (2010).</li>
<li>Stansbury, L. G., Dutton, R. P., Stein, D. M., Bochicchio, G. V., Scalea, T. M., Hess, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controversy+in+trauma+resuscitation%3A+do+ratios+of+plasma+to+red+blood+cells+matter%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Transfus+Med+Rev%22%5BJournal%5D)">Controversy in trauma resuscitation: do ratios of plasma to red blood cells matter?</a> Transfus Med Rev. 23, 255-265 (2009).</li>
<li>Gao, J., Zhao, W. X., Xue, F. S., Zhou, L. J., Yu, Y. H., Zhou, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+different+resuscitation+fluids+on+acute+lung+injury+in+a+rat+model+of+uncontrolled+hemorrhagic+shock+and+infection%5BTitle%5D)+AND+%22J+Trauma%22%5BJournal%5D)">Effects of different resuscitation fluids on acute lung injury in a rat model of uncontrolled hemorrhagic shock and infection.</a> J Trauma. 6, 1213-1219 (2009).</li>
<li>Maier, S., Holz-Holzl, C., Pajk, W., Ulmer, H., Hengl, C., Dunser, M., Haas, T., Velik-Salchner, C., Fries, D., Greiner, A., Hasibeder, W., Knotzer, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microcirculatory+parameters+after+isotonic+and+hypertonic+colloidal+fluid+resuscitation+in+acute+hemorrhagic+shock%5BTitle%5D)+AND+%22J+Trauma%22%5BJournal%5D)">Microcirculatory parameters after isotonic and hypertonic colloidal fluid resuscitation in acute hemorrhagic shock.</a> J Trauma. 66, 33-45 (2009).</li>
<li>Stahel, P. F., Smith, W. R., Moore, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+trends+in+resuscitation+strategy+for+the+multiply+injured+patient%5BTitle%5D)+AND+%22Injury%22%5BJournal%5D)">Current trends in resuscitation strategy for the multiply injured patient.</a> Injury. 40, 27-35 (2009).</li>
<li>Dar, D. E., Soustiel, J. F., Zaaroor, M., Em, B., L, A., Shapira, Y., Semenikhina, L., Solopov, A., Krausz, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Moderate+lactated+ringer%27s+resuscitation+yields+best+neurological+outcome+in+controlled+hemorrhagic+shock+combined+with+brain+injury+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Shock%22%5BJournal%5D)">Moderate lactated ringer's resuscitation yields best neurological outcome in controlled hemorrhagic shock combined with brain injury in rats.</a> Shock. , Forthcoming (2009).</li>
<li>Moon, P. F., Hollyfield-Gilbert, M. A., Myers, T. L., Uchida, T., Kramer, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluid+compartment+in+hemorrhaged+rats+after+hyperosmotic+crystalloid+and+hyperoncotic+crystalloid+resuscitation%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Fluid compartment in hemorrhaged rats after hyperosmotic crystalloid and hyperoncotic crystalloid resuscitation.</a> Am J Physiol. 270, F1-F8 (1996).</li>
<li>Perel, P., Roberts, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Colloids+vs+crystalloids+for+fluid+resuscitation+in+critically+ill+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Cochrane+Database+System+Rev%22%5BJournal%5D)">Colloids vs crystalloids for fluid resuscitation in critically ill patients.</a> Cochrane Database System Rev. 4, CD000567-CD000567 (2007).</li>
</ol>

Experimenten op dieren zijn toezicht en uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijnen en voorschriften uiteengezet door de Institutional Animal Care en gebruik Comite dat is ingesteld en het onderzoek uit te voeren en Compliance Office van de Universiteit van Pittsburgh, een volledig geaccrediteerde AALAS / AALAC instelling. Dierlijke bronnen zijn onder andere Jackson Laboratories en Charles Rivers Laboratories. Alle dieren ondergaan uitgebreide gezondheid zekerheid door elke leverancier en de Universiteit van interne diergezondheid Pittsburgh monitoringprogramma&#39;s. Dit onderzoek wordt uitgevoerd in overeenstemming met de Amerikaanse regering opdrachtgevers voor het gebruik van gewervelde dieren. Het programma is geregistreerd bij de USDA, en heeft een brief van zekerheid met de Public Health Service Bureau van Laboratory Animal Welfare.

<table border="1"><tbody><tr><th> Instrument </th><th> Fabrikant </th><th> Catalogus Nummer </th></tr><tr><td> Dumonts (SS/45 ° hoek 0.2x0.12mm-tip, 13.5cm lengte) </td><td> Fijn Science Tools </td><td> 11203-25 </td></tr><tr><td> Chirurgische schaar (straight-12cm) </td><td> Fijn Science Tools </td><td> 14068-12 </td></tr><tr><td> Arterieklem (gebogen-12.5cm) </td><td> Fijn Science Tools </td><td> 13009-12 </td></tr><tr><td> Microscissors (voorjaar schaar-straight-8cm) </td><td> Fijn Science Tools </td><td> 15000-00 </td></tr><tr><td> Tang (0,8 mm-tip, gebogen-10cm) </td><td> Fijn Science Tools </td><td> 11050-10 </td></tr><tr><td> hechtdraad reel 6-0 </td><td> Fijn Science Tools </td><td> 18020-60 </td></tr><tr><td> hechtdraad 4-0 PDSII </td><td> Penn Vet </td><td> ETHZ304H </td></tr><tr><td> gaas 4x4 </td><td> kunnen worden aangeschaft via een wereldwijde leverancier van </td><td></td></tr><tr><td> katoen-tip applicator </td><td> kunnen worden aangeschaft via een wereldwijde leverancier van </td><td></td></tr><tr><td> 30G naald </td><td> kunnen worden aangeschaft via een wereldwijde leverancier van </td><td></td></tr><tr><td> 23G naald </td><td> kunnen worden aangeschaft via een wereldwijde leverancier van </td><td></td></tr><tr><td> 3CC spuit </td><td> kunnen worden aangeschaft via een wereldwijde leverancier van </td><td></td></tr><tr><td> 5cc spuit </td><td> kunnen worden aangeschaft via een wereldwijde leverancier van </td><td></td></tr><tr><td> 10cc spuit </td><td> kunnen worden aangeschaft via een wereldwijde leverancier van </td><td></td></tr><tr><td> 50cc conische buis </td><td> kunnen worden aangeschaft via een wereldwijde leverancier van </td><td></td></tr><tr><td> 1cc spuit w / 25G naald </td><td> Fisher Scientific </td><td> 14-826-88 </td></tr><tr><td> Polyethyleen buis 10 100 `(PE-10) </td><td> Fisher Scientific </td><td> 14 tot 170-12P </td></tr><tr><td> Polyethyleen buis 50 100 `(PE-50) </td><td> Fisher Scientific </td><td> 14 tot 170-12B </td></tr><tr><td> 3-weg kraan </td><td> Fisher Scientific </td><td> NC9779127 </td></tr><tr><td> chirurgische blauwe pad </td><td> Fisher Scientific </td><td> 50-7105 </td></tr><tr><td> Steriel veld dressings </td><td> Fisher Scientific </td><td> NC9517505 </td></tr><tr><td> tape rollen 1 &quot; </td><td> Corporate Express </td><td> MMM26001 </td></tr><tr><td> rechte kant brede mond potten (gebruikt als cap voor de neus) </td><td> VWR </td><td> 159000-058 </td></tr><tr><td> roestvrij stalen lade 8 &quot;x 11&quot; </td><td> VWR </td><td> 62687-049 </td></tr><tr><td> mannetje-mannetje Leur lock 3-weg </td><td> VWR </td><td> 20068-909 </td></tr><tr><td> sterilisatie zakje 3 &quot;x8&quot; </td><td> VWR </td><td> 24008 </td></tr><tr><td> sterilisatie zakje 5 &quot;x10&quot; </td><td> VWR </td><td> 24010 </td></tr><tr><td> Wild M650 microscoop w / boom stand </td><td> Leica </td><td></td></tr><tr><td> Leica D IC digitale camera / live-beelden </td><td> Leica </td><td></td></tr><tr><td> Digi-Med BPA-400 analyzer en systems integrator </td><td> Micro-Med </td><td> SYS-400 </td></tr><tr><td> TXD-310 (Digi-Med Transducer) </td><td> Micro-Med </td><td> TXD-300 </td></tr><tr><td> Computer </td><td> Dell </td><td></td></tr><tr><td> Hete kraal instrument sterilisator </td><td> VWR </td><td> 18000-45 </td></tr><tr><td> Oster A5 clippers w. maat 40 blade </td><td> VWR </td><td> 10749-020 </td></tr><tr><td> circulerende warmingscapaciteitg pad 18x26 </td><td> Harvard </td><td> py872-5272 </td></tr><tr><td> rectale thermometer </td><td> Kent Wetenschappelijke </td><td> RET-3 </td></tr></tbody></table><table border="1"><tbody><tr><th> Reagens </th><th> Concentratie </th><th> Fabrikant </th><th> Catalogus Nummer </th></tr><tr><td> Pentobarbital natrium (Nembutol Natrium Solution) </td><td> 70mg/kg </td><td> Ovatie </td><td></td></tr><tr><td> Buprenorfine HCl </td><td> 0.1mg/kg </td><td> Bedford Laboratories </td><td></td></tr><tr><td> Lactaat Ringers Injectie 250cc IV tas </td><td> Baxter </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Aerrane (Isofluraan) </td><td> 99,9% </td><td> NLS Animal Health </td><td> 105996 </td></tr><tr><td> Heparine Natrium </td><td> 1000U </td><td> Abraxis </td><td></td></tr><tr><td> Bacteriostatisch natriumchloride </td><td> 0,9% </td><td> Hospira </td><td></td></tr><tr><td> Ethyl Alcohol </td><td> 70% </td><td> Farmaco-AAPER </td><td></td></tr><tr><td> Triadine povidon-jood (Betadine) </td><td></td><td> Triad disposables </td><td></td></tr></tbody></table>

vaste volume of vaste druk: een muizenmodel van hemorragische shock

Fixed Volume or Fixed Pressure: A Murine Model of Hemorrhagic Shock

Het is algemeen bekend dat ernstig bloedverlies en traumatisch letsel kan leiden tot een cascade van negatieve signalen gebeurtenissen wat vaak resulteert in sterfte. 1, 2, 3, 4, 5 Deze signalering gebeurtenissen kunnen ook leiden tot sepsis en / of meerdere orgaandisfunctie (MOD ). 6, 7, 8, 9 Het is van cruciaal vervolgens naar de oorzaken van onderdrukte immuunsysteem en schadelijk signaaltransductiecascades te onderzoeken om meer effectieve manieren om patiënten die last hebben van traumatische verwondingen helpen ontwikkelen. 10 Deze vaste druk Hemorragische Shock (HS) procedure, hoewel technisch uitdagende, is een uitstekende bron voor onderzoek naar deze pathofysiologische omstandigheden. 11, 12, 13 Advances in de beoordeling van biologische systemen, dat wil zeggen Systems Biology hebben de wetenschappelijke gemeenschap in staat om verder te begrijpen complexe fysiologische netwerken en mobiele communicatie patronen. 14 hemorragische Shock heeft bewezen een belangrijk instrument voor de onthulling van deze cellulaire communicatie patronen als deze betrekking hebben op het immuunsysteem te zijn. 15, 16, 17, 18 Deze procedure kan worden beheerst! Deze procedure kan ook worden gebruikt als een vast volume of vaste druk aanpak. We paste deze techniek in het muismodel om onderzoek te versterken in aangeboren en adaptieve immuunsysteem. 19, 20, 21 Door hun kleine formaat GS bij muizen presenteert unieke uitdagingen. Echter te wijten aan de vele beschikbare muizenstammen, deze soort is een ongeëvenaarde bron voor de studie van de biologische reacties. De HS-model is een belangrijk model voor het bestuderen van cellulaire communicatie patronen en de reacties van systemen zoals hormonale en ontstekingsmediatoren systemen, en gevaar signalen, dat wil zeggen vochtige en PAMP opregulatie als het lokt verschillende reacties die verschillen van andere vormen van shock. 22, 23 , 24, 25 De ontwikkeling van transgene muizen-stammen en de inductie van biologische middelen om specifieke signalering remmen gepresenteerd waardevolle kansen om verder te ontrafelen ons begrip van de op en neer regulering van de signaaltransductie na ernstig bloedverlies, dat wil zeggen HS en trauma 26, 27 , 28, 29, 30. Er zijn tal van reanimatie methoden (R) in samenwerking met HS en trauma. 31, 32, 33, 34 een vast volume reanimatie methode van uitsluitend Ringerlactaat (LR), gelijk aan driemaal het vergoten bloed volume, wordt in dit model de endogene mechanismen zoals remote orgaan letsel en systemische inflammatie te bestuderen. 35, 36, 38 Deze methode van reanimatie is bewezen effectief te zijn bij de evaluatie van de effecten van GS en trauma 38, 39.

Het Hemorragische Shock model is een betrouwbare en reproduceerbare bron vergemakkelijken van de identificatie en het begrip van signaalcascades geassocieerd met ontsteking en eindorgaanschade na een trauma. Dit artikel geeft een stap-voor-stap beschrijving van chirurgische en mechanische aspecten die samenhangen met de hemorragische Shock experimentele procedure in muizen.

Vaste Volume of vaste druk: een muizenmodel van hemorragische shock

Het is algemeen bekend dat ernstig bloedverlies en traumatisch letsel kunnen leiden tot een cascade van nadelige signaleringsgebeurtenissen die vaak resulteren in mortaliteit. 1, ...

Om de immunologische responsen op hypovolemische shock te karakteriseren, wordt een chirurgische procedure uitgevoerd waarbij de vaten van een muis worden gedisseceerd en gecatheteriseerd. Terwijl de fysiologie van het dier wordt gemonitord via digitale registratie en fysieke observatie, wordt hemorragische shock geïnduceerd om een traumatische ervaring na geïnduceerde shock na te bootsen. De muis wordt gereanimeerd, de katheter wordt verwijderd en het dier krijgt de gelegenheid om te herstellen.De muis kan vervolgens worden bestudeerd om veranderingen in orgaanfunctie, cellulaire communicatiepatronen en genetische expressie te beoordelen via een reeks technieken zoals flowcytometrie, hematologie, immunoblots, immunohistochemie of gene chip microarray-analyse. Het belangrijkste voordeel van deze techniek ten opzichte van bestaande methoden is dat dit model van hemorragische shock met een vast volume of een vaste druk de onderzoeker de mogelijkheid biedt om de graad van shock te beheersen, terwijl fysiologische fluctuaties continu worden gemonitord en nauwkeurig worden geregistreerd. Deze specifieke methode van hemorragische shock vergroot het vermogen van de onderzoeker om de immunologische functie te bestuderen en te begrijpen ter voorbereiding op de operatie.Zorg ervoor dat de volgende steriele apparatuur en benodigdheden aanwezig zijn. Zes nul-hechtingen, katoenen wattenstaafjes, gaasjes, drieweg stopkranen voor transducers, stukken PE 50-slang van 18 inch en stukken PE 10-slang van vijf inch. De benodigde chirurgische instrumenten zijn drieweg stopkranen, een spuit van 1 cc, een spuit van 10 cc, een naald van 23 gauge, een naald van 30,5 gauge, microschaartjes, fijne pincetten, een chirurgisch pakket, pincetten, hemostaten en chirurgische scharen.Aanvullende benodigdheden zijn Lactated Ringer-oplossing en alcoholdoekjes. Een metalen plaat, een steriel veld, steriele handschoenen, Betadine, steriele zoutoplossing, gehepariniseerde zoutoplossing en anesthesie. Richt op de dag van de operatie, met steriele handschoenen aan, de catheter in het rechterbeen in voor het meten van de bloeddruk.Pak het midden van een vijf inch stuk steriele PE 10-slang met beide handen vast en rek deze ongeveer één inch uit om de inbreng van de katheter te vergemakkelijken. Knip de slang met de steriele schaar doormidden, waarbij het uitgerekte uiteinde schuin wordt afgesneden. Steek vervolgens een naald van 30 gauge in het stompe uiteinde van de niet-uitgerekte PE 10-slang.Steriliseer met een alcoholdoekje de bovenkant van een steriel flacon van 10 cc met de hepariniseerde zoutoplossing. Vul een spuit van één cc met 0,6 tot 0,7 kubieke centimeter van de heparineoplossing. Bevestig een naald van 30 gauge en een katheter aan het uiteinde van een driewegkraan, direct tegenover de mannelijke aansluiting.Vul de 30 gauge naald van de stopkraan en de PE-slang met de heparine-oplossing, waarbij u er zeker van bent dat er geen luchtbellen aanwezig zijn. Verwijder luchtbellen door te tikken, verwijder vervolgens de 30 gauge naald uit de driewegkraan en trek vloeistof in de driewegkraan terug in de 1 cc spuit om eventuele bellen die in de driewegkraan vastzitten te verwijderen, en bevestig daarna de naald met de aangesloten slang opnieuw. Er moet ongeveer 0,1 kubieke centimeter van het mengsel in de spuit achterblijven.Om de mirroring-katheter voor het linkerbeen te installeren, volgt u de zojuist beschreven procedure, waarbij u de driewegkraan weglaat. Veeg eerst de zak Ringerlactaat af met alcohol. Sluit vervolgens een steriele transducer aan op een bloeddruk- en hartslagmeter volgens de specificaties van micro me.Bevestig vervolgens een driewegkraan aan beide uiteinden van de transducer en leg deze plat op de werkbank. Vul een spuit van 10 cc met lactaat-Ringer-oplossing en bevestig deze aan de driewegkraan. Steek een naald van 23 gauge in beide uiteinden van een steriel stuk PE 50-slang van 18 inch.Bevestig één uiteinde van de PE-slang aan de driewegkraan waaraan de spuit van 10 cc is bevestigd. Vul vervolgens de driewegkraan en de PE 50-opstelling met lactaatringeroplossing. Zorg ervoor dat alle luchtbellen worden verwijderd, zoals eerder beschreven.Bevestig vervolgens de driewegkraan opnieuw aan de transducer en vul deze. Doe hetzelfde met een tweede driewegkraan met Ringerlactaat. Bevestig ten slotte de metalen mannelijke luer-lock stopkraan aan de 23 gauge naald van de PE 50 slang voor bevestiging aan de spiegelkatheter in het rechterbeen.De instrumenten zijn nu gereed voor gebruik in de chirurgische en experimentele procedures om de vaten van de muis te dissekeren en te catheteriseren ter voorbereiding op de inductie van shock. Begin met het plaatsen van een met natrium-pentobarbital geanestheseerde muis op de metalen chirurgische plaat. Immobiliseer het dier in rugligging met behulp van een losse lus-tapetechniek, waarbij dunne stroken tape losjes rond elke ledemaat onder de poot worden gewikkeld en met osteo a five clippers worden vastgeplakt op de plaat. Scheer de abdominale en inguinale regio's van de dieren met een scheermes met een blad van maat 40.Veeg vervolgens het gebied met gaas af met Betadine en alcohol om het te steriliseren. Plaats een neuskegel met één kubieke centimeter fluoruteen over de neus van de muis. Zodra de ademhaling van het dier begint te vertragen, dient de diepte van de anesthesie te worden getest met de ledemaatstrekkings-terugtrekkingsreflex.Plaats gedurende de hele procedure een steriel velddressing over het dier om de steriliteit te waarborgen. Maak vervolgens een kleine incisie van vier tot vijf millimeter in de huid, parallel aan de linker musculus obliquus internus abdominis en de linker musculus transversus abdominis. Let er hierbij op dat de omliggende spieren niet worden beschadigd en dat er geen zenuwen worden geraakt.Gebruik een dumont-pincet om het weefsel bij de abdominale verbinding vast te pakken en scheid het vetweefsel van de oblique en transversus abdominalis spieren. Gebruik met het andere paar Als-pincetten een botte dissectie langs de abdominale spieren om fascia en vetweefsel weg te pellen. Vlak onder dit vetweefsel, net als de vena femoralis en arteria femoralis, bevindt zich de nervus femoralis; dissekeer de nervus femoralis door het vetweefsel dat ernaast ligt vast te pakken zonder de zenuw zelf aan te raken.Trek dit weefsel zijwaarts weg van de ader en slagader. De zenuw die in dit weefsel is ingebed, zal volgen wanneer de zenuw zijwaarts wordt getrokken. Plaats de andere Dumont-pincetpunt tegen de slagader en open en sluit deze.Voer een botte dissectie van de fascia uit. De vaten liggen zeer oppervlakkig, dus zorg ervoor dat u niet in de onderliggende spieren graaft. Nadat de zenuw is gescheiden, houdt u de Dumont gesloten en schuift u deze dorsaal van de vaten.Zodra de punt van de dumont aan de andere kant van de ader verschijnt, spreid deze dan om de fascia stomp te dissekeren. Houd de dumont dorsaal van het vat en pak de eerste hechting vast. Trek de hechting vervolgens terug door de opening die is gemaakt tussen de vaten en de onderliggende spieren.Plaats in totaal 3 6 0 hechtingen rondom de hechting van de ader en slagader. Plaats één hechting het meest proximaal ten opzichte van de knoop van de buikspier, maar laat deze los en klem deze vast met een hemostaat. De concave zijde van de hemostaat moet op de buikholte van het dier rusten.Hechting twee bevindt zich het meest distaal. Knoop deze hechting onmiddellijk af om de vaten te ligeren en klem deze vast met een hemostat, met de concave zijde naar beneden; de distale en proximale hechtingen worden gebruikt om de vaten opzij te trekken om bloedverlies te voorkomen en om ze iets op te tillen om de catheterinsertie te vergemakkelijken. Hechting drie moet worden geplaatst tussen de distale en proximale hechtingen.Knoop voor de ondersteuning van de katheter een losse knoop die gebruikt zal worden om de katheter na inbreng in het vat te fixeren. Zodra de hechtingen stevig vastzitten, kan de arterie worden geïdentificeerd aan de dikke vaatwand en de witte kleur. Maak met de microschaar een kleine incisie aan de bovenzijde van de arterie, dicht bij de distale hechting, zodat er voldoende arteriewand beschikbaar is voor de initiële inbreng van de katheter.Plaats één uiteinde van de dumont in het lumen van het arteriële vat en sluit deze over de vaatwand om het gat te openen terwijl de arteriële wand wordt vastgehouden. Duw de katheter in het lumen terwijl het vat over de katheter wordt getrokken. Knoop de middelste ondersteunende hechting lichtjes vast om de katheter op zijn plaats te houden.Laat vervolgens de proximale hemostat los om de proximale hechting te versoepelen en de hechting rond de vaten weer te openen. Op dit punt zou de arteriële druk het bloed terug in de katheter moeten duwen. Pulserend bloed zou in de katheter zichtbaar moeten zijn.Houd de vaten rond de katheter met één hand vast en gebruik de andere hand om de katheter in het vat te duwen. Vier tot vijf millimeter. De punt van de katheter moet net onder de m. obliquus internus abdominis en de m. transversus abdominis rusten.Sluit het dier aan op een BPA 400-analyzer en spoel de arteriële lijnen door. Breng één of twee druppels steriele zoutoplossing aan in de chirurgische opening om het omliggende weefsel vochtig te houden tijdens de procedures voor hemorragische shock en resuscitatie om hemorragische shock op te wekken. Begin door de geanestheseerde muis onder een lamp en op een circulerend warmtekussen te plaatsen om te helpen de temperatuur van 36 tot 37 °C te handhaven.Gebruik vervolgens een spuit om gedurende 15 minuten ongeveer de helft van het bloedvolume van de muis af te nemen, om een gemiddelde arteriële druk van 28 tot 32 millimeters kwik te bereiken. Reanimeer het dier na 1,5 tot drie uur met behulp van een spuitpomp om lactaatringeroplossing toe te dienen in een hoeveelheid van drie keer het verloren volume, met een constante snelheid over een periode van 15 minuten. Wanneer het dier is gereanimeerd, wordt de katheter verwijderd en worden de vaten afgebonden.Trek de katheter met behulp van drie hechtingen net voorbij de proximale hechting en knoop deze hechting vervolgens volledig dicht om bloedverlies te voorkomen. Collaterale bloedstroom voorkomt dat de achterpoten ischemisch worden. Hecht ten slotte beide openingen in de achterpoten dicht met een steriele 4-0 PDSI.Ik hecht de wond. Verwijder de losse lusband en plaats het dier in een schone kooi, die gedurende enkele uren op een circulerende warmtemat wordt gehouden. Na herstel.Dit diagram geeft een overzicht van de procedure voor hemorragische shock. Na bilaterale canulatie en de initiële aansluiting op de bloeddrukmonitor wordt gedurende vijf minuten een basislijn van de bloeddruk vastgesteld. Zodra een betrouwbare bloeddruk is geregistreerd, vindt de inductie van shock plaats, waarbij bloed via de femorale katheter wordt afgenomen om een bloeddruk van 28 plus of minus 2 mmHg te bereiken; de bloedafname dient over een tijdsbestek van 15 minuten plaats te vinden.Na de inductie van de shock volgt een shockperiode van twee en een half uur, waarbij de bloeddruk constant wordt gemonitord. Na de shockperiode vindt een gecontroleerde reanimatie plaats met behulp van een spuitenpomp waarmee drie keer het verloren bloedvolume terug in het dier wordt geïnfuseerd. Ten slotte wordt het dier opnieuw aangesloten op de bloeddrukmeters voor een tweede nulmeting.Dit duurt ongeveer vijf tot 10 minuten. Deze figuur geeft de pro- en anti-inflammatoire responsen weer die geassocieerd zijn met hemorragische shock. Er treedt een cytokinestorm op waarbij pro- en anti-inflammatoire cytokinen, samen met macrofagen, T-cellen en een veelvoud aan andere fysiologische responsen, interageren in een feedbackloop in een poging het lichaam terug te brengen naar homeostatische omstandigheden en zuurstofarme organen te herstellen.Deze grafische weergave geeft de leverfunctie weer in wildtype muizen die zijn onderworpen aan twee tijdspunten van hemorragische shock vergeleken met sham-muizen; het alanine-aminotransferase- of ALT-niveau wordt getoond in grafiek A en het aspartaat-aminotransferase- of AST-niveau wordt getoond in grafiek B. Leverenzymen werden gemeten in bloedplasma met behulp van een bloedchemie-analyzer. Deze fluorescentiemicroscopiebeelden tonen longweefsel in wildtype muizen die zijn onderworpen aan hemorragische shock en controlemuizen.Kleuring voor actine is in het groen weergegeven. Kleuring van de nucleus is in het blauw weergegeven. iNOS-expressie is in het rood weergegeven, zoals hier te zien is.Muizen met hemorragische shock vertonen een duidelijke infiltratie van iNOS, in rood weergegeven, in het bronchiale epitheel en het vasculair endotheel van het longweefsel. Deze kleuring is afwezig bij controlemuizen die een sham-procedure ondergingen. Deze fotomicrografieën tonen coupes van leverweefsel van muizen die waren blootgesteld aan hemorragische shock of van controlemuizen, gefixeerd in paraformaldehyde en gekleurd met hematoxyline of eosine.Het weefselgedeelte van de muizen die waren blootgesteld aan hemorragische shock vertoonde necrotisch weefsel als gevolg van een verminderde circulatie en oxygenatie, wat niet werd waargenomen bij muizen die de sham-procedure ondergingen. Bij het uitvoeren van deze techniek is het zeer belangrijk om geduldig en zorgvuldig te zijn met de chirurgische techniek en de bloeding. Houd er rekening mee dat dit model gecombineerd kan worden met andere traumatische modellen, zoals bilaterale femurfractuur, pseudofractuur en weke delen trauma, om vragen te beantwoorden met betrekking tot de immunologie van meervoudige trauma's.

fixed-volume-or-fixed-pressure-a-murine-model-of-hemorrhagic-shock

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Een gestandaardiseerde muismodel van subarachnoïdale bloeding door intraluminale Cirkel van Willis perforatie wordt beschreven. Vaatperforatie en subarachnoïdale bloeden worden bewaakt door intracraniële druk monitoring. Daarnaast zorgen verschillende vitale parameters worden geregistreerd en gecontroleerd om fysiologische omstandigheden te handhaven.

Een muizenmodel van subarachnoïdale bloeding

Ongecontroleerde bloeding, een belangrijke oorzaak van sterfte onder traumapatiënten, kan gemodelleerd worden met behulp van een standaard leverlaceratie in een muizen model. Dit model resulteert in consistent bloedverlies, overleving, en maakt het mogelijk om hemostatische stoffen te testen. Dit artikel geeft de stap voor stap het uitvoeren van dit waardevolle model.

Ongecontroleerde hemorragische shock, gemodificeerd via leverlakeratie in muizen met realtime hemodynamische monitoring

Het doel van dit artikel is het presenteren van een methode waarmee een 3-dimensionale reconstructie van de cerebrovasculaire boom in muizen nadat micro berekende tomografie en bepaling van de hoeveelheden van hele schip segmenten die kunnen worden gebruikt voor het kwantificeren van cerebrale vasospasm in lymfkliertest modellen van subarachnoïdale bloeding.

Een volumetrische methode voor de kwantificering van cerebrale Vasospasm in een lymfkliertest Model van subarachnoïdale bloeding

Hier presenteren we een protocol aan te tonen een hemorragische schok model in varkens die gebruikmaakt van de aorta occlusie als brug naar de definitieve zorg in trauma. Dit model heeft toepassing in het testen van een breed scala van chirurgische en farmacologische therapeutische strategieën.

Volledige en gedeeltelijke aorta occlusie voor de behandeling van hemorragische schok in varkens

Hemorragische shock is een ernstige complicatie bij ernstig gewonde patiënten, wat leidt tot levensbedreigende zuurstof ondervoeding. We presenteren een gestandaardiseerde methode voor het induceren van hemorragische shock via bloed terugtrekking bij varkens die wordt geleid door hemodynamiek en microcirculatoire cerebrale oxygenatie.

Gestandaardiseerde hemorragische shock inductie geleid door cerebrale Oximetrie en uitgebreide hemodynamische controle bij varkens

Het monitoren van de intracraniale druk in knaagdiermodellen van niet-traumatische intraventriculaire bloedingen komt niet vaak voor in de huidige literatuur. Hierin demonstreren we een techniek voor het meten van intracraniale druk, gemiddelde arteriële druk en cerebrale perfusiedruk tijdens intraventriculaire bloeding in een rattendiermodel.

Intracraniale drukmonitoring in niet-traumatisch intraventriculaire bloeding knaagdiermodel

Dit protocol biedt een stapsgewijze procedure voor het uitvoeren van meervoudige intraveneuze toediening van bolusdoses en invasieve hemodynamische monitoring bij muizen. Onderzoekers kunnen dit protocol gebruiken voor toekomstige screening van therapeutische verbindingen voor hypertensie van de longslagader.

Meervoudige intraveneuze bolusdosering en invasieve hemodynamische beoordeling in een door hypoxie geïnduceerd model voor hypertensie van de longslagader van muizen

Dit artikel is bedoeld om onderzoekers een gedetailleerde en toegankelijke gids te bieden voor het opzetten van een model van hemorragische shock bij baby's.

Beschrijving van een varkensbabymodel van volumegecontroleerde hemorragische shock

Hemorragische shock doodt elk jaar wereldwijd 1,9 miljoen mensen. Kleine dieren worden vaak gebruikt als hemorragische shockmodellen, maar worden geassocieerd met problemen op het gebied van standaardisatie, reproduceerbaarheid en klinische significantie, waardoor hun relevantie wordt beperkt. Dit artikel beschrijft de ontwikkeling van een nieuw klinisch relevant hemorragisch shockmodel bij ratten.

Ontwikkeling van een klinisch relevant hemorragisch shockmodel bij ratten

Deze studie presenteert een hybride kwantitatief model voor axillaire junctionele bloeding bij varkens, waardoor de evaluatie van hemostatische interventies vóór het ziekenhuis wordt verbeterd.

Een nieuw hybride kwantitatief evaluatiemodel voor okseljunctale bloeding bij varkens

Leer een chirurgische methode om hemorragische shock bij muizen te induceren voor traumagerelateerd immunologisch onderzoek. Dit model maakt gecontroleerde monitoring van fysiologische veranderingen en orgaanfunctie mogelijk.

Vaste Volume of vaste druk: een muizenmodel van hemorragische shock

Meer video's verkennen