JoVE Encyclopedie van Experimenten
Microbiologie
0 weergaven • 2:59 min. • August 31st, 2026
Neem een in vitro gekweekte aardappelplant.
Gebruik vervolgens recombinante Agrobacterium, een plantpathogeen dat transfer-DNA (T-DNA) bevat.
Het T-DNA draagt een volledig genoom van het aardappelvirus X, dat zodanig is gemodificeerd dat het een niet-coderend RNA codeert om specifieke microRNA's van planten weg te vangen.
Infiltreer de bladeren met de bacteriën en kras de stengel met een tandenstoker die is bedekt met de bacteriën.
Op de inoculatieplaats knippen de bacteriën het T-DNA uit en brengen dit als enkelstrengs DNA over in de plantencellen.
Met behulp van de machinerie van de gastheer produceert het T-DNA viraal genomisch RNA, dat repliceert en niet-coderende RNA's en virale eiwitten tot expressie brengt.
Het niet-coderende RNA bindt aan de doelwit-microRNA's van de plant, waardoor wordt voorkomen dat zij binden aan hun doelwit-mRNA's, wat leidt tot ontwikkelingsdefecten.
Ondertussen vormen de virale genomische RNA's ribonucleoproteïnecomplexen die systemisch via plasmodesmata verspreiden om microRNA-silencing in de gehele plant mogelijk te maken.
Bladafwijkingen, waaronder ectopische uitgroeisels en trompetvormige bladeren, duiden op de ontwikkelingsrol van de gesilencete microRN
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's