JoVE Encyclopedie van Experimenten
Microbiologie
0 weergaven • 3:24 min. • August 31st, 2026
Neem de buisjes met virale capsiden, wat virusachtige deeltjes zijn zonder genetisch materiaal.
Verhit de buizen bij een constante temperatuur gedurende variërende tijdsduuren.
Een kortere verhittingsduur veroorzaakt milde stress bij de capsideproteïnen, terwijl langdurige verhitting het capside verstoort en aggregatie veroorzaakt.
Koel de buisjes snel af om verdere structurele veranderingen te voorkomen.
Breng de vloeistof over op een paraffinefolie.
Plaats een transmissie-elektronenmicroscopie (TEM) grid op de druppel. De capsiden hechten zich aan het oppervlak van het grid.
Deponeren het grid op filterpapier om overtollige vloeistof te verwijderen.
Was met een buffer om losjes gebonden capsiden te verwijderen en dep het rooster vervolgens opnieuw droog.
Dompel in uranylacetaat, een zwaar metaalcontrastmiddel dat bindt aan het oppervlak van het capsid, waardoor deze donkerder verschijnen onder TEM.
Depot het grid op filterpapier en plaats het op een plaat. Bewaar de plaat in een desiccator om vocht te verwijderen.
Maak beelden van het grid met behulp van TEM om hitte-geïnduceerde schade aan het capsid te visualiseren.
Voer de hittebehandeling uit zoals eerder beschreven, maar vervang 10 mil
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's