JoVE Encyclopedie van Experimenten
Microbiologie
0 weergaven • 3:51 min. • August 31st, 2026
Neem lentivirale vectoren die HIV-1 p24-antigeen bevatten, een eiwitmarker die wordt gebruikt voor detectie.
Voeg een detergent toe om p24 te lyseren en vrij te maken, en verdun vervolgens het monster in een seriële verdunningsreeks.
Gebruik een microplaat die is gecoat met anti-p24 monoklonale antilichamen en een blokkeringsmiddel om aspecifieke binding te voorkomen.
Voeg de monsterverdunningen en p24-standaarden als referenties toe.
Incubeer om de interactie van p24 met de antilichamen via een specifiek epitoop mogelijk te maken en verwijder vervolgens de ongebonden componenten.
Incubeer met anti-p24 polyklonale antilichamen die binden aan verschillende epitopen op p24. Verwijder alle ongebonden antilichamen.
Voeg peroxidase-gekoppelde antilichamen toe die binden aan de polyklonale antilichamen. Verwijder ongebonden antilichamen.
Voeg een peroxidase-substraat toe dat wordt omgezet in een gekleurd product.
Voeg een zuur toe om de peroxidase te inactiveren en het product te stabiliseren.
Meet de absorptie die overeenkomt met de kleurintensiteit, welke proportioneel is aan de p24-concentratie.
Maak de standaardgrafiek en schat de monsterconcentraties om de virale titer te bepalen.
Coat een hig
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's