JoVE Encyclopedie van Experimenten
Microbiologie
0 weergaven • 3:25 min. • September 30th, 2026
Neem een multi-wellplaat met mammale epitheelcellen.
Bereid seriële verdunningen voor van een pseudovirus dat coronavirus-spike-eiwitten bevat.
Vervang het medium in elke well door een verdunde virussuspensie.
Incubeer met af en toe schudden om de virale spike-eiwitten te laten binden aan de receptor van de gastheercel.
Verwijder het medium. Voeg een medium toe dat methylcellulose bevat om een semisolide overlay te vormen die de verspreiding van het virus beperkt, en incubeer.
Het virus dringt de cel binnen en laat zijn RNA-genoom vrij.
Het RNA stuurt de synthese van nieuw viraal RNA en eiwitten aan, die assembleren tot virale deeltjes die de cel verlaten.
De vrijgekomen virussen infecteren naburige cellen, waardoor een heldere zone ontstaat die een plaque wordt genoemd.
Verwijder de overlay en was de cellen.
Voeg een kleurstof toe en incubeer de plaat onder schudden.
Was en droog de wells.
De kleurstof kleurt de cellen, terwijl de plaques helder blijven.
Tel de zichtbare plaques in elke well om de virale concentratie te bepalen.
Om de virale titer te bepalen, worden Vero E6-cellen in zeswellplaten uitgeplaat met een zaaidichtheid van 6 × 10⁵ cellen per well en overnacht geïncubeerd. De volgend
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's