JoVE Encyclopedie van Experimenten
Microbiologie
0 weergaven • 4:56 min. • September 30th, 2026
Neem een multi-wellplaat met hitte-geïnactiveerd patiërserum dat coronavirus-specifieke antilichamen bevat in de testwell. Gebruik gezond menselijk serum als controle.
Voeg pseudovirussen toe die coronavirus-spike-eiwitten vertonen en RNA coderen voor groen fluorescent eiwit aan de serummonsters, en incubeer.
In de testput binden antilichamen aan de spike-eiwitten en neutraliseren ze de pseudovirussen, terwijl in de controleput aspecifieke antilichamen niet binden aan de spike-eiwitten, waardoor de pseudovirussen ongebonden blijven.
Voeg het mengsel toe aan epitheelcelmonolagen. Incubeer voor virale adsorptie.
Voeg semi-solide overlay-medium toe aan elke put om virale diffusie te beperken. Incubeer.
In de controle binden ongebonden pseudovirussen aan celreceptoren, dringen ze cellen binnen, laten ze RNA vrij en brengen ze GFP tot expressie, waardoor fluorescerende infectiehaarden ontstaan.
In de testput falen door antilichamen geneutraliseerde pseudovirussen om cellen binnen te dringen, waardoor de vorming van infectiehaarden wordt voorkomen.
Tel de fluorescentie-infectiehaarden onder een fluorescentie-imager.
De afwezigheid van infectiehaarden in de testput, vergeleken met talrijke haarde
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's