JoVE Encyclopedie van Experimenten
Microbiologie
0 weergaven • 3:39 min. • September 30th, 2026
Begin met een liposoomsuspensie waarin recombinant maalkinkervirus-antigenoomplasmiden en helperplasmiden die coderen voor essentiële virale eiwitten zijn ingekapseld.
Het antigenoom-plasmide bevat cDNA van het mazelengenoom, gemodificeerd om immunostimulerende eiwitten en een fluorescent reportereiwit tot expressie te brengen in geïnfecteerde cellen.
Neem een virusproducerende celcultuur die antibiotica bevat om contaminatie te voorkomen.
Voeg de liposoomsuspensie toe aan de cultuur en incubeer.
De liposomen fuseren met het celmembraan om de plasmiden af te leveren.
De machinerie van de gastheercel transcribeert het antigenoom-cDNA naar RNA en de helperplasmiden naar mRNA's, waardoor eiwitexpressie en de vorming van het virale replicatiecomplex mogelijk worden. Dit complex produceert genomisch RNA, wat virale eiwitexpressie mogelijk maakt.
Genomisch RNA assembleert met virale eiwitten om recombinante virale partikels te genereren.
Geïnfecteerde cellen brengen ook het fluorescerende reportereiwit tot expressie voor microscopische visualisatie en produceren het door het virus gecodeerde immunostimulerende eiwit.
Geïnfecteerde cellen vormen meerkernige syncytia, een kenmerk van het cytopathi
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's