JoVE Encyclopedie van Experimenten
Microbiologie
0 weergaven • 4:36 min. • September 30th, 2026
Begin met lentivirussen die een antibioticaresistentiegen dragen.
Centrifugeer om het debris te scheiden. Verzamel het supernatant dat de virussen bevat en laat dit door een surfactantvrij membraan lopen.
Dit zorgt ervoor dat de lentivirussen passeren terwijl verontreinigingen worden tegengehouden.
Ultracentrifugeer om de virussen te concentreren. Verwijder het supernatant en voeg buffer toe om de virussen opnieuw te suspenderen.
Breng de suspensie vervolgens over naar een microcentrifugebuisje en vortex deze.
Centrifugeer om luchtbellen te verwijderen. Voeg vervolgens de virussen toe aan een infectiemedium met muis embryonale stamcellen en meng.
Centrifugeer om het contact tussen virus en cel te verbeteren en incubeer vervolgens.
De virussen brengen hun genomen over in de cellen.
Verwijder het medium, voeg vers medium toe en incubeer.
Het virale genoom wordt omgezet in DNA en integreert in het genoom van de gastheer, waardoor de productie van mRNA mogelijk wordt dat de synthese van het antibioticumresistentie-eiwit aanstuurt.
Vervang het medium door vers medium aangevuld met het selectieantibioticum en incubeer.
De cellen die het antibioticaresistentie-eiwit tot expressie brengen, overleven,
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's