Intranasale infectie met het murine herpesvirus bij muizen om immuunresponsen van de gastheer te beoordelen

Begin met een gezonde, geanestheseerde muis die is gepositioneerd voor toediening via de luchtwegen.

Dien het murine herpesvirus intranasaal toe om de infectie te initiëren.

Het virus verplaatst zich via de luchtwegen en bereikt de longen.

In de longen infecteert het virus de longepitheelcellen en laat het zijn nucleocapside vrij.

Het virale genoom komt de kern binnen en wordt getranscribeerd naar viraal RNA.

Een cytosolische sensor van de gastheer herkent het virale RNA en initieert signaleringspaden die specifieke transcriptiefactoren activeren. Deze factoren bevorderen vervolgens de expressie van cytokinegenen, wat leidt tot de productie van antivirale cytokinen.

Dissekeer na de infectie de geëuthanaseerde muis en oogst het longweefsel.

Plaats één longlob in een buis met siliciumkralen en voeg koud kweekmedium toe.

Homogeniseer het weefsel om de cellen te lyseren en intracellulaire componenten, waaronder de antivirale cytokinen, vrij te maken.

Koel het homogenaat op ijs en herhaal vervolgens de homogenisatie om volledige weefseldisruptie te waarborgen.

Centrifugeer om de celresten te pelletteren.

Verzamel het supernatant dat antivirale cytokinen bevat om de immuunrespons van de gastheer op