JoVE Encyclopedie van Experimenten
Microbiologie
0 weergaven • 3:24 min. • September 30th, 2026
Begin met een met koolstof gecoat transmissie-elektronenmicroscopie- of TEM-rooster dat op een objectglas is geplaatst.
Plaats het objectglas in een kamer en pas een glow discharge toe om het koolstofoppervlak hydrofiel te maken voor een uniforme verspreiding van het monster.
Verwijder het objectglas, houd het raster met een pincet vast en breng een suspensie van Hepatitis E-virus (HEV) nanodeeltjes aan.
Deze nanodeeltjes bestaan uit recombinante HEV-capside-eiwitten en bevatten geen nucleïnezuren of accessoire virale eiwitten.
Incubeer de monsters om de nanodeeltjes te laten adsorberen aan het oppervlak van het raster. Blot vervolgens met filterpapier om het overtollige suspensie te absorberen.
Was het raster met gedeïoniseerd water om niet-geadsorbeerde nanodeeltjes te verwijderen en dep opnieuw.
Voeg uranylacetaatkleuring toe en incubeer kort.
Uranylacetaat vormt een elektronendichte achtergrond rond de nanodeeltjes, wat het contrast tijdens TEM-beeldvorming verbetert.
Dep het overtollige contrastmiddel af en plaats het raster in een ontvochtigingskamer om te drogen.
Onder TEM verschijnen HEV-nanodeeltjes als uniforme, holle, icosaëdrische structuren waarin virale nucleïnezuren ontbreken
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's