JoVE Encyclopedie van Experimenten
Microbiologie
0 weergaven • 4:33 min. • September 30th, 2026
Neem een multi-well plaat met epitheliale cellagen en voeg een virale suspensie toe aan de wells.
Incubeer met af en toe schudden om de virussen gelijkmatig te verspreiden. De virussen hechten zich aan de cellen en dringen deze binnen.
Voeg in één put gesmolten agarose toe, dat stolt tot een semi-solide overlay.
Voeg in een andere well een viskeuze vloeibare overlay op basis van microkristallijne cellulose toe en incubeer deze. De viscositeit ervan beperkt de virale diffusie, vergelijkbaar met de semi-solide overlay.
Binnen in de cel laat het virus zijn genoom vrij en produceert het nieuwe virale RNA's en eiwitten.
Nieuwe virussen assembleren, verlaten de cellen en veroorzaken cellyse.
Vrijgekomen virussen infecteren nabijgelegen cellen, waardoor plaques ontstaan.
Aspireer de vloeibare overlay en voeg een fixatief toe om de niet-gelyseerde cellen te bewaren.
Giet het fixatief af en verwijder de agarose overlay.
Voeg een kleurstof toe die levensvatbare cellen kleurt, waardoor plaques ongekleurd blijven. Was vervolgens de overtollige kleurstof weg.
De vloeibare overlay produceert vergelijkbare plaque-aantallen als de semi-solide overlay, wat het gebruik ervan als alternatief in plaque-assays o
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's