Name: Principes van Knaagdieren Chirurgie voor de Nieuwe Surgeon (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-01-06T20:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 29 s
Description: Leer de principes van aseptische chirurgie bij knaagdieren voor beginnende onderzoekers. Deze methode behandelt steriele velden, voorbereiding van dier en chirurg, en postoperatieve zorg om infectie te voorkomen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

1. Voor uitvoeren van een operatie, Wees ervan bewust dat er wettelijke en ethische eisen rond het gebruik van dieren in onderzoek en onderwijs <ol><li> Alle chirurgische ingrepen moet worden goedgekeurd door de lokale ethische of wettelijke bevoegdheid (IACUC of Ethische commissie of Home Office, etc.). </li><li> Zorg ervoor dat deze goedkeuring is op zijn plaats voor het begin. </li><li> Als er sprake is van goedkeuring voor een operatie of goedkeuring voor het gebruik van dieren, niet doorgaan. </li></ol> 2. Inzicht in aseptische techniek <ol><li> Steriliteit als concept <ol><li> Het doel van aseptische techniek is te verminderen of te elimineren waar mogelijk de normale bacteriële belasting aanwezig is op het dier en in de omgeving voor het begin van de operatie. Dit betekent dat de instrumenten worden gesteriliseerd, de chirurgische werkvlak is gedesinfecteerd, en het dier en de chirurg handen gedesinfecteerd. </li><li> Chirurgie, correct is uitgevoerd, hoeft niet profylactisch antibiotica of andere behandelingen, andere dan de verlichting van de pijn. </li><li> Zelfs met een uitstekende aseptische techniek, kunnen bacteriën afkomstig van de chirurgische onderwerp nog worden geïntroduceerd in een chirurgisch gemaakte wond. Een goede aseptische techniek beperkt het risico van insleep van ziekteverwekkers, voornamelijk bacteriën, in de chirurgische sites. </li></ol></li><li> Steriel veld <ol><li> Het steriele veld omvat de chirurgische gebied, het gebied voorbereid op het dier, en de voorkant van de chirurg. </li></ol></li><li> Breaks in steriliteit <ol><li> Breekt in steriliteit optreden wanneer de chirurg raakt iets buiten het steriele veld. Dit kan haar gezicht, een lamp, een onvoorbereid deel van het dier, of een niet-steriel instrument zijn. </li><li> Dit is de reden profylactisch antibiotica worden gebruikt. </li><li> Vergeet niet, is een speciale activiteit plaats. Wees kalm, bedachtzaam en nauwkeurig. </li></ol></li></ol> 3. Voorbereiden voor Heelkunde <ol><li> Knaagdier operatie niet nodig een speciale chirurgische suite. Idealiter zou operaties worden uitgevoerd in een aparte ruimte in een lab, zoals een kap of laminaire flow kast. Hoe dan ook, moet de gekozen gebied worden netjes, goed verlicht, en uit de verkeersstroom. Knaagdier operaties worden vaak uitgevoerd op een laboratorium benchtop. Voor het regelen van de chirurgische gebied, goed schoon de stationaire met een desinfecterend middel. </li><li> Het is nuttig voor de chirurg om een ​​assistent. Deze assistent kan u helpen met een verdoving, voorbereiden dieren, en het toezicht op herstel. Hierdoor kan de chirurg om zich voor te bereiden, terwijl de dieren worden bereid, dus het verkorten van de tijd dier onder narcose, en misschien waardoor meer operaties uit te voeren. </li><li> Schik de chirurgische gebied, zodat er drie verschillende zones: de voorbereiding, operatie en herstel. </li><li> Voor de voorbereiding gebied, verzamelen die nodig zijn de leveringen: <ol><li> Smeren oogzalf </li><li> Tondeuse of scheerapparaat </li><li> Gaas </li><li> Chirurgische scrub-oplossingen <ol><li> Chirurgische scrub oplossingen vaak gebruikt worden jodoforen of chloorhexidine / </li><li> 70% isopropyl alcohol wordt ook gebruikt als onderdeel van de chirurgische scrub. </li></ol></li></ol></li><li> Voor de chirurgische gebied, opbouwen en inrichten van het materiaal dat nodig is. <ol><li> Warmtebron voor het houden van het knaagdier warm <ol><li> De ideale warmtebron is een recirculerende water verwarming pad. Elektrische verwarming pads zijn niet aanvaardbaar voor een operatie. Chirurgische handschoenen gevuld met warm water, of chemische de hand warmers kunnen ook worden gebruikt. Als een van de laatste twee worden gebruikt, moeten de temperatuur van het object zorgvuldig te worden gecontroleerd tijdens de operatie. </li></ol></li><li> Chirurgische platform <ol><li> Dit kan een steriele waterdichte pad geplaatst over de warmtebron worden. </li></ol></li><li> Wegwerp levert <ol><li> Deze kunnen zijn: steriele chirurgische gordijnen, gaas, katoen applicators, vloeistoffen voor toediening aan het knaagdier, weefsel irrigatie oplossing. </li></ol></li><li> Steriele instrumenten <ol><li> Het complement van instrumenten zal variëren afhankelijk van de operatie, maar over het algemeen zijn scalpels, weefsel oprolmechanismen, tang, hemostats, en schaar. </li><li> Instrument sterilisator of steriliseren oplossing als het dezelfde instrumenten gebruikt moeten worden op meer dan een chirurgische onderwerp <ol><li> Het gebruik van een hete kraal sterilisator om instrumenten te steriliseren tussen dieren komt veel voor. </li></ol></li></ol></li><li> Materiaal naar de chirurgische incisie te sluiten. <ol><li> De gebruikte materialen is afhankelijk van de chirurgische site en applicatie, maar kan omvatten: Suture en naalden, nietjes en een nietje applicator, of weefsel lijm </li></ol></li><li> Alle andere nodige speciale apparatuur (stereotaxische apparatuur, implantaten, operationele microscoop) </li></ol></li></ol> 4. De voorbereiding van de instrumenten voor Heelkunde <ol><li> Instrumenten moeten schoon zijn ensteriel aan het begin van de operatie. Dit wordt vaak gedaan door het creëren van een complete chirurgische packs die worden geautoclaveerd. </li><li> Instrumenten kunnen worden gebruikt voor meer dan een knaagdier chirurgie zonder autoclaaf en ompakken, maar moet worden gereinigd en gesteriliseerd tussen de knaagdieren. <ol><li> Als een warme kraal sterilisator wordt gebruikt, moet u tijd te geven voor de instrumenten om af te koelen na sterilisatie. Instrumenten kunnen worden gekoeld door dompelen in steriel water. </li><li> Chemische sterilisatiemiddelen kan ook gebruikt worden, maar vereisen een langere contacttijd (~ 10 minuten-zou kunnen worden 30-60 minuten, vereisen spoelen). Alcohol is niet een sterilisatiemiddel. </li></ol></li><li> Schik instrumenten op steriele waterdichte laken in de volgorde waarin ze zullen worden gebruikt. </li></ol> 5. De voorbereiding van de Animal voor Heelkunde <ol><li> De drie dingen die worden toegediend voor de operatie zijn verdoving, pijnstilling en antibiotica. <ol><li> Anesthesie noodzakelijk is voor een operatie. Anesthetica kunnen worden toegediend via inhalatie of injectie. <ol><li> De meest voorkomende inhaleren verdoving in gebruik is op dit moment isofluraan. </li><li> De meest voorkomende injecteerbare verdoving wordt gebruikt is een combinatie van ketamine en xylazine, eventueel met een ander kalmerend middel toegevoegd. </li><li> Raadpleeg uw installatie diergeneeskundig personeel voor de juiste doseringen. </li></ol></li><li> Pre-emptieve analgetica worden aanbevolen en dient te worden toegediend voor de operatie begint. <ol><li> Vaak gebruikte niet-steroïdale anti-inflammatoire onder flunixine en carprofen. </li><li> Beschikbare opiaten kan buprenorfine, morfine, fentanyl of. </li><li> Raadpleeg uw installatie diergeneeskundig personeel voor de juiste doseringen en wijze van toediening. </li></ol></li><li> Met goed uitgevoerde operatie, zijn antibiotica in het algemeen niet nodig is, met uitzondering van enkele hoog-risico gastro-intestinale chirurgie. <ol><li> Als antibiotica worden gebruikt, gebruikt bieden peri-operatief (voor de eerste incisie). </li><li> Raadpleeg uw installatie diergeneeskundig personeel voor de juiste antibiotica, doseringen, en de wijze van toediening. </li></ol></li></ol></li><li> Chirurgisch voorbereiding van de incisie <ol><li> Scheer de incisie site. Over het algemeen scheren een oppervlakte van ongeveer 3 keer de grootte van de voorgestelde incisie. De grootte van de geschoren en bereid gebied kan worden beperkt door de grootte van het dier of het gebied op het dier. </li><li> Het geschoren gebied wordt gedesinfecteerd met meerdere toepassingen van chirurgische scrub oplossing en isopropyl alcohol. Toepassing is meestal chirurgische scrub eerst, dan de alcohol. Eindig met een uiteindelijke toepassing van struikgewas oplossing. </li><li> Chirurgische schrobben is uitgevoerd in een cirkelvormig patroon, te beginnen in het midden en spiraalvormige naar buiten, of op kleinere dieren, een unidirectioneel mode. <ol><li> Als schrobben een richting, plaats steriel gaasje op de crainial marge van het geschoren gebied, die het haar van het dier. Begrijpen en voorzichtig stabiliseren van het dier door de steriele gaas. Toe te passen scrub oplossing en alcohol een richting weg van het steriele gaas. </li></ol></li></ol></li><li> Verplaatsen van het dier naar het operatiegebied <ol><li> Beweegt het dier met de voorbereide operatiewond naar boven, en zonder contact met de voorbereide site. </li><li> Plaats het dier op het chirurgische gebied, zodat de operatiewond is naar boven, naar de chirurg. </li></ol></li><li> Draperen van het dier <ol><li> Als het dier wordt gedrapeerd door de assistent, moet de assistent niet vergeten dat het buitenoppervlak van het laken wordt beschouwd als onderdeel van het steriele veld en mogen niet worden gehanteerd door de assistent. Draperen wordt vaak overgelaten aan de chirurg, en drapeer is opgenomen in de chirurgische verpakking. </li><li> Een standaard waterdicht wegwerp papier laken wordt algemeen aanbevolen. </li></ol></li></ol> 6. De voorbereiding van de chirurg voor Heelkunde <ol><li> Voorbereiding van de chirurg moeten benadrukken dat een speciale activiteit zal plaatsvinden, een waarin de chirurg moet bewust zijn van hun elke beweging in en uit het steriele veld. </li><li> Het haar en gezicht worden over het algemeen bedekt met een muts en masker, respectievelijk. Deze moeten nieuw zijn bij de start van de chirurgische sessie, maar hoeven niet te worden veranderd tussen de dieren. </li><li> Chirurgen moeten dragen een disposable chirurgische jurk, schone wegwerp laboratoriumjas of op zijn minst een schone laboratoriumjas. Dit hoeft niet te worden gewijzigd tussen de dieren, maar moet worden veranderd tussen chirurgie sessies. </li><li> Handen moeten worden gereinigd goed voor de operatie. Chirurgische handschoenen of examen handschoenen moeten worden gebruikt. Als examen handschoenen worden gebruikt, moeten ze worden gewassen met een chirurgische ontsmettingsmiddel voordat het wordt gebruikt. Handschoenen moeten worden veranderd tussen de dieren. </li></ol> 7. Tijdens de operatie <ol><li> Onderhoud van het steriele veld. <ol><li> Zodra uw handen steriel en de operationele veld is steriel, moet u zorgvuldig te bewegen en niet om steriliteit te breken onthouden. Deze includes met een steriel veld waarop u kunt neergelegd instrumenten, herinneren niet aan je neus krabben, en alleen het uitdelen van de chirurgische patiënt door de steriele laken. </li></ol></li><li> Tissue behandeling <ol><li> Voorzichtig behandelen weefsels. Houden weefsels vochtig, vooral als een operatie wordt verlengd. Minimaliseer het creëren van weefsel zakken en onnodige dissectie. </li><li> Juiste weefsel behandeling vermindert de kans en het risico van postoperatieve infecties, versnelt de genezing en vermindert de post-operatieve pijn. </li></ol></li><li> Vervanging van verloren vloeistoffen <ol><li> De gebruikelijke routes van toediening van vocht bij knaagdieren zijn subcutane of intraperitoneale. Gebruik maken van kleine hoeveelheden voor kleine dieren-1-2 ml intraperitoneaal voor muizen, bijvoorbeeld. </li><li> Verwarmde vloeistoffen kan helpen voorkomen dat een daling van de lichaamstemperatuur. Muis en rat lichaamstemperatuur hoger is dan de mens, zodat vloeistoffen moeten worden warmer. </li></ol></li><li> Behouden warmte <ol><li> Plaatsing van een verwarmings-pad onder het dier tijdens de operatie en de kooi tijdens het herstel is een standaard manier om een ​​dier lichaamstemperatuur te behouden. <ol><li> Voorzichtig met verwarming alleen pads gebruiken die zijn gemarkeerd voor de operatie. Anderen kunnen veroorzaken thermisch letsel. </li></ol></li><li> Verwarmde vloeistoffen, gegeven intraperitoneaal, kan ook helpen warm dieren. </li></ol></li><li> Operationele microscoop-kunnen sommige procedures te vergemakkelijken (microvasculaire chirurgie, oudere chirurgen, etc. Kan ook worden bereikt door het gebruik van loepen, zoals loepen, enz.) </li></ol> 8. Post-operatieve herstel Overwegingen <ol><li> Dieren moeten herstellen op een plat papier beddengoed (steriele papieren handdoeken, enz.) in plaats van standaard veeteelt beddengoed. </li><li> Houd het dier warm. Warmte helpt bij spoedig herstel toe. Dit wordt vaak gedaan door het plaatsen van het herstel kooi half-op een verwarmingselement, zodat de dieren kunnen hun gewenste temperatuur kiezen als ze herstellen. </li><li> Niet terug te keren dieren of kooien om het dier wachtruimte totdat alle dieren lijken normaal. Elk dier dat geopereerd moet weer de mogelijkheid om recht zelf in de kooi en in staat zijn om normaal te bewegen over voordat ze terug naar de wachtruimte. </li><li> Monitor dieren post-operatief voor onverwachte tekenen van ziekte of infectie. Dieren zullen over het algemeen verliezen een kleine hoeveelheid van het gewicht na de operatie, maar met de juiste pijnstilling en het verstrekken van voedsel, moeten ze het gewicht snel terug te krijgen. </li></ol> 9. Post-operatieve Monitoring is het laatste deel van een succesvolle operatie <ol><li> Voor de vijf tot zeven dagen na de operatie, toezicht houden op de algemene toestand van het dier. <ol><li> Post-operatief, moeten de dieren worden helder, alert en actief. Ze moeten normaal gesproken te maken krijgen met lotgenoten, eten en drinken, en in staat om een ​​normale soort-specifieke houdingen te bereiken. </li><li> Dieren die zich depressief voelt, eetlustremmende of traag moeten worden onderzocht om de oorzaak van deze verandering. Overweeg de mogelijkheid van een onbehandelde pijn of infectie. </li></ol></li><li> Eten / drinken is ook belangrijk om herstel. <ol><li> Er zal een aantal drop-off zijn van de consumptie na de operatie. Dit kan worden verminderd door het maken van voedsel en water beter toegankelijk. <ol><li> Langere sipper buizen nuttig zou kunnen zijn. </li><li> Dagelijkse provisie van natte voedsel in de bodem van de kooi kan ook verleiden dieren om te eten. </li></ol></li><li> Sommige analgetica bij ratten leidt tot pica, dus wees ervan bewust dat dieren kunnen ongepaste items (zoals bedden) eten letsel. </li></ol></li><li> Monitor dieren op tekenen van infectie bij de incisie. Het gevaar periode is de eerste 7 dagen en dieren moeten dagelijks worden gecontroleerd. <ol><li> Tekenen van infectie zijn roodheid, zwelling, afscheiding (purulent of sereuze), pijn, of het openen van de incisie (dehiscentie). </li></ol></li></ol> 10. Na de ingreep is voltooid, is de laatste stap IJkopname succes van uw operatie <ol><li> Was het model geïnduceerde / part verwijderd hersteld / functionaliteit? </li><li> Was er zo weinig pijn als mogelijk? </li><li> Was er geen infectie? </li><li> Succes! </li></ol>

<ol><li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22American+College+of+Laboratory+Animal+Medicine+Position+on+Rodent+Surgery%22">American College of Laboratory Animal Medicine Position on Rodent Surgery</a>. , Forthcoming.</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Animal+Welfare%2C+9+CFR%2C+Parts+1%2C+2%2C+and+3%22">Animal Welfare, 9 CFR, Parts 1, 2, and 3</a>. , Forthcoming.</li>
<li>Bradfield, J. F., Schachtman, T. R., McLaughlin, R. M., Steffen, E. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+and+physiologic+effects+of+inapparent+wound+infection+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim+Sci%22%5BJournal%5D)">Behavioral and physiologic effects of inapparent wound infection in rats.</a> Lab Anim Sci. 42, 572-578 (1992).</li>
<li>Brown, M. J., Pearson, P. T., Tomson, F. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+animal+surgery+in+research+and+teaching.+AVMA+Panel+on+Animal+Surgery+in+Research+and+Teaching%2C+and+the+ASLAP+%28American+Society+of+Laboratory+Animal+Practitioners%29%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Vet+Res%22%5BJournal%5D)">Guidelines for animal surgery in research and teaching. AVMA Panel on Animal Surgery in Research and Teaching, and the ASLAP (American Society of Laboratory Animal Practitioners).</a> Am J Vet Res. 54, 1544-1559 (1993).</li>
<li>Brown, P. A., Hoogstraten-Miller, S. Principles of Aseptic Rodent Survival Surgery: Parts I & 2. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBrown%2C+PA+%22Laboratory+Animal+Medicine+and+Management%22">Laboratory Animal Medicine and Management</a>. Reuter, J. D., Suckow, M. A. , International Veterinary Information Service. Ithaca. (2004).</li>
<li>Institute of Laboratory Animal Resources, National Research Council. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Guide+for+the+Care+and+Use+of+Laboratory+Animals%22">Guide for the Care and Use of Laboratory Animals</a>. , National Academy Press. Washington, DC. 556-570 (1996).</li>
<li>Popp, M. B., Brennan, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+vascular+access+in+the+rat%3A+importance+of+asepsis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Long-term vascular access in the rat: importance of asepsis.</a> Am J Physiol. 241, H606-H612 (1981).</li>
<li>Rutala, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((APIC+guideline+for+selection+and+use+of+disinfectants%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Infect+Control%22%5BJournal%5D)">APIC guideline for selection and use of disinfectants.</a> Am J Infect Control. 24, 313-342 (1996).</li>
</ol>

Alle auteurs werken voor Charles River, een belangrijke leverancier van chirurgisch-gemodificeerde dieren voor onderzoek.

Experimentele operatie aan knaagdieren wordt zelden uitgevoerd door dierenartsen en artsen. In plaats daarvan wordt vaak uitgevoerd door biomedische onderzoekers met weinig of geen formele opleiding in de beginselen van chirurgie en aseptische techniek. In een onderzoekssetting, een operatie is meestal geleerd van collega&#39;s, zich meestal niet formeel beide opgeleid. Operatie uitgevoerd in het laboratorium kan ook gezien worden in de eerste plaats als een methode voor het opstellen van een diermodel met als doel het genereren van een set van dieren voor een studie. Terwijl een bepaalde operatie is meestal een kwestie van hand-oog coördinatie en technische vaardigheid, die beide kunnen worden verworven via de praktijk, principes en vaardigheden in verband met het concept van de aseptische techniek (en dus een operatie zonder infectie) kan niet alleen worden verworven via de praktijk en zijn vaak niet volledig overgebracht naar onderzoekers. De afwezigheid van formele opleiding in de chirurgische principes kan leiden tot een gebrek aan begrip van de gelijke betekenis van zowel technisch correct chirurgie en pre-en post-operatieve zorg van de dieren. Behandeling van zowel de operatie zelf en de peri-operatieve zorg van de dieren zal resulteren in een toename van het welzijn van dieren en de kwaliteit van de gegevens verkregen uit het chirurgisch model. Kan bijvoorbeeld subklinische post-operatieve infectie verwarren resultaten, zoals veranderingen in gedrag en fysiologie gezien met pijn. Als prooi soorten, de meeste knaagdieren zijn verrassend stoïcijns en hoewel die lijden aan post-operatieve pijn of infectie kunnen vertonen weinig klinische symptomen. De subtiele tekenen van pijn of ongemak bij knaagdieren worden verder verduisterd door een algemeen gebrek aan opleiding van biomedische onderzoekers in de erkenning van zulke tekenen bij knaagdieren. Bovendien, knaagdieren zijn het meest actief tijdens de donkere cyclus, wanneer medewerkers zijn over het algemeen niet beschikbaar voor de klinische en gedragsmatige tekenen van pijn na een operatie te bekijken. Deze video is geen vervanging voor een goede chirurgische opleiding, die idealiter zou zowel hands-on en die door hun instelling, maar is ontworpen om onderzoekers een overzicht van de gemeenschappelijke zorgen en visual demonstratie van geaccepteerde aseptische procedures en technieken nodig zijn om een ​​minimale competentie te ontwikkelen bij de uitvoering van de operatie te overleven bij knaagdieren.

A correction to author list has been made for article Principles of Rodent Surgery for the New Surgeon.

Erratum: Principles of Rodent Surgery for the New Surgeon.

principes van knaagdieren chirurgie voor de nieuwe surgeon

Principles of Rodent Surgery for the New Surgeon

Voor zowel wetenschappelijk als om redenen van dierenwelzijn, zou de opleiding in basis-chirurgische technieken en concepten worden ondernomen voordat ooit op zoek naar een operatie uit te voeren op een knaagdier. Studenten, post-doctorale onderzoekers en anderen die geïnteresseerd zijn in het uitvoeren van een operatie aan knaagdieren als onderdeel van een onderzoeksprotocol kan niet gehad hebben formele chirurgische opleiding als deel van hun benodigde cursussen. Operatie zelf is een technische vaardigheid, en een die zal verbeteren met de praktijk. De principes van aseptische techniek, maar blijven vaak onverklaard of onkundige. Voor de meeste nieuwe chirurgen, is deze vitale informatie in stukjes en beetjes mode of geleerd op de baan, die geen van beide is ideaal. Het kan ook leren hoe je een bepaalde operatie moeilijk, omdat de nieuwe chirurg is zowel een chirurgische techniek en de beginselen van asepsis op hetzelfde moment te leren uit te voeren. Dit artikel geeft een overzicht en doet aanbevelingen voor basis-chirurgische vaardigheden en technieken die nodig zijn voor een succesvolle knaagdier chirurgie. Dit artikel is bedoeld om hands-on training aan te vullen door de instelling van de gebruiker.

Voordat u een operatie moet er een nieuwe chirurg zijn opleiding in basis chirurgische technieken en concepten. In dit artikel zal basic chirurgische overwegingen met een nadruk op knaagdieren.

Principes van Knaagdieren Chirurgie voor de Nieuwe Surgeon

Om zowel wetenschappelijke redenen als redenen van dierenwelzijn, dient men training in basisconcepten en -technieken van de chirurgie te volgen voordat men probeert ... uit te voeren.

Het algemene doel van deze procedure is om de principes en praktijken rondom aseptische chirurgie bij knaagdieren te schetsen. Dit wordt bereikt door eerst het concept van het steriele veld te introduceren. Vervolgens wordt de juiste voorbereiding van de werkruimte gedemonstreerd, zodat een soepele workflow en het behoud van het steriele veld gewaarborgd zijn.Vervolgens worden de stappen beschreven die nodig zijn om het dier en de chirurg voor te bereiden, zodat de introductie van omgevingscontaminanten en pijn bij het knaagdier tot een minimum worden beperkt. Ten slotte worden eenvoudige chirurgische overwegingen besproken, zoals de weefselbehandeling en de postoperatieve zorg voor het chirurgische subject. Over het algemeen zullen onderzoekers die nieuw zijn in de chirurgie moeite hebben, omdat zij zowel de aseptische techniek als een technisch veeleisende chirurgische procedure tegelijkertijd leren.Een visuele demonstratie van de aseptische techniek is belangrijk omdat deze vaardigheden vaak nieuw zijn voor personen zonder formele medische opleiding. Voordat een chirurgische procedure wordt gestart, moet deze zijn goedgekeurd door de lokale wettelijke of ethische autoriteit. Dit kan een institutionele commissie voor dierenzorg en -gebruik, een ethische commissie of de overheidsinstantie betreffen.Deze video is bedoeld als introductie of aanvulling op de praktische training die binnen uw instelling wordt verzorgd. Het doel van chirurgische ingrepen bij knaagdieren is het voorkomen van sepsis of andere infecties na de operatie. Om dit te bereiken, moeten de handen van de chirurg worden gedesinfecteerd, de instrumenten worden gesteriliseerd en het operatiegebied worden gesaneerd.Zelfs bij een uitstekende aseptische techniek kunnen bacteriën afkomstig van de patiënt nog steeds in een wond terechtkomen. Een correcte aseptische techniek beperkt het risico op de introductie van infectieuze agentia, primair bacteriën, in wonden en op chirurgische locaties. Het steriele veld omvat het gebied waar de instrumenten zijn klaargelegd en het gebied op het dier dat is voorbereid voor de chirurgie.Een steriel veld is het gebied boven, onder en rondom het dier dat de voorkant van de chirurg bevat, evenals alle benodigdheden en apparatuur die nodig zijn voor de operatie. Als apparatuur, materialen of de chirurg buiten het steriele veld treden, moet de chirurg onmiddellijk stoppen en de doorbreking van de techniek aanpakken om het risico op infectie te vermijden. Operaties bij knaagdieren vereisen geen speciale operatiekamers, maar worden idealiter uitgevoerd in een zuurkast of een laminaire flowkast.De ruimte dient netjes en goed verlicht te zijn en moet zich buiten de looproutes bevinden. Indien de chirurgische ingrepen op een laboratoriumbank worden uitgevoerd, moet deze grondig worden gereinigd met een desinfectiemiddel. Richt de chirurgische ruimte vóór de opstart in zodanig dat er drie duidelijk gescheiden zones zijn.Voorbereiding, chirurgie en herstel: verzamel voor het voorbereidingsgebied de benodigde materialen, zoals glijmiddel, oogzalf, een trimmer of plukker en chirurgische scruboplossingen. Verzamel en schik voor het chirurgische gebied de benodigde benodigdheden, zoals een recirculerend verwarmingsmatje om het knaagdier warm te houden en een steriele waterdichte onderlegger. Indien er in één sessie opeenvolgende operaties worden uitgevoerd, moet er ook een instrumenttensterlizer aanwezig zijn, zoals een hot-bead sterilisator. Verzamel ten slotte de materialen die nodig zijn om de chirurgische incisie te sluiten: hechtdraad en naalden, een nietapparaat met nietjes of weefsellijm.Alle overige benodigde apparatuur, zoals een stereotaxisch apparaat, implantaten of een operatiemicroscoop, moet ook gereedstaan. Het herstelgebied moet een grote kooi bevatten die op een warmtemat is geplaatst en aan het begin van de operatie doorgaans is belegd met plat papier als bodembedekking. Alle instrumenten moeten schoon en steriel zijn.Dit wordt vaak bereikt door volledige chirurgische pakketten samen te stellen die geautoclaveerd worden. Stereotaxische instrumenten moeten tussen operaties door grondig worden gereinigd, en onderdelen die in contact komen met de dieren, zoals de oor- of snijtandstangen, of die door de chirurg worden gebruikt, zoals de knoppen, moeten vóór gebruik en tussen de dieren door worden gedesinfecteerd. Knoppen kunnen worden omwikkeld met steriel inpakmateriaal om de steriliteit tijdens de operatie te garanderen.Instrumenten kunnen voor meer dan één knaagersoperatie worden gebruikt zonder autoclaven en opnieuw inpakken, maar moeten tussen de knaagers door worden gereinigd en gesteriliseerd, bijvoorbeeld met een hot bead. Laat de instrumenten na sterilisatie voldoende afkoelen voordat ze in contact komen met weefsel. Daarnaast kunnen instrumenten worden afgekoeld door ze in steriel water te dopen; alcohol is geen sterilisatiemiddel.Vóór de chirurgische ingreep bij knaagdieren worden doorgaans drie soorten geneesmiddelen toegediend: anesthetica, analgetica en antibiotica. Anesthesie kan worden toegediend via inhalatie of door injectie. Het meest gebruikte inhalatieanestheticum bij knaagdieren is isofluraan.Veelgebruikte injecteerbare anesthetica zijn ketamine en xylazine, met of zonder toevoeging van een ander sedativum. Veel anesthetica heffen de knipperreflex op. Gebruik altijd steriele oogsalf om de ogen te beschermen voordat u met een procedure begint.Preëmptieve analgetica worden aanbevolen en omvatten niet-steroïde anti-inflammatoire middelen zoals flunixon en opioïden zoals buprenorfine of morfine. Om het operatiegebied voor te bereiden, dient het haar eerst te worden geschoren. Haar kan contaminatie in de chirurgische incisie brengen, dus scheer een gebied dat groter is dan de verwachte incisie met brede marges.Voor een incisie van één centimeter wordt bijvoorbeeld vaak een gebied van drie centimeter voorbereid. Dit kan worden beperkt door de grootte van het dier of de anatomische regio. Voer drie afwisselende toepassingen uit van een chirurgische scrub en 70% ISA profielalcohol, entweder in een cirkelvormig patroon of in één richting, en sluit af met een laatste applicatie van de scruboplossing, niet van alcohol.Positioneer vervolgens het dier zodanig dat de chirurgische plek naar boven is gericht. De chirurg voert tot slot een teenknijptest uit om te verifiëren dat het dier diep onder narcose is. De voorbereiding van de chirurg moet benadrukken dat er een speciale activiteit zal plaatsvinden, waarbij de chirurg zich bewust moet zijn van elke beweging in en uit het steriele veld. Het haar en het gezicht worden doorgaans respectievelijk met een muts en een masker bedekt.Deze moeten aan het begin van de chirurgische sessie nieuw zijn, maar hoeven niet tussen de dieren door te worden vervangen. De handen moeten voor de operatie goed worden gereinigd. Voor de chirurgie moeten steriele chirurgische handschoenen worden gebruikt.Handschoenen moeten worden gewisseld tussen verschillende dieren of wanneer ze beschadigd of besmet raken tijdens een procedure. Idealiter dragen chirurgen een wegwerpbare chirurgische jas, maar een schone laboratoriumjas, of deze nu wegwerpbaar is of onlangs is gewassen, is acceptabel. De laboratoriumjas hoeft niet tussen dieren te worden gewisseld, maar moet wel worden gewisseld tussen verschillende chirurgische sessies.Om de operatie te beginnen, wordt het gebied afgedekt met een steriel waterdicht afdekdoek. Controleer periodiek de dieren op een adequate oxygenatie en de diepte van de anesthesie. Indien het controleren van de anesthesiediepte een onderbreking van de steriliteit veroorzaakt, dient een chirurgisch assistent deze taak uit te voeren.Doorbrekingen van de steriliteit moeten onmiddellijk worden gecorrigeerd. Veelvoorkomende doorbrekingen tijdens procedures zijn onder meer het aanraken van het gezicht of het aanraken van voorwerpen buiten het steriele veld, zoals een lichtbron; handschoenen moeten onmiddellijk worden vervangen als de steriliteit is aangetast. Aanvullende ondersteuning voor het dier moet bestaan uit intraperitonele, subcutane of intraveneuze toediening van warme, steriele, fysiologisch gebalanceerde oplossingen, zoals 0,9% Sodium chloride. Laat dieren herstellen in warme kooien met papierhanddoeken of een andere vlakke papieren ondergrond, niet met standaard strooisel voor dierhouderij.De herstelkooi kan gedeeltelijk op een warmtemat worden geplaatst, zodat het dier naar een koeler gedeelte kan bewegen zodra het weer mobiel is. Plaats post-chirurgische dieren pas in de verblijfskooi zodra ze zich na de operatie weer normaal in de kooi kunnen bewegen. Zorg dat voedsel en water gemakkelijker toegankelijk zijn.Er wordt water aan het voer toegevoegd om het zacht te maken, zodat de dieren het gemakkelijker kunnen eten. Dieren moeten worden gecontroleerd op tekenen van pijn en kunnen postoperatieve analgesie nodig hebben. Controleer daarnaast de chirurgische wonden op ontsteking of infectie.Wondsluitingen moeten 10 tot 14 dagen na de operatie worden verwijderd. Een succesvolle operatie is een operatie waarbij er geen sprake is van infectie. De pijn is minimaal en het doel van de onderzoeker bij het uitvoeren van de operatie is bereikt.Specifieke chirurgische ingrepen en hun doelstellingen kunnen per laboratorium verschillen, maar een aseptische techniek is altijd vereist. Chirurgie is een vaardigheid die men leert. Hoe meer ingrepen u uitvoert, hoe groter uw vertrouwen en succes zullen zijn bij het handhaven van de aseptische techniek.Na het bekijken van deze video heeft u een idee van hoe de principes van aseptische techniek worden toegepast bij operaties aan knaagdieren. Elke operatie heeft zijn eigen specifieke technische vereisten, maar de principes van asepsis zijn altijd van toepassing.

principles-of-rodent-surgery-for-the-new-surgeon

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

Stereotaxische operatie aan knaagdieren zorgt voor doelgerichte toediening van geneesmiddelen of elektrische stimulatie en opnamen in wakker gedragen dieren. In deze video presentatie zullen we zien de laatste procedurele verfijningen aan deze langdurige procedure die met succes een verbeterde overleving en verminderde post-operatieve gewichtsverlies.

Knaagdier stereotaxische Chirurgie en Dierenwelzijn Outcome Verbeteringen voor Behavioral Neuroscience

Dit protocol toont injectie van een retrogradely vervoerbare virale vector in rat ruggenmerg weefsel. De vector is overgenomen in de synaps en vervoerd naar de cel lichaam van doel neuronen. Dit model is geschikt voor retrograde tracering van belangrijke spinale trajecten of targeting cellen voor gen-therapie-toepassingen.

Directe inspuiting van een lentivirale Vector hoogtepunten meerdere Motor trajecten in het ruggenmerg Rat

Dit protocol beschrijft een reproduceerbare benadering van gezichtszenuwchirurgie in het rattenmodel, inclusief beschrijvingen van verschillende induceerbare patronen van letsel.

Facial Nerve Surgery in the Rat Model to Study Axonal Inhibition and Regeneration

Hier wordt een stereotactische procedure beschreven die zich kan richten op uitdagende en moeilijk bereikbare hersengebieden (vanwege ruimtelijke beperkingen) met behulp van een schuine coronale benadering. Dit protocol is aanpasbaar aan zowel muis- als rattenmodellen en kan worden toegepast op diverse neurowetenschappelijke toepassingen, waaronder canule-implantatie en micro-injecties van virale constructies.

Aanpasbare schuine stereotactische benadering voor veelzijdige neurowetenschappelijke technieken

Tot op heden wordt de ontwikkeling van bijschildklier (PG) identificatiemethoden beperkt door het gebrek aan diermodellen in preklinisch onderzoek. Hier stellen we een eenvoudig en effectief rattenmodel op voor intraoperatieve PG-beeldvorming en evalueren we de effectiviteit ervan door ijzeroxidenanodeeltjes te gebruiken als een nieuw PG-contrastmiddel.

Oprichting van een eenvoudig en effectief rattenmodel voor intraoperatieve beeldvorming van bijschildklieren

Reparatie van de slagader in een muismodel na injectie zorgt ervoor dat het bloed weer naar de slagader stroomt zonder de verdeling van het geïnjecteerde materiaal negatief te beïnvloeden. Reparatie op de injectieplaats vergemakkelijkt volgende injecties via dezelfde slagader en voorkomt cerebrale ischemie bij muizenstammen die geen volledige Circle of Willis hebben.

Het vergemakkelijken van herhaalde intracarotisinjecties in muismodellen door een nieuwe techniek voor het herstellen van de injectieplaats

Dit manuscript introduceert een gestandaardiseerd protocol voor een 5/6 nefrectomie door middel van scherpe bipolectomie via middellijnlaparotomie in een rattenmodel, met als doel een toestand van nierinsufficiëntie te induceren via nierparenchymreductie met een grote mate van methodische precisie en een laag risico op technische fouten.

5/6 Nefrectomie met behulp van scherpe bipolectomie via middellijnlaparotomie bij ratten

Hier presenteren we twee protocollen voor de registratie van micro-elektrocorticografie met hoge dichtheid (μEcoG) bij ratten en muizen, inclusief chirurgische, implantatie- en registratiemethoden. μECoG-opnames worden uitgevoerd in combinatie met laminaire polytrode-opname in de auditieve cortex van de rat of met optogenetische manipulatie van neurale activiteit in de somatosensorische cortex van de muis.

Multischaalonderzoek van corticale verwerking door integratie van laminaire polytrodes en optogenetica met micro-elektrocorticografie bij knaagdieren

De komst van site-specific recombinase (SSR) technologie en het Cre / lox systeem heeft geleid tot tal van ontwikkelingen in de moleculaire biologie, en heeft zichzelf bewezen als een waardevol instrument voor de beoordeling van gen-functie in transgene dieren. Dit interview bespreekt het mechanisme van de site van de specifieke recombinatie door cyclisatie recombinase (Cre) en hoe het gebruik van dit enzym heeft geleid tot de ontwikkeling van voorwaardelijke mutagenese, hetgeen aanzienlijke...

Principes van site-specifieke recombinase (SSR) Technologie

Ondersteund vlakke bilagen zijn krachtige instrumenten die kunnen worden gebruikt om de moleculaire interacties in een immunologische synaps model. Hier tonen we methoden voor het verankeren van celadhesie eiwitten waarvan bekend is dat moduleren synapsvorming naar de bovenste folder van de lipide bilyer en synapsvorming met behulp van TIRF microscopie visualiseren.

Ondersteunde Planar dubbellagen voor de vorming van studie van immunologische synapsen en Kinapse

Leer de principes van aseptische chirurgie bij knaagdieren voor beginnende onderzoekers. Deze methode behandelt steriele velden, voorbereiding van dier en chirurg, en postoperatieve zorg om infectie te voorkomen.

Principes van Knaagdieren Chirurgie voor de Nieuwe Surgeon

Meer video's verkennen