Name: Micro-dissectie van hersenen van de rat voor RNA of eiwit-extractie uit specifieke hersengebieden regio (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-08-30T00:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 31 s
Description: Leer micro-dissectie van rattenhersenen voor RNA- en eiwitextractie uit specifieke hersengebieden. Deze methode behoudt de integriteit van weefselmonsters voor neurowetenschappelijk onderzoek naar neurodegeneratieve ziekten.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Stap 1 Offer van de rat volgens de vastgestelde protocollen. Haal de hersenen uit de schedel en het in ijs spoel koud DEPC behandeld Milli Q water op elk oppervlak bloed te verwijderen. Stap 2 Plaats op koude metalen plaat. Snijd de hersenen bi-half in de rechter-en linker hersenhelft. <img src="/files/ftp_upload/old/269_2008_7_19_3/269_Figure-01.png" alt="269_Figure-01" width="474" height="224" /> Figuur 1. Het snijden posities van de mediale zicht van de rat halfrond Stap 3 Verzamel de bulbus olfactorius direct na de eerste snede. Flash bevriezen het model in vloeibare stikstof en bewaar bij -80 ° C. <img src="/files/ftp_upload/old/269_2008_7_19_4/269_Figure-02.png" alt="269_Figure-02" width="564" height="145" /> Figuur 2. Bulbus olfactorius dissectie Stap 4 Verzamelen van de frontale cortex direct na de tweede snede, met behulp van een mes en een tang Dumont nr. 5. Flash bevriezen het model in vloeibare stikstof en bewaar bij -80 ° C. <img src="/files/ftp_upload/old/269_2008_7_19_5/269_Figure-03.png" alt="269_Figure-03" width="566" height="220" /> Figuur 3. Frontale cortex dissectie Stap 5 Verzamel de striatum (nucleus caudatus) rechts na de derde gesneden met behulp van twee Dumont No.5 tang. Flash bevriezen het model in vloeibare stikstof en bewaar bij -80 ° C. <img src="/files/ftp_upload/old/269_2008_7_19_6/269_Figure-04.png" alt="269_Figure-04" width="555" height="208" /> Figuur 4. Striatum (nucleus caudatus) dissectie Stap 6 Voor het verzamelen van de hippocampus, opgemaakt de ventrale zijde van de hersenen en verwijder vervolgens middenhersenen naar de hippocampus bloot te leggen. Ontleden van de hippocampus van de cortex met behulp van twee Dumont No.5 tang. Flash bevriezen het model in vloeibare stikstof en bewaar bij -80 ° C. <img src="/files/ftp_upload/old/269_2008_7_19_7/269_Figure-05.png" alt="269_Figure-05" width="559" height="191" /> Figuur 5. Hippocampus dissectie

<ol><li>Palkovits, M. Maps and guide to micro-dissection of the rat brain. , Elsevier. New York. (c.1988).</li>
<li>Swanson, L. W. Brain maps: structure of the rat brain. 3rd revised edition. , Elsevier Academic Press. (2004).</li>
</ol>

De dieren werden behandeld volgens het protocol voor het gebruik van dierlijke in het onderzoek goedgekeurd door het Comite over het gebruik van levende dieren in Onderwijs en Onderzoek (CULATR) in de Universiteit van Hong Kong en volgens de National Institutes of Health richtlijnen voor het gebruik van dieren.

Verschillende gebieden van de hersenen associëren met verschillende neurodegeneratieve ziekten. Bijvoorbeeld, frontale cortex en het striatum verband met de ziekte van Parkinson s, terwijl hippocampus betrekking heeft met de ziekte van Alzheimer. Precieze micro-dissectie van de hersenen laat ons toe om het mRNA en eiwit veranderingen in de aangetaste regio te detecteren nauwkeuriger.

<table><tbody><tr><td>Microscoop</td><td>Olympus Corporation</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dissectiegereedschap</td><td></td><td></td><td>Metalen plaat, pincetten, mesje, etc. Individueel in aluminiumfolie gewikkeld en acht uur lang verhit bij 180oC om RNase te elimineren. Voor gebruik ijskoud gemaakt. </td></tr></tbody></table>

micro-dissectie van hersenen van de rat voor rna of eiwit-extractie uit specifieke hersengebieden regio

Micro-dissection of Rat Brain for RNA or Protein Extraction from Specific Brain Region

Micro-dissectie van hersenen van de rat in verschillende regio&#39;s is van groot belang voor de studie van verschillende neurodegeneratieve ziekten. Deze video toont micro-dissectie van de vier grote gebieden van de hersenen zijn reukorgaan, frontale cortex, striatum en de hippocampus in de hersenen van de rat verse weefsel. Nuttige tips voor snelle verwijdering van de desbetreffende regio&#39;s om RNA en eiwit afbraak van het weefsel te voorkomen worden gegeven.

Micro-dissectie van hersenen van de rat voor RNA of eiwit-extractie uit specifieke hersengebieden regio

Microdissectie van de rattenhersenen in verschillende regio's is uiterst belangrijk voor de studie naar diverse neurodegeneratieve ziekten. Deze video demonstreert ...

Hallo, ik ben Quint van de Afdeling Anatomie van de Universiteit van Hong Kong. Vandaag ga ik uitleggen hoe we het rattenbrein micro-dissecteren in vier hoofddelen: de prefrontale cortex, het striatum en de hippocampus. Hier is een schematische afbeelding die laat zien hoe we het brein dissecteren.Er zijn drie sneden. Het eerste snijvlak bevindt zich bij de verbinding tussen de olfactorische bol en de frontale cortex. Het tweede snijvlak bevindt zich bij de conjunctie van het corpus callosum.Het derde snijvlak bevindt zich bij de anterieure punt van de pharynx. Na drie sneden zijn er vier hersenbanen. Aan de linkerzijde bevindt zich een factor.Aan de rechterkant bevindt zich de hippocampus. De frontale cortex ligt tussen de eerste en de tweede snede. Codering nuclease, dat deel uitmaakt van het stratum, bevindt zich tussen de tweede en de derde snede van de verse hersenhelft.Het is zeer belangrijk om eerst het corpus callosum en de pharynx te herkennen. Vervolgens kunnen we de drie sneden eenvoudig lokaliseren. Het eerste snijvlak bevindt zich op de verbinding tussen een olfactory bulb en de frontale cortex.Het tweede snijvlak bevindt zich bij een ion van het corpus callosum, en he

micro-dissection-rat-brain-for-rna-or-protein-extraction-from

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

RNA-expressieprofilering van specifieke hersenregio's bij muizen vereist een nauwkeurige en reproduceerbare strategie voor weefselverzameling. Hier wordt een protocol beschreven dat gebruikmaakt van zowel coronale hersensecties als microdissectie met behulp van een weefselpons. De opbrengst en kwaliteit van het totale RNA dat uit de resulterende monsters is verkregen, bevestigen het nut van de beschreven methode.

Niet-Laser Capture Microscopie Aanpak voor de Microdissection van Discrete Mouse Brain Regio&#39;s voor Totaal RNA isolatie en Downstream next-generation sequencing en Gene Expression Profiling

We beschrijven een rat model van post-traumatische stress-stoornis (PTSS) dat de aanhoudende veranderingen in neuro-endocriene functie en de vertraagde lange termijn, overdreven angst reactie, kenmerkend voor PTSS-patiënten laat zien. Het diermodel en de hier beschreven methoden zijn nuttig voor het correleren van biomarkers in hersenkernen, die mechanisch maar kan niet worden gemeten in patiënten met biomarkers in perifere witte bloedcellen, die kan.

Biomarkers in een diermodel voor het openbaren van Neural, hematologische, en gedragsmatige correlaten van PTSS

This video demonstrates the process of isolating brain microvessels from euthanized rats. It includes the dissection of the brain, cleaning of the tissue, and mechanical digestion, followed by repeated centrifugation to isolate the pure fraction of microvessels.

A Method for the Isolation of Neurovascular Units from Rat Brain

This video demonstrates the detection of serotonin receptor RNA synthesis using oligonucleotide probes in rat brain tissue affected by serotonin syndrome. The protocol includes tissue pretreatment, probe hybridization, and enzymatic detection to visualize and quantify serotonin receptor RNA expression under a microscope.

In Situ Hybridization Using Oligonucleotide Probes to Study RNA Expression in Rat Brain Sections

Genexpressie analyse van een subset van cellen in een specifiek weefsel vormt een grote uitdaging. In dit artikel wordt beschreven hoe u een hoge kwaliteit totaal RNA van een specifieke cel populatie te isoleren door het combineren van een snelle immunolabeling methode met lasermicrodissectie.

RNA isolatie van de Cel specifieke subpopulaties met behulp van laser-capture Microdissection Gecombineerd met Rapid immunolabeling

Hier wordt een methode voor het isoleren van de rat hersenen microvessels en voor de bereiding van de eindmonsters membraan beschreven. Dit protocol heeft het duidelijk voordeel van het produceren van verrijkte microvessel monsters met aanvaardbare eiwit van individuele dieren opbrengst. Steekproeven kunnen vervolgens worden gebruikt voor analyses van de robuuste proteïne in de hersenen microvasculaire endotheel.

Een eenvoudige en reproduceerbare methode te bereiden membraan monsters van vers geïsoleerde Rat hersenen Microvessels

We bieden een protocol voor isolatie van Microglia uit verschillende ontleed gebieden van een volwassen muis hersen halfrond, gevolgd door semi-geautomatiseerde bibliotheek voorbereiding voor diepe eencellige RNA-sequencing van volledige lengte transcriptomes. Deze methode zal helpen om functionele heterogeniteit van Microglia in gezondheid en ziekte te verhelmaken.

Isolatie van regiospecifieke Microglia van één volwassen muis hersen halfrond voor diepe eencellige RNA-sequencing

Deze procedure beschrijft de verzameling van discrete bevroren hersengebieden om hoogwaardige eiwitten en RNA te verkrijgen met behulp van goedkope en algemeen beschikbare tools.

Verzameling van bevroren knaagdierhersengebieden voor downstreamanalyses

We presenteren een hands-on, stap-voor-stap, snel protocol voor het verwijderen en ontleden van discrete gebieden van vers hersenweefsel bij muizen. Het verkrijgen van hersengebieden voor moleculaire analyse is routine geworden in veel neurowetenschappelijke laboratoria. Deze hersengebieden worden onmiddellijk bevroren om transcriptomische gegevens van hoge kwaliteit te verkrijgen voor analyse op systeemniveau.

Microdissectie van muizenhersenen in functioneel en anatomisch verschillende regio's

De combinatie van laser capture microdissectie en microfluïdische RT-qPCR biedt anatomische en biotechnische specificiteit bij het meten van het transcriptoom in enkele neuronen en glia. Het toepassen van creatieve methoden met de biologische benadering van een systeem voor psychiatrische ziekten kan leiden tot doorbraken in begrip en behandeling, zoals de neuro-inflammatie antireward hypothese bij verslaving.

Onderzoek naar drivers van antireward in verslavingsgedrag met anatomisch specifieke eencellige genexpressiemethoden

Leer micro-dissectie van rattenhersenen voor RNA- en eiwitextractie uit specifieke hersengebieden. Deze methode behoudt de integriteit van weefselmonsters voor neurowetenschappelijk onderzoek naar neurodegeneratieve ziekten.

Micro-dissectie van hersenen van de rat voor RNA of eiwit-extractie uit specifieke hersengebieden regio

Meer video's verkennen