Cecal Ligatie Puncture Procedure

Hallo, mijn naam is Miguel Toscano van het laboratorium van Dr. Dena in de afdeling Microbiologie en Hematologie aan de Temple University. Vandaag laten we u zien hoe u de iCal-aanklacht en punctiemodel in de C 57 Black Seas Muisstam kunt instellen. We gebruiken dit model in ons laboratorium om humane sepsis na te bootsen.

Kortom, dit model bestaat uit een punctie van de seum die de afgifte van fecale materialen in de buikholte mogelijk maakt om een polymicrobiële sepsis te produceren, waardoor een exacerbeerde immuunrespons wordt gegenereerd. In dit model worden veel organen en verschillende celtypen onomkeerbaar beschadigd. Dat kan uiteindelijk de dood van het dier veroorzaken.

Dus laten we beginnen. Het verdoven van de muis. De eerste stap is het verdoven van het dier door intraperitoneaal te injecteren.

Een mengsel, één op één van Ketomine en xylazine. Om te voorkomen dat je gebeten wordt door de muis, om te voorkomen dat je hem pijn doet, moeten we de muis met één hand bij de staart grijpen. Met de andere hand drukken we hem tegen de vloer.

Vervolgens kunnen we de muis bij de achterkant van het hoofd grijpen en het dier op zijn rug draaien om de buik te onthullen. Met een insulinesyringe van 29 gauge injecteren we 20 tot 30 microliters van het verdovingsmiddel in de buikholte. De muis voorbereiden op de procedure, grijpen we de achterkant van de muis en scheren we zijn buik. Door de staart en/of het been van de muis te drukken.

We controleren of de muis niet gevoelig is voor pijn, vervolgens wordt de buik gedesinfecteerd. Eerst door schrobben met Betadine-oplossing, gevolgd door afvegen met een isopropylalcoholdoek gedurende ten minste één minuut. De laparotomie oefenen Om een laparotomie te oefenen, tillen we de huid in het midden van de buik op met de pincetten en maken we een kleine incisie van ongeveer een centimeter lengte.

Til vervolgens het perineum op en oefen nog een kleine incisie uit om de buikholte bloot te leggen. Gebruik gebogen pincetten om het peritoneale membraan vast te houden. Identificeer en leg het blinddarm bloot door het door het peritoneale membraan te laten passeren.

Plaats het over de buik. Nu is het moment van de ligatie. Dit is een belangrijke factor.

Om de ernst van het model te bepalen, kunnen we de ernst van de procedure moduleren. Door de uitbreiding van de ligatie ontwikkelen muizen een mildere sepsis. Als ligatie dichter bij het uiteinde van het blinddarm wordt gemaakt, een sepsis van gemiddelde ernst als het in het midden wordt gedaan en een ernstige sepsis als het dichter bij de ileocecale klep wordt gedaan, zal de ernst van de procedure worden weerspiegeld door het percentage sterfte.

Ligatuur nooit de ileocecale klep. Maak nu de ligatie met zijden naad met een dubbele knoop om deze strak te maken, maak de punctie Houd het blinddarm vast en maak voorzichtig een punctie dicht bij de ligatieplaats en maak een andere punctie dichter bij het uiteinde van het blinddarm. Het membraan van het blinddarm is zacht en zal heel gemakkelijk worden geperforeerd.

Met naalden van verschillende diktes en het maken van een of twee perforaties, kunnen we ook de ernst van het model moduleren. De enkele of dubbele punctiemethode die hier wordt getoond, is een alternatieve techniek voor de klassieke door-en-door sequel-punctie. Het voordeel van het gebruik van de enkele of dubbele punctiemethode is dat men de hoeveelheid uitgedreven uitwerpselen beter kan beheersen wanneer ze wordt geperst.

Houd het blinddarm met beide vingers vast en extrudeer voorzichtig het blinddarm om een zeer kleine hoeveelheid uitwerpselen te extraheren. De laparotomie sluiten, Til vervolgens het peritoneum op en plaats het blinddarm voorzichtig terug in de buikholte.

Wees uiterst voorzichtig om accidentele prikken van het blinddarm te voorkomen Met de pincetten wordt het gebruik van grotere pincetten aanbevolen. Nu is het tijd om de buikholte te sluiten. Met zijden naad is het erg belangrijk dat u ervoor zorgt dat het erg goed is gesloten.

We beginnen aan de ene kant van de wond waar we een knoop maken. Blijf naaien tot aan de andere kant door de zijde onder de lus van de vorige punctie te laten passeren. Om de huid te sluiten, kunnen we Mitchell-wondclips of reflexclips gebruiken met het juiste gereedschap om de clips te sluiten.

Plaats zoveel clips als nodig is om ervoor te zorgen dat de wond is gesloten. Muizen reanimeren door subcutaan één milliliter voorverwarmde zoutoplossing te injecteren. Met behulp van een naald van 25 gauge zal deze maatregel voor vochttoediening de hyperdynamische fase van sepsis induceren en de procedure afmaken.

Plaats de muis onder een infrarood verwarmingslamp of alternatief op een verwarmingspad totdat de muis hersteld is van de verdoving. Zorg voor voedsel en water op de bodem van de kooi en bewaak de dieren om de acht tot 12 uur op tekenen van ziekte. Injecteer buprenorfine subcutaan voor postoperatieve pijnstilling.

Een ander analgeticum om te gebruiken is T.Tramadol. Tekenen van sepsis, symptomen van sepsis zijn koorts, lethargie, pelo, erectie, diarree, samenkropen en malaise. Zeer zieke dieren vertonen een ernstige daling van de lichaamstemperatuur en bewegen nauwelijks om te lijden te voorkomen.

Ze moeten in dit stadium worden geëuthanaseerd H.Dus dit is hoe we het sickle-ligatie- en punctiemodel uitvoeren. Hopelijk heeft u genoten van de demonstratie van deze procedure en het nuttig gevonden voor uw onderzoek voordat u met uw dierstudie begint. We raden u ten zeerste aan oude of ongebruikte geest te gebruiken voor training om de juiste ernst van uw experimenten vast te stellen door de lengte van de ligatie, de dikte van de naald en het aantal puncties aan te passen.

Met dat gezegd, tot ziens.