Diagnostische autopsie en Selected Tissue en Sample Collection bij ratten en muizen

Het algemene doel van deze procedure is om een basisrodent necropsie uit te voeren. Dit wordt bereikt door eerst basisinformatie over het dier vast te leggen. De tweede stap van de procedure is om de ingewanden te onderzoeken.

De derde stap is het verzamelen van monsters zoals organen of mesenterische lymfeklieren. Uiteindelijk kan de gezondheidsstatus van een dier worden bepaald door middel van histopathologie of andere technieken. Over het algemeen zullen mensen die nieuw zijn in het uitvoeren van een necropsie het moeilijk hebben omdat de anatomie van knaagdieren op de werkvloer wordt geleerd.

Deze methoden kunnen helpen om belangrijke vragen over de gezondheid van dieren in een onderzoekskolonie te beantwoorden. Visuele demonstratie van deze technieken is essentieel omdat het tijd kost om de locaties van verschillende weefsels te leren en om normaal weefsel te onderscheiden van abnormaal weefsel. Voordat het dier wordt gedood, verzamel informatie over zijn geschiedenis en noteer zijn huidige kenmerken zoals fysieke conditie, gedrag, geslacht, leeftijd, gewicht, ras, enzovoort.

Dit record is van vitaal belang voor de persoon die de weefsels zal onderzoeken voordat het dier wordt gedood. Zorg ervoor dat geschikte persoonlijke beschermingsmiddelen worden gebruikt. Bereid een dissectie, pincet, schaar, labels voor containers, fixatief, media en verzamelvaten voor.

Nadat het dier is gedood, beoordeelt u zijn lichamelijke toestand, controleert u op huid- en vachtafwijkingen, uitputting en uitdroging. Zoek ook naar bewijs van kunstmatige manipulaties, implantaten of chirurgische littekens op het dier. Gebruik vervolgens een dissectiesmicroscoop om alle externe openingen in detail te onderzoeken.

Deze omvatten de oren, ogen, neus, mond, anus en geslachtsdelen. Leg nu het dier op zijn rug op het dissectiebord, til zijn huid op met pincet en gebruik schaar om de huid open te snijden van de anus tot de kin. Draai vervolgens de huid opzij en snijd door de buikwand en ribbenkast.

Leg de thoracale ingewanden bloot door twee sneden te maken langs elke kant van de ribbenkast. Snijd het diafragma door. Verwijder vervolgens de ribbenkast door over de bovenkant van het borstbeen te snijden.

Bekijk nu de blootgestelde thoracale en abdominale organen. Let op eventuele kleurveranderingen, ongewone geuren, grootte, verschillen en ontbrekende of ontwrichtende organen. Onderzoek de consistentie van de orgaanoppervlakken en noteer eventuele weefselmassa's of met vloeistof gevulde zakken.

Let ook op de aanwezigheid van vloeistof in beide holtes. Ga door met het onderzoek van het maagdarmkanaal. Onderzoek het mesenterium op vergrote lymfeklieren of weefselmassa's.

Beschrijf de inhoud van het maagdarmkanaal en controleer zorgvuldig op verdikte wanden, massa's of bloeding. Om het binnenste van de nieren te onderzoeken, gebruikt u een mes om een longitudinale sectie van de linker nier en een dwarsdoorsnede van de rechter nier uit te voeren, niet in het midden van de middenlijn. Controleer het parenchym op eventuele afwijkingen.

Inspecteer nu het urogenitale systeem bij mannen. Identificeer de zaadblaasjes, de teelballen, de epididymis, de urineleiders en de perusaalklieren bij vrouwen. Identificeer de baarmoeder, de eierstokken en de urineleiders.

Onderzoek het urogenitale systeem op blokkades, vloeistofzakken, bloeding of andere afwijkingen. Nadat u deze onderzoeken hebt voltooid, isoleert en verwijdert u de doelorganen voor verder onderzoek. Meestal worden het hart, de lever, de nieren en de milt verzameld zodra ze worden verwijderd.

Dompel elk orgaan onder in een fixatief of volg de eerste stappen van een protocol dat deze weefsels vereist, zoals bevriezing of immunohistochemie om adequate fixatie te krijgen. Over het algemeen worden weefsels ondergedompeld in een conserveermiddel zoals 10%NBF in een verhouding van 20 volumes fixatief tot één volume weefsel. Wanneer u met ratten werkt, verzamelt u het bronchiale aspergaat voordat u het nasale aspergaat verzamelt.

Begin met het reflecteren van de huid in onderhuidse weefsels weg van het cervicale gebied, waardoor de speekselklieren en de cervicale musculatuur worden blootgelegd. Verwijder vervolgens die weefsels om de luchtpijp bloot te leggen. Maak een incisie van drie millimeter in de luchtpijp en steek een pipet geladen met één milliliter monstervloeistof in de lumen van de luchtpijp, gericht op het kwartier.

Spoel langzaam de monstervloeistof drie keer door de luchtpijp en de longen. Trek vervolgens de monstervloeistof terug en verwijder de pipet uit de luchtpijp. Niet al het vocht zal terugkeren in de pipet.

Herhaal daarom het proces als er meer vloeistof nodig is. Voor testen bij muizen. Om een nasofaryngeel aspergaat of bronchiaal aspergaatmonster te nemen, opent u de nasale farynx ATU met gesteriliseerde schaar.

Snijd de temporale kaakgewricht en vouw de onderkaak weg van de bovenkaak, waardoor de nasale farynx atu wordt blootgelegd om het nasale aspergaat te verzamelen. Steek een pipet geladen met één milliliter monstervloeistof in de nasale farynx atu van de muis of in het tracheaal lumen van de rat. De pipet moet richting cran worden gericht en worden ingedrukt.

Zodat het punt de nasale verhemelte raakt. Eenmaal daar injecteert u langzaam de monstervloeistof. Terwijl de vloeistof de neusholte binnenkomt, vormt deze meniscussen bij de neusopening en zou ook zichtbaar moeten zijn door het doorschijnende orale verhemelte.

Als de vloeistof echter via de mond uitstroomt, richt u de pipet opnieuw. Zodra het volledig is geïnjecteerd, trekt u de monstervloeistof vanuit de neusholte de pipet in en verwijdert u de pipet. Begin met het vastpakken van de luchtpijp met pincet en snij er net boven het pincet doorheen.

Trek vervolgens voorzichtig de luchtpijp omhoog en snij weefselverbindingen door totdat de