Waarom is nulhypothesetoetsing van serumfluorescentemarkerniveaus belangrijk voor targetvalidatie?

Nulhypothesetoetsing van serummarkerniveaus maakt een objectieve bepaling mogelijk van de vraag of interventies de intestinale permeabiliteit significant veranderen, wat bijdraagt aan een robuuste targetvalidatie en het aantal fout-positieven in de vroege ontdekkingsfase vermindert.

Hoe past de isolatie van het pcLoop-segment in de ontdekkingspijplijn?

Het isoleren van het pcLoop-segment maakt een gecontroleerde beoordeling van de barrièrefunctie in een gedefinieerde regio mogelijk, wat mechanistische studies vergemakkelijkt en een directe koppeling tussen moleculaire targets en functionele uitkomsten in de discovery-workflow mogelijk maakt.

Wat maken kwantitatieve serummetingen van fluorescerende markers mogelijk in R&D?

Kwantitatieve serummetingen leveren reproduceerbare, schaalbare resultaten van de intestinale permeabiliteit, waardoor vergelijkingen tussen verbindingen, genetische modellen en experimentele condities mogelijk zijn voor datagestuurde besluitvorming.

Waarom zijn replicatie-eisen cruciaal voor cross-functionele samenwerking bij permeabiliteitsstudies?

Replicatie waarborgt dat waargenomen veranderingen in permeabiliteit robuust en reproduceerbaar zijn, wat de afstemming tussen discovery-, farmacologie- en translationele teams vergemakkelijkt en het vertrouwen in het verder ontwikkelen van kandidaten ondersteunt.

Welke statistische analysemogelijkheden zijn vereist voordat serummarker-detectieworkflows worden geïmplementeerd?

Statistische analyse moet de vergelijking van serummarkerniveaus tussen groepen ondersteunen, variabiliteit controleren en het detecteren van significante verschillen mogelijk maken, om een betrouwbare interpretatie en ondersteuning bij portfoliobeslissingen te waarborgen.

Generation of Mouse Proximal Colon Loop Model: A Surgical Procedure to Generate Proximal Colon Loop and Measure Intestinal Permeability by Detection of Fluorescent Markers in Serum Following Intraluminal Injection

JoVE Encyclopedia of Experiments

Biologie

0 weergaven • 4:00 min • July 8th, 2025

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

During pathological conditions, impaired intestinal epithelial tight junction barrier causes increased permeation of harmful luminal contents into systemic circulation, resulting in increased systemic inflammation.

To assess intestinal permeability by generating an intestinal proximal colon loop or pcLoop model, prep an anesthetized mouse in the supine position. Perform a midline abdominal incision. Gently exteriorize the cecum, terminal ileum, and proximal colon, placed over wet gauze to maintain organ hydration.

Locate the proximal colon’s mesocolon — membranous folds of peritoneum containing blood vessels. Identify two sites appropriately apart in the mesocolon free of blood vessels, distal from the cecum, to be ligated. Perforate the sites.

Creating the ligature in the selected sites, make incisions close to the ligated sites to isolate a pcLoop segment without disturbing the blood supply. Flush the segment with buffer to remove any fecal matter.

Surgically tie up the cut ends of the flushed segment. Inject desired fluorescent-marker solution into the colon segment lumen. Return the organs into the abdominal cavity. Close the surgical incision and allow the mouse to recover.

Following injection, reduced intestinal barrier integrity facilitates increased paracellular transport of the fluorescent marker molecules from the intestinal lumen into the blood circulation, which can be detected in the serum fraction of blood to measure the intestinal permeability.

Prepare the mouse for surgery and exteriorize the caecum. Using wet cotton swabs, exteriorize the entire ileum and place it on top of a wet cotton gauze. Identify the proximal colon into the blood supply located in the mesocolon. Mobilize the proximal colon, and create the first ligature in an area free of vessels in the mesocolon, at about 0.5 centimeters distal from the caecum.

Measure 2 centimeters from the first ligature, and create a second ligature at an area free of blood supply in the mesocolon. Using fine scissors, carefully cut next to each ligation to isolate a 2-centimeter-long pcLoop.

Gerelateerde video's

0 Bekeken

Laatst bijgewerkt: 1 augustus 2026

Generation of Mouse Proximal Colon Loop Model: A Surgical Procedure to Generate Proximal Colon Loop and Measure Intestinal Permeability by Detection of Fluorescent Markers in Serum Following Intraluminal Injection

Overzicht

Belangrijkste studiecomponenten

Wetenschappelijk vakgebied

Achtergrond

Doel van de studie

Gebruikte methoden

Belangrijkste resultaten

Conclusies

Veelgestelde vragen

Industriële Relevantie voor Directie

Strategische Toepassingen in Biofarmaceutische R&D

Vroege Ontdekking & Targetvalidatie

Screening & Assayontwikkeling

Translationeel & Preklinisch Onderzoek

Pipeline- & Workflowintegratie

Operationele & Bedrijfsimpact

Overwegingen voor de implementatie

Veelgestelde vragen over biofarmaceutica

Overaccumulation van de Ileectomy-geïnduceerde gal in de darm van de muis

De cel van de stam van de intestinale isolatie en cultuur in een varkens Model van gesegmenteerde kleine intestinale ischemie

Menselijke Colonoid Monolayers studie van interacties tussen ziekteverwekkers, Commensals en Host intestinaal epitheel

Generating PDOX Mouse Model of Colorectal Cancer: Studying Progression of Colorectal Cancer in a Murine Model

Mouse Ileal Loop Model: A Surgical Model to Study Intestinal Permeability in the Mouse

A Technique to Generate a Murine Model of Dextran Sulfate Sodium-Induced Colitis

Een genetisch ontwikkeld muis model van sporadische colorectale kanker

Een muismodel van intestinale gedeeltelijke obstructie

Lymfkliertest distale colostoma, een nieuw Model van afleiding Colitis in C57BL/6 muizen

Oprichting van Colon Anastomosis in muizen