T-doolhof Gedwongen Afwisseling en links-rechts Discriminatie Taken voor de beoordeling van Werken en Reference geheugen in Muizen

De gemodificeerde Automatic teammates-app met trackingsysteem wordt getoond. Deze app is geconstrueerd met witte plastic rails met wanden van 25 centimeter hoog. De MA is in zes gebieden verdeeld door automatische draden richting gebied A. Eén hiervan is een STA-compartiment.

S twee is een overeenkomst van de teamgenoten. A één onder A twee zijn respectievelijk de linker- en rechterarmen. Gebieden P één onder P twee vergelijken de verbindingsgangen van gebieden A één of A twee naar A één, zodat de muis kan terugkeren naar het statische compartiment.

De deuren openen hier in deze film automatisch naar beneden ter demonstratie; één van de deuren wordt handmatig bediend. Deze verbeterde bediening stelt ons in staat om INB micro SSIS te gebruiken in de moleculaire fysiologie en genetische technieken tijdens de prestaties van teamgenoten. De N, met een periode om te dispenseren als kruisperiode, wordt gebruikt als voedselbeloning, gevolgd door een voedseldispenserfles en vervolgens de weggegooide fles.

U ziet het pellet dat uit de voedseldispenser op de voedseltray valt en vervolgens onder het terrein wordt afgevoerd. De muis wordt gedetecteerd door de sensor en geregistreerd door een computer. In de praktijk doseert het programma van het videotracking-systeem de pellets automatisch, zodat u tot het einde van de sessie niets hoeft te doen. De CCD-camera is boven de operator gemonteerd om het gedrag van de muis door de computer als beeld vast te leggen, waarbij de apparatus wordt verlicht bij 100% helderheid.

Wij raden aan om de apparatuur in een geluidsdichte ruimte te plaatsen om omgevingsgeluiden te verminderen. Begin één week voor de start van de sessies met het dagelijks wegen van de muizen en bied elke muis een kleine hoeveelheid voedsel aan om hen te laten wennen aan de procedure en aan het begin van de training. Voer een standaard dieet van CHO toe om 80% tot 85% van het gewicht bij vrije voeding gedurende het hele experiment te handhaven. De dag nadat het streefgewicht is bereikt, worden alle kooien met muizen ten minste 30 minuten voor aanvang van de eerste proef naar de geluidsdichte ruimte overgeplaatst om direct licht uit de kamer te vermijden. Vermijd het plaatsen van kooien op de bovenste plank om direct licht te voorkomen.

Voordat u de muizen in de operatoren plaatst, moet u de operatoren eerst afvegen met een tong, waarbij u uw superhypochloorwater opent om een bias op basis van ProAct-cues te voorkomen. Plaats vandaag zes gesloten geesten per muis in het centrum, waarbij elk van de zes Geboden één periode in elk plateau van de voedseldispensers krijgt. Plaats alle muizen in een individuele kooi in de Perus en laat ze vrij.

Verken de Perus met alle deuren gesloten gedurende 30 minuten. Begin één dag na arbitrage; de muizen ondergaan dagelijks een bloedafname met alle deuren gesloten en de pellet gedeponeerd in de voergoot. Plaats de muis in de linkerarm; indien de muis de pellet binnen vijf minuten consumeert (AOP's), verplaats de muis dan naar de rechterarm en begin de pre-training opnieuw. Deze trainingsprocedure wordt vijf keer per dag herhaald en voortgezet tot de muis ze heeft geconsumeerd.

In meer dan 80% van de gevallen werd de muis in het statische compartiment geplaatst. De deuren worden geopend en de muis krijgt eerst de keuze voor één arm, waarna hij zelfstandig terugkeert naar het startcompartiment. Vervolgens krijgt de muis in de toekomst opnieuw de keuze.

Nu wordt de arm tegenover de vierde arm gebeten. Vervolgens keert de muis zelfstandig terug naar de statische box en wordt de procedure herhaald. Dit wordt 10 keer per dag herhaald voor zowel de controlegroep als de experimentele muizen.

Op basis van deze criteria kunt u de muizen verder testen in de vertraagde retentietest door intervallen van 3, 10, 30 of 60 seconden in te voegen tussen de eerste keuze en de volledige keuze van de zelfstandige naamwoorden. Dit is een werkblad voor het registreren van de informatie voor deze taak, inclusief het unieke muis-ID, genotype, oormerkingspatroon en ruimte voor het handmatig registreren van de resultaten van het applicatieprogramma. Selecteer de plug TM online input project-ID.

Bijvoorbeeld, de sessie voor het invoeren van de naam van de hoofdlijn. Bijvoorbeeld, de testdatum, invoerparameters zoals de formule met de door camera C vastgelegde afbeelding, de uitsnijdijd en de grootte van de operator. Voer vervolgens het trial-id in.

Refereer bijvoorbeeld het stationnummer aan de bestandsnaam of deze taak en bepaal de naam via het vervolgkeuzemenu, voer het keuzenummer in, stel de tijdslimiet voor machinefouten in en bepaal de boetestraf. Stel vervolgens de waarden voor helderheid en contrast in met de vastgelegde afbeelding, gevolgd door een speciaal kort binair beeld. Controleer tot slot of de relevante regions of interest zijn verzameld en voltooi het patroon, zodat het programma gereed is voor testen.

Pak de muis voorzichtig op en plaats de muis in het startcompartiment. Klik op de startknop en maak de keuze voor de kracht. Na het starten kunt u live- en binaire beelden en laesies van de darm zien.

In dit geval was de proefpersoon ED vandaag in het veld met de rechterarm, de muis betrad de pagina en de deur stond open. Zodra de volledige keuze was gemaakt, werd de periode aan de linkerarm geleverd. Omdat de muis de linkerarm betrad, werd de respons als correct gemarkeerd.

De resultaten van de reacties worden weergegeven in het onderste lichtvenster op de monitor. Hier geeft de weergave van de voorbeeldbeelden in real-time aan dat de woorden gesloten zijn en geeft de gele cirkel de kruisperiode aan. Een muis wordt in een sessie per dag onderworpen aan 10 opeenvolgende trials.

De muis wordt dagelijks getraind om een gemiddelde van 80% correcte responsen te bereiken. Het percentage correcte responsen, de latentietijd om de sessie te voltooien, de afstand tot het niveau en het aantal remissie-fouten worden automatisch door het programma berekend. Na elke sessie wordt het dier teruggebracht naar zijn thuiskooi. Reinig de plaat naar de dispenser en veeg de platen af met een papieren handdoek; maak ze schoon met gedestilleerd water om een bias op basis van geursporen te voorkomen. Indien de controlegroep onder de experimentele muizen valt, zijn dit de criteria. Indien u de muizen verder wilt testen in de taak voor vertraagde retentie, selecteert u simpelweg het vertraagde bestand in de programma-instellingen en begint u de volgende sessie.

De procedure is enigszins vergelijkbaar met de taak voor positie, maar ongeacht of het de linker- of rechterarm is, is het altijd hetzelfde als in de taak voor postretentie en het toepassingsprogramma. Selecteer de referentiebestandsnaam voor deze taak en de naam van de muis uit het uitklapmenu, en plaats de muis in het startcompartiment. Klik op de startknop en de leidkeuze begint nu.

In dit geval wordt de geselecteerde arm altijd gevolgd door de periode. Een muis wordt gewoonlijk onderworpen aan 10 tot 20 opeenvolgende pogingen in een sessie per dag. Muizen worden dagelijks getraind om een criterium van gemiddeld 80% correcte responsen te bereiken.

De resultaten worden automatisch berekend na de muizen. Op basis van deze criteria kunnen aanvullende sessies met de muizen worden uitgevoerd om het retentiegeheugen te beoordelen, door de vertraging tussen de sessies te variëren, of om de gedragsactiviteit te beoordelen. Door de locatie van de lever over proeven en sessies heen naar de tegenovergestelde arm te verplaatsen, werd video gebruikt om dit proces te corrigeren door alpha gecompliceerde hetero M en gecontroleerd door type LI in de geforceerde automatiseringstaak.

Het resultaat toont aan dat het werkgeheugen van een mutant met een CBR-deficiëntie in de disc-taak is aangetast; muizen met deze mutatie ondervinden problemen bij het uitvoeren van deze taak. Zelfs na een vertraging van één maand vertoonden zij geen beperking in het bus-leren. De mutanten vertoonden echter een verminderde prestatie. De Teammates Test is een van de meest gebruikte gedragstests voor het beoordelen van het ruimtelijke en referentiegeheugen.

Bij knaagdieren hebben we het testapparaat verbeterd, wat verschillende voordelen biedt. Ten eerste openen de schuifdeuren automatisch, waardoor de muis na elke trial zelfstandig de S-box kan betreden. Deze automatisering van de MA vermindert de tijd en inspanning die nodig zijn om de dispensers voor water en voedsel handmatig te bedienen.

En in ons laboratorium kan één experiment door maximaal vier teamleden tegelijkertijd worden uitgevoerd. Ten tweede stelt de opstelling ons in staat om technieken te gebruiken waarbij bedrading vanaf de kop vereist is, zoals voor in vivo microdialyse, in vivo elektrofysiologie of in vivo optogenetica, doordat de schuifdeuren naar beneden openen. Tot slot is het doolhof zo ontworpen dat de muis alleen vooruit of opzij kan bewegen en niet achteruit, wat een vloeiende beweging van de muis mogelijk maakt.

In deze video stellen we dit aangepaste automatische teammate-apparaat en onze protocollen voor; dit is dr. Hiro Pash. In ons laboratorium zal Hirotaka in deze film de protocollen demonstreren met behulp van dit aangepaste geautomatiseerde apparaat. Hirotaka, wat was je eerste indruk van de teammate-test met dit verbeterde apparaat?

Mijn eerste indruk was dat de apparatuur en het softwareprogramma zeer eenvoudig in gebruik waren en dat de test gemakkelijk kon worden uitgevoerd. Denkt u dat iedereen deze apparatuur en dit programma kan bedienen of is er een speciale training nodig? Ik ben het gedeeltelijk hiermee eens.

Iedereen kan leren hoe de bedieningselementen moeten worden gehanteerd. Er is geen speciale training nodig om de testprocedures uit te voeren. Zijn er tips of zaken waar men op moet letten bij het uitvoeren van de test?

Ja. Ik zorg ervoor dat de motivatie voor voedsel dat in de massa wordt aangeboden op peil blijft door het lichaamsgewicht dagelijks te controleren. Individuele verschillen in motivatie kunnen leiden tot variaties in de prestaties van teamgenoten.