Name: De muis Gedwongen Swim Test (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-01-29T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 19 s
Description: Leer de gedwongen zwemtest bij muizen voor het voorspellen van antidepressieve effectiviteit. Deze methode kwantificeert ontsnappingsgerelateerde mobiliteit om gedragsreacties te analyseren.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Deze studie werd ondersteund door de subsidie ​​NiMH R01 MH091816 en R21 MH084043 aan TDG.

1. Materialen en Methoden 1.1. Het water tanks Het cilindrische tanks (30 cm hoog x 20 cm diameter) die nodig zijn voor de muis gedwongen zwemmen test (FST) in ons laboratorium zijn gemaakt van transparant plexiglas, omdat dit materiaal in staat is om de frequente bewegingen van de tanks en ongevallen beter dan glas te weerstaan. Het waterpeil is 15 cm van de bodem en moet worden aangegeven op de tank om ervoor te zorgen dat het volume van het water is consistent muizen. Het aantal tanks idealiter minstens twee keer zoveel als het aantal muizen getest op een moment, zodat het tweede water tank set gevuld kan worden, terwijl de eerste set in gebruik is. De afmetingen van de tanks moeten worden geselecteerd op een manier die de muizen niet in staat zal zijn om de bodem van de tank of aanraken, met hun poten of hun staarten, tijdens de zwemtest. De hoogte van de tank moet hoog genoeg zijn om de muizen te verhinderen te ontsnappen uit de tank. Let op:dat de diameter van de tank en de diepte van het water zijn belangrijke parameters die kunnen worden aangepast aan het gedrag van muizen (voor een gedetailleerde analyse van deze kwesties te zien 1-3) te veranderen. 1.2. Thermometer Een waterbestendig infrarood thermometer heeft de voorkeur, omdat een snelle meting van de temperatuur vermindert de hoeveelheid tijd die nodig is om de test uit te voeren. Toch zal een glazen kwik thermometer ook voldoende zijn voor deze taak. 1.3. Timer 1.4. Video-opname-apparaat We maken gebruik van een video camera wordt ondersteund door een statief. Omdat deze test meestal bestaat uit meerdere dieren wordt getest op hetzelfde moment, wordt live scoring zeer moeilijk zijn en is niet aan te raden. De video camera moet opnemen in hoge resolutie genoeg om een ​​beeld dat later gebruikt zal worden voor gedrag scoren maken. Zorg altijd dat er voldoende opname geheugen van de camera voordat Starting van de test. We maken gebruik van een videocamera die digitaal registreert zonder het gebruik van mechanische media (dwz video cassette), waardoor digitale overdracht van video&#39;s. Als er veel reflecties op de tanks, die zich kunnen voordoen in het laboratorium omgevingen met tl-verlichting overhead, kunt u een polariserende lens filter gebruiken met uw camera. 1.5. Dividers In ons lab hebben we twee sets van de verdelers (35 cm hoog x 22 cm breedte x 22 cm diepte). Deze zijn rechthoekig met drie wanden en worden gebruikt als zowel de achtergrond en als verdelers tussen de tanks om muizen te voorkomen dat het zien van elkaar tijdens de test en eventueel het veranderen van hun gedrag. Een set kan zwart zijn voor albino en licht gekleurde dieren, de andere set kan licht gekleurd voor donker gekleurde dieren worden om een ​​hoge contrast maken. De onderzoeker moet ervoor zorgen dat de oppervlakken van de verdelers niet overdreven reflecterend, zodat ze veranderen camerabeelden, of maken grote differences tussen verlichting niveaus. 1.6. Witte ruis generator Dit is nodig in het laboratorium omgevingen waarin plotselinge harde geluiden te horen die potentieel zouden de dieren schrikken. Het geluid generator zal maskeren zoals intermitterende storende geluiden. Het volume van de witte ruis generator moet worden gekozen te worden boven andere de omgevingstemperatuur en onverwachte geluiden. In onze experimentele de kamer van de omgevingsgeluid (zonder de witte geactiveerd noise generator) is 60 dB. Het totale geluidsniveau met de witte ruis generator geactiveerd op de plaats waar de tanks zijn geplaatst is 70-72 dB. Toch moet worden opgemerkt dat deze cijfers zijn bedoeld als voorbeeld, en elk laboratorium moet de juiste geluidsniveau te selecteren op basis van hun unieke omgeving en omstandigheden. 1.7. Drogen papier en warmte lamp Voordat de dieren naar hun kooien, is het belangrijk om te droogze zachtjes met behulp van papieren handdoeken en het is nuttig om een ​​warmtelamp gebruiken (zeker de belichting temperatuur niet hoger zijn dan 32 ° C) om onderkoeling te voorkomen. 2. Behavioral Procedures <ol><li> De algehele opzet van het experiment moet een weerspiegeling zijn goed tegenwicht tussen variabelen die specifiek zijn voor uw experiment. Bijvoorbeeld, in onze experimenten, proberen we elke groep te vertegenwoordigen eveneens in elke FST sessie (dat wil zeggen, als er vier behandelgroepen, elk zal worden vertegenwoordigd in elke sessie). Ook muizen zijn gedraaid, zodanig zijn dat muizen uit elke behandelingsgroep geplaatst in een andere tank in elke sessie. </li><li> Plaats de camera en de verdelers in positie. De camera moet zo dicht mogelijk zijn om de hoogst mogelijke resolutie van de muizen te verkrijgen. </li><li> De tanks moeten worden gevuld met kraanwater ingesteld op de kamertemperatuur (23-25 ​​° C) om het vastgestelde niveau, dat is aangegeven op de tank muren. Als uw installatie niet constant warm / koud water, kunt u warm water en / of ijs te bereiden op het water snel te brengen naar de juiste temperatuur. Controleer de temperatuur van het water met de infrarood thermometer. Als alternatief, wanneer de temperatuur van warm en koud water constant zijn op uw locatie, kunt u putten uit de tank twee merken - een voor het niveau van warm water en een tweede cijfer voor de toevoeging van koud water - om dicht bij de correcte uitslag temperatuur van het water snel. </li><li> Start de witte ruis generator, zo wordt gebruikt, voordat de muizen worden geïntroduceerd om de test kamer. Het niveau van witte ruis moet alleen genoeg zijn om externe geluiden te maskeren. Voorkomen dat een hoog volume en zorg ervoor dat het hetzelfde niveau van witte ruis wordt gebruikt voor alle dieren. </li><li> Breng de dieren in de testkamer. Als de kolonie ruimte waar de dieren verblijven en het testen kamer zijn naast of zeer dicht bij elkaar, de omgevingsomstandigheden zijn gelijk en de verstoring tijdens het verplaatsen van de kooi is minimaal, dan is er geen acclimatisatie period nodig zal zijn. Anders, plaats de dieren in de testkamer voor een periode van acclimatisatie (over het algemeen ten minste een uur). Als een acclimatiseringsperiode noodzakelijk is, zorg ervoor dat de geacclimatiseerd dieren niet worden beïnvloed door de muizen getest op hetzelfde moment in dezelfde ruimte. Houd er rekening mee dat de olfactorische en ultrasone signalen kunnen worden waargenomen door de andere dieren in dezelfde ruimte. </li><li> Start video-opname voor het plaatsen van de dieren in het water tanks. </li><li> Houd het dier door zijn staart, en zachtjes en langzaam in het water. Zodra de muizen is in het water, langzaam los van de staart. Typisch, zal het dier het hoofd van het gebruik van deze procedure verhinderen dat ondergedompeld onder water. </li><li> Plaats de muizen in de tanks in een volgorde waarin de obstructie van de opname zal worden geminimaliseerd. Deze orde, natuurlijk, moeten worden vastgesteld in samenwerking met het tegenwicht van groepen en andere vereisten die specifiek zijn voor uw experimenteel ontwerp. </li><li>Als alle muizen in de tanks-start het aftellen op de stopwatch. De gebruikelijke test lengte voor muizen is zes minuten in de FST. </li><li> Tijdens de test zeker je op een redelijke afstand van de dieren en maak geen bewegingen of geluid die kunnen worden opgemerkt door de dieren. Muizen kunnen gemakkelijk drijven in water, maar als een van beide een nieuwe stam van muizen of een nieuwe verbinding wordt getest zonder voorafgaande kennis van hun effect op het gedrag van zwemmen, de onderzoeker moet de dieren beter te kunnen volgen. In tegenstelling tot ratten, muizen hebben meestal niet duiken tijdens het FST, maar in het geval van het duiken met de muis moet worden verwijderd uit de tank. Als de onderzoeker de kamer verlaat de muizen moet door de video worden gevolgd in het geval dat een muis niet kunnen handhaven zwemmen en drijven gedrag en op de proef gesteld, indien nodig te stoppen. </li><li> Aan het einde van zes minuten testperiode stoppen met de opname. In ons lab, laten we een briefje in de voorkant van de camera dat de dieren identificeert op het eindevan elke opname. Bij het gebruik van deze benadering van de individuele vervolgens het scoren van de opname zal niet weten wat de identiteit van de dieren, omdat de identiteit wordt alleen weergegeven aan het einde van de opname. Dit voorkomt de identificatie en registratie problemen die zich later kunnen voordoen met betrekking tot de opnames. Ongeacht de registratie strategie die wordt gebruikt, moet het duidelijk van de dieren en ook voorkomen dat de persoon later scoren de test van het hebben van kennis van de groepsopdrachten. </li><li> Haal de dieren uit het water door hun staart in dezelfde volgorde dat je ze in en voorzichtig ze droog met een droog papier en leg terug in hun homecage. </li></ol> 3. Gedrag Analyse <ol><li> De muis versie van FST is typisch, van begin tot eind, zes minuten lang. Echter, over het algemeen alleen de laatste vier minuten van de proef worden geanalyseerd. Dit is te wijten aan het feit dat de meeste muizen zijn zeer actief aan het begin van de FST, en de potential effecten van de behandeling kan worden verduisterd tijdens de eerste twee minuten. </li><li> In ons laboratorium hebben we direct uploaden van de video bestanden van de camera naar een PC en doe de analyse op de PC. </li><li> Tijdens de gedrags-analyse, is de tijd dat elke muizen besteedt mobiele gemeten. Het totale bedrag van de mobiliteit de tijd wordt vervolgens afgetrokken van de 240 seconden van de test tijd en is vervolgens aangegeven, aangezien de immobiliteit tijd. Hoewel het mogelijk is om de immobiliteit tijd direct te meten, in ons laboratorium hebben we vonden het gemakkelijker op te sporen en actieve bewegingen te meten in plaats van het ontbreken van een dergelijke bewegingen. </li><li> Het belangrijkste aspect van de gedragsanalyse en meestal de grootste bron van variabiliteit tussen waarnemers in de FST is de correcte identificatie van de bewegingen die worden geteld als bona fide mobiliteit. Onze operationele definitie voor mobiliteit in het FST is een andere bewegingen dan die welke nodig is om het lichaam in balans en het hoofd boven water te houden 4. Muizen in het algemeen drijven in het water gemakkelijk, hoe ze nog steeds kleine bewegingen manifesteren om hun lichaam balans en hun hoofd boven water te houden. Deze gedragingen zijn niet een poging om te ontsnappen en mag niet worden gescoord als mobiliteit. Ook na een enkele aanval van de mobiliteit, ook al wezen immobiel, kunnen muizen nog steeds drijven in het water als gevolg van een momentum. Deze bewegingen moeten ook niet worden gescoord als mobiliteit. </li><li> In ons laboratorium, gebruiken we een on-screen stopwatch software (XNote Stopwatch, dnSoft Research Group) voor de tijd metingen. Twee afzonderlijke stopwatches worden gebruikt op het scherm. De eerste stopwatch telt af van 240 seconden en waarschuwt de waarnemer als de gedragsanalyse periode eindigt. De tweede stopwatch meet de tijd die mobiele besteed. Sommige stopwatch software heeft de mogelijkheid om toetsen toe te wijzen aan het starten en stoppen functies, zodat op het scherm stopwatches kan worden bestuurd door het toetsenbord. In ons lab, in plaats van een regulier toetsenbord, gebruiken we een invoerapparaat algemeen bekend alseen &#39;gamepad&#39; om de chronometers te controleren. </li><li> Bij gebruik van een PC op immobiliteit kwantificeren, als er meer dan een muis getest en presenteren op het scherm, is het een goed idee om de andere dieren cover (je kunt een ander programma venster fysiek te gebruiken of bedek het scherm met papier), zodat hun bewegingen niet afleiden van de waarnemer. </li><li> Als een on-screen stopwatch wordt gebruikt, zeker om alle, maar de milliseconde decimalen van de stopwatch te dekken. De reden hiervoor is om vooringenomenheid te voorkomen dat in de waarnemer, terwijl u toch de mogelijkheid om te bepalen of het horloge is uitgevoerd of niet uitgevoerd. Sinds de waarnemer, terwijl blind voor de groepsopdrachten van de dieren, zal een algemeen idee van het niveau van de mobiliteit in de muizen hebben, is er mogelijk een vertekening optreden als ze mag het totale bedrag van de mobiliteit de verstreken tijd voor die muis te zien vóór de voltooiing van de analyse sessie. Door het bedekken van de stopwatch, zal ze alleen maar weten of de stopwatch is ingeschakeld of uitgeschakeld op elk punt, maar Will niet weten wat de totale tijd verstreken en kan daarom niet door enig vooroordeel zijn. </li><li> Een inter-observer betrouwbaarheid test moet worden uitgevoerd voor elke nieuwe waarnemer alvorens te beginnen met de gegevens van proefdieren te verzamelen. In ons laboratorium elke nieuwe waarnemer horloges eerst een ervaren waarnemer scoren. Nadat de nieuwe waarnemer krijgt het vertrouwen om de mobiliteit te onderscheiden van immobiliteit, zij dan scoren met de ervaren waarnemer te kijken en te wijzen op eventuele fouten. Zodra deze fase is voltooid, zal de nieuwe waarnemer analyseren van een specifieke set van FST video&#39;s die we in ons laboratorium te houden voor trainingsdoeleinden. Pas na een hoog niveau van inter-observer correlatie is verkregen met de ervaren waarnemer heeft een onderzoeker gaan analyseren FST video&#39;s in de werkelijke experimenten. We archief van de gegevens van deze training analyses tot een interne standaard voor het laboratorium voor toekomstig gebruik vormen. We hebben waargenomen verschillen tussen stammen in de wijze waarop zij uitdrukking mobiteit (en immobiliteit) gedrag, en de gemiddelde tijd tussen de geslachten immobiliteit. Wanneer er een nieuwe stam, geslacht of genetisch gemodificeerde muis model is getest in het laboratorium is het noodzakelijk om opnieuw te ondernemen dit soort betrouwbaarheidsanalyse. </li></ol> 4. Representatieve resultaten Er zijn duidelijke verschillen tussen de genetisch verschillende inteelt en outbred muizenstammen in termen van hun baseline immobiliteit en te reageren op een specifiek geneesmiddel 5-11. We bijvoorbeeld differentieel antidepressivum-achtige reacties geïdentificeerd lithium in een panel van muizenstammen (figuur 1) 5. Experimentele details van dit experiment zijn gepubliceerd in Can et al.., 2011 5. <img src="/files/ftp_upload/3638/3638fig1.jpg" alt="Figuur 1" /> Figuur 1. Immobiliteit tijd (in seconden) in de gedwongen zwemmen test, vijf uur na een enkele ip injectie van zout, 200, 300, of 400 mg / kg in verschillende inteelt en outbred muizenstammen. *: P &lt;0,05, **: p &lt;0,01, ***: p &lt;0,001 duiden op een significant verschil in vergelijking met zoutoplossing groep, post hoc test Dunnett&#39;s. De gegevens worden uitgedrukt als gemiddelde ± SEM. Aantal dieren per groep voor elke stam is 6-8 (Figuur overgenomen uit 5). Niet alle muizenstammen zijn geschikt voor de FST. Sommige stammen, zoals de Black Zwitserse, NIH Zwitserse en FVB / NJ weinig of bijna geen immobiliteit onder controle omstandigheden, dus neerkomt op een vloer effect (figuur 1) 5. Het ontbreken van baseline immobiliteit voorkomt dat de doeltreffende opsporing een anti-depressieve effect van experimentele manipulaties. Het is ook mogelijk, maar zeer zeldzaam, dat sommige muizenstammen afwijkend kunnen gedragen en duik in de tank tijdens de test ook al zijn ze kunnen drijven. Een van deze stam is DBA/1OlaHsd (ongepubliceerde waarnemingen in ons laboratorium). Dergelijke stammen zijn niet geschikt voor het FST. Vanwege dit risico duiken, hoe small, bij het testen van een nieuwe stam die nog niet eerder getest in de FST of een muis drager zijn van een nieuwe genetische manipulatie, is het noodzakelijk om zorgvuldig te observeren de eerste proeven om muizen te redden indien zij zich in potentieel schadelijk gedrag. In de experimentele ontwerp hier beschreven, meerdere dieren (maximaal vijf) worden getest op hetzelfde moment. Terwijl de verdelers gebruiken we muizen voorkomen dat zien elkaar tijdens de test, en de witte ruis generator onderdrukt hoorbaar geluiden, doet onze set-up niet voorkomen dat alle ultrasone of olfactorische signalen worden overgebracht. Hoewel het onwaarschijnlijk gezien de aard van de test, kunnen deze invloed hebben op het gedrag van muizen. Een oplossing voor dit probleem zou zijn om individueel te testen van de dieren. Echter, deze aanpak heeft zijn eigen problemen. Bijvoorbeeld, algemeen, de dieren getest in elke sessie komen uit dezelfde homecage. Dit maakt randomisatie en tegenwicht van de experimentele variabelen. Het testen van muizen individuelely zou betekenen dat het verwijderen van een muis op een tijd van de homecage. Dit zal leiden tot herhaalde stress en verstoring van de sociale hiërarchie in de kooi onder de anderen achter gelaten. Een ander probleem met het testen afzonderlijk zijn de tijdsdruk. Het testen van een muis op een tijd zal verlengen van het experiment in een groot aantal uren resulteert in een situatie waarin muizen zijn getest op verschillende tijdstippen van de circadiane cyclus. Dit kan leiden tot verwarrende tijd van de dag effecten. De onderzoekers moeten houden deze punten in gedachten, terwijl het ontwerpen van hun experimenten.

<ol><li>Hascoét, M., Bourin, M. In Mood and Anxiety Related Phenotypes in Mice. 42, 85-118 (2009).</li>
<li>Sunal, R., Gümüçel, aB., Kayaalp, S. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+changes+in+swimming+area+on+results+of+%22behavioral+despair+test%22%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacology+Biochemistry+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Effect of changes in swimming area on results of "behavioral despair test".</a> Pharmacology Biochemistry and Behavior. 49, 891-896 (1994).</li>
<li>Petit-Demouliere, B., Chenu, F., Bourin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Forced+swimming+test+in+mice%3A+a+review+of+antidepressant+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology.+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Forced swimming test in mice: a review of antidepressant activity.</a> Psychopharmacology. (Berl). 177, 245-255 (2005).</li>
<li>Cryan, J. F., Markou, A., Lucki, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+antidepressant+activity+in+rodents%3A+recent+developments+and+future+needs%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Pharmacological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Assessing antidepressant activity in rodents: recent developments and future needs.</a> Trends in Pharmacological Sciences. 23, 238-245 (2002).</li>
<li>Can, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antidepressant-like+responses+to+lithium+in+genetically+diverse+mouse+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Genes%2C+Brain+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Antidepressant-like responses to lithium in genetically diverse mouse strains.</a> Genes, Brain and Behavior. 10, 434-443 (2011).</li>
<li>Lucki, I., Dalvi, A., Mayorga, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensitivity+to+the+effects+of+pharmacologically+selective+antidepressants+in+different+strains+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology.+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Sensitivity to the effects of pharmacologically selective antidepressants in different strains of mice.</a> Psychopharmacology. (Berl). 155, 315-322 (2001).</li>
<li>David, D. J., Renard, C. E., Jolliet, P., Hascoet, M., Bourin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antidepressant-like+effects+in+various+mice+strains+in+the+forced+swimming+test%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Antidepressant-like effects in various mice strains in the forced swimming test.</a> Psychopharmacology (Berl). 166, 373-382 (2003).</li>
<li>Bai, F., Li, X., Clay, M., Lindstrom, T., Skolnick, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intra-+and+interstrain+differences+in+models+of+%22behavioral+despair%22%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol.+Biochem.+Behav%22%5BJournal%5D)">Intra- and interstrain differences in models of "behavioral despair".</a> Pharmacol. Biochem. Behav. 70, 187-192 (2001).</li>
<li>Guzzetti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strain+differences+in+paroxetine-induced+reduction+of+immobility+time+in+the+forced+swimming+test+in+mice%3A+Role+of+serotonin%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Strain differences in paroxetine-induced reduction of immobility time in the forced swimming test in mice: Role of serotonin.</a> European Journal of Pharmacology. 594, 117-124 (2008).</li>
<li>Cervo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genotype-dependent+activity+of+tryptophan+hydroxylase-2+determines+the+response+to+citalopram+in+a+mouse+model+of+depression%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Genotype-dependent activity of tryptophan hydroxylase-2 determines the response to citalopram in a mouse model of depression.</a> J. Neurosci. 25, 8165-8172 (2005).</li>
<li>Jiao, J., Nitzke, A., Doukas, D., Seiglie, M., Dulawa, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antidepressant+response+to+chronic+citalopram+treatment+in+eight+inbred+mouse+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Antidepressant response to chronic citalopram treatment in eight inbred mouse strains.</a> Psychopharmacology. 213, 509-520 (2011).</li>
<li>Porsolt, R. D., Pichon, M. L. e, Jalfre, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Depression%3A+a+new+animal+model+sensitive+to+antidepressant+treatments%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Depression: a new animal model sensitive to antidepressant treatments.</a> Nature. 266, 730-732 (1977).</li>
<li>Porsolt, R. D., Bertin, A., Jalfre, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+despair+in+mice%3A+a+primary+screening+test+for+antidepressants%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Int.+Pharmacodyn.+Ther%22%5BJournal%5D)">Behavioral despair in mice: a primary screening test for antidepressants.</a> Arch. Int. Pharmacodyn. Ther. 229, 327-336 (1977).</li>
<li>Porsolt, R. D., Bertin, A., Jalfre, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%22Behavioural+despair%22+in+rats+and+mice%3A+strain+differences+and+the+effects+of+imipramine%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">"Behavioural despair" in rats and mice: strain differences and the effects of imipramine.</a> Eur. J. Pharmacol. 51, 291-294 (1978).</li>
<li>Mineur, Y. S., Belzung, C., Crusio, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+unpredictable+chronic+mild+stress+on+anxiety+and+depression-like+behavior+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain.+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of unpredictable chronic mild stress on anxiety and depression-like behavior in mice.</a> Behav. Brain. Res. 175, 43-50 (2006).</li>
<li>Millstein, R. A., Holmes, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+repeated+maternal+separation+on+anxiety-+and+depression-related+phenotypes+in+different+mouse+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+%26+Biobehavioral+Reviews%22%5BJournal%5D)">Effects of repeated maternal separation on anxiety- and depression-related phenotypes in different mouse strains.</a> Neuroscience & Biobehavioral Reviews. 31, 3-17 (2007).</li>
<li>Cryan, J. F., Valentino, R. J., Lucki, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+substrates+underlying+the+behavioral+effects+of+antidepressants+using+the+modified+rat+forced+swimming+test%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+%26+Biobehavioral+Reviews%22%5BJournal%5D)">Assessing substrates underlying the behavioral effects of antidepressants using the modified rat forced swimming test.</a> Neuroscience & Biobehavioral Reviews. 29, 547-569 (2005).</li>
<li>Crowley, J. J., Jones, O. 'L. eary, F, O., Lucki, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+tests+for+measuring+the+effects+of+antidepressants+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacology+Biochemistry+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Automated tests for measuring the effects of antidepressants in mice.</a> Pharmacology Biochemistry and Behavior. 78, 269-274 (2004).</li>
<li>Kurtuncu, M., Luka, L. J., Dimitrijevic, N., Uz, T., Manev, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reliability+assessment+of+an+automated+forced+swim+test+device+using+two+mouse+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Reliability assessment of an automated forced swim test device using two mouse strains.</a> Journal of Neuroscience Methods. 149, 26-30 (2005).</li>
<li>Hayashi, E., Shimamura, M., Kuratani, K., Kinoshita, M., Hara, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+experimental+system+capturing+three+behavioral+components+during+murine+forced+swim+test%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sciences%22%5BJournal%5D)">Automated experimental system capturing three behavioral components during murine forced swim test.</a> Life Sciences. 88, 411-417 (2011).</li>
<li>Cryan, J., Page, M., Lucki, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+behavioral+effects+of+the+antidepressants+reboxetine%2C+fluoxetine%2C+and+moclobemide+in+a+modified+forced+swim+test+following+chronic+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Differential behavioral effects of the antidepressants reboxetine, fluoxetine, and moclobemide in a modified forced swim test following chronic treatment.</a> Psychopharmacology. 182, 335-344 (2005).</li>
<li>Gould, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beta-catenin+overexpression+in+the+mouse+brain+phenocopies+lithium-sensitive+behaviors%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Beta-catenin overexpression in the mouse brain phenocopies lithium-sensitive behaviors.</a> Neuropsychopharmacology. 32, 2173-2183 (2007).</li>
<li>Can, A., Grahame, N. J., Gould, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Affect-related+related+behaviors+in+mice+selectively+bred+for+high+and+low+voluntary+alcohol+consumption%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Genet%22%5BJournal%5D)">Affect-related related behaviors in mice selectively bred for high and low voluntary alcohol consumption.</a> Behav. Genet. , (2011).</li>
<li>McKinney, W. T., Bunney, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+Model+of+Depression%3A+I+Review+of+Evidence%3A+Implications+for+Research.%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Gen.+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Animal Model of Depression: I Review of Evidence: Implications for Research.</a> Arch. Gen. Psychiatry. 21, 240-248 (1969).</li>
<li>Willner, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+validity+of+animal+models+of+depression%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology.%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">The validity of animal models of depression.</a> Psychopharmacology.(Berl). 83, 1-16 (1984).</li>
<li>Detke, M. J., Lucki, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+serotonergic+and+noradrenergic+antidepressants+in+the+rat+forced+swimming+test%3A+the+effects+of+water+depth%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Detection of serotonergic and noradrenergic antidepressants in the rat forced swimming test: the effects of water depth.</a> Behav. Brain Res. 73, 43-46 (1995).</li>
<li>Gould, T. D., Dao, D. T., Kovacsics, C. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGould%2C+TD+%22In+Mood+and+Anxiety+Related+Phenotypes+in+mice%3A+characterization+using+behavioral+tests%22">In Mood and Anxiety Related Phenotypes in mice: characterization using behavioral tests</a>. Gould, T. D. 42, Humana Press. (2009).</li>
<li>Bourin, M., Fiocco, A. J., Clenet, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+valuable+are+animal+models+in+defining+antidepressant+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Psychopharmacology%3A+Clinical+and+Experimental%22%5BJournal%5D)">How valuable are animal models in defining antidepressant activity.</a> Human Psychopharmacology: Clinical and Experimental. 16, 9-21 (2001).</li>
</ol>

Auteurs verklaren geen belangenconflicten.

De FST (ook wel Porsolt zwemmen test) werd voor het eerst ontwikkeld voor ratten en vervolgens aangepast voor muizen door Porsolt en collega&#39;s 12,13. In aanvulling op de hierboven beschreven protocol succesvol in ons laboratorium, hebben een aantal grotendeels subtiele wijzigingen te testen gepubliceerd (zie Hascoet en Bourin voor een volledige herziening 1). Het is een veelgebruikte test wordt gebruikt voor de evaluatie van de effectiviteit van anti-depressiva en de effecten van verschillende ...

<ul><li> Watertanks </li><li> Thermometer </li><li> Timer </li><li> Videocamera </li><li> White Noise Generator (optioneel) </li><li> Drogend papier </li></ul>

de muis gedwongen swim test

The Mouse Forced Swim Test

De gedwongen zwemmen test is een knaagdier gedragstest worden gebruikt voor de evaluatie van antidepressiva, antidepressieve werkzaamheid van nieuwe verbindingen, en experimentele manipulaties die gericht zijn op rendering of het voorkomen van depressieve-achtige toestanden. Muizen worden geplaatst in een onontkoombare transparante tank die gevuld is met water en hun ontsnapping aanverwante mobiliteitsgedrag wordt gemeten. De gedwongen zwemmen test is eenvoudig om betrouwbaar te voeren en het vereist een minimale gespecialiseerde apparatuur. Succesvolle implementatie van de gedwongen zwemmen test vereist de naleving van bepaalde procedurele details en minimalisering van de ongerechtvaardigde stress bij de muizen. In het protocol beschrijving en de bijbehorende video, leggen we uit hoe u de muis versie van deze test uit te voeren met de nadruk op mogelijke valkuilen die nadelig kan zijn voor de interpretatie van de resultaten en hoe ze te vermijden. Daarnaast leggen we uit hoe het gedrag tot uiting in de test worden beoordeeld.

De gedwongen zwemmen test is gevalideerd als een experimentele benadering van potentiële antidepressieve werking te evalueren bij knaagdieren. Proefdieren worden geplaatst in een tank met water en ontsnappen met betrekking tot mobiliteit gedrag wordt gekwantificeerd. De gemeenschappelijke procedures voor de muis versie van deze test zijn beschreven.

De muis Gedwongen Swim Test

De forced swim test is een gedragstest voor knaagdieren die wordt gebruikt voor de evaluatie van antidepressiva, de antidepressieve werkzaamheid van nieuwe verbindingen en experimentele ...

De forced swim test bij muizen is een veelgebruikte test om de effectiviteit van antidepressiva te voorspellen. Deze video demonstreert de procedures van de muisversie van de forced swim test. De muisversie verschilt van de wrap-versie en deze mogen niet door elkaar worden gebruikt.Bij de forced swim test worden muizen in een tank gevuld met water geplaatst. De muis blijft zes minuten lang in de tank. Tijdens deze periode worden de gedragingen van het proefdier geregistreerd.Aan het einde van de testperiode van zes minuten wordt het proefdier uit het water gehaald. Na voltooiing van de test worden de visuele opnames overgebracht naar een computer of videomonitor. Voor de analyse meet een waarnemer de tijd die een muis besteedt aan worstelen tijdens de laatste vier minuten van de sessie van zes minuten.Antidepressiva verhogen de hoeveelheid tijd die wordt besteed aan strijden. Dit vertaalt zich in kortere perioden van immobiliteit. Hallo, mijn naam is Sean van het laboratorium van Dr. Todd Gould aan de University of Maryland School of Medicine.Hallo, ik ben Chantelle uit hetzelfde laboratorium. In deze video gaan we laten zien hoe u de muisversie van de Forced Swim Test uitvoert en scoort. De forced swim test bij muizen wordt gebruikt om de potentiële effectiviteit van antidepressieve behandelingen te evalueren.Laten we beginnen. We gebruiken transparante cilindrische tanks gemaakt van een stevig materiaal, zoals plexiglas; de afmetingen van de tank zijn zo gekozen dat wordt voorkomen dat de muizen ontsnappen of met hun poten of staart de bodem raken. Vul de tank met kraanwater tot het vooraf bepaalde en gemarkeerde niveau en stel de watertemperatuur in.De temperatuur moet tussen de 23 en 25 °C liggen. De watertanks moeten zodanig worden geplaatst dat ze gefilmd kunnen worden. In ons laboratorium voeren we de forced swim test uit met vier tot vijf proefpersonen tegelijkertijd tussen de tanks.We plaatsen scheidingswanden om te voorkomen dat de proefdieren elkaar kunnen zien. Deze wanden zorgen daarnaast voor een contrastrijk contrast met de muizen. Voor albino muizen biedt zwart een goed contrast voor video-opnamen.Voor donkergekleurde muizenstammen is een witte of crèmekleurige achtergrond geschikt. Start de machine voor witte ruis voordat u met het experiment begint. Zorg ervoor dat het volume niet te hoog staat.Het zou alleen eventuele onderbrekende geluiden moeten maskeren. Breng de proefpersonen naar de experimentele ruimte. Voor de acclimatisatie is deze periode over het algemeen ten minste één uur.De omstandigheden in de experimenteerruimte moeten constant worden gehouden en vrij zijn van geluiden, veranderingen in lichtintensiteit en andere mogelijke verstoringen. Zodra de habituatieperiode is beëindigd, kan de test worden gestart. Het is belangrijk om de naam van de sessie te registreren. Pak eerst de muizen bij hun staarten vast en plaats ze voorzichtig in het tankreservoir.Het is belangrijk om dit langzaam te doen, zodat de dieren zich kunnen oriënteren wanneer ze het wateroppervlak raken. Neem aan het einde van de testperiode van zes minuten de identificatie van de dieren op video en stop vervolgens de opname. Verwijder de muizen in dezelfde volgorde als waarin ze zijn begonnen en droog ze voorzichtig af met papieren handdoeken voordat u ze terug in de kooi plaatst.Het water in de tanks mag niet opnieuw worden gebruikt. Nu we het testen hebben voltooid, gaan we over naar het scoren van de gedragingen in de Mass Force Swim-test. De belangrijkste variabele die wordt beoordeeld, is de hoeveelheid tijd dat de dieren immobiel blijven tijdens de proef.Over het algemeen worden bij de gedwongen zwemtest bij muizen de laatste vier minuten van de totale sessie van zes minuten gescoord. De reden hiervoor is dat de meeste muizen, ongeacht de behandeling, in de beginfasen van de test continu mobiel zijn. Deze activiteit overschaduwt eventuele potentiële behandelingseffecten.Zoals in deze video te zien is, zijn de muizen zeer actief tijdens de beginfasen van de test. Deze activiteit zal afnemen na de eerste twee minuten van de verblijftijd van elke muis. De mobiliteit wordt gemeten met een stopwatch op het scherm die via een game controller wordt bediend.De andere stopwatch telt de 240 seconden af. Testtijdmobiliteit wordt gedefinieerd als elke beweging anders dan die nodig is om het lichaam in balans te houden en het hoofd boven water te houden. Laten we nu een voorbeeld zien van de scoren van een proef.We dekken eerst de overige muizen die niet worden beoordeeld af om verwarring te voorkomen. Muizen drijven over het algemeen gemakkelijk in het water. Desondanks vertonen ze nog steeds kleine bewegingen om hun lichaam in balans te houden en hun kop boven water te houden.Deze gedragingen zijn geen poging tot ontsnapping en mogen niet als mobiliteit worden gescoord. Bovendien kunnen muizen na een enkele periode van mobiliteit, hoewel ze in wezen immobiel zijn, nog steeds in het water drijven als gevolg van de eerder opgebouwde impuls; ook deze bewegingen mogen niet als mobiliteit worden gescoord. Laten we nu overgaan naar een andere video.De muis in deze video vertoont perioden van zowel mobiliteit als immobiliteit, zoals aangegeven op het scherm; een waarnemer registreert de mobiliteitstijd. Hoewel het theoretisch mogelijk is om de immobiliteitstijd direct te meten, is het eenvoudiger om actieve bewegingen te detecteren en te meten dan het gebrek aan dergelijke bewegingen. Traditioneel wordt de immobiliteitstijd gerapporteerd.De immobilisatietijd wordt bepaald door de mobilisatietijd af te trekken van 240 seconden. Het scoren van de vierde zwemtest vereist veel training en oefening. Om een hoge mate van betrouwbaarheid te bereiken, is het belangrijk om een interne levensstandaard vast te stellen en elke nieuwe waarnemer te trainen totdat zij een hoge mate van betrouwbaarheid bereiken.In deze video leggen we de muisversie van de Forced Swim-test uit. Veel succes met uw toekomstige experimenten.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowetenschap

Ondiep water (Peddelen) Varianten van het Water Maze Tests in Muizen

De Morris Water Maze is een gedrags taak om hippocampus-afhankelijke leer-en geheugen te testen. Het is op grote schaal gebruikt in de studie van neurobiologie, neurofarmacologie en neurocognitieve stoornissen in knaagdier modellen.

Morris Water Maze test voor leren en geheugen Tekortkomingen in de ziekte van Alzheimer Model Muizen

Dit artikel geeft het protocol van T-doolhof proeven met een aangepaste automatische apparatuur voor de beoordeling van de leer-en geheugenfuncties bij muizen.

T-doolhof Gedwongen Afwisseling en links-rechts Discriminatie Taken voor de beoordeling van Werken en Reference geheugen in Muizen

De staart-vering test is gevalideerd als een experimentele procedure om antidepressieve werking van het geneesmiddel behandelingen in muizen te beoordelen. Muizen worden geschorst door hun staart gedurende zes minuten en ontsnappen gerelateerd gedrag worden beoordeeld. We beschrijven procedures die worden gebruikt bij het uitvoeren van de staart ophanging te testen.

De Staart Suspension Test

Dit protocol beschrijft de forced swim test, die wordt gebruikt voor de studie van depressief-achtig gedrag bij knaagdieren. Deze procedure omvat het plaatsen van een dier in een container gevuld met water dat uiteindelijk zal leiden tot het vertonen van onbeweeglijk gedrag, wat wordt beschouwd als een weerspiegeling van gedragswanhoop.

De Gedwongen Swim Test als een model van Depressieve-achtig gedrag

Stereotactische injectie van lentivirussen uiten cDNAs of shRNAs kan genexpressie moduleren in specifieke hersengebieden van muizen. Hier presenteren we een protocol om stereotactische injecties te combineren met gedragsproblemen taken, zoals het open veld Test (OFT) en de Gedwongen Swim Test (FST).

Het toepassen van stereotactische injectie techniek om genetische effecten op Animal Gedrag Studie

Dit manuscript beschrijft een Morris water maze (MWM) protocol dat is aangepast voor gebruik met een veelgebruikte muismodel van de ziekte van Alzheimer. De MWM wordt veel gebruikt in transgene muismodellen. Implementatie van een procedure die gevoelig is voor de achtergrondstam van het muismodel is essentieel voor het detecteren van verschillen tussen groepen.

Morris Water Maze Test: Optimalisatie voor Mouse Strain en testomgeving

Dit protocol beschrijft een nieuwe model waarmee gezonde ratten depressie na verloop van een bepaalde tijd periodthrough besmetting door blootstelling aan chronische onvoorspelbare (CUS) ratten benadrukt kon aangaan.

Een nieuwe methode voor het induceren van een depressie-achtige werking in ratten

Een uitgebreide gedrags testbatterij van motorische vaardigheden, stemming — met inbegrip van sociale interactie, depressie en angst — en cognitie is ontworpen voor de herhaalde beoordeling van neurodegeneratie-gerelateerde gedragsveranderingen bij muizen.

Een gedrags testbatterij voor de herhaalde beoordeling van motorische vaardigheden, humeur en cognitie bij muizen

Dit artikel presenteert een protocol voor het uitvoeren van het zeer translationele en onafhankelijk bewezen muis Stroke Unit (mSU) concept bij muizen met een grote beroerte. Het biedt ook een gestandaardiseerd protocol voor het uitvoeren van de focale experimentele beroerteschaal bij muizen, die de gedetecteerde focale tekorten van een beroerte evalueert, zelfs op de lange termijn.

Het Mouse Stroke Unit Protocol met gestandaardiseerde neurologische scores voor translationele onderzoeken naar muisberoertes

Leer de gedwongen zwemtest bij muizen voor het voorspellen van antidepressieve effectiviteit. Deze methode kwantificeert ontsnappingsgerelateerde mobiliteit om gedragsreacties te analyseren.

De muis Gedwongen Swim Test

Meer video's verkennen