Name: Een eenvoudig protocol voor het extraheren van hemocyten van Wild Rupsen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-11-15T11:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 35 s
Description: Leer een eenvoudige methode om hemocyten te extraheren, visualiseren en kwantificeren uit wilde rupsen. Deze techniek ondersteunt onderzoek naar insectenimmunologie en celulaire immuunreacties.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

TMS werd gesteund door de Harlan Trust Fellowship (GWU) tijdens deze studie. Financiering voor veld verzamelen en kweken van L. Fasciola en E. delphinii werd verstrekt door NSF subsidie ​​DEB 0642438 naar JTL.

1. Materiaal Voorbereiding <ol><li> Bereid naalden (1-2 micrometer tip en 3-4 mm conus) van borosilicaatglas capillaire buizen en een micropipet trekker. Instrument instellingen: helling: 561; snelheid: 20; warmte: 560; vertraging: 1; pull: 100; druk: 500. </li><li> Bereid de verzameling oplossing: 60% Medium Grace&#39;s (GM) aangevuld met 10% foetaal runderserum (FBS) en 20% antistollingsmiddel buffer (98 mM NaOH, 186 mM NaCl, 1,7 mM EDTA en 41 mM citroenzuur, pH 4,5 ). De bovenstaande oplossing wordt vers bereid onder steriele omstandigheden en op ijs gehouden te allen tijde. </li><li> Bereid de incubatiebuffer oplossing: 90% van GM aangevuld met 10% van FBS. Deze oplossing wordt ook vers bereid en op ijs gehouden te allen tijde. </li><li> Bereid een totaal van ten minste 15 ul x het aantal insecten enerzijds het verzamelen en de incubatie oplossingen. </li></ol> 2. Injectie van Rupsen met Collection Solution <ol><li> Verdoven voorlaatste instar larven door koeling ze op ijs gedurende 20 min voor extractie hemocyte. </li><li> Breng het stompe uiteinde van een schone capillaire naald (16 gauge) in de buis die is verbonden met een 20 ml glazen injectiespuit (figuur 2). Laat de buis met de verzameling oplossing openen op de labtafel en langzaam het capillair vullen met de buffer. Het capillair wordt meestal gevuld met ongeveer 10-15 pl verzameling oplossing, afhankelijk van de grootte van de rups (ongeveer 1 ui oplossing per 10 mg rupsband totale lichaamsmassa = 0.01% van lichaamsgewicht). Leg de naald op een bal van klei die naast de dissectiemicroscoop geplaatst. </li><li> Plaats de rups in een petrischaal. Het insect moet worden geplaatst op de zijkant zodat de spiracles duidelijk zichtbaar (Figuur 3). </li><li> Tijdens het bekijken onder een dissectiemicroscoop, houdt de rups vast met een pincet en plaats de naald dicht bij een van de spiracles, waar de insekte cuticula is over het algemeen zachter. Druk voorzichtig op de capillaire naald tegen het lichaam van het insect. Zodra de naald is doorgedrongen tot de cuticula, injecteren het totale volume van de oplossing in de rups (figuur 3). Het is belangrijk te voorkomen injecteren luchtbellen in de rups. De rups lichaam zal (bijvoorbeeld in volume te verhogen met 20%) zwellen na de injectie, maar mag niet barsten of lekken. </li><li> Zet de rups het ijs, het positioneren van de insect dorsaal naar buffer lekt uit de wond (figuur 3). </li><li> Herhaal stappen 2.1-2.4 per caterpillar voor hemolymfe extractie. In dit stadium zodat alle insecten op ijs gedurende 30 minuten rusten alvorens verder te gaan. </li></ol> 3. Extractie van hemocyten <ol><li> Plaats de rups in een petrischaal onder de dissectiemicroscoop. </li><li> Een ondiepe (2-3 mm lang) incisie in het achterste gedeelte van de rupsband met een steriel scalpe<html> l (Figuur 3). Zorg ervoor dat u de darm of andere inwendige organen beschadigen, het doel is om het doorprikken van de cuticula zorgvuldig en verzamel de buffer / hemolymfe mix met hemocyten van individuele insecten. </li><li> Knijp voorzichtig in de rups met behulp van flexibele kunststof pincet terwijl het verzamelen van de hemolymfe mix (ongeveer 10-20 ui) met een 10 ul pipet tip, weer zorg ervoor dat u de interne weefsels (figuur 3) verwonden. Hemolymfe wordt verzameld uit de druppel geperst uit het lichaam van de rups. Gooi de rups de overblijfselen. </li><li> Verzamel hemolymfe van elke afzonderlijke rups in afzonderlijke label gesiliconiseerd 0,5 ml microcentrifugebuisjes. </li><li> Voeg gelijke volume van de incubatie-oplossing (ongeveer 10-20 ui) aan elk monster hemolymfe vanuit een individu rups. Houden hemolymfe monsters op ijs te allen tijde. </li><li> Herhaal stappen 3.1-3.5 voor elke rupsband gebruikt in het experiment. </li></ol>le &quot;&gt; 4. Kwantificering van hemocyten <ol><li> Meng de hemolymfe monster en de incubatie-oplossing onmiddellijk voorafgaand aan het tellen hemocyten. Deze behandeling zorgt voor een goede scheiding van hemocyten en voorkomt klonteren. </li><li> Gebruik een schone pipet tip om 10 ul van hemolymfe monster, gemengd met de incubatie oplossing op een hemocytometer te dragen. </li><li> Met een samengestelde microscoop, tellen en dient het aantal hemocyten in ten minste 15 van de grote vierkanten (oppervlak van een vierkante: 0,04 mm 2, diepte: 0,1 mm) van het centrale rooster van de hemocytometer (figuur 3). Voeg deze waarden een totale som van het aantal hemocyten in de 15 vierkanten ontstaat. </li><li> Spoel de hemocytometer en het deksel schuif grondig met een wasfles met gedestilleerd en gedeïoniseerd water en droog het af met Kimwipes (Kimberly-Clark) na elk monster. </li><li> Herhaal stap 4,1-4,4 voor elke hemolymfe monster. </li><li> Bereken het gemiddelde aantal hemocyten per ml hemolymfe volume voor elke rups, als volgt: </li></ol> Totale volume van elk vierkant van de hemocytometer rooster: (0,04 mm 2-gebied) × (0,1 mm diepte) = 0,004 mm 3 × 15 vierkantjes = 0,06 mm 3 = het totale volume van alle 15 geteld pleinen. (Som van het totaal aantal hemocyten in de 15 vierkanten geteld / het totale volume van alle 15 vierkanten geteld) x 2 = verdunningsfactor het aantal hemocyten / mm 3 x 1000 = het aantal hemocyten / ml hemolymfe.

<ol><li>Hartenstein, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+cells+and+blood+cell+development+in+the+animal+kingdom%5BTitle%5D)+AND+%22Annu.+Rev.+Cell+Dev.+Biol%22%5BJournal%5D)">Blood cells and blood cell development in the animal kingdom.</a> Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 22, 677(2006).</li>
<li>Wood, W., Jacinto, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+melanogaster+embryonic+haemocytes%3A+masters+of+multitasking%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Mol.+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Drosophila melanogaster embryonic haemocytes: masters of multitasking.</a> Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 8 (7), 542(2007).</li>
<li>Strand, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+insect+cellular+immune+response%5BTitle%5D)+AND+%22Insect+Sci%22%5BJournal%5D)">The insect cellular immune response.</a> Insect Sci. 15 (1), 1(2008).</li>
<li>Fauvarque, M. O., Williams, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+cellular+immunity%3A+a+story+of+migration+and+adhesion%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">Drosophila cellular immunity: a story of migration and adhesion.</a> J. Cell Sci. 124 (9), 1373(2011).</li>
<li>Nehme, N. T., Quintin, J., Cho, J. H., Lee, J., Lafarge, M. C., Kocks, C., Ferrandon, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relative+roles+of+the+cellular+and+humoral+responses+in+the+Drosophila+host+defense+against+three+gram-positive+bacterial+infections%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Relative roles of the cellular and humoral responses in the Drosophila host defense against three gram-positive bacterial infections.</a> PLoS One. 6 (3), e14743(2011).</li>
<li>Ulvila, J., Vanha-Aho, L. M., Rämet, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+phagocytosis+-+still+many+unknowns+under+the+surface%5BTitle%5D)+AND+%22APMIS%22%5BJournal%5D)">Drosophila phagocytosis - still many unknowns under the surface.</a> APMIS. 119 (10), 651(2011).</li>
<li>Moreira, C. G., Regan, J. C., Zaidman-Remy, A., Jacinto, A., Praq, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+hemocyte+migration%3A+an+in+vivo+assay+for+directional+cell+migration%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">Drosophila hemocyte migration: an in vivo assay for directional cell migration.</a> Methods Mol. Biol. 769, 249(2011).</li>
<li>Hillyer, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mosquito+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Adv.+Exp.+Med.+Biol%22%5BJournal%5D)">Mosquito immunity.</a> Adv. Exp. Med. Biol. 708, 218(2010).</li>
<li>Castillo, J. C., Robertson, A. E., Strand, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+hemocytes+from+the+mosquitoes+Anopheles+gambiae+and+Aedes+aegypti%5BTitle%5D)+AND+%22Insect+Biochem.+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">Characterization of hemocytes from the mosquitoes Anopheles gambiae and Aedes aegypti.</a> Insect Biochem. Mol. Biol. 36 (12), 891(2006).</li>
<li>Jiang, H., Vilcinskas, A., Kanost, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunity+in+lepidopteran+insects%5BTitle%5D)+AND+%22Adv.+Exp.+Med.+Biol%22%5BJournal%5D)">Immunity in lepidopteran insects.</a> Adv. Exp. Med. Biol. 708, 181(2010).</li>
<li>Eleftherianos, I., Xu, M., Yadi, H., ffrench-Constant, R. H., Reynolds, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasmatocyte-spreading+peptide+%28PSP%29+plays+a+central+role+in+insect+cellular+immune+defenses+against+bacterial+infection%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">Plasmatocyte-spreading peptide (PSP) plays a central role in insect cellular immune defenses against bacterial infection.</a> J. Exp. Biol. 212 (12), 1840(2009).</li>
<li>Ribeiro, C., Brehélin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insect+haemocytes%3A+what+type+of+cell+is+that%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Insect+Physiol%22%5BJournal%5D)">Insect haemocytes: what type of cell is that.</a> J. Insect Physiol. 52 (5), 417(2006).</li>
<li>Beetz, S., Brinkmann, M., Trenczek, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differences+between+larval+and+pupal+hemocytes+of+the+tobacco+hornworm%2C+Manduca+sexta%2C+determined+by+monoclonal+antibodies+and+density+centrifugation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Insect+Physiol%22%5BJournal%5D)">Differences between larval and pupal hemocytes of the tobacco hornworm, Manduca sexta, determined by monoclonal antibodies and density centrifugation.</a> J. Insect Physiol. 50 (9), 805(2004).</li>
<li>Beetz, S., Holthusen, T. K., Koolman, J., Trenczek, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Correlation+of+hemocyte+counts+with+different+developmental+parameters+during+the+last+larval+instar+of+the+tobacco+hornworm%2C+Manduca+sexta%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Insect+Biochem.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Correlation of hemocyte counts with different developmental parameters during the last larval instar of the tobacco hornworm, Manduca sexta.</a> Arch. Insect Biochem. Physiol. 67 (2), 63(2008).</li>
<li>Eleftherianos, I., Joyce, S., ffrench-Constant, R. H., Clarke, D. J., Reynolds, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Probing+the+tri-trophic+interaction+between+insects%2C+nematodes+and+Photorhabdus%5BTitle%5D)+AND+%22Parasitology%22%5BJournal%5D)">Probing the tri-trophic interaction between insects, nematodes and Photorhabdus.</a> Parasitology. 137 (11), 1695(2010).</li>
<li>Qayum, A. A., Telang, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Protocol+for+Collecting+and+Staining+Hemocytes+from+the+Yellow+Fever+Mosquito+Aedes+aegypti%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">A Protocol for Collecting and Staining Hemocytes from the Yellow Fever Mosquito Aedes aegypti.</a> J. Vis. Exp. (51), e2772(2011).</li>
</ol>

Geen belangenconflicten verklaard.

Werkwijzen voor het extraheren van hemocyten medisch belangrijke lepidoptera insecten en insecten model eerder gemeld 9, 14. Hemocyte extractie zijn aangepast op basis van de insectensoorten, de ontwikkelingsfase van het insect en de morfologische kenmerken. Zo kan hemolymfe isolatie van Manduca larven gemakkelijk worden uitgevoerd door knippen de gebogen hoorn het einde van de buik 15. Omdat slug rupsen (Limacodidae) missen deze buik structuur, hebben we een aparte protocol voor hemolymfe...

<table border="1"><tbody><tr><td> Naam van het reagens </td><td> Vennootschap </td><td> Catalogusnummer </td><td> Reacties </td></tr><tr><td> Micropipet trekker </td><td> Sutter Instrumenten </td><td> P-1000 </td><td></td></tr><tr><td> Borosilicaatglas buizen </td><td> Sutter Instrumenten </td><td> B100-50-10 </td><td> OD: 1,0, ID: 0,50 mm </td></tr><tr><td> Grace&#39;s Medium </td><td> Sigma </td><td> G8142 </td><td></td></tr><tr><td> Fetal Bovine Serum </td><td> Thermo Fisher Scientific </td><td> SH3007102 </td><td> Hitte geïnactiveerd </td></tr><tr><td> Dumont # 5 Forceps </td><td> Fine Science Tools </td><td> 11.252-40 </td><td></td></tr><tr><td> Neubauer hemocytometer </td><td> Hausser Wetenschappelijke </td><td> 3200 </td><td></td></tr><tr><td> Plastic Tubing </td><td> Tri-Tech </td><td> TT-3-32OD </td><td> OD: 3/32&#39;&#39;, ID: 1/32 &#39; </td></tr><tr><td> Glas medische spuit </td><td> Fortuna Optima </td><td> D-97877 </td><td> 50 ml volume </td></tr><tr><td> Stomp uiteinde naald </td><td> Kleine onderdelen </td><td> NE-162PL-25 </td><td> 16 Gauge x 1 &quot;lengte </td></tr></tbody></table>

een eenvoudig protocol voor het extraheren van hemocyten van wild rupsen

A Simple Protocol for Extracting Hemocytes from Wild Caterpillars

Insect hemocyten (gelijk aan zoogdieren witte bloedcellen) spelen een belangrijke rol in diverse fysiologische processen in het leven van een insect cyclus 1. In larvale stadia van insecten behorend tot de orde van de Lepidoptera (motten en vlinders) en Diptera (ware vliegen), worden hemocyten gevormd uit de lymfeklier (een gespecialiseerde hematopoietische orgel) of embryonale cellen en kan worden uitgevoerd door middel van het volwassen stadium. Embryonale hemocyten zijn betrokken bij celmigratie gedurende de ontwikkeling en chemotaxis regelgeving tijdens de ontsteking. Zij nemen ook deel in cel apoptose en zijn essentieel voor embryogenese 2. Hemocyten bemiddelen de cellulaire arm van het insect aangeboren immuunrespons die verschillende functies, zoals celspreiding, cel aggregatie, vorming van nodules, fagocytose en inkapseling van indringers 3 omvat. Zij zijn ook verantwoordelijk voor het orkestreren specifieke humorale afweer insect tijdens infectie, zoals de productie van antimicrobiële peptiden en andere effectormoleculen 4, 5. Hemocyte morfologie en functie zijn voornamelijk bestudeerd in genetische of fysiologische insect modellen, zoals de fruitvlieg Drosophila melanogaster 6, 7, de muggen Aedes aegypti en Anopheles gambiae 8, 9 en de tobacco hornworm, Manduca sexta 10, 11. Er is echter weinig informatie bestaat momenteel over de diversiteit, classificatie, morfologie en functie van hemocyten in niet-model insectensoorten, met name die uit het wild gehaald 12. Hier beschrijven we een eenvoudig en efficiënt protocol voor de extractie van hemocyten van wilde rupsen. We gebruiken voorlaatste instar Lithacodes Fasciola (geel-schouders slug mot) (figuur 1) en Euclea delphinii (spiny eiken slug) rupsen (Lepidoptera: Limacodidae) en laten zien dat er voldoende hoeveelheden hemolymfe (insect bloed)kan worden geïsoleerd en hemocyte aantal getelde van individuele larven. Deze methode kan worden gebruikt om efficiënt onderzoeken hemocyte types in deze soorten en in andere lepidoptera rupsen geoogst van het veld, of het kan eenvoudig worden gecombineerd met immunologische assays ontworpen hemocyte functie onderzoeken na infectie met bacteriën of parasitaire organismen 13.

Het protocol hier beschreven staat de inzameling toe van een minimaal volume van 10-20 ul van insecten hemolymfe van individuele rupsen. Hemocyten verzameld via deze werkwijze zijn vrij van cellen klonteren, melanisatie gebreken weefsel vuil of andere verontreinigingen. Daarom hemocyten gemakkelijk kunnen worden waargenomen en geteld onder de microscoop en diverse insecten kunnen worden waargenomen binnen een paar Hosur. We hebben waargenomen dat de meeste hemocyten in onze monsters bestonden uit plasmatocytes 3</s...

Insect hemocyten voeren tal van belangrijke functies, zowel immune als niet-immune, in alle stadia van insecten ontwikkeling. Onze huidige kennis van hemocyte soorten en functie komt van studies over insecten genetische modellen. Hier presenteren we een methode voor het extraheren, het kwantificeren en visualiseren hemocyten van wilde rupsen.

Een eenvoudig protocol voor het extraheren van hemocyten van Wild Rupsen

Insectenhemocyten (gelijk aan de witte bloedcellen bij zoogdieren) spelen een belangrijke rol in verschillende fysiologische processen gedurende de levenscyclus van een insect ...

Het algemene doel van deze procedure is om hemocyten uit wilde rupsen te extraheren, te visualiseren en te tellen. Dit wordt bereikt door de rups eerst te anesthetiseren door deze op ijs te plaatsen, een buffersolution met een antistollingsmiddel te injecteren en de rups terug op het ijs te plaatsen zodat de hemocyten opnieuw in de circulatie kunnen komen voordat de extractie plaatsvindt. De tweede stap is het maken van een ondiepe incisie aan het posterieure uiteinde van de rups met een schoon scalpel.Vervolgens wordt de rups voorzichtig samengedrukt met een zachte pincet. Daarna wordt het mengsel van bufferoplossing en hemolymfe opgezogen met een micropipet en opgevangen in een microcentrifugebuisje. De laatste stap is om de hemolymfe-oplossing voorzichtig te mengen met een gelijk volume bufferoplossing en 10 µL van de oplossing over te brengen naar een hemocytometer om de hemocyten te visualiseren en te tellen.Uiteindelijk kan deze methode voor hemocyt-extractie worden gebruikt als een snelle en effectieve manier om hemocyten van diverse rupsensoorten te tellen en kan deze dienen als instrument om fysiologische aspecten van de cellulaire immuunrespons van de insecten te onderzoe

a-simple-protocol-for-extracting-hemocytes-from-wild-caterpillars

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

Deze video zal laten zien hoe je hemocytes (bloedcellen) te verkrijgen van de Hawaiiaanse Bobtail...

Het verkrijgen van Hemocytes van de Hawaiiaanse Bobtail Squid Euprymna scolopes En observatie van de Naleving van Symbiotische en niet-symbiotische bacteriën

Een vereenvoudigde toch nauwkeurige methode voor het verzamelen en vlekken mug hemocytes wordt beschreven. Onze methode combineert de eenvoud van perfusie met de nauwkeurigheid van hoge injectie technieken om schoon voorbereidingen van hemocytes in Aedes muggen te isoleren. Deze methode maakt studies vereist kennis van de soorten hemocytes en hun overvloed.

Een protocol voor het verzamelen en Kleuring Hemocytes uit de Yellow Fever Mosquito Aedes aegypti</em

Deze video beschrijft de Drosophila-lymfklier - de primaire plaats van hematopoiese in de vlieglarve - en toont een voorbeeldprotocol om het orgaan te ontleden en te monteren voor immunohistochmie en fluorescerende beeldvorming.

Larvale lymfklierdissectie: het isoleren van het Drosophila Hemocyt-producerende orgaan

De Drosophila hemolymph dient als zowel bloed als interstitiële vloeistof en circuleert door het hele lichaam tijdens de larve- en volwassen stadia. Deze video beschrijft een protocol om larvale hemolymph te verzamelen om de circulerende cellen te kwantificeren.

Cuticula disruptie: een methode om hemolymph te verzamelen van Drosophila larven

This video demonstrates the hemocyte disturbance assay, evaluating hemocyte re-adhesion in Drosophila larvae's hematopoietic pockets. Mechanical disturbance releases resident hemocytes, elevating circulating hemocyte counts. Post-recovery, re-adherence of resident hemocytes is confirmed, illustrating reversibility.

A Hemocyte Disturbance Assay to Assess Hemocyte Re-Adhesion to Hematopoietic Pockets

Drosophila bloedcellen, of hemocyten, circuleren tussen residente locaties en circulatie.  In de larve lokaliseren residente (sessile) hemocyten zich in inductief micro-omgevingen, de hematopoietische zakken, terwijl circulerende hemocyten vrij bewegen in de hemolymf. Het doel van dit protocol is de gestandaardiseerde isolatie en kwantificering van deze twee, gedragsmatig verschillende maar onderling uitwisselbare, hemocytpopulaties.

Testen Bloedcel Populaties van de<em&gt; Drosophila melanogaster</em&gt; Larva

Drosophila en zoogdieren hematopoietische systemen hebben veel gemeenschappelijke kenmerken, waardoor Drosophila een aantrekkelijke genetische model om hematopoiese te bestuderen. Hier laten we dissectie en montage van grote larvale hematopoëtische organen voor immunohistochemie. We beschrijven ook werkwijzen om verschillende larvale hematopoietische compartimenten waaronder circulerende hemocytes sessiele kristalcellen testen.

Methoden om Onderzoek de lymfeklier en Hemocytes in<em&gt; Drosophila</em&gt; Larven

Deze methode laat zien hoe om te visualiseren pathogen invasie in insect cellen met driedimensionale (3D) modellen. Hemocytes van Drosophila larven waren besmet met virale of bacteriële pathogenen, ex vivo of in vivo. Besmette hemocytes werden vervolgens vast en gekleurd voor imaging met een confocal microscoop en de daaropvolgende 3D cellulaire wederopbouw.

Winning van Hemocytes van Drosophila melanogaster larven voor microbiële infectie en analyse

Analyse van Tick hemolymph vertegenwoordigt een belangrijke bron van informatie over hoe sommige ziekteverwekkers ziekte veroorzaken en hoe teken immunologisch reageren op deze infectie. De huidige studie toont aan hoe inoculeren schimmel propagulen en het verzamelen van hemolymph van Rhipicephalus Microplus engorged vrouwtjes.

Het onthullen van Hemolymph inzameling en inenting van anisopliae Blastospores in Rhipicephalus Microplus teken naar ongewervelde pathologie studies

Hier presenteren we protocollen voor 1) het laboratorium in gevangenschap voortplanting van de federaal bedreigde Miami blauwe vlinder(Cyclargus thomasi bethunebakeri), en 2) de beoordeling van elementaire levensgeschiedenis informatie, zoals onvolwassen ontwikkelingstijd en het aantal larve stadia. Beide methoden kunnen worden aangepast voor gebruik met andere ex situ conserveringsprogramma's.

At-Risk Butterfly Captive propagatie programma's ter verbetering van life history kennis en effectieve Ex Situ Conservation Technieken

We beschrijven een methode om kwantificeerbare hemolymfe efficiënt te verzamelen uit kleine geleedpotigen voor latere analyse.

Een nauwkeurige en kwantificeerbare methode voor het verzamelen van hemolymfe van kleine geleedpotigen

Leer een eenvoudige methode om hemocyten te extraheren, visualiseren en kwantificeren uit wilde rupsen. Deze techniek ondersteunt onderzoek naar insectenimmunologie en celulaire immuunreacties.

Een eenvoudig protocol voor het extraheren van hemocyten van Wild Rupsen

Meer video's verkennen