Name: Bioluminescent Bacteriële Imaging In Vivo (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-11-04T23:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 6 s
Description: Leer bioluminescente beeldvorming om bacteriële groei in tumoren van levende muizen te volgen. Deze niet-invasieve methode ondersteunt onderzoek naar bacteriën als therapeutische vectoren voor kankerbehandeling.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De auteurs willen ondersteunen die relevant zijn voor dit manuscript erkennen van de Europese Commissie zevende kaderprogramma (PIOF-GA-2009 tot 255.466 duizend) en de Ierse Health Research Board (HRA_POR/2010/138). Lux-gelabelde E. coli was een vriendelijke gift van Dr Cormac Gahan, University College Cork.

1. Tumor Inductie <ol><li> Voor routine tumorinductie werd de minimale dosis van tumorigene cellen gesuspendeerd in 200 ul serumvrij kweekmedium subcutaan (sc) in de flank van infectievrije 6-8 weken oude vrouwelijke Balb / C muizen of athymische MF1-nu/nu n = 6 (Harlan, Oxfordshire, UK) (1 x 10 6 4T1 cellen) met een 21-gauge naald. De levensvatbaarheid van cellen voor inoculatie bedroeg meer dan 95% zoals bepaald door visuele telling met een hemocytometer en Trypan Blue Dye Exclusion (Gibco). </li><li> Na tumor oprichting werden tumoren kunnen groeien en ontwikkelen, en waren twee keer per week gecontroleerd. Het tumorvolume werd berekend volgens de formule V = (ab 2) Π / 6, waarbij a de langste diameter van de tumor is en b de langste diameter loodrecht op een diameter. </li></ol> 2. Bereiding bacteriële <ol><li> De bacteriële stam die in deze protocoIk was E. coli K-12 MG1655, een niet-eiwit-toxine-expressie brengende stam, herbergde een luxABCDE coderende plasmide waarmee de bacteriën worden gedetecteerd door BLI. E. coli MG1655 bevattende geïntegreerde luxABCDE werd aëroob gekweekt bij 37 ° C in LB medium (Sigma-Aldrich, België) aangevuld met 300 ug / ml erythromycine (Em). De bioluminescente afgeleide van MG1655 werd gemaakt met behulp van het plasmide p16S lux die de constitutieve P HELP luxABCDE operon 1 bevat. </li><li> Voor preparaat voor toediening aan muizen, werden de kweken geïncubeerd in LB-medium bij 37 ° C in een schudinrichting bij 200 rpm tot mid-log fase (optische dichtheid bij 600 nm). Bacteriën werden geoogst door centrifugatie (6.000 x g gedurende 5 min), gewassen met PBS (Sigma), en verdund in PBS 1 x 10 7 kolonievormende eenheden (cfu) / ml voor IV toediening, of 1 x 10 10 voor gavage. </li></ol> 3. Bacteriële Administratie <ol><li> Muizen werden willekeurig verdeeld in experimentele groepen als tumoren bereikt ongeveer 100 mm 3 in volume. Voor intraveneuze toediening, beheerst muizen elk 10 6 cellen in 100 ul ontvangen, direct geïnjecteerd in de laterale staartader met een 28G naald. Het kiemgetal van elk inoculum werd bepaald door plateren achteraf. </li><li> Voor GIT kolonisatie studies werden 10 9 bacteriecellen oraal toegediend in 100 ul per muis via een maagsonde, op drie opeenvolgende dagen. Reeds bestaande commensale bacteriën niveaus werden vóór gedaald tot voeden door toevoeging van 5 mg / ml streptomycine in muis drinkwater gedurende 7 dagen voor het begin van orale gavage 1. </li></ol> 4. Bioluminescentie beeldvorming <ol><li> 2D imaging in vivo BLI werd uitgevoerd met IVIS100 (Caliper). Op bepaalde tijdstippen na bacteriële administratie, muizen werden verdoofd met behulp van Remklauw XGI-8 Gas AnesthesiaSysteem met 3% Isofluorane en het gehele lichaam werd beeldanalyse uitgevoerd in de IVIS 100 systeem gedurende 2-5 minuten bij hoge gevoeligheid. </li><li> Voor 3D beeldvorming werden verdoofde muizen in een muis imaging shuttle binnenkant van het optisch afbeeldingsstelsel voor dorsale imaging (IVIS Spectrum, Caliper). Beelden van de bacteriële luciferase signaal voor 3D optische reconstructie verkrijgen, werden emissiefilter golflengte tussen 500 tot 580 nm gebruikt bak 16 Zoektijden van 3-4 min per filter om de signaal-ruisverhouding te maximaliseren. Als onderdeel van deze afbeelding acquisitie-sequentie werd een gestructureerd licht beeld verkregen tot een hoogte kaart te definiëren. Deze kaart werd ingevoerd diffuus licht beeldvorming tomografie (DLIT) reconstructies algoritmen die zijn gebruikt om een 3D optische afbeelding met behulp van een niet-negatief kleinste kwadraten optimalisatie 2 te vormen. </li><li> Afbeelding Analyse: Regio&#39;s van belang werden geïdentificeerd en gekwantificeerd met behulp van Living Image software (Remklauw). </li></ol> 5. VertegenwoordigerResultaten In deze studie, de niet-pathogene commensale bacteriën E.coli K-12 expressie MG1655 de luxABCDE operon was IV toegediend aan muizen die sc 4T1 xenograft tumoren. Bacteriële lux signaal werd specifiek gedetecteerd in tumoren van muizen na IV-toediening (figuur 2). Cultuur recovery van bacteriën bij muizen monster bevestigt het bestaan ​​van een lineair verband tussen levensvatbare bacteriële aantallen en de hoeveelheid gedetecteerde licht (Figuur 3). In vivo beeldvorming van oraal toegediende commensale bacteriën in de GIT wordt ook bereikt met 3D BLI. <img src="/files/ftp_upload/4318/4318fig1.jpg" alt="Figuur 1" fo:content-width="4in" fo:src="/files/ftp_upload/4318/4318fig1highres.jpg"/> Figuur 1. Protocol tijdlijn. Subcutane tumoren worden geïnduceerd in muizen, en bacteriën toegediend op tumorontwikkeling (100 mm 3). Levende muizen zijn BLI imjaar op verschillende tijdstippen na bacteriële administratie (pijlen weer typisch keer). <img src="/files/ftp_upload/4318/4318fig2.jpg" alt="Figuur 2" /> Figuur 2. Toediening van E. coli MG1655 luxABCDE aan tumor dragende muizen. Subcutane tumoren werden geïnduceerd 4T1 MF1 in nu / nu muizen en E. coli MG1655 luxABCDE toegediend bij de ontwikkeling van tumoren. Elk dier ontving 10 6 cellen direct geïnjecteerd in de laterale staartader. Muizen werden afgebeeld op vier tijdstippen tijdens de studie (zwarte stippen z-as en beelden) gevolgd herstel van levensvatbare bacteriën (cfu) van tumoren van muizen opgeofferd monster (staafdiagram). Verhoging van de hoeveelheid bacteriën en plasmide genexpressie in het bijzonder in tumoren waargenomen na verloop van tijd (vertegenwoordiger muis geïllustreerd per tijdstip). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/4318/4318fig2large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere afbeelding te bekijken</a> .<img src="/files/ftp_upload/4318/4318fig3.jpg" alt="Figuur 3" /> Figuur 3. Relatie tussen intratumorale Bacteriële Numeri en bioluminescentie. Levensvatbare bacteriën in tumoren werden opgesomd door ex vivo bacteriecultuur van tumoren na BLI op verschillende tijdstippen na intraveneuze toediening. Log waarden van de bacteriële aantallen (cfu) ten opzichte van in vivo bioluminesce eenheden opgenomen. Een sterk verband tussen bacteriële tellingen en bacteriële bioluminescentie signalen waargenomen R 2 = 0,9717 1. <img src="/files/ftp_upload/4318/4318fig4.jpg" alt="Figuur 4" /> Figuur 4. 3D IVIS Afbeelding Van Murine Maagdarmkanaal gekoloniseerd door E. coli MG1655. GIT De muizen gekoloniseerd door orale toediening van 10 9 cfu van E. coli gedurende drie opeenvolgende dagen. Een voorbeeld van een geïsoleerd beeld van 3D tomografie van de gekoloniseerde muis wordt weergegeven.3D-beelden tonen een digitale muis atlas van het skelet aan anatomische registratie. E. coli MG1655 bioluminescentie in groen zichtbaar bij lagere en paars op hogere niveaus.

<ol><li>Cronin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+resolution+in+vivo+bioluminescent+imaging+for+the+study+of+bacterial+tumour+targeting%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">High resolution in vivo bioluminescent imaging for the study of bacterial tumour targeting.</a> PLoS One. 7, e30940(2012).</li>
<li>Kuo, C., Coquoz, O., Troy, T. L., Xu, H., Rice, B. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+reconstruction+of+in+vivo+bioluminescent+sources+based+on+multispectral+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomed.+Opt%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional reconstruction of in vivo bioluminescent sources based on multispectral imaging.</a> J. Biomed. Opt. 12, 024007(2007).</li>
<li>Tangney, M., Ahmad, S., Collins, S. A., O'Sullivan, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+therapy+for+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Postgrad+Med%22%5BJournal%5D)">Gene therapy for prostate cancer.</a> Postgrad Med. 122, 166-180 (2010).</li>
<li>Morrissey, D., O'Sullivan, G. C., Tangney, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumour+targeting+with+systemically+administered+bacteria%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Tumour targeting with systemically administered bacteria.</a> Curr. Gene Ther. 10, 3-14 (2010).</li>
<li>Collins, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Viral+vectors+in+cancer+immunotherapy%3A+which+vector+for+which+strategy%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Viral vectors in cancer immunotherapy: which vector for which strategy.</a> Curr. Gene Ther. 8, 66-78 (2008).</li>
<li>Yu, Y. A., Zhang, Q., Szalay, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+and+characterization+of+conditions+required+for+tumor+colonization+by+intravenously+delivered+bacteria%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnol.+Bioeng%22%5BJournal%5D)">Establishment and characterization of conditions required for tumor colonization by intravenously delivered bacteria.</a> Biotechnol. Bioeng. 100, 567-578 (2008).</li>
<li>Baban, C. K., Cronin, M., O'Hanlon, D., O'Sullivan, G. C., Tangney, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bacteria+as+vectors+for+gene+therapy+of+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Bioeng.+Bugs%22%5BJournal%5D)">Bacteria as vectors for gene therapy of cancer.</a> Bioeng. Bugs. 1, 385-394 (2010).</li>
<li>Cronin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orally+administered+bifidobacteria+as+vehicles+for+delivery+of+agents+to+systemic+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Ther%22%5BJournal%5D)">Orally administered bifidobacteria as vehicles for delivery of agents to systemic tumors.</a> Mol. Ther. 18, 1397-1407 (2010).</li>
<li>van Pijkeren, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+Listeria+monocytogenes-based+DNA+delivery+system+for+cancer+gene+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">A novel Listeria monocytogenes-based DNA delivery system for cancer gene therapy.</a> Hum. Gene Ther. 21, 405-416 (2010).</li>
<li>Ahmad, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+effective+antitumor+response+after+mucosal+bacterial+vector+mediated+DNA+vaccination+with+endogenous+prostate+cancer+specific+antigen%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Urol%22%5BJournal%5D)">Induction of effective antitumor response after mucosal bacterial vector mediated DNA vaccination with endogenous prostate cancer specific antigen.</a> J. Urol. 186, 687-693 (2011).</li>
<li>Riedel, C. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+luciferase+tagging+system+for+Listeria+monocytogenes+allows+real-time+monitoring+in+vivo+and+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Environ+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Improved luciferase tagging system for Listeria monocytogenes allows real-time monitoring in vivo and in vitro.</a> Appl Environ Microbiol. 73, 3091-3094 (2007).</li>
<li>Cheng, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor-targeting+prodrug-activating+bacteria+for+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Tumor-targeting prodrug-activating bacteria for cancer therapy.</a> Cancer Gene Ther. 15, 393-401 (2008).</li>
<li>Foucault, M. L., Thomas, L., Goussard, S., Branchini, B. R., Grillot-Courvalin, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+bioluminescence+imaging+for+the+study+of+intestinal+colonization+by+Escherichia+coli+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Appl.+Environ.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">In vivo bioluminescence imaging for the study of intestinal colonization by Escherichia coli in mice.</a> Appl. Environ. Microbiol. 76, 264-274 (2010).</li>
<li>Collins, S. A., Hiraoka, K., Inagaki, A., Kasahara, N., Tangney, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PET+Imaging+For+Gene+%26+Cell+Therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">PET Imaging For Gene & Cell Therapy.</a> Curr. Gene Ther. , (2012).</li>
<li>Tangney, M., Francis, K. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+Optical+Imaging+in+Gene+%26+Cell+Therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">In vivo Optical Imaging in Gene & Cell Therapy.</a> Curr. Gene Ther. , (2012).</li>
</ol>

Geen belangenconflicten verklaard.

In de context van gentherapie, is het gebruik van biologische agentia voor de levering van therapeutische genen aan patiënten grote belofte 3-5. Zoals virussen, de aangeboren biologische eigenschappen van bacteriën mogelijk efficiënte DNA afgifte aan cellen of weefsels, met name in de context van kanker. Aangetoond is dat bacteriën van nature kunnen homing tumoren bij systemische toediening resulteert in hoge niveaus van replicatie lokaal of buiten (niet-invasieve soorten) of binnen tumorcellen (pathogenen). ...

<table border="1"><tbody><tr><td> Naam van het reagens </td><td> Vennootschap </td><td> Catalogusnummer </td><td> Reacties </td></tr><tr><td> 4T1 cellijn </td><td> ATCC </td><td> CRL-2539 </td><td> Syngene borstkankermodel afgeleid van een spontaan ontstaan ​​BALB / c borsttumor </td></tr><tr><td> DMEM </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> D6429 </td><td> Dulbecco&#39;s Modified Eagle&#39;s Medium </td></tr><tr><td> PBS </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> D8537 </td><td> Fosfaat gebufferde zoutoplossing </td></tr><tr><td> Xenogen IVIS </td><td> Caliper Life Sciences </td><td></td><td> IVIS 100 voor 2D-beeldvorming; IVIS Spectrum voor 3D. </td></tr><tr><td> Luria Broth Miller (LB) </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> L2542 </td><td> Groeimedium voor E. coli </td></tr&gt; <tr><td> Erythromycine </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> E5389 </td><td> Antibioticum </td></tr><tr><td> Streptomycine </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> S9137 </td><td> Antibioticum </td></tr><tr><td> MF1nu/nu muizen </td><td> Harlan (UK) </td><td> 069 (nu) / 070 (nu / +) </td><td> HSD: Athymische Naakt-Foxn1nu </td></tr><tr><td> Balb / c muizen </td><td> Harlan (UK) </td><td> 066 </td><td> Haplotype: H-2 d </td></tr><tr><td> Gavage naald </td><td> Vet-tech Solutions (UK) </td><td> DE009 </td><td> 22G x 38mm rechte sonde naald </td></tr><tr><td> Spuit voor intraveneuze injectie </td><td> BD BioSciences </td><td> 309309-1 ml </td><td> Insuline spuit met 28 G x ½ inch micro-fijne IV naald. </td></tr><tr><td> Injectiespuit tumorinoculatie </td><td> Braun </td><td> 9161376V </td><td> Omnifix 26 G x &amp;frac12; inch naald </td></tr></tbody></table>

bioluminescent bacteriële imaging<em&gt; in vivo</em

Bioluminescent Bacterial Imaging In Vivo

Deze video beschrijft het gebruik van het gehele lichaam bioluminesce imaging (BLI) voor de studie van bacteriële handel in levende muizen, met een nadruk op het gebruik van bacteriën in gen-en celtherapie voor kanker. Aanwezige bacteriën een aantrekkelijke klasse van vector voor de behandeling van kanker, het bezit van een natuurlijke vermogen om bij voorkeur binnen tumoren groeien na systemische toediening. Bacteriën ontworpen om het lux-gen cassette vergunning BLI detectie van de bacteriën en tegelijkertijd tumorplaatsen drukken. De locatie en de hoeveelheid bacteriën in tumoren tijd gemakkelijk worden onderzocht, gevisualiseerd in twee of drie dimensies. De methode is toepasbaar op een breed scala aan bacteriesoorten en tumor xenograft types. Dit artikel beschrijft het protocol voor analyse van bioluminescente bacteriën in subcutane tumor dragende muizen. Visualisatie van commensale bacteriën in het maag-darmkanaal (GIT) door BLI wordt ook beschreven. Deze krachtige, en goedkoop, real-time beeldvorming strategie vertegents een ideale methode voor de studie van bacteriën in vivo in het kader van kankeronderzoek, met name gentherapie en infectieziekten. Deze video beschrijft de procedure voor het bestuderen van lux-gelabelde E. coli in levende muizen, waaruit de ruimtelijke en temporele uitlezing haalbaar gebruik te maken van BLI met de IVIS-systeem.

Dit artikel beschrijft de toediening van<em&gt; Lux-gelabelde</em&gt; Bacteriën muizen en daaropvolgende<em&gt; In vivo</em&gt; Analyse met behulp van bioluminescentie IVIS beeldvorming.

Bioluminescent Bacteriële Imaging<em&gt; In Vivo</em

Deze video beschrijft het gebruik van bioluminescentie-imaging (BLI) van het gehele lichaam voor de studie naar bacteriële trafficking in levende muizen, met een nadruk op het gebruik van ...

Deze video beschrijft het gebruik van bioluminescente beeldvorming van het hele lichaam voor de studie van bacteriële trafficking in levende muizen, met een nadruk op de detectie van bacteriële groei binnen tumorxenografts. Bacteriën vormen een aantrekkelijke klasse vectoren voor cancertherapie, aangezien zij een natuurlijk vermogen bezitten om bij intraveneuze toediening preferentieel binnen tumoren te groeien, waarbij zij zich ofwel extern aan ofwel binnenin tumorcellen ontwikkelen. Bacteriële stammen die genetisch zijn gemodificeerd om de lux-gen cassette tot expressie te brengen, vergemakkelijken de detectie van zowel de bacteriën als de tumoren. De waarde van niet-invasieve longitudinale monitoring van bacteriële stammen in vivo is algemeen aanvaard, aangezien dit het aantal gebruikte dieren vermindert en statistisch relevantere gegevens oplevert dan endpoint assays.Deze procedure omvat de inductie van subcutane tumoren bij muizen. De tumoren krijgen de kans om zich te ontwikkelen en worden in de loop van de tijd gemonitord. Voor de hier beschreven experimenten worden bacteriën toegediend en worden de muizen op specifieke tijdstippen onderworpen aan bioluminescentie-imaging.Subcutane tumoren worden geïnduceerd bij muizen met een immuuncompetente of een thymische achtergrond. Afhankelijk van de keuze van het xenograft worden Lux-type bacteriën van de gewenste soort, zoals e coli, gekweekt als overnight-culturen. Bacteriële cellen worden gewassen en geresuspendeerd in de gewenste concentratie voor intraveneuze toediening.10⁶ bacteriële cellen in een injectievolume van 100 µL worden routinematig gebruikt. Muizen met subcutane tumoren van routinematig 100 mm³ volume worden voorbeid voor behandeling.Met een injectienaald van gauge 29 wordt de bacteriële suspensie in de laterale staartvin geïnjecteerd. De bacteriën repliceren na verloop van tijd bij voorkeur binnen de tumormassa. Intratumorale bacteriën blijven gedurende enkele weken repliceren en zijn tussen drie en zes dagen detecteerbaar via IVUS-beeldvorming.Na toediening worden voor bioluminescentie-imaging levende en geanestheseerde muizen geplaatst in de 37 °C kamer van het ivus. Indien gewenst kunnen meerdere muizen gelijktijdig worden geïmageerd. Fotografische en luminescente lichtbeelden worden verzameld met een gekoelde CCD-camera bij de gewenste software-instellingen.Afhankelijk van het beeldvormingsapparaat kan een twee- of driedimensionale analyse worden uitgevoerd. Er is een robuuste en lineaire relatie tussen de intratumorale bacteriële aantallen en de niveaus van het geproduceerde licht, wat een betrouwbare schatting van de bacteriële aantallen in vivo mogelijk maakt. LX-expresserende bacteriën kunnen bovendien worden gedetecteerd vanuit diepere delen van het lichaam.Lux-expresserende, darmkoloniserende commensale bacteriën worden gedurende enkele weken gevisualiseerd. Na toediening via cavage wordt verder aangetoond dat bioluminescentie-imaging nuttig is voor de analyse van lux-expresserende bacteriën in proefdieren.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie en Infectie

Methoden voor bioluminescentie beeldvorming van bacteriële infecties bij levende dieren beschreven. Ziekteverwekkers worden aangepast om luciferase te drukken waardoor optisch het gehele lichaam van infecties in levende dieren. Diermodellen kunnen besmet zijn met luciferase uitdrukken pathogenen en de daaruit voortvloeiende beloop van de ziekte gevisualiseerd in real-time door bioluminescentie imaging.

Met behulp van Luciferase naar Afbeelding bacteriële infecties in Muizen

Hierin beschrijven we de methoden om te bouwen, visualiseren en kwantificeren van de bioluminescente reacties van zowel vuurvlieg en Renilla luciferase enzymen uitgedrukt in gemetastaseerde borstkanker cellen tijdens hun groei en...

In vivo Dual ondergrond Bioluminescent Imaging

Source: de Vries, C. R., et al., A Delayed Inoculation Model of Chronic Pseudomonas aeruginosa Wound Infection. J. Vis. Exp. (2020).This video demonstrates a bioluminescent imaging technique to monitor bacterial infection progression in a live mouse model. Pathogenic bacteria engineered with the luxABCDE reporter system emit light at the infection site, allowing visualization of metabolically active bacteria. By imaging the mouse over time, researchers can non-invasively track infection...

Bioluminescence Imaging of Bacterial Infections in Mice

Source: Valentine, M. E., et al., Generation of In-Frame Gene Deletion Mutants in Pseudomonas aeruginosa and Testing for Virulence Attenuation in a Simple Mouse Model of Infection. J. Vis. Exp. (2020)This video demonstrates the use of a bioluminescence-based imaging approach to monitor bacterial infection in a live mouse model. Sequential bioluminescent and X-ray imaging enables real-time visualization and anatomical localization of infection spread throughout the host.

Real-Time Imaging of Bacterial Infection in a Mouse Model Using Bioluminescence

Source: Wang, Y., et al. In Vivo Investigation of Antimicrobial Blue Light Therapy for Multidrug-resistant Acinetobacter baumannii Burn Infections Using Bioluminescence Imaging. J. Vis. Exp. (2017)This video demonstrates the procedure for imaging burn wound infections in mice inoculated with Acinetobacter baumannii carrying a bioluminescent operon. It demonstrates how luciferase-catalyzed substrate oxidation produces light proportional to bacterial load, enabling real-time monitoring of...

Bioluminescence Imaging of Acinetobacter baumannii-Infected Burn Wounds in Mice

Gecombineerde optische en μCT beeldvorming in een muismodel van orthopedische implantaten infectie, gebruik van een bioluminescent gemanipuleerde stam van Staphylococcus aureus, die het vermogen om de dynamiek van de bacteriële infectie, evenals de overeenkomstige ontstekingsreactie en anatomische veranderingen in de noninvasively longitudinaal bewaken bone.

Gecombineerd<em&gt; In vivo</em&gt; Optisch en μCT Imaging aan Infectie, Ontsteking, en Bone Anatomie Monitor in een orthopedisch implantaat Infectie in Muizen

Infectedies veroorzaakt door multiresistente (MDR) bacteriestammen zijn een ernstige bedreiging voor de volksgezondheid geworden, wat de ontwikkeling van alternatieve therapieën noodzakelijk maakt. We presenteren een protocol om de effectiviteit van antimicrobiële blauwlicht (aBL) therapie voor MDR Acinetobacter baumannii infecties bij muizen met brandwonden te evalueren door bioluminescentie beeldvorming te gebruiken.

In vivo onderzoek naar Antimicrobial Blue Light therapie voor Multiresistente Acinetobacter baumannii Burn Infecties met behulp van bioluminescentie Imaging

Een gedetailleerd protocol voor een muismodel voor enterohemorrhagic E. coli (EHEC) kolonisatie met behulp van bacteriën bioluminescentie-label wordt gepresenteerd. Het opsporen van deze bioluminescente bacterie door een niet-invasieve in vivo imaging systeem in levende dieren kan verder ons huidige begrip van EHEC kolonisatie.

Detectie van de Enterohemorrhagic Escherichia Coli kolonisatie in lymfkliertest Host door niet-invasieve In Vivo bioluminescentie systeem

Lichte productie regelen bioluminescente bacterie via allerlei mechanismen, zoals quorum sensing. Deze nieuwe methode kan de behandeling in situ van bioluminescentie en de correlatie van licht emissie celdichtheid. Een kunstmatige bioluminescente Escherichia coli systeem maakt het mogelijk de karakterisatie van lux operons, Lux eiwitten en hun samenspel.

In Situ Meting en de correlatie van de celdichtheid en lichte emissie van bioluminescente bacterie

Dit protocol beschrijft de oprichting van een tumor-lager muismodel om te controleren van de progressie van de tumor en angiogenese in real-time door dubbele bioluminescentie beeldvorming.

Dubbele bioluminescentie beeldvorming van tumor progressie en angiogenese

Het hier verstrekte protocol beschrijft de gedetailleerde stappen om onderzoeken naar de werkzaamheid van geneesmiddelen uit te voeren in een bioluminescent model van Trypanosoma cruzi-infectie , met een focus op gegevensverzameling, -analyse en -interpretatie. Er zijn ook procedures voor probleemoplossing en kwaliteitscontrole om technische problemen tot een minimum te beperken.

Demystificerende in vivo bioluminescentiebeeldvorming van een muismodel van de ziekte van Chagas voor onderzoeken naar de werkzaamheid van geneesmiddelen

Leer bioluminescente beeldvorming om bacteriële groei in tumoren van levende muizen te volgen. Deze niet-invasieve methode ondersteunt onderzoek naar bacteriën als therapeutische vectoren voor kankerbehandeling.

Bioluminescent Bacteriële Imaging

Meer video's verkennen