Name: 2-Vessel Occlusie / Hypotensie: een rat model van Global Brain Ischemie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-06-22T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 29 s
Description: Leer een ratmodel van globale hersenischemie via bilaterale carotisocclusie en systemische hypotensie. Deze methode simuleert cerebrale insulten met voorspelbare hippocampuslaesies en lage mortaliteit voor neurowetenschappelijk onderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

<ol><li>Kirino, T., Sano, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+vulnerability+in+the+gerbil+hippocampus+following+transient+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathologica%22%5BJournal%5D)">Selective vulnerability in the gerbil hippocampus following transient ischemia.</a> Acta Neuropathologica. 62, 201-208 (1984).</li>
<li>Smith, M. L., Auer, R. N., Siesjo, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+density+and+distribution+of+ischemic+brain+injury+in+the+rat+following+2-10+min+of+forebrain+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathologica%22%5BJournal%5D)">The density and distribution of ischemic brain injury in the rat following 2-10 min of forebrain ischemia.</a> Acta Neuropathologica. 64, 319-332 (1984).</li>
<li>Sanderson, T. H., Kumar, R., Sullivan, J. M., Krause, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin+blocks+cytochrome+c+release+in+the+reperfused+brain+through+PI3-K+signaling+and+by+promoting+Bax%2FBcl-XL+binding%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurochemistry%22%5BJournal%5D)">Insulin blocks cytochrome c release in the reperfused brain through PI3-K signaling and by promoting Bax/Bcl-XL binding.</a> Journal of Neurochemistry. 106, 1248-1258 (2008).</li>
<li>Sanderson, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin+activates+the+PI3K-Akt+survival+pathway+in+vulnerable+neurons+following+global+brain+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Neurological+Research%22%5BJournal%5D)">Insulin activates the PI3K-Akt survival pathway in vulnerable neurons following global brain ischemia.</a> Neurological Research. 31, 947-958 (2009).</li>
<li>Sanderson, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PKR-like+endoplasmic+reticulum+kinase+%28PERK%29+activation+following+brain+ischemia+is+independent+of+unfolded+nascent+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">PKR-like endoplasmic reticulum kinase (PERK) activation following brain ischemia is independent of unfolded nascent proteins.</a> Neuroscience. 169, 1307-1314 (2010).</li>
<li>Hazelton, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperoxic+reperfusion+after+global+cerebral+ischemia+promotes+inflammation+and+long-term+hippocampal+neuronal+death%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Hyperoxic reperfusion after global cerebral ischemia promotes inflammation and long-term hippocampal neuronal death.</a> Journal of Neurotrauma. 27, 753-762 (2010).</li>
<li>Lloyd-Jones, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+disease+and+stroke+statistics--2010+update%3A+a+report+from+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart disease and stroke statistics--2010 update: a report from the American Heart Association.</a> Circulation. 121, e46-e215 (2010).</li>
<li>Krause, G. S., Kumar, K., White, B. C., Aust, S. D., Wiegenstein, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemia%2C+resuscitation%2C+and+reperfusion%3A+mechanisms+of+tissue+injury+and+prospects+for+protection%5BTitle%5D)+AND+%22American+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Ischemia, resuscitation, and reperfusion: mechanisms of tissue injury and prospects for protection.</a> American Heart Journal. 111, 768-780 (1986).</li>
<li>Krause, G. S., White, B. C., Aust, S. D., Nayini, N. R., Kumar, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+cell+death+following+ischemia+and+reperfusion%3A+a+proposed+biochemical+sequence%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">Brain cell death following ischemia and reperfusion: a proposed biochemical sequence.</a> Critical Care Medicine. 16, 714-726 (1988).</li>
<li>Bloom, H. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+survival+after+successful+inhospital+cardiac+arrest+resuscitation%5BTitle%5D)+AND+%22American+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Long-term survival after successful inhospital cardiac arrest resuscitation.</a> American Heart Journal. 153, 831-836 (2007).</li>
<li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%3B+a+Journal+of+Cerebral+Circulation%22%5BJournal%5D)">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke; a Journal of Cerebral Circulation. 20, 84-91 (1989).</li>
<li>Uluc, K., Miranpuri, A., Kujoth, G. C., Akture, E., Baskaya, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Focal+cerebral+ischemia+model+by+endovascular+suture+occlusion+of+the+middle+cerebral+artery+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Focal cerebral ischemia model by endovascular suture occlusion of the middle cerebral artery in the rat.</a> J. Vis. Exp. (48), e1978(2011).</li>
<li>Neumar, R. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calpain+mediates+eukaryotic+initiation+factor+4G+degradation+during+global+brain+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cereb.+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Calpain mediates eukaryotic initiation factor 4G degradation during global brain ischemia.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 18, 876-881 (1998).</li>
<li>Paine, M. G., Che, D., Li, L., Neumar, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebellar+Purkinje+Cell+Neurodegeneration+After+Cardiac+Arrest%3A+Effect+of+Therapeutic+Hypothermia%5BTitle%5D)+AND+%22Resuscitation%22%5BJournal%5D)">Cerebellar Purkinje Cell Neurodegeneration After Cardiac Arrest: Effect of Therapeutic Hypothermia.</a> Resuscitation. , (2012).</li>
<li>Pulsinelli, W. A., Brierley, J. B., Plum, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+profile+of+neuronal+damage+in+a+model+of+transient+forebrain+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Neurology%22%5BJournal%5D)">Temporal profile of neuronal damage in a model of transient forebrain ischemia.</a> Annals of Neurology. 11, 491-498 (1982).</li>
<li>Edinger, A. L., Thompson, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Death+by+design%3A+apoptosis%2C+necrosis+and+autophagy%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Death by design: apoptosis, necrosis and autophagy.</a> Current Opinion in Cell Biology. 16, 663-669 (2004).</li>
<li>Kirino, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delayed+neuronal+death+in+the+gerbil+hippocampus+following+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Delayed neuronal death in the gerbil hippocampus following ischemia.</a> Brain Research. 239, 57-69 (1982).</li>
<li>Yager, J. Y., Brucklacher, R. M., Vannucci, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+energy+metabolism+during+hypoxia-ischemia+and+early+recovery+in+immature+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Cerebral energy metabolism during hypoxia-ischemia and early recovery in immature rats.</a> The American Journal of Physiology. 262, 672-677 (1992).</li>
<li>Sugawara, T., Fujimura, M., Morita-Fujimura, Y., Kawase, M., Chan, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+release+of+cytochrome+c+corresponds+to+the+selective+vulnerability+of+hippocampal+CA1+neurons+in+rats+after+transient+global+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial release of cytochrome c corresponds to the selective vulnerability of hippocampal CA1 neurons in rats after transient global cerebral ischemia.</a> J. Neurosci. 19, RC39(1999).</li>
<li>Nishino, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiological+process+after+transient+ischemia+of+the+middle+cerebral+artery+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Pathophysiological process after transient ischemia of the middle cerebral artery in the rat.</a> Brain Research Bulletin. 35, 51-56 (1994).</li>
<li>Ross, D. T., Ebner, F. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thalamic+retrograde+degeneration+following+cortical+injury%3A+an+excitotoxic+process%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Thalamic retrograde degeneration following cortical injury: an excitotoxic process.</a> Neuroscience. 35, 525-550 (1990).</li>
<li>Soriano, M. A., Ferrer, I., Rodriguez-Farre, E., Planas, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Apoptosis+and+c-Jun+in+the+thalamus+of+the+rat+following+cortical+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroreport%22%5BJournal%5D)">Apoptosis and c-Jun in the thalamus of the rat following cortical infarction.</a> Neuroreport. 7, 425-428 (1996).</li>
<li>Watanabe, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protein+synthesis+inhibitor+transiently+reduces+neuronal+death+in+the+thalamus+of+spontaneously+hypertensive+rats+following+cortical+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">Protein synthesis inhibitor transiently reduces neuronal death in the thalamus of spontaneously hypertensive rats following cortical infarction.</a> Neuroscience Letters. 233, 25-28 (1997).</li>
<li>Wei, L., Ying, D. J., Cui, L., Langsdorf, J., Yu, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Necrosis%2C+apoptosis+and+hybrid+death+in+the+cortex+and+thalamus+after+barrel+cortex+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Necrosis, apoptosis and hybrid death in the cortex and thalamus after barrel cortex ischemia in rats.</a> Brain Research. 1022, 54-61 (2004).</li>
<li>Zong, W. X., Thompson, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Necrotic+death+as+a+cell+fate%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+%26+Development%22%5BJournal%5D)">Necrotic death as a cell fate.</a> Genes & Development. 20, 1-15 (2006).</li>
<li>Ito, U., Spatz, M., Walker, J. T., Klatzo, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+cerebral+ischemia+in+mongolian+gerbils.+I.+Light+microscopic+observations%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathologica%22%5BJournal%5D)">Experimental cerebral ischemia in mongolian gerbils. I. Light microscopic observations.</a> Acta Neuropathologica. 32, 209-223 (1975).</li>
<li>Saver, J. L., Albers, G. W., Dunn, B., Johnston, K. C., Fisher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stroke+Therapy+Academic+Industry+Roundtable+%28STAIR%29+recommendations+for+extended+window+acute+stroke+therapy+trials%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%3B+a+Journal+of+Cerebral+Circulation%22%5BJournal%5D)">Stroke Therapy Academic Industry Roundtable (STAIR) recommendations for extended window acute stroke therapy trials.</a> Stroke; a Journal of Cerebral Circulation. 40, 2594-2600 (2009).</li>
<li>Busto, R., Dietrich, W. D., Globus, M. Y., Ginsberg, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+brain+temperature+in+cerebral+ischemic+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%3B+a+Journal+of+Cerebral+Circulation%22%5BJournal%5D)">The importance of brain temperature in cerebral ischemic injury.</a> Stroke; a Journal of Cerebral Circulation. 20, 1113-1114 (1989).</li>
<li>Voll, C. L., Auer, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postischemic+seizures+and+necrotizing+ischemic+brain+damage%3A+neuroprotective+effect+of+postischemic+diazepam+and+insulin%5BTitle%5D)+AND+%22Neurology%22%5BJournal%5D)">Postischemic seizures and necrotizing ischemic brain damage: neuroprotective effect of postischemic diazepam and insulin.</a> Neurology. 41, 423-428 (1991).</li>
<li>Yamaguchi, M., Calvert, J. W., Kusaka, G., Zhang, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((One-stage+anterior+approach+for+four-vessel+occlusion+in+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%3B+a+Journal+of+Cerebral+Circulation%22%5BJournal%5D)">One-stage anterior approach for four-vessel occlusion in rat.</a> Stroke; a Journal of Cerebral Circulation. 36, 2212-2214 (2005).</li>
<li>Gionet, T. X., Warner, D. S., Verhaegen, M., Thomas, J. D., Todd, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+intra-ischemic+blood+pressure+on+outcome+from+2-vessel+occlusion+forebrain+ischemia+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Effects of intra-ischemic blood pressure on outcome from 2-vessel occlusion forebrain ischemia in the rat.</a> Brain Research. 586, 188-194 (1992).</li>
<li>Sugawara, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+hypotension+severity+on+hippocampal+CA1+neurons+in+a+rat+global+ischemia+model%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Effect of hypotension severity on hippocampal CA1 neurons in a rat global ischemia model.</a> Brain Research. 877, 281-287 (2000).</li>
</ol>

De auteurs hebben geen financiële belangenconflicten.

Het beschreven model produceert een ischemisch insult de hersenen die kan optreden als gevolg van een hartstilstand en reanimatie, die een verwonding vergelijkbaar met die bij mensen. Deze werkwijze voor het produceren wereldbrein ischemie is een van meerdere protocollen. We maken gebruik van dit protocol vooral voor haar relatief lage sterfte, sneller herstel, en reproduceerbare resultaten. De hartstilstand / reanimatie-model is waarschijnlijk de meest klinisch relevante model, maar technisch de moeilijkste om voortdur...

Hersenletsel als gevolg van een hartstilstand en beroerte is een belangrijke doodsoorzaak en langdurige arbeidsongeschiktheid. Terwijl reanimatie van slachtoffers van hartstilstand lukt herstellen spontane circulatie bij ongeveer 70.000 patiënten per jaar in de Verenigde Staten 7,8 tenminste 60% ​​van deze patiënten later sterven in het ziekenhuis als resultaat van uitgebreide hersenbeschadiging en slechts 3-10% van gereanimeerd patiënten kunnen hun vroegere levensstijl te hervatten 9,10. Duidelijk, het begrijpen van de mechanismen die leiden tot hersenbeschadiging na globale ischemie van de hersenen en het ontwerpen van therapeutische interventies om neurologische trauma te minimaliseren is het van cruciaal belang is. Hersenischemie gemodelleerd worden gebruik meerdere methoden. Meestal wordt hersenischemie geproduceerd bij knaagdieren door afsluiten van een belangrijke bloedvat in de hersenen, de middelste cerebrale slagader, waardoor een focale ischemische beroerte 11,12 produceren. Hoewel klinisch belangrijke,focale hersenischemie geen nauwkeurige methode van hersenbeschadiging door hartstilstand / reanimatie bestuderen. Om deze klinische paradigma model het volledige hersenen dient te geschieden ischemische gevolgd door herintroductie van de bloedstroom. Om deze klinische presentatie na te bootsen, onderzoekers experimenteel induceren hartstilstand gevolgd door reanimatie met reanimatie en defibrillatie 13,14. Dit model is klinisch relevant, kan echter onvoorspelbaar reanimatie malen te verhogen variabiliteit en kan data-analyse moeilijk te interpreteren. Tevens wordt dit model geassocieerd met een hoge mortaliteit, een verdere verhoging dier benodigd zijn om een ​​hypothese te testen. Onderzoek van de cerebrale reactie op globale ischemie en / of reperfusie in een reproduceerbare consistente en survivable insult de voorkeur. Globale ischemie kan worden geïnduceerd in de hersenen, terwijl sommige bloedstroom behoud systemisch. Dit vermindert sterfte, terwijl investigation van de mechanismen van weefselbeschadiging in de hersenen 2. Om wereldbrein ischemie produceren, is het noodzakelijk te onderbreken of aanzienlijk te beperken stroming in alle vier vaten die de hersenen, het interne halsslagaders en vertebrale slagaders leveren. Deze schepen leveren de hersenen met de bloedstroom door een vasculaire structuur genaamd de cirkel van Willis, die een anastomotische lus vormt. Deze vasculaire architectuur kan de hersenen perfusie bij proximale vasculaire occlusie behouden. Daarom, om volledig ischemie van de hersenen, de doorbloeding te induceren door alle bijdragende vaartuigen moeten plaatsvinden. Occlusie van de halsslagader kan worden bereikt met behulp van een minimaal invasieve ventrale nek cut-down en toepassing van aneurysma clips voor een gewenste periode. Onderbreking van de bloedstroom via de vertebrale slagaders kan moeilijk zijn, omdat ze incased in de dwarsrichting foramen van de wervelkolom. Onderzoekers hebben dit voorafgaand aan de halsslagader aangepakt door electrocauterizing de vertebrale slagaders 24-48 uurocclusie en ischemie van de hersenen (4VO model) 15. In tegenstelling tot deze aanpak, Smith et al.. Ontwikkelden een werkwijze voor het induceren globale hersenischemie doordat de gemiddelde arteriële bloeddruk (MAP) systemisch aan 40 mmHg perfusie te verminderen door de vertebrale slagaders naar een punt waar de bloedstroom wordt verloren of sterk verminderd 2 . In combinatie met carotis occlusie, produceert deze methode ischemie in de voorhersenen, waardoor een patroon van hersenbeschadiging die nabootst die van hartstilstand overlevenden. In een verdere verfijning van deze methode, het model hier geïntroduceerde vereist strak MAP regeling op 30 mmHg ± 1mHg gedurende de gehele 8 min ischemie. We vonden deze wijziging verbetert de reproduceerbaarheid van hersenletsel veroorzaakt door dit model met behoud van het lage sterftecijfer van de oorspronkelijke techniek ontworpen door Smith et al.. De precieze fenotype van celdood en totale mate van weefselschade doorde hier gepresenteerde model zijn direct afhankelijk van ischemische duur 16. Na 8 min ischemie, CA1 neuronen vertonen vertraagde celdood, suggereert dat er een tijdelijk venster voor therapeutische interventie in de reperfusiefase 15,17. Bij het ​​begin van reperfusie, neuronen snel weer functie en geen directe celdood detecteerbaar 18. Deze belediging veroorzaakt echter inductie van celdood cascades (apoptose) die culmineren in afgifte van apoptotische eiwitten uit mitochondriën, waaronder cytochroom c, tussen 4-6 uur van reperfusie 3,19. Tussen 6 en 24 uur van reperfusie, hebben neuronen van de hippocampus CA1 inzetten voor cel ondergang, en de apoptotische celdood programma wordt uitgevoerd 19. Opgemerkt wordt dat celdood fenotype verantwoordelijk voor ischemische schade zeer controversieel. Vroege studies hebben gesuggereerd necrose is de primaire celdood fenotype 20,21, terwijl andere anderen melden apoptosis als het voornaamste mechanisme 22,23. In totaal, de huidige gegevens suggereren dat cellen sterven van een spectrum van celdood fenotypes variërend van klassiek apoptose tot necrose. De specifieke wijze van celdood is afhankelijk van vele factoren, met de mogelijke bijdrage van elke fenotype afhankelijk van de ernst van de belediging, onder andere factoren 24,25. Door 24 uur van reperfusie, stervende cellen bezitten pyknotische kernen, gecondenseerde cytosol met duidelijk bewijs van geaggregeerde cellulaire inhoud, en het verlies van functionele mitochondriale morfologie. Dode cellen worden verder onderverdeeld, opgeslokt door immuuncellen, zoals macrofagen en / of de microglia, en gewist uit de CA1 hippocampus regio. Door het 4-7 dagen van reperfusie, worden dode cellen verwijderd, en alles wat overblijft zijn ontstekingscellen en geactiveerde gliacellen 17,26. Derhalve 7 dagen reperfusie vertegenwoordigt een optimale tijd waar hippocampale CA1 neuronale dood kan worden gekwantificeerd met behulp van eenvoudige, niet-specifieke cel vlekken inclusief Cresyl violet of hemotoxyline-eosine en geteld op basis van criteria morfologische insluiting. Nog op dit late reperfusie interval cellen kunnen worden geteld als overlevende cellen, waardoor een index van hersenbeschadiging. Indien dit model wordt gebruikt om therapeutische interventies te testen, wordt voorgesteld dat de proefopzet volgen TRAPPEN criteria (Stroke Therapy Academic Industrie Roundtable) 27. Deze richtsnoeren moeten worden gevolgd bij het ontwerpen en uitvoeren van een onderzoek, worden echter niet besproken.

<table><tbody><tr><td colspan="4">Materiaalnaam</td></tr><tr><td>5-0 VICRYL hechtdraad, omgekeerd snijdend </td><td>Ethicon</td><td>J391H</td><td></td></tr><tr><td>Schaar, Nr.10</td><td>Swann-Morton</td><td>6601</td><td></td></tr><tr><td>Gaasjesponzen</td><td>Fisher</td><td>22-362-178</td><td></td></tr><tr><td>18G x 1 &frac12; inch naald</td><td>BD</td><td>305201</td><td></td></tr><tr><td>23G x 1 inch naald</td><td>BD</td><td>305145</td><td></td></tr><tr><td>26 G x 3/8 inch naald</td><td>BD</td><td>305110</td><td></td></tr><tr><td>18 G x 1 &#188; katheter</td><td>EXEL</td><td>26735</td><td></td></tr><tr><td>1 ml spuit</td><td>BD</td><td>309659</td><td></td></tr><tr><td>10 ml spuit</td><td>BD</td><td>309604</td><td></td></tr><tr><td>60 ml spuit</td><td>BD</td><td>309653</td><td></td></tr><tr><td>Surgilube</td><td>Henry Schein</td><td>1152666</td><td></td></tr><tr><td>.9% Saline, plastic IV-zak</td><td>Henry Schein</td><td>1537468</td><td></td></tr><tr><td>Hechtdraad 3-0 Zijde</td><td>Henry Schein</td><td>1007842</td><td></td></tr><tr><td>Puralube Oogzalf</td><td>Henry Schein</td><td>3390017</td><td></td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Henry Schein</td><td>6903564</td><td></td></tr><tr><td>Steriele Handdoek</td><td>Moore Medical</td><td>14170</td><td></td></tr><tr><td>Polyethyleen Slang, 50</td><td>Intramedic</td><td>427411</td><td></td></tr><tr><td>Stopkraan, 3-weg</td><td>Smiths medical</td><td>MX9311L</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Geneesmiddelnaam</td></tr><tr><td>AERRANE (isofluraan)</td><td>Henry Schein</td><td>2091966</td><td></td></tr><tr><td>Mapap Liquid (Tylenol)</td><td>Major Pharmaceuticals</td><td>1556</td><td></td></tr><tr><td>Kedavet (ketamin)</td><td>Ketathesia Butney</td><td>NDC 50989-996-06</td><td></td></tr><tr><td>Butorphic (butorfanol)</td><td>Lloyd Labs</td><td>4881</td><td></td></tr><tr><td>Heparine</td><td>APP Pharmaceuticals</td><td>504011</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Chemische naam </td></tr><tr><td>Paraformaldehyde korrels</td><td>Elecron Microscopy Sci.</td><td>19202</td><td></td></tr><tr><td>2-methylbutaan</td><td>Sigma</td><td>270342</td><td></td></tr><tr><td>Cresyl Violet Acetaat</td><td>Sigma</td><td>C5042</td><td></td></tr><tr><td>Sucrose</td><td>Sigma</td><td>S9378</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Software</td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>NIH</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

2-vessel occlusie / hypotensie: een rat model van global brain ischemie

2-Vessel Occlusion/Hypotension: A Rat Model of Global Brain Ischemia

Hartstilstand gevolgd door reanimatie resulteert vaak in dramatische hersenschade veroorzaakt door ischemie en daaropvolgende reperfusie van de hersenen. Wereldbrein ischemie schade veroorzaakt specifieke hersengebieden getoond dat zeer gevoelig voor ischemie 1. Hippocampale neuronen hogere gevoeligheid voor ischemische beledigingen vergelijking met andere celpopulaties, en specifiek, het CA1 gebied van de hippocampus is bijzonder kwetsbaar voor ischemie / reperfusie 2. Het ontwerp van therapeutische interventies of studie van mechanismen betrokken bij hersenschade vereist een model dat soortgelijke schade de klinische toestand en reproduceerbare wijze produceert. Bilaterale carotis vatocclusie met hypotensie (2VOH) is een model dat reversibele voorhersenen ischemie produceert, emuleren de cerebrale gebeurtenissen die kunnen optreden tijdens een hartstilstand en reanimatie. We beschrijven een model modificatie van Smith et al.. (1984) 2, Zoals eerst gepresenteerd in zijn huidige vorm Sanderson et al.. (2008) 3, die reproduceerbaar letsel veroorzaakt selectief kwetsbare hersengebieden 3-6. De betrouwbaarheid van het model wordt bepaald door nauwkeurige controle van de systemische bloeddruk tijdens toegepast hypotensie, de duur van de ischemie, scherpe temperatuurcontrole, een specifiek regime anesthesie en ijverig post-operatieve zorg. 8 minuten ischemie veroorzaakt celdood van CA1 hippocampale neuronen die in de loop van 6 tot 24 uur reperfusie vordert, terwijl minder kwetsbare hersenengebieden gespaard. Deze progressieve celdood gemakkelijk gekwantificeerd na 7-14 dagen na reperfusie, als een bijna volledig verlies van CA1 neuronen blijkt op dit moment. Daarnaast hersentraumamodel presenteren we een werkwijze voor het CA1 schadekwantificatie op eenvoudige, maar grondige, methodologie. Belangrijk is dat kwantificering worden bereikt met behulp van een eenvoudige camera gemonteerde microscoop, eenda gratis ImageJ (NIH) software plugin, wegnemen van de noodzaak voor de kosten prohibitief stereology software programma&#39;s en een gemotoriseerde microscopische podium voor de beoordeling van schade.

De 2VOH model van global hersenen ischemie / reperfusie veroorzaakt neuronale dood in het CA1 gebied van de hippocampus. Figuur 2 geeft de schade door 8 min wereldbrein ischemie, verwerkt 14 dagen na reperfusie. Figuren 2A en 2B vergelijken de hippocampus van sham en post-ischemische hersenen, gekleurd met Cresyl violet. Figuur 2A toont een hippocampus van een schijn-geopereerde ratten die normale morfologie vertoont, met inbegrip van een intacte CA1. <...

Bilaterale carotis occlusie combinatie met systemische hypotensie produceert wereldwijde hersenen ischemie in de rat, met schade aan de hippocampus met reproduceerbare ernst. Proefdieren worden verminderd met voorspelbare patronen van hersenbeschadiging, ze herstellen doelmatig en sterftecijfers zijn relatief laag.

2-Vessel Occlusie / Hypotensie: een rat model van Global Brain Ischemie

Cardiac arrest followed by resuscitation often results in dramatic brain damage caused by ischemia and subsequent reperfusion of the brain. Global brain ...

Het algemene doel is om een kortstondig ischemisch event in de hersenen op te wekken om de cerebrale schade te simuleren die wordt veroorzaakt door een hartstilstand en reanimatie. Eerst wordt systemische hypotensie geïnduceerd door bloed af te nemen uit de arteria femoralis. Vervolgens worden de arteriae carotides afgesloten om de bloedtoevoer naar de hersenen te beperken.De hersenen worden gedurende acht minuten in een ischemische toestand gehouden door middel van een strikte controle van de systemische bloeddruk. Ten slotte worden de clips verwijderd en wordt het onttrokken bloed opnieuw toegelaten. Uiteindelijk kan de neuronale schade op verschillende tijdstippen na de ischemie worden gekwantificeerd.Het belangrijkste voordeel van deze techniek ten opzichte van bestaande methoden, zoals hartstilstand en reanimatie, is dat het cerebrale ischemische event kan worden gesimuleerd zonder de mortaliteit en comorbiditeiten die gepaard gaan met systemische ischemie. De visuele demonstratie van deze operatie stelt ons in staat om het belang van specifieke procedurele nuances te benadrukken om de reproduceerbaarheid te waarborgen. Begin met het maken van een vasculaire katheter. Knip hie

2-vessel-occlusionhypotension-a-rat-model-of-global-brain-ischemia

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Chirurgische inductie van ischemische hersenschade in de rat is een veel gebruikt model voor een beroerte onderzoek. Hier laten we zien de inductie van focale cerebrale ischemie door occlusie van de midden cerebrale slagader. Visualisatie van de resulterende infarct door histologische kleuring en magnetische resonantie beeldvorming wordt ook getoond.

Focus cerebrale ischemie Model door Endovasculaire Suture Occlusie van de midden cerebrale slagader in de Rat

This video demonstrates the procedure of performing permanent distal middle cerebral artery occlusion, or MCAO, with the common carotid artery, or CCA ligation, in aged rats to model ischemic stroke. This blocks blood flow to the brain, leading to neuronal death and generating a model to study stroke mechanisms and potential treatments.

Inducing Ischemia via Middle Cerebral and Common Carotid Artery Occlusion in a Rat Model

Source: Larpthaveesarp, A., et. al. Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Model of Neonatal Stroke in P10 Rats. J. Vis. Exp. (2017)This video demonstrates the establishment of the Middle Cerebral Artery Occlusion model in a rat pup. The internal carotid artery (ICA) is exposed, and a ligature is secured to restrict blood flood. An occlude is inserted through the ICA to reach the Middle Cerebral Artery. The pup is then allowed to recover before further analysis.

Generating a Middle Cerebral Artery Occlusion in a Rat Pup to Induce Local Brain Ischemia

We beschrijven een zeer reproduceerbare werkwijze voor de permanente occlusie van een knaagdier grote cerebrale bloedvat. Deze techniek kan worden bereikt met zeer weinig perifere schade minimaal bloedverlies, een hoog percentage overleving op lange termijn en consistente infarct volume evenredig met de klinische populatie.

Permanente Cerebrale vatocclusie<em&gt; Via</em&gt; Dubbele Ligatuur en doorsnijding

Modellen voor trombo-embolische beroertes zijn essentiële hulpmiddelen voor het optimaliseren van de recanalisatietherapie. Hier beschrijven we een muismodel voor trombotische beroerte gebaseerd op een tijdelijk cerebraal hypoxisch-ischemisch (tHI) letsel, dat trombose en infarct veroorzaakt en gunstig reageert op weefselplasminogeenactivator (tPA)-gemedieerde fibrinolyse in een therapeutisch venster vergelijkbaar met dat bij beroertepatiënten.

Een Trombotische Stroke model op basis van Transient Cerebrale hypoxie-ischemie

Het algemene doel van deze procedure is bedoeld als een zeer reproduceerbaar techniek voor in vivo beoordeling van de verstoring van de bloed - hersen barrière in rat modellen van ischemische beroerte.

In Vivo eenbeoordeling van de verstoring van de bloed - hersen barrière in een Rat Model van ischemische beroerte

Een muismodel van cerebrale ischemie-reperfusie is gevestigd te onderzoeken de pathofysiologie van een beroerte. We distally de rechts midden cerebrale slagader en rechts gemeenschappelijke halsslagader afbinden en bloedstroom herstellen na 10 of 40 min van ischemie.

Muismodel van twee-schip occlusie van cerebrale ischemie-reperfusie

Het huidige protocol beschrijft een ratmodel van occlusie/reperfusie van de middelste hersenslagader dat de anatomische structuur van hersenvaten behoudt zonder schade te veroorzaken.

Een rattenmodel van middelste cerebrale arteriële occlusie/reperfusie zonder de anatomische structuur van cerebrale vaten te beschadigen

Dit protocol beschrijft het proces voor het induceren van een cerebraal ischemisch comamodel met behulp van een aangepaste occlusiemethode met vier vaten.

Cerebraal ischemisch comamodel geïnduceerd door gemodificeerde occlusie van vier bloedvaten

In vivo modellen van ratten zijn onmisbare hulpmiddelen om de pathologische mechanismen en therapeutische doelen voor ischemische beroerte te onderzoeken. Dit werk beschrijft het uitvoeren van immunofluorescentiekleuring in hersenplakjes met een infarct na occlusie van de middelste hersenslagader (MCAO) bij ratten.

Evaluatie van celdoodsignalering door immunofluorescentie in een rattenmodel van ischemische beroerte

Leer een ratmodel van globale hersenischemie via bilaterale carotisocclusie en systemische hypotensie. Deze methode simuleert cerebrale insulten met voorspelbare hippocampuslaesies en lage mortaliteit voor neurowetenschappelijk onderzoek.

2-Vessel Occlusie / Hypotensie: een rat model van Global Brain Ischemie

Meer video's verkennen