Name: Extracellulair Het identificeren van Motor Neuronen voor een Muscle Motor Pool in Aplysia californica (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-03-25T12:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 37 s
Description: Leer hoe je extracellulair individuele motorneuronen identificeert in een motorpool van Aplysia californica. Deze methode maakt monitoring en controle mogelijk tijdens voedingsgerelateerde motorpatronen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit onderzoek werd ondersteund door NIH subsidie ​​NS047073 en NSF subsidie ​​DMS1010434.

<ol><li>McCrohan, C. R., Benjamin, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synaptic+relationships+of+the+cerebral+giant+cells+with+motoneurones+in+the+feeding+system+of+Lymnaea+stagnalis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">Synaptic relationships of the cerebral giant cells with motoneurones in the feeding system of Lymnaea stagnalis.</a> J. Exp. Biol. 85, 169-186 (1980).</li>
<li>Benjamin, P. R., Rose, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+generation+of+bursting+in+the+feeding+system+of+the+snail%2C+Lymnaea+stagnalis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">Central generation of bursting in the feeding system of the snail, Lymnaea stagnalis.</a> J. Exp. Biol. 80, 93-118 (1979).</li>
<li>Peters, M., Altrup, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+organization+in+pharynx+of+Helix+pomatia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Motor organization in pharynx of Helix pomatia.</a> J. Neurophysiol. 52 (3), 389-409 (1984).</li>
<li>Church, P. J., Cohen, K. P., Scott, M. L., Kirk, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peptidergic+motoneurons+in+the+buccal+ganglia+of+Aplysia+californica%3A+immunocytochemical%2C+morphological%2C+and+physiological+characterizations%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol.+A%22%5BJournal%5D)">Peptidergic motoneurons in the buccal ganglia of Aplysia californica: immunocytochemical, morphological, and physiological characterizations.</a> J. Comp. Physiol. A. 168 (3), 323-336 (1991).</li>
<li>Lu, H., Chestek, C. A., Shaw, K. M., Chiel, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+extracellular+stimulation+of+individual+neurons+in+ganglia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neural.+Eng%22%5BJournal%5D)">Selective extracellular stimulation of individual neurons in ganglia.</a> J. Neural. Eng. 5 (3), 287-309 (2008).</li>
<li>Church, P. J., Lloyd, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+diverse+neuropeptide+cotransmitters+by+identified+motor+neurons+in+Aplysia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Expression of diverse neuropeptide cotransmitters by identified motor neurons in Aplysia.</a> J. Neurosci. 11 (3), 618-625 (1991).</li>
<li>Church, P. J., Lloyd, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activity+of+multiple+identified+motor+neurons+recorded+intracellularly+during+evoked+feedinglike+motor+programs+in+Aplysia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurophys%22%5BJournal%5D)">Activity of multiple identified motor neurons recorded intracellularly during evoked feedinglike motor programs in Aplysia.</a> J. Neurophys. 72 (4), 1794-1809 (1994).</li>
<li>McManus, J. M., Lu, H., Chiel, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+In+Vitro+Preparation+for+Eliciting+and+Recording+Feeding+Motor+Programs+with+Physiological+Movements+in+Aplysia+californica%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">An In Vitro Preparation for Eliciting and Recording Feeding Motor Programs with Physiological Movements in Aplysia californica.</a> J. Vis. Exp. (70), e4320(2012).</li>
<li>Cullins, M. J., Chiel, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrode+fabrication+and+implantation+in+Aplysia+californica+for+multi-channel+neural+and+muscular+recordings+in+intact%2C+freely+behaving+animals%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Electrode fabrication and implantation in Aplysia californica for multi-channel neural and muscular recordings in intact, freely behaving animals.</a> J Vis. Exp. (40), e1791(2010).</li>
<li>Zhurov, Y., Weiss, K. R., Brezina, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tight+or+loose+coupling+between+components+of+the+feeding+neuromusculature+of+Aplysia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Tight or loose coupling between components of the feeding neuromusculature of Aplysia.</a> J. Neurophysiol. 94 (1), 531-549 (2005).</li>
<li>Hurwitz, I., Goldstein, R. S., Susswein, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compartmentalization+of+pattern-initiation+and+motor+functions+in+the+B31+and+B32+neurons+of+the+buccal+ganglia+of+Aplysia+californica%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Compartmentalization of pattern-initiation and motor functions in the B31 and B32 neurons of the buccal ganglia of Aplysia californica.</a> J. Neurophysiol. 71 (4), 1514-1527 (1994).</li>
<li>Morton, D. W., Chiel, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+timing+of+activity+in+motor+neurons+that+produce+radula+movements+distinguishes+ingestion+from+rejection+in+Aplysia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol.+A%22%5BJournal%5D)">The timing of activity in motor neurons that produce radula movements distinguishes ingestion from rejection in Aplysia.</a> J. Comp. Physiol. A. 173 (5), 519-536 (1993).</li>
<li>Iles, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+and+synaptic+activation+of+the+fast+coxal+depressor+motoneurone+of+the+cockroach.+Periplaneta+americana%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">Structure and synaptic activation of the fast coxal depressor motoneurone of the cockroach. Periplaneta americana.</a> J. Exp. Biol. 56 (3), 647-656 (1972).</li>
<li>Westerfield, M., McMurray, J. V., Eisen, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identified+motoneurons+and+their+innervation+of+axial+muscles+in+the+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Identified motoneurons and their innervation of axial muscles in the zebrafish.</a> J. Neurosci. 6 (8), 2267-2277 (1986).</li>
<li>Susswein, A. J., Rosen, S. C., Gapon, S., Kupfermann, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+buccal+motor+programs+elicited+by+a+cholinergic+agonist+applied+to+the+cerebral+ganglion+of+Aplysia+californica%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol.+A%22%5BJournal%5D)">Characterization of buccal motor programs elicited by a cholinergic agonist applied to the cerebral ganglion of Aplysia californica.</a> J. Comp. Physiol. A. 179 (4), 509-524 (1996).</li>
<li>Hurwitz, I., Neustadter, D., Morton, D. W., Chiel, H. J., Susswein, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activity+patterns+of+the+B31%2FB32+pattern+initiators+innervating+the+I2+muscle+of+the+buccal+mass+during+normal+feeding+movements+in+Aplysia+californica%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurophys%22%5BJournal%5D)">Activity patterns of the B31/B32 pattern initiators innervating the I2 muscle of the buccal mass during normal feeding movements in Aplysia californica.</a> J. Neurophys. 75 (4), 1309-1326 (1996).</li>
<li>Morton, D. W., Chiel, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+buccal+nerve+activity+that+distinguishes+ingestion+from+rejection+can+be+used+to+predict+behavioral+transitions+in+Aplysia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol.+A%22%5BJournal%5D)">In vivo buccal nerve activity that distinguishes ingestion from rejection can be used to predict behavioral transitions in Aplysia.</a> J. Comp. Physiol. A. 172 (1), 17-32 (1993).</li>
<li>Warman, E. N., Chiel, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+technique+for+chronic+single-unit+extracellular+recording+in+freely+behaving+animals+using+pipette+electrodes%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">A new technique for chronic single-unit extracellular recording in freely behaving animals using pipette electrodes.</a> J. Neurosci. Methods. 57 (2), 161-169 (1995).</li>
<li>Nargeot, R. N., Baxter, D. A., Byrne, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contingent-dependent+enhancement+of+rhythmic+motor+patterns%3A+an+in+vitro+analog+of+operant+conditioning%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Contingent-dependent enhancement of rhythmic motor patterns: an in vitro analog of operant conditioning.</a> J. Neurosci. 17 (21), 8093-8105 (1997).</li>
<li>Kandel, E. R. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKandel%2C+ER+%22Behavioral+biology+of+Aplysia%22">Behavioral biology of Aplysia</a>. , Freeman. San Francisco. (1979).</li>
<li>Scott, M. L., Govind, C. K., Kirk, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuromuscular+organization+of+the+buccal+system+in+Aplysia+californica%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Neuromuscular organization of the buccal system in Aplysia californica.</a> J. Comp. Neurol. 312 (2), 207-222 (1991).</li>
<li>Rosen, S. C., Miller, M. W., Cropper, E. C., Kupfermann, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Outputs+of+radula+mechanoafferent+neurons+in+Aplysia+are+modulated+by+motor+neurons%2C+interneurons%2C+and+sensory+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Outputs of radula mechanoafferent neurons in Aplysia are modulated by motor neurons, interneurons, and sensory neurons.</a> J. Neurophysiol. 83 (3), 1621-1636 (2000).</li>
<li>Rosen, S. C., Miller, M. W., Evans, C. G., Cropper, E. C., Kupfermann, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diverse+synaptic+connections+between+peptidergic+radula+mechanoafferent+neurons+and+neurons+in+the+feeding+system+of+Aplysia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Diverse synaptic connections between peptidergic radula mechanoafferent neurons and neurons in the feeding system of Aplysia.</a> J. Neurophysiol. 83 (3), 1605-1620 (2000).</li>
<li>Weiss, K. R., Chiel, H. J., Koch, U., Kupfermann, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activity+of+an+identified+histaminergic+neuron%2C+and+its+possible+role+in+arousal+of+feeding+behavior+in+semi-intact+Aplysia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Activity of an identified histaminergic neuron, and its possible role in arousal of feeding behavior in semi-intact Aplysia.</a> J. Neurosci. 6 (8), 2403-2415 (1986).</li>
<li>Rosen, S. C., Teyke, T., Miller, M. W., Weiss, K. R., Kupfermann, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+and+characterization+of+cerebral-to-buccal+interneurons+implicated+in+the+control+of+motor+programs+associated+with+feeding+in+Aplysia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Identification and characterization of cerebral-to-buccal interneurons implicated in the control of motor programs associated with feeding in Aplysia.</a> J. Neurosci. 11 (11), 3630-3655 (1991).</li>
<li>Jing, J., Weiss, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+variants+of+a+motor+act+in+a+modular+and+hierarchical+motor+network%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Biol%22%5BJournal%5D)">Generation of variants of a motor act in a modular and hierarchical motor network.</a> Curr. Biol. 15 (19), 1712-1721 (2005).</li>
<li>Azizi, F., Lu, H., Chiel, H. J., Mastrangelo, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemical+neurostimulation+using+pulse+code+modulation+%28PCM%29+microfluidic+chips%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Chemical neurostimulation using pulse code modulation (PCM) microfluidic chips.</a> J. Neurosci. Methods. 192 (2), 193-198 (2010).</li>
<li>Zhurov, Y., Proekt, A., Weiss, K. R., Brezina, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+of+internal+state+are+expressed+in+coherent+shifts+of+neuromuscular+activity+in+Aplysia+feeding+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Changes of internal state are expressed in coherent shifts of neuromuscular activity in Aplysia feeding behavior.</a> J. Neurosci. 25 (5), 1268-1280 (2005).</li>
<li>Baker, B. J., Kosmidis, E. K., Vucinic, D., Falk, C. X., Cohen, L. B., Djurisic, M., Zecevic, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+brain+activity+with+voltage-+and+calcium-sensitive+dyes%5BTitle%5D)+AND+%22Cell.+Mol.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Imaging brain activity with voltage- and calcium-sensitive dyes.</a> Cell. Mol. Neurobiol. 25 (2), 245-282 (2005).</li>
<li>Fejtl, M., Stett, A., Nisch, W., Boven, K. -H., Möller, A. On Micro-Electrode Array Revival. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aFejtl%2C+M+%22Advances+in+Network+Electrophysiology+Using+Multi-Electrode+Arrays%22">Advances in Network Electrophysiology Using Multi-Electrode Arrays</a>. Baudry, M., Taketani, M. , Springer Press. New York. 24-37 (2006).</li>
</ol>

We hebben niets te onthullen.

In dieren met grote geïdentificeerde neuronen, zoals weekdieren (bijvoorbeeld Lymnaea, Helix, en Aplysia), analyse van motor pools wordt meestal gedaan met behulp intracellulaire opname 1,2,3,4. In dit protocol, beschrijven we een werkwijze voor uniek identificeren de motor neuronen voor een motor pool behulp een extracellulair techniek. We de krachtmetingen gebruikt als illustratie van dit proces. Men zou ook kunnen gebruik maken van EMG om spier te innervaties te meten. Kort, daartoe, de p...

<table border="1"><tbody><tr><td> Naam </td><td> Vennootschap </td><td> Catalogusnummer </td><td> Reacties </td></tr><tr><td> Natriumchloride </td><td> Fisher Scientific </td><td> S671 </td><td> Biologische, Certified </td></tr><tr><td> Kaliumchloride </td><td> Fisher Scientific </td><td> P217 </td><td> Gecertificeerde ACS </td></tr><tr><td> Magnesiumchloridehexahydraat </td><td> Acros Organics </td><td> 19753 </td><td> 99% </td></tr><tr><td> Magnesiumsulfaat heptahydraat </td><td> Fisher Scientific </td><td> M63 </td><td> Gecertificeerde ACS </td></tr><tr><td> Calciumchloridedihydraat </td><td> Fisher Scientifc </td><td> C79 </td><td> Gecertificeerde ACS </td></tr><tr><td> Glucose (dextrose) </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> G7528 </td><td> BioXtra </td></tr><tr><td> MOPS Buffer </td><td> Acros Organics </td><td> 17263 </td><td> 99% </td></tr><tr><td> Carbachol </td><td> Acros Organics </td><td> 10824 </td><td> 99% </td></tr><tr><td> Natriumhydroxide </td><td> Fisher Scientific </td><td> SS255 </td><td> Certified </td></tr><tr><td> Zoutzuur </td><td> Fisher Scientific </td><td> SA49 </td><td> Certified </td></tr><tr><td> Single-barrelled capillair glas </td><td> AM Systems </td><td> 6150 </td><td></td></tr><tr><td> Flaming-Brown micropipet trekker model P-80/PC </td><td> Sutter Instrumenten </td><td></td><td> Filament gebruikte: FT345B </td></tr><tr><td> Emaillen roestvrij staaldraad </td><td> California Fine Wire </td><td></td><td> 0.001D, coating h </td></tr><tr><td> Huishoudelijke Silicone II Lijm </td><td> GE </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Duro Quick-Gel superlijm </td&gt; <td> Henkel corp. </td><td></td><td></td></tr><tr><td> AM Systems Model 1700 versterker </td><td> AM Systems </td><td></td><td> Filterinstellingen: 10-500 Hz voor de I2 zenuw / spier; 300-500 Hz voor alle andere zenuwen </td></tr><tr><td> Pulsemaster Multi-Channel Stimulator </td><td> Wereld Precisie-instrumenten </td><td> A300 </td><td></td></tr><tr><td> Stimulus Isolator </td><td> Wereld Precisie-instrumenten </td><td> A360 </td><td></td></tr><tr><td> AxoGraph X </td><td> AxoGraph Wetenschappelijke </td><td></td><td> Software voor opnames </td></tr><tr><td> Gold Connector Pins </td><td> Bulgin </td><td> SA3148 / 1 </td><td></td></tr><tr><td> Gold Connector Sockets </td><td> Bulgin </td><td> SA3149 / 1 </td><td></td></tr><tr><td> Sylgard 184 siliconelastomeerfase </td><td> Dow Corning </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 100 x 15 mm Crystalizing Schotel </td><td> Pyrex </td><td></td><td></td></tr><tr><td> High Vacuum Grease </td><td> Dow Corning </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Pipettips </td><td> Fisher Scientific </td><td> 21-375D </td><td></td></tr><tr><td> Minutien Pins </td><td> Fine Science Tools </td><td> 26.002-10 </td><td></td></tr><tr><td> Boetseerklei </td><td> Sargent Kunst </td><td> 22-4.400 </td><td></td></tr><tr><td> Whisper Air Pump </td><td> Tetra </td><td> 77849 </td><td></td></tr><tr><td> Aquarium Tubing </td><td> Eheim </td><td> 7783 </td><td> 12/16 mm </td></tr><tr><td> Elite Bruissteen </td><td> Hagen </td><td> A962 </td><td></td></tr><tr><td> Vannas Spring Schaar </td><td> Fine Science Tools </td><td> 15.000-08 </td><td></td></tr><tr><td> Dumont # 5 Fine Forceps </td><td> Fijn Science Gereedschap </td><td> 11.254-20 </td><td></td></tr><tr><td> Kimwipes </td><td> Kimberly-Clark </td><td> 34155 </td><td></td></tr></tbody></table>

extracellulair het identificeren van motor neuronen voor een muscle motor pool in<em&gt; aplysia californica</em

Extracellularly Identifying Motor Neurons for a Muscle Motor Pool in Aplysia californica

Bij dieren met grote geïdentificeerde neuronen (bijv. weekdieren), analyse van de motor pools wordt gedaan met behulp van intracellulaire technieken 1,2,3,4. Onlangs, ontwikkelden we een techniek om extracellulair te stimuleren en op te nemen individuele neuronen in Aplysia californica 5. We hebben nu beschrijven een-protocol voor het gebruik van deze techniek om eenduidig ​​te identificeren en motorische neuronen karakteriseren binnen een motor zwembad. Deze extracellulaire techniek heeft voordelen. Elke optie, extracellulaire elektroden kan stimuleren en neuronen opnemen door de schede 5, zodat het hoeft niet worden verwijderd. Aldus zullen neuronen gezonder zijn in extracellulaire experimenten dan in intracellulaire degenen. Ten tweede, als ganglia zijn geroteerd door passende pinning van de mantel, kan extracellulaire elektroden toegang neuronen aan beide zijden van de ganglion, waardoor het eenvoudiger en efficiënter te identificeren meerdere neuronen in hetzelfde preparaat. Third, extracellular elektroden hoeven niet te cellen te penetreren, en dus gemakkelijk kunnen worden heen en weer liep tussen neuronen, waardoor minder schade berokkenen. Dit is vooral handig wanneer men probeert om meerdere neuronen op te nemen in de loop van te herhalen motor patronen dat alleen kan aanhouden voor minuten. Vierde, extracellulaire elektroden soepeler zijn dan intracellular Wat is tijdens spierbewegingen. Intracellulaire elektroden kunnen eruit trekken en deze beschadigen neuronen tijdens spiercontracties. In contrast, aangezien extracellulaire elektroden worden voorzichtig geperst op de schede bovenstaande neuronen, ze verblijven meestal boven hetzelfde neuron tijdens spiercontracties, en kan dus worden gebruikt in more intact preparaten. Als unieke motor neuronen identificeren voor een motor pool (in name, de I1/I3 spier in Aplysia) met behulp extracellulaire elektroden, kan men gebruik features die niet vereisen intracellulaire metingen als criteria: soma size and location, axonale projectie, en spier innervatie 4, 6,7. Voor de specifieke motor pool gebruikt om de techniek illustreren, we opgenomen vanuit buccale zenuwen 2 en 3 om axonale projecties meten, en gemeten de samentrekking krachten van de I1/I3 spier om het patroon van spier innervatie voor de afzonderlijke motor neuronen bepalen. We aan te tonen het complete proces van de eerste het identificeren van motorische neuronen met behulp van spier innervatie, dan is het karakteriseren van hun timing tijdens de motorische patronen, het creëren van van een vereenvoudigde diagnostische methode voor de snelle identificatie. De vereenvoudigde en nog veel meer snelle diagnostische methode is superieur voor meer intacte de voorbereidingen, bijv. in de geschorste buccale massa-het preparaat 8 of in vivo 9. Deze taak kan ook worden toegepast in andere motor pools 10,11,12 in Aplysia of in andere dierlijke systemen 2,3,13,14.

Figuren 4 en 5 tonen typische resultaten gebruikt om twee I1/I3 motorneuronen identificeren. Figuur 4 toont het soma opnamen van een grote motor neuron, B3, tijdens egestive-achtige en ingestive-achtige patronen (figuren 4C, 4D). De een-op-een overeenkomstige pieken op de soma kanaal en het ipsilaterale BN2 kanaal (figuur 4E) tonen aan dat de specificiteit van B3 soma opname werd gehandhaafd tijdens patronen. B3 vuurt in het midden-tot-...

In dieren met grote geïdentificeerde neuronen (<em&gt; Bv</em&gt; Weekdieren), wordt de analyse van de motorische zwembaden gedaan met behulp van intracellulaire technieken<sup&gt; 1,2,3,4</sup&gt;. Onlangs hebben we een techniek ontwikkeld om extracellulair stimuleren en individuele neuronen opnemen in<em&gt; Aplysia californica</em<sup&gt; 5</sup&gt;. We hebben nu beschrijven een-protocol voor het gebruik van deze techniek om eenduidig ​​te identificeren en motorische neuronen karakteriseren binnen een motor zwembad.

Extracellulair Het identificeren van Motor Neuronen voor een Muscle Motor Pool in<em&gt; Aplysia californica</em

In animals with large  identified neurons (e.g. mollusks), analysis of motor pools is done using  intracellular techniques1,2,3,4. Recently,  we developed ...

Het algemene doel van deze procedure is om individuele motorneuronen voor een motorpool extracellulair te identificeren, om deze vervolgens te monitoren en te controleren tijdens motorische patronen. Dit wordt bereikt door eerst de geprepareerde buccale massa van de plegia, met haakelektroden bevestigd aan cruciale zenuwen, in een gespecialiseerde registreschaal te plaatsen, en vervolgens de buccale ganglia en het cerebrale ganglion voor te bereiden op extracellulaire stimulatie en registraties. De tweede stap is het bevestigen van zuigelektroden aan de cruciale zenuwen en spieren van de buccale massa, het bevestigen van krachttransducers aan de doelspier en het plaatsen van extracellulaire glaselektroden op de schede van de buccale ganglia.Lokaliseer vervolgens de doelmotorneuronen met de extracellulaire glaselektroden. De laatste stap is om de doelmotorneuronen extracellulair te stimuleren en te registreren, terwijl de spiercontractiekrachten gelijktijdig worden gemeten. Uiteindelijk wordt de extracellulaire stimulatie- en registratietechniek gebruikt om de identificatie van individuele motorneuronen en hun neurale activiteit tijdens verschillende voedingsgerelateerde motorische

extracellularly-identifying-motor-neurons-for-muscle-motor-pool

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowetenschap

De voorbereiding van Aplysia Sensory-motor Neuronale Cell Cultures

De experimenten tonen aan een eenvoudige benadering voor studenten om ervaring op te doen bij de behandeling van spier-structuur, de synaptische reacties, de effecten van de ion gradiënten en permeabiliteit op membraan mogelijkheden. Ook is een zintuiglijke-CNS-motor-spier circuit voorgelegd aan een middel om effecten van de verbindingen op een neuronale circuit test tonen.

Membraan Potentials, Synaptic Responses, neuronale circuits, Neuromodulatie en Muscle Histologie Met behulp van de rivierkreeftjes: Student Laboratorium Oefeningen

Deze nieuwe methode maakt het gelijktijdig intracellulaire opname van een volwassen muis motoneuron en de meting van de kracht die door de spiervezels. De gecombineerde onderzoek van de elektrische en mechanische eigenschappen van motoreenheden in normale en genetisch gemodificeerde dieren is een doorbraak voor de studie van het neuromusculaire systeem.

Gelijktijdig Intracellulaire opnemen van een lumbale motoneuron en de kracht die door de motor in de volwassen muis<em&gt; In vivo</em

Zeeslak Aplysia californica is veel gebruikt als een neurobiologisch model voor de studies op cellulaire en moleculaire basis van gedrag. Hier wordt een methodologie beschreven voor het verkennen van het zenuwstelsel van Aplysia voor de elektrofysiologische en moleculaire analyses van enkele neuronen van geïdentificeerde neurale circuits.

Aplysia Ganglia voorbereiding voor elektrofysiologische en moleculaire analyses van enkele neuronen

Hier beschrijven we de dissectie van de abdominale zenuwstreng van rivierkreeft. We demonstreren ook een elektrofysiologische techniek om fictieve voortbeweging op te nemen vanuit zwembeenmotorneuronen.

De Swimmeret Systeem van rivierkreeftjes: Een praktische gids voor de dissectie van de Nerve Koord en extracellulaire Opnamen van de Motor van het Patroon

De werkzaamheid van intramusculaire opname en retrograad transport van moleculen naar corresponderende motorische neuronen hangt af van de locatie van de injectieplaatsen ten opzichte van de motorische eindplaten (MEP's). Hier beschrijven we hoe je MEP's op skeletspieren kunt lokaliseren om het retrograad transport van tracers naar motorische neuronen te optimaliseren.

Intramusculaire injecties Langs de Motor End Plates: een minimaal invasieve benadering van Shuttle Tracers Rechtstreeks in Motor Neuronen

Dit werk bevat een standaard immunohistochemie methode om motorische neuron projecties van late-16 Drosophila melanogaster embryo's te visualiseren . De gefiltreerde bereiding van vaste embryo's die gekleurd zijn met FasII antilichaam, biedt een krachtig instrument om de genen die nodig zijn voor motor axon pathfinding en target recognition tijdens neurale ontwikkeling te karakteriseren.

Visualisatie van het Axonal Projectiepatroon van Embryonische Motor Neuronen in<em&gt; Drosophila</em

Hier presenteren we een protocol voor minimaal invasieve chirurgische lesioning van spieren intrinsiek aan het Voer apparaat van de mariene weekdieren Aplysia californica om de rollen van deze spieren te begrijpen tijdens het voeden gedrag.

Een minimaal invasieve laesie techniek voor de intrinsieke spieren van de Odontophore van Aplysia californica

We beschrijven een methode voor het retrograde traceren van de Drosophila embryonale motorneuronen met behulp van lipofiele fluorescerende kleurstoffen.

Retrograde tracing van Drosophila embryonale motor neuronen met behulp van lipofiele fluorescerende kleurstoffen

Dit protocol presenteert een methode voor het weergeven van neuronale populatieactiviteit met eencellige resolutie bij niet-transgene ongewervelde soorten met behulp van absorptiespanningsgevoelige kleurstoffen en een fotodiode array. Deze aanpak maakt een snelle workflow mogelijk, waarbij beeldvorming en analyse in één dag kunnen worden nagestreefd.

Op fotodiode gebaseerde optische beeldvorming voor het opnemen van netwerkdynamica met single-neuronresolutie in niet-transgene ongewervelde dieren

We beschrijven een methode om menselijke motorische eenheden te genereren in commercieel verkrijgbare microfluïdische apparaten door door de mens geïnduceerde pluripotente stamcel-afgeleide motorneuronen te co-cultiveren met menselijke primaire mesoangioblast-afgeleide myotubes, wat resulteert in de vorming van functioneel actieve neuromusculaire juncties.

Generatie van menselijke motorische eenheden met functionele neuromusculaire juncties in microfluïdische apparaten

Leer hoe je extracellulair individuele motorneuronen identificeert in een motorpool van Aplysia californica. Deze methode maakt monitoring en controle mogelijk tijdens voedingsgerelateerde motorpatronen.

Extracellulair Het identificeren van Motor Neuronen voor een Muscle Motor Pool in

Meer video's verkennen