Muismodellen voor Graft Arteriosclerosis

Het algemene doel van het volgende experiment is om een donorvat in de abdominale aorta van een ontvanger te transplanteren. De eerste stap is het dissekeren van de thoracale aorta van de donormuis. Vervolgens worden anastomotische sites gecreëerd in de abdominale aorta van de ontvangermuis.

Het donorvat wordt vervolgens geïmplanteerd in de abdominale aorta van de ontvanger. Uiteindelijk kan een succesvolle transplantatie worden beoordeeld aan de hand van de intacte motorische functie van de achterpoten van de ontvangermuis. Dus dit model zal ons helpen de pathogenese van graft arteriële sclerose te begrijpen.

En het is technisch uitdagend, wat veel oefening vereist en de patiënt perfect moet zijn. Dus het demonstreren van de procedure zal door Dr. Chen en assistent door Louanne worden gedaan. Om te beginnen bevestigt u de juiste diepte van anesthesie bij de donormuis.

Nadat de muis is verdoofd, plaatst u deze in rugligging op een lade onder een operatiemicroscoop. Reinig de borstkas met herhaalde scrubs van jodium en alcohol na het blootleggen van het hart en het door spoelen met zoutoplossing, verwijder het hart en de longen om de volledige lengte van de thoracale aorta bloot te leggen. Zodra het is gevisualiseerd, begint u voorzichtig de thoracale aorta weg te dissekeren van het omliggende weefsel.

Wanneer de lumbale takken worden bereikt, bind ze dicht bij de aorta met zijden hechting voordat ze worden afgesneden. Wanneer vrijgemaakt van het omliggende weefsel, snijdt u de volledige thoracale aorta af. Eenmaal geïsoleerd, spoelt u de donoraorta met heparine-zoutoplossing en bewaart u deze in deze oplossing op ijs tot de transplantatie.

Na het verzekeren van adequate anesthesie bij de ontvangermuis, scheer de vacht van de voorste buikstreek. Bedek de ogen met oogzalf en maak het gebied schoon zoals eerder gezien. Wanneer klaar, plaats de muis in rugligging op een lade onder een operatiemicroscoop.

Snijd de buikwand in de middenlijn van het borstbeen tot het schaambeen en gebruik vervolgens een retractor om de wand uit elkaar te spreiden en de buikholte bloot te leggen. Eenmaal blootgelegd, wikkel de darmen in met zoutoplossing bevochtigd gaas en duw ze omhoog en weg van de buikholte. Gebruik meer met zoutoplossing bevochtigd gaas om de resterende buikgebieden te omwikkelen en gebruik dit om het rectum naar de rechterkant van de buik te trekken. Verplaats vervolgens de voortplantingsorganen naar beneden.

Zorg ervoor dat de blootgestelde weefsels vochtig blijven door zoutoplossing aan te brengen. Identificeer regelmatig de infrarenale aorta, gelegen proximal van het niervat en distaal van de aortabifurcatie, bot. Disseceer het voorzichtig om het te scheiden van de inferieure vena cva.

Identificeer, bind en snijd alle kleine takken los die uit dit deel van de aorta ontspringen. Zodra het aortasegment is geïsoleerd, plaatst u een vaatklemme aan elk uiteinde ongeveer vijf millimeter uit elkaar. Maak vervolgens de anastomotische sites door de abdominale aorta te doorsnijden tussen de klemmen.

Gebruik scherpe microschaar om een klein segment van de aorta van het ene gesneden uiteinde te verwijderen om de donor aorta graft te accommoderen. Spoel de aortasegmenten tussen de klemmen met heparine-zoutoplossing om het resterende bloed te verwijderen. Vergeet niet om gedurende het hele proces beide aortamonsters regelmatig te irrigeren met heparine-zoutoplossing.

Snijd vervolgens beide zijden van de donoraorta door om een segment graft van 2,5 millimeter lang te maken voor transplantatie. Plaats de donor aorta graft in positie door de proximale en distale uiteinden uit te lijnen voor continue hechtingen. Plaats eerst vaste hechtingen op de drie en negen uur posities van beide uiteinden.

Verbind vervolgens de gesneden randen met drie tot vier loopnaden en knoop de loopnaden met een dubbele knoop aan de vaste hechtingen voor onderbroken hechtingen. Bouw vier anastomoseplaatsen op de drie en negen uur posities van beide zijden van de graft. Eerst. Verbind vervolgens de gesneden randen met drie tot vier steken tussen elk van deze plaatsen.

Zodra de hechtingen op hun plaats zijn, laat u de distale klem los om retrograde stroom in de graft toe te staan. Identificeer eventuele bloedingsplaatsen en maak aanvullende steken binnen drie minuten. Wanneer bevredigende hemostase is bereikt, laat u de proximale klem los.

De doorvoer van de graft kan worden bevestigd door de aanwezigheid van krachtige pulsatie. Als de pulsatie afneemt, injecteert u heparine in het vat om trombose te voorkomen. Wanneer klaar, brengt u de darmen terug in de buikholte en hecht u de spier- en huidlagen dicht.

Plaats de ontvangermuis in een warme, schone kooi en controleer gedurende één tot twee uur totdat de bewustzijnstoestand weerkeert. Beoordeel de motorische functie van de muis na herstel en opnieuw, op de tweede dag, een transplantatieoperatie is succesvol als geen disfunctie van de achterpoten wordt waargenomen. Histologische analyse van de slagadergrafts die vier weken na de operatie werden genomen, toonde een verhoogde dikte van de vaatwand bij vrouwelijke ontvangers van een mannelijke donor.

Echter, er werd geen graft arteriosclerose waargenomen in de mannelijke naar mannelijke groep. In dit voorbeeld werd de thoracale slagader van een mannelijke donor getransplanteerd in een interferon gamma knockout muis waarna interferon gamma expressie werd geïnduceerd in de ontvangermuis. Voordat monsters werden genomen.

Een paar weken later, toont histologische analyse van slagadergrafts aan dat er geen graft arteriosclerose werd waargenomen in de behandelde groep. Nu weet je hoe je deze operatie moet uitvoeren. Blijf proberen.