Name: Niet-invasieve Intratracheaal intubatie om te studeren de Pathologie en Fysiologie van Mouse Lung (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-11-08T22:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 15 s
Description: Leer een niet-invasieve intratracheale intubatiemethode voor muizen om longfysiologie en -pathologie te bestuderen. Deze techniek maakt directe behandelingsafgifte en visualisatie mogelijk voor longonderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Dit werk werd ondersteund door het Intramurale Onderzoeksprogramma van het National Cancer Institute, Centrum voor Kankeronderzoek.

Het volgende protocol beschrijft een niet-invasieve, eenvoudige en snelle methode om materiaal plaats leveren muizenlongen. Deze procedure werd goedgekeurd door de Animal Care en gebruik Comite National Cancer Institute. 1. Anesthesie <ol><li> Eerst verdoven de muis met een mengsel van ketamine en xylazine (100 mg / kg lichaamsgewicht en 10 mg / kg lichaamsgewicht, respectievelijk). Dit is de aanbevolen ACUC anesthesie en dosering. Met dit bedrag, muizen onbewust tenminste voor ~ 20 minuten. </li><li> Breng dierenarts zalf voor de ogen van de muis om het drogen van de ogen tijdens anesthesie voorkomen. </li><li> Na enkele minuten, knijp een voet van de muis om te controleren op het bewustzijn. Eenmaal bevestigd onbewuste, plaatst u de muis op een intubatie stand een hoek van 60 ° en zijn plaats te houden door het inhaken van de bovenste snijtanden over een kleine rubberen band aan de bovenkant van de voet. </li></ol> 2. Intratracheale intubatie </p&gt; <ol><li> Zachtjes trekken de tong van de muis naar een kant met behulp van een Q-tip. </li><li> Bij gebruik van de BioLite intubatie Illumination System, voorzichtig in de intubatie systeem totdat het strottenhoofd wordt gevisualiseerd met behulp van de glasvezel-lichtgeleider. </li><li> Zodra de epiglottis en de arytenoid kraakbeen worden gevisualiseerd, steek de vezel over de epiglottis en tussen de arytenoid kraakbeen, en vooruit tot de juiste lengte van de katheter is ingebracht. </li></ol> Opmerking: Om de juiste lengte van de katheter worden ingebracht verkrijgen aanvankelijk de lengte tussen de mond en de bronchiale vertakkingspunt meten met een praktijk muis van een vergelijkbare grootte voren (figuur 1). De lengte hangt grotendeels af van de grootte van de muis. Insertie van de katheter boven het vertakkingspunt stop (-1,5 cm voor muizen met ~ 25 g lichaamsgewicht). Dit verzekert dat de geïntubeerde materiaal naar alle lobben. Minstens 50 praktijk mice kan nodig zijn voor een persoon die de intubatie te bekwamen in de techniek geworden (Vaardig betekent dat het slagingspercentage van intubatie is meer dan 95%). <ol start="4"><li> Zodra de katheter wordt ingebracht, snel de glasvezel-lichtgeleider verwijderen van de katheter, zodat het dier om normaal te ademen. Wanneer de intubatie Verlichtingssysteem niet wordt gebruikt, direct plaatst een katheter beschreven. </li><li> Voeg een oplossing bevattende materiaal plaats op een katheter. Zorg ervoor dat de oplossing wordt meegezogen in de longen direct na toevoeging. Vijftig microliter voor ~ 25 g lichaamsgewicht van de muis wordt routinematig gebruikt. </li></ol> 3. Animal Recovery <ol><li> Zodra de oplossing wordt meegezogen in de long, take down de muis uit de stand, en zet het terug in de oorspronkelijke kooi. </li><li> Let op de muis totdat het begint te bewegen. </li><li> Eenmaal bevestigd dat de muis is in goede staat, terug de kooi aan een rek. </li></ol>

<ol><li>Das, S., Macdonald, K., Chang, H. Y., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+method+of+mouse+lung+intubation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">A simple method of mouse lung intubation.</a> J. Vis. Exp. (73), e50318(2013).</li>
<li>Miller, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualization+of+murine+intranasal+dosing+efficiency+using+luminescent+Francisella+tularensis%3A+effect+of+instillation+volume+and+form+of+anesthesia%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Visualization of murine intranasal dosing efficiency using luminescent Francisella tularensis: effect of instillation volume and form of anesthesia.</a> PLoS One. 7, e31359(2012).</li>
<li>Rayamajhi, M., Redente, E. F., Condon, T. V., Gonzalez-Juarrero, M., Riches, D. W., Lenz, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-surgical+intratracheal+instillation+of+mice+with+analysis+of+lungs+and+lung+draining+lymph+nodes+by+flow+cytometry%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Non-surgical intratracheal instillation of mice with analysis of lungs and lung draining lymph nodes by flow cytometry.</a> J. Vis. Exp. (51), e2702(2011).</li>
<li>Riesenfeld, E. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhaled+salmeterol+and%2For+fluticasone+alters+structure%2Ffunction+in+a+murine+model+of+allergic+airways+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Respir.+Res%22%5BJournal%5D)">Inhaled salmeterol and/or fluticasone alters structure/function in a murine model of allergic airways disease.</a> Respir. Res. 11, 22(2010).</li>
<li>Rivera, B., Miller, S., Brown, E., Price, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+method+for+endotracheal+intubation+of+mice+and+rats+used+in+imaging+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Contemp.+Top.+Lab+Anim.+Sci%22%5BJournal%5D)">A novel method for endotracheal intubation of mice and rats used in imaging studies.</a> Contemp. Top. Lab Anim. Sci. 44, 52-55 (2005).</li>
<li>Bonniaud, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progressive+transforming+growth+factor+beta1-induced+lung+fibrosis+is+blocked+by+an+orally+active+ALK5+kinase+inhibitor%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Res.+Crit.+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Progressive transforming growth factor beta1-induced lung fibrosis is blocked by an orally active ALK5 kinase inhibitor.</a> Am. J. Res. Crit. Care Med. 171, 889-898 (2005).</li>
<li>Bivas-Benita, M., Zwier, R., Junginger, H. E., Borchard, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+pulmonary+aerosol+delivery+in+mice+by+the+endotracheal+route%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Pharm.+Biopharm%22%5BJournal%5D)">Non-invasive pulmonary aerosol delivery in mice by the endotracheal route.</a> Eur. J. Pharm. Biopharm. 61, 214-218 (2005).</li>
<li>Haegens, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myeloperoxidase+deficiency+attenuates+lipopolysaccharide-induced+acute+lung+inflammation+and+subsequent+cytokine+and+chemokine+production%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Myeloperoxidase deficiency attenuates lipopolysaccharide-induced acute lung inflammation and subsequent cytokine and chemokine production.</a> J. Immunol. 182, 7990-7996 (2009).</li>
<li>Jackson, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exposure+of+pregnant+mice+to+carbon+black+by+intratracheal+instillation%3A+toxicogenomic+effects+in+dams+and+offspring%5BTitle%5D)+AND+%22Mutat.+Res%22%5BJournal%5D)">Exposure of pregnant mice to carbon black by intratracheal instillation: toxicogenomic effects in dams and offspring.</a> Mutat. Res. 745, 73-83 (2012).</li>
<li>Bodewes, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogenesis+of+Influenza+A%2FH5N1+virus+infection+in+ferrets+differs+between+intranasal+and+intratracheal+routes+of+inoculation%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Pathol%22%5BJournal%5D)">Pathogenesis of Influenza A/H5N1 virus infection in ferrets differs between intranasal and intratracheal routes of inoculation.</a> Am. J. Pathol. 179, 30-36 (2011).</li>
<li>Winslow, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suppression+of+lung+adenocarcinoma+progression+by+Nkx2-1%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Suppression of lung adenocarcinoma progression by Nkx2-1.</a> Nature. 473, 101-104 (2011).</li>
</ol>

De auteurs verklaren dat zij geen concurrerende financiële belangen.

Intratracheale intubatie zoals hier beschreven is een eenvoudige, maar uitstekende niet-invasieve methode om materialen van belang gelijkmatig aan de muizenlong toe te dienen. Deze methode maakt het mogelijk de effecten en/of rol van het toegediende materiaal op de fysiologie en/of pathologie van de long te bestuderen. De toegediende materialen kunnen endogene moleculen zoals cytokinen zijn, of exogene materialen zoals xenobiotische chemicaliën/geneesmiddelen, carcinogenen, verontreinigingen, allergenen of virussen die r...

Lung is een orgaan waar veel verwoestende ziekten vaak worden gediagnosticeerd. Onder hen, longkanker is de tweede meest gediagnosticeerde kanker bij zowel mannen als vrouwen, en de meest voorkomende oorzaak van overlijden door kanker. Chronische obstructieve longziekte, ook bekend als emfyseem en chronische bronchitis, is een zeer ernstige ziekte en de derde doodsoorzaak in de Verenigde Staten. In 2011 werd geschat dat 25,9 miljoen Amerikanen had astma, waaronder 7,1 miljoen kinderen onder de leeftijd van 18. Astma is de derde belangrijke oorzaak van ziekenhuisopname bij kinderen onder de leeftijd van 15 (American Lung Association, <a href="http://www.lung.org" target="_blank">http://www.lung.org</a> ). Om de pathofysiologie en / of etiologie van deze verwoestende ziekte en de onderliggende mechanismen te bestuderen, het gebruik van nauwkeurige modellen is kritiek in combinatie met geschikte en niet-invasieve toediening van verschillende materialen plaats long. Muizen bieden een van de beste modellen tebestuderen van de moleculaire mechanismen van de pathologie en fysiologie van longziekten vanwege de toenemende beschikbaarheid van knockout en transgene muizen en een grote aanbod van genetische informatie. Verschillende werkwijzen zijn gebruikt door een aantal onderzoekers in verschillende instellingen materialen plaats leveren aan muizenlongen, waaronder inhalatie, intranasale instillatie, intratracheale instillatie en intratracheale intubatie 1-4. De laatste procedure is niet routinematig gebruikt omdat het nogal moeilijk uitvoerbaar wordt beschouwd. Intratracheale intubatie hierin beschreven is een niet-invasieve, eenvoudige en snelle methode om materiaal van belang muizenlongen leveren om het effect van het geleverde materiaal op genexpressiepatronen, pathologie en / of fysiologie van de long 5 bestuderen. Deze techniek zorgt voor de levering van exogene materialen om een ​​hele long en geen overleving chirurgie omvatten en zal dus likely toegelaten door een institutionele Animal Care en gebruik commissies.

<table><tbody><tr><td>KetaVed</td><td>Vedco</td><td></td><td>Ketamine</td></tr><tr><td>AnaSed Injection 20 mg</td><td>LLOYD</td><td></td><td>Xylazine</td></tr><tr><td>BioLite Stand</td><td>Braintree Scientific</td><td>RIS100</td><td>Voor muizen</td></tr><tr><td>BioLite Intubatie Verlichtingssysteem</td><td>Braintree Scientific</td><td>BIO MI-KIT</td><td>Voor muizen</td></tr><tr><td>22 G, 1 inch i.v. katheter</td><td>Terumo</td><td>SR-OX2225CA</td><td>Voor muizen onder 30 g. De katheter wordt alleen gebruikt indien het Intubatie Verlichtingssysteem niet wordt gebruikt.</td></tr><tr><td>20 G, 1 inch i.v. katheter</td><td>Terumo</td><td>SR-OX2025CA</td><td>Voor muizen boven 30 g. De katheter wordt alleen gebruikt indien het Intubatie Verlichtingssysteem niet wordt gebruikt.</td></tr></tbody></table>

niet-invasieve intratracheaal intubatie om te studeren de pathologie en fysiologie van mouse lung

Noninvasive Intratracheal Intubation to Study the Pathology and Physiology of Mouse Lung

Het gebruik van een model dat de toestand van longziekten bij mensen nabootst is kritiek voor het bestuderen van de pathofysiologie en / of etiologie van een bepaalde ziekte en ontwikkelen van therapeutische interventie. Met de toenemende beschikbaarheid van knockout en transgene derivaten, samen met een grote hoeveelheid genetische informatie, muizen verschaffen een van de beste modellen om de moleculaire mechanismen van de pathologie en fysiologie van longziekten te bestuderen. Inademing, intranasale instillatie, intratracheale instillatie, en intratracheale intubatie zijn de meest gebruikte technieken door een aantal onderzoekers om materialen van belang te dienen aan muizenlongen. Er zijn voor-en nadelen voor elke techniek, afhankelijk van de doelen van een studie. Hier een niet-invasieve intratracheaal intubatie methode die direct exogene materialen kunnen leveren aan muizenlongen wordt gepresenteerd. Deze techniek werd toegepast op bleomycine toedienen aan muizenlongen als model pulmonale fibrose te bestuderen. &lt;/ P&gt;

Aanvankelijk werd groen geverfd oplossing gebruikt om muizen te intuberen voor de praktijk. De long werd onmiddellijk gereseceerd na intubatie te onderzoeken hoe gelijkmatig de kleur in de long (figuur 2) werd verdeeld. Deze techniek werd toegepast op bleomycine-geïnduceerde longfibrose bestuderen met C57BL / 6 muizen. Toen de muizen intratracheaal werden geïntubeerd met 1,2 U / kg bleomycine of zoutoplossing als controle en necropsie 3 weken later, de muizen ontwikkelde bleomycine geïnduceerde fibrose ...

Het gebruik van een model dat de toestand van longziekten bij mensen nabootst is kritiek voor het bestuderen van de pathofysiologie en / of etiologie van een bepaalde ziekte en ontwikkelen van therapeutische interventie. Hier een niet-invasieve intratracheaal intubatie methode die direct exogene materialen kunnen leveren aan muizenlongen wordt gepresenteerd.

Niet-invasieve Intratracheaal intubatie om te studeren de Pathologie en Fysiologie van Mouse Lung

The use of a model that mimics the condition of lung diseases in humans is critical for studying the pathophysiology and/or etiology of a particular ...

Het algemene doel van deze procedure is om intratracheale intubatie te gebruiken om de effecten van experimentele behandelingen op de fysiologie en pathologie van de spiegellong te bestuderen. Dit wordt bereikt door eerst een controlemuis van een vergelijkbare grootte als de experimentele muis te meten, van de mond tot het punt van de bronchiale vertakking van de long. Gebruik vervolgens het BioLite intubatie-verlichtingssysteem om de trachea te lokaliseren.De glasvezel wordt na insertie vervolgens snel verwijderd, terwijl de katheter op zijn plaats blijft. In de laatste stap wordt een oplossing met de experimentele behandeling via de katheter aan de longen toegediend. Ten slotte kan de gelijkmatige verspreiding van het betreffende molecuul in de gehele long worden gevisualiseerd met behulp van een bijbehorende groene kleurstof.Het belangrijkste voordeel van deze techniek ten opzichte van andere intubatiemethoden is dat, bij onze techniek, het glasvezel-eliminatiesysteem de lokalisatie van de trachea en de plaatsing van de katheter vergemakkelijkt, waardoor een optimale afgifte van het betreffende materiaal in de long wordt gegarandeerd. De demonstratie van de procedure zal ter pla

noninvasive-intratracheal-intubation-to-study-pathology-physiology

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Herhaalde metingen van knaagdieren respiratoire fysiologie en bemonstering van de luchtwegen ontstekingscellen wenselijk zijn, maar over het algemeen niet haalbaar. Hier beschrijven we een herhaalbare methode voor het mondeling intuberen muizen dat herhaalde metingen van de luchtwegen hyperreactiviteit en de bemonstering van de luchtwegen ontstekingscellen vergunningen.

Een reversibele, niet-invasieve methode voor Airway Resistance Metingen en bronchoalveolaire lavage Fluid Sampling in Muizen

We illustreren niet-chirurgische levering van testmateriaal in de longen van verdoofde muizen via de luchtpijp. Deze methode laat long blootstelling aan bacteriële en virale pathogenen, cytokines, antistoffen, kralen, chemicaliën of kleurstoffen. We verder beschrijven oogst en verwerking van de longen en longen drainerende lymfeklieren (LDLNs) voor flowcytometrie.

Niet-chirurgische intratracheale Instillatie van Muizen met Analyse van de longen en Lung drainerende lymfeklieren door middel van flowcytometrie

We hebben een eenvoudige, betrouwbare en relatief goedkope methode voor endotracheale intubatie bij muizen via directe laryngoscopie behulp van een otoscoop met een 2,0 mm speculum ontwikkeld. Deze techniek is atraumatische en kan worden gebruikt voor herhaalde metingen in chronische experimenten. We vinden het superieur aan tracheostomie of eerder gerapporteerde niet-chirurgische technieken.

Luchtpijpintubatie in Muizen<em&gt; Via</em&gt; Directe laryngoscopie behulp van een otoscoop

Dit artikel beschrijft een striaghforward en efficiënte methode van intubatie muizen voor longfunctie metingen of pulmonale instillatie, die het mogelijk maakt de muizen om te herstellen en studeerde worden op latere tijdstippen. Deze procedure houdt een goedkope optische vezel lichtbron die direct verlicht de luchtpijp.

Een eenvoudige methode van de Muis van Lung intubatie

Intratracheale intubatie-gemedieerde (IMIT) instillatie van reagentia is een uitstekend invasieve methode voor het bestuderen ademhalingsziekte, alsmede een werkwijze voor het indruppelen therapeutische reagentia direct in de longen. Het is een snelle en zeer reproduceerbare werkwijze die geschikt is voor preklinische proeven.

Intubatie-gemedieerde Intratracheaal (IMIT) Blaasinstillatie: een niet-invasieve, Lung-specifieke Delivery System

Het doel van dit artikel is om eenvoudige methoden die sterk zal helpen bij de opzet en analyse van de muis longen met longkanker of andere aandoeningen te beschrijven. We presenteren 3 protocollen eenvoudig en betrouwbaar uit te voeren long instillaties, fixatie, en longvolume metingen.

Instillatie en Fixatie Methoden Nuttig in Mouse Lung Cancer Research

Dit artikel presenteert een snelle en eenvoudige methode voor het toedienen van bleomycine rechtstreeks in de muis luchtpijp via intubatie. Belangrijkste voordelen van deze werkwijze zijn dat het zeer reproduceerbaar, gemakkelijk onder de knie, en vereist geen gespecialiseerde apparatuur of lange hersteltijden.

Een verbeterde werkwijze voor snelle intubatie van de trachea in muizen

Het doel van dit artikel is het beschrijven van een verfijnde methode van intubatie van de laboratoriummuis. De methode is niet-invasief en daarom ideaal voor studies die seriële controle van de ademhalingsfunctie en/of instillatie van behandelingen in de long vereisen.

Herhaalde Orotracheale intubatie bij muizen

Een muischirurgisch model om reperfusie (IR) -letsel in de linkerlong te creëren met behoud van ventilatie en het vermijden van hypoxie.

Een muismodel van orotracheale intubatie en beademde longischemie reperfusiechirurgie

Hier stellen we een protocol voor intratracheale lipopolysaccharide (LPS) levering via niet-invasieve orofaryngeale endotracheale intubatie. Deze methode minimaliseert het trauma van de chirurgische procedure voor het dier en levert LPS nauwkeurig af aan de luchtpijp en vervolgens aan de longen.

Niet-invasieve intratracheale lipopolysaccharide-instillatie bij muizen

Het muizen intrapulmonale tracheale transplantatie (IPTT) model is waardevol voor het bestuderen van obliteratieve luchtwegaandoeningen (OAD) na longtransplantatie. Het biedt inzicht in longspecifiek immunologisch en angiogeen gedrag bij luchtwegvernietiging na allotransplantatie met een hoge reproduceerbaarheid. Hier beschrijven we de IPTT-procedure en de verwachte resultaten.

Intrapulmonale tracheale transplantatie bij muizen: een model voor het onderzoeken van obliteratieve luchtwegaandoeningen na longtransplantatie

Leer een niet-invasieve intratracheale intubatiemethode voor muizen om longfysiologie en -pathologie te bestuderen. Deze techniek maakt directe behandelingsafgifte en visualisatie mogelijk voor longonderzoek.

Niet-invasieve Intratracheaal intubatie om te studeren de Pathologie en Fysiologie van Mouse Lung

Meer video's verkennen