Name: Flexibele colonoscopie in Muizen aan de ernst van colitis en Colorectale Tumoren Evalueer behulp van een gevalideerde Endoscopische Scoring System (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-10-16T20:30:00.000+00:00
Duration: 15 min 49 s
Description: Leer een gevalideerde endoscopische methode voor het evalueren van colitis en colorectale tumoren bij muizen. Dit protocol maakt gestandaardiseerde beoordeling van darmontsteking mogelijk.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Speciale dank aan Sarah Kossak, Mitchell Guanzon, Sung Yeun Yang en Li Guo Jia, voor hun medewerking tijdens de endoscopische beoordeling van hun proefdieren.

1. Het opzetten van de Endoscopie System <ol><li> Het opzetten van de endoscopie systeem voor verlamming van de muizen, volgens de instructies van de fabrikant. Gebruik een video ureteroscope ontworpen voor mensen voor dit protocol (figuur 1). De buitendiameter van de buis inbrengen 9,9 Fr (3,3 mm), het distale uiteinde is 8,5 Fr (2,8 mm) en de binnendiameter van de instrumentatie kanaal 6 Fr (1,2 mm). </li><li> Hoewel het gebruik van endoscopen zijn niet gekoppeld aan ziekteoverdracht [9], steriliseer de endoscoop lens met 70% ethanol of 10 met geschikte technieken bij het ​​werken met sporenvormende micro-organismen. Bereid bacteriostatisch steriel glijmiddel en niet-krassen veeg weefsels naar de endoscoop punt verzadigen. </li><li> Bevestig een 3 ml spuit vol met lucht (of een geschikte CO2 gasmengsel) naar de top van de instrumentatie kanaal. </li><li> Schakel de stroom in, en stel de witbalans in normale witte licht,evenals smalle band imaging (NBI) modus, indien van toepassing. Sinds 2001 heeft NBI verstrekt diagnostische beeldvorming voordelen als het benadrukt fijne structuren bloedvat op de slijmvliezen, waaronder colitis en tumorous laesies, die kenmerkend zijn abnormale vascularisatie 11 hebben. NBI-filter modus beperkt de golflengte van het gevangen licht 390-445 nm en 530-550 nm, welke structuren hoogtepunten met hemoglobine. </li><li> Print de beoordeling scoreformulier (figuur 2) om uw bevindingen te registreren. Vertrouwd te raken met de verwachte normale en NBI beelden (figuur 3A) en de definitie en de kwaliteiten van elk criterium voor het examen (zie paragraaf 6.1). </li><li> Bereid een kleurstof-gebaseerde oplossing van met fosfaat gebufferde zoutoplossing (PBS) voor chromoscopie, indien gewenst. In chromoscopie, wordt het examen uitgevoerd met behulp van een kleurstof als contrastmiddel om mucosale veranderingen te markeren. Gebruik methyleenblauw (0,1-1%) en indigotine (0,1%) oplossing (figuur 3B). Nootdat methyleenblauw een oxidatie-reductiemiddel dat oxiderende radicalen, indirecte verknoping aminozuurresten en DNA degradatie 12, die kunnen storen monsteranalyse kan produceren. </li></ol> 2. Algemene anesthesie van de Muis <ol><li> Kies het anestheticum en de toedieningsweg. Raadpleeg een dierenarts van een dier bron voorziening of Institutional Animal Care en gebruik Comite (IACUC) over een mogelijke interferentie van medicijnen met het immuunsysteem en onderzoeksdoelen. Sommige medicijnen kunnen cytokineprofiel expressie beïnvloeden bij dieren, waaronder knaagdieren 13. Gebruik injecteerbare tribroomethanol voor terminal procedures of isofluraan te overleven endoscopieën, samen met de juiste controles. </li><li> Voor inductie toedienen 4-5% isofluraan in 100% zuurstof met een snelheid van 0,2-0,5 L / min, gebruik 0.5-2% onderhoud. Dit protocol is niet geschikt voor alle dieren. Raadpleeg uw faciliteit dierenartsvoor de juiste instructies en training. Voldoen aan de relevante IACUC aanbevelingen aan de hoogste normen voor het welzijn van dieren te bereiken. Zorg ervoor dat de muis als volledig verdoofd. </li><li> &#39;Strap&#39; de verdoofde muis om een ​​steunvlak tafel in een dorsale of ventrale positie met behulp van laboratorium plakband. Pas op voor de anatomische oriëntatie op uw endoscoop scherm. Beveilig de onderste ledematen en staart. Een band van tape kan ook op de borst geplaatst worden om beweging weg van de respirator te voorkomen, maar vermijd beperken thoracale ventilatory bewegingen. </li></ol> 3. Gedetailleerde endoscopisch onderzoek <ol><li> Kijk voor perianale letsels voordat u de endoscoop in het rectum, dan vooraf de reikwijdte via de anus. </li><li> De vacht van de endoscoop met steriele chirurgische glijmiddel. Wees er zeker niet om de vacht van het oppervlak van de CCD-sensor (Charge Coupled Device). </li><li> Plaats de endoscoop en de opname te starten. Opgenomen video&#39;s zijn nuttig voor meticulous evaluatie van endoscopie indien nodig na het onderzoek. Probeer de endoscopie uitvoeren in de minst mogelijke tijd tot intestinale / mucosale irritatie te voorkomen. </li><li> Solliciteer lucht met behulp van een injectiespuit langzaam apart gezet van de darmwand. Afhankelijk van de grootte van de muis, gebruik 1-2 ml lucht. Vermijd overmatige lucht inblazing, het kan ademhalingsproblemen en de dood van de verdoofde muis veroorzaken. </li><li> Vooraf de endoscoop naar voren als je de weg vrij met lucht of zachte rotatie van de scope. Laat de endoscoop niet verder als je niet ziet het darmlumen. Perforaties of rectale / colon scheuren optreden in dit stadium, vooral bij jonge muizen (&lt;8-10 weken oud). Maak foto&#39;s als dat nodig is. </li><li> Naarmate de omvang voorschotten, beoordelen of er spontane bloedingen (gedefinieerd als natuurlijk voorkomende mucosale bloedingen niet geassocieerd met traumatische endoscopie). Spontane bloeden kan worden waargenomen als de endoscoop komt het rectum en het colon. </li><li> AlsSess de transparantie van de dikke muur. Transparantie wordt gedefinieerd als het vermogen om de intramurale bloedvaten in de dikke darm visualiseren en die van de omliggende ingewanden (figuur 4). Zachte beweging van de scope (back-forward, rechts, links) helpen bepalen of bloedvaten kan worden gezien in de context van andere ingewanden. Mesenteriale vetweefsel kan ook worden gezien. Let op als het rectum binnen de bekkenholte lijkt minder transparant zijn dan de dikke muur in de buikholte. </li><li> Inspecteren om het type en het aantal focale laesies (oedemateus gebieden, erosies, zweren, tumor massa&#39;s) te bepalen. Dit zal worden vastgelegd in het scoreformulier met de dikke darm ontsteking score en de decimale identifiers die zijn ontwikkeld. </li><li> Zodra het gebied waar de dikke darm buigt caudaal in de proximale colon is bereikt, trekken de endoscoop langzaam en zoek naar de aanwezigheid van contact bloedingen (die door brosheid mucosale na voordoetendoscoop is gevorderd of verwijderd). Het is niet noodzakelijk om de dikke darm oppervlak opzettelijk schrapen. Gezonde colorectale slijmvlies bloedt niet na een goede endoscopisch onderzoek. </li></ol> 4. Biopsie <ol><li> Als biopten nodig zijn, plaatst de biopsietang door de endoscoop kanaal speciaal voor instrumentatie. Bewaken van de voortgang van de tang op de endoscoop scherm om darmperforatie voorkomen. </li><li> Open de biopsie kopjes van de tang om ongeveer 60-80 ° kop-aan-kop hoek, en deze rechtstreeks naar het gebied van belang. Overmatig geopende tang of druk kunnen extra lagen van darmweefsel, wat resulteert in een biopsie-geïnduceerde perforatie van gezonde transparante darmwand grijpen. Als perforatie optreedt, euthanaseren het dier tijdens anesthesie na uw aanbevelingen IACUC. Perforaties leiden endotoxemie en peritonitis. </li><li> Sluit de biopsie kopjes, en trek ze uit terwijl de tang gesloten. </li><li> Remove het preparaat uit de tang door spoelen van het weefsel met een oplossing die aangenaam is voor het weefsel en de tang. RNA later en PBS zijn gemeenschappelijke werkgroep oplossingen, indien nodig, gebruik de naald om het monster te verjagen. Vermijd het uithollen van het pincet bekers of snijkanten. </li></ol> 5. Herstel van Anesthesie <ol><li> Na voltooiing van het onderzoek, een warme omgeving om de muis totdat herstelt. Gebruik ofwel een elektrisch licht, of een warme pad ingesteld op 37 ° C. Vermijd oververhitting; perifere vaatverwijding compromissen herstel dier. Bewaken van de muis nauwkeurig tot volledig herstel. </li></ol> 6. Geïntegreerde Endoscopische Scoring System van colorectale Gezondheid met decimale Identifiers <ol><li> Gebruik het scoreformulier (figuur 2) en de parameter definities hieronder (Endoscopische Evaluatie van Muriene Colorectale Ontsteking en tumoren met behulp van een decimaal-gewogen Scoring System: Parameter Definities, en Protocol) voorvoorbeelden en de optionele &#39;distale-proximale Endoscopische Colitis scoresysteem&#39; (D-PECS) als leidraad voor nonbiased beoordeling en gedetailleerde registratie. </li><li> De score van de vier parameters van colorectale ontsteking beschreven op het scoresysteem vorm (figuur 2). Minutieus evalueren de perianale regio, intestinale transparantie, het type van intestinale bloedingen (indien aanwezig), en de aanwezigheid en hoeveelheid van focale laesies (erosieve, colitis, en / of tumor). </li><li> Bij de beoordeling van tumoren voor onderzoeksdoeleinden, onderzoekt de hoeveelheid, locatie en grootte, en te beschrijven met behulp van de colon kaart en het staafdiagram op het scoreformulier. De numerieke som van de scores verkregen en het aantal laesies (indien van toepassing) wordt de achtergrond colon ontsteking, het meest overheersende type letsel en het aantal laesies bepalen. </li></ol>

<ol><li>Huang, E. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Colonoscopy+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Surg.+Endosc%22%5BJournal%5D)">Colonoscopy in mice.</a> Surg. Endosc. 16, 22-24 (2002).</li>
<li>Wirtz, S., Becker, C., Blumberg, R., Galle, P. R., Neurath, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+of+T+cell-dependent+experimental+colitis+in+SCID+mice+by+local+administration+of+an+adenovirus+expressing+IL-18+antisense+mRNA%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Treatment of T cell-dependent experimental colitis in SCID mice by local administration of an adenovirus expressing IL-18 antisense mRNA.</a> J. Immunol. 168, 411-420 (2002).</li>
<li>Funovics, M. A., Alencar, H., Su, H. S., Khazaie, K., Weissleder, R., Mahmood, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Miniaturized+multichannel+near+infrared+endoscope+for+mouse+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Imaging%22%5BJournal%5D)">Miniaturized multichannel near infrared endoscope for mouse imaging.</a> Mol Imaging. 2, 350-357 (2003).</li>
<li>Becker, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+imaging+of+colitis+and+colon+cancer+development+in+mice+using+high+resolution+chromoendoscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">In vivo imaging of colitis and colon cancer development in mice using high resolution chromoendoscopy.</a> Gut. 54, 950-954 (2005).</li>
<li>Ravnic, D. J., Konerding, M. A., Huss, H. T., Wolloscheck, T., Pratt, J. P., Mentzer, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+microvideo+endoscopy+of+the+colonic+microcirculation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Surg.+Res%22%5BJournal%5D)">Murine microvideo endoscopy of the colonic microcirculation.</a> J. Surg. Res. 142, 97-103 (2007).</li>
<li>Hamilton, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Essential+role+for+mast+cell+tryptase+in+acute+experimental+colitis%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Essential role for mast cell tryptase in acute experimental colitis.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 108, 290-295 (2011).</li>
<li>Becker, C., Fantini, M. C., Neurath, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+resolution+colonoscopy+in+live+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">High resolution colonoscopy in live mice.</a> Nat. Protoc. 1, 2900-2904 (2006).</li>
<li>Hensley, H. H., Merkel, C. E., Chang, W. C., Devarajan, K., Cooper, H. S., Clapper, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endoscopic+imaging+and+size+estimation+of+colorectal+adenomas+in+the+multiple+intestinal+neoplasia+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Gastrointest.+Endosc%22%5BJournal%5D)">Endoscopic imaging and size estimation of colorectal adenomas in the multiple intestinal neoplasia mouse.</a> Gastrointest. Endosc. 69, 742-749 (2009).</li>
<li>Banerjee, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Infection+control+during+GI+endoscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Gastrointest.+Endosc%22%5BJournal%5D)">Infection control during GI endoscopy.</a> Gastrointest. Endosc. 67, 781-790 (2008).</li>
<li><a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cleaning+and+disinfection+of+equipment+for+gastrointestinal+endoscopy.+Report+of+a+Working%5BTitle%5D)+AND+%22Party+of+the+British+Society+of+Gastroenterology+Endoscopy+Committee.+Gut%22%5BJournal%5D)">Cleaning and disinfection of equipment for gastrointestinal endoscopy. Report of a Working.</a> Party of the British Society of Gastroenterology Endoscopy Committee. Gut. 42, 585-593 (1998).</li>
<li>Sano, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+diagnostic+method+based+on+color+imaging+using+narrow+band+imaging+%28NBI%29+system+for+gastrointestinal+tract%5BTitle%5D)+AND+%22Gastrointest.+Endosc%22%5BJournal%5D)">New diagnostic method based on color imaging using narrow band imaging (NBI) system for gastrointestinal tract.</a> Gastrointest. Endosc. 53, 125-12 (2001).</li>
<li>Davies, J., Burke, D., Olliver, J. R., Hardie, L. J., Wild, C. P., Routledge, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methylene+blue+but+not+indigo+carmine+causes+DNA+damage+to+colonocytes+in+vitro+and+in+vivo+at+concentrations+used+in+clinical+chromoendoscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">Methylene blue but not indigo carmine causes DNA damage to colonocytes in vitro and in vivo at concentrations used in clinical chromoendoscopy.</a> Gut. 56, 155-156 (2007).</li>
<li>Chiang, N., Schwab, J. M., Fredman, G., Kasuga, K., Gelman, S., Serhan, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anesthetics+impact+the+resolution+of+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Anesthetics impact the resolution of inflammation.</a> PLoS One. 3, e1879(2008).</li>
<li>Zilberman, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+digital+flexible+ureteroscope%3A+in+vitro+assessment+of+optical+characteristics%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Endourol%22%5BJournal%5D)">The digital flexible ureteroscope: in vitro assessment of optical characteristics.</a> J. Endourol. 25, 519-522 (2011).</li>
<li>Machida, H., Sano, Y., Hamamoto, Y., Muto, M., Kozu, T., Tajiri, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Narrow-band+imaging+in+the+diagnosis+of+colorectal+mucosal+lesions%3A+a+pilot+study%5BTitle%5D)+AND+%22Endoscopy%22%5BJournal%5D)">Narrow-band imaging in the diagnosis of colorectal mucosal lesions: a pilot study.</a> Endoscopy. 36, 1094-1098 (2004).</li>
<li>Dohoo, I., Martin, W., Stryhn, H. Cohort studies. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDohoo%2C+I+%22Veterinary+Epidemiologic+Research%22">Veterinary Epidemiologic Research</a>. McPike, S. M. , AVC, Inc. Charlottetown, Prince Edward Island, Canada. 151-162 (2003).</li>
<li>Yiou, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pathophysiology+of+pelvic+floor+disorders%3A+evidence+from+a+histomorphologic+study+of+the+perineum+and+a+mouse+model+of+rectal+prolapse%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Anat%22%5BJournal%5D)">The pathophysiology of pelvic floor disorders: evidence from a histomorphologic study of the perineum and a mouse model of rectal prolapse.</a> J. Anat. 199, 599-607 (2001).</li>
</ol>

Geen financiële of belangenconflict bekendgemaakt.

Er zijn verschillende overwegingen ten aanzien van de wijziging en het oplossen van problemen van de endoscopische techniek bij muizen. Kritische aspecten van de procedure die tijdens het gebruik van flexibele endoscopie te worden beheerst onder meer de aanpassing van het volume lucht die nodig is om een ​​opgezette buik en respiratoire compromis van de muis te voorkomen en kleine technische aspecten van het uitzicht besturing met de coördinatie van de gehoekt en staartrotorbediening . Koppelregeling is belangrijk om he...

Muizen-endoscopie is uitgevoerd als een belangrijke onderzoeksmethode voor meer dan een decennium 1-3. Tot op heden zijn de meeste onderzoeken waarin muizen endoscopie hebben gebruikt starre endoscopen, hoewel sommige hebben ook flexibele sigmoïdoscopie. Muizen endoscopie biedt directe resultaten en een meer objectieve inschatting van de mate van het intestinale normaliteit, de ernst van de ontsteking, en de progressie van de tumor ten opzichte van indirecte maatregelen, zoals gewichtsverlies, diarree en histologie (die niet optimaal wanneer laesies zijn fragmentarisch), terwijl het aanbieden van inzichten over de algehele gezondheid van de dikke darm. Met name, endoscopie maakt de herhaalde beoordeling van proefdiermodellen tijd, in tegenstelling tot traditionele histologisch onderzoek dat het dier wordt gedood en dubbele punten voor analyse 1 te oogsten vereist. Ondanks deze voordelen is het gebruik van murine endoscopische technologie niet wijdverbreid en wordt beperkt door het ontbreken van gestandaardiseerde protocollen voor implementatiop en scoren van pathologische bevindingen. Goed uitgevoerd, muizen endoscopie houdt grote belofte voor ons begrip en karakterisatie van diermodellen voor multiple chronische gastro-intestinale ziekten, met inbegrip van inflammatoire darmziekten, colitis, en colorectale tumoren verder te vergemakkelijken. Het nut van muizen endoscopische techniek scharnieren op de reproduceerbaarheid en objectiviteit, die het bestaan ​​van gestandaardiseerde onderzoek procedures en een consistente, niet-redundante en betrouwbare scoresysteem voor intestinale pathologieën vereist. Ten minste drie beschrijvende scoringssystemen voor endoscopische beoordeling van colitis 4-6, en voor colon tumoren in muizen 4,7,8 gepubliceerd. Echter, deze meldde benaderingen en scoring systemen zijn niet goed vergelijkbaar tussen de studies. In veel gevallen is er geen duidelijke omschrijving van de criteria voor de indeling van de laesies, en wanneer de criteria worden gegeven, ze lopen sterk uiteen. Bovendienzijn er geen meldingen scoren systemen die de beoordeling van zowel colitis en tumoren, twee van de meest voorkomende colon pathologieën die gelijktijdig kunnen optreden en hebben interactieve effecten op de uitkomst, in een enkel meetinstrument integreren. Ten slotte is de endoscopische scoring systemen die bestaan ​​voor colitis hebben vaak inflammatoire categorieën met beperkt discriminatie (dwz. Smalle scoreopties over korte integer schalen, vaak 1-4) om goed te vertegenwoordigen ziekteprogressie scenario&#39;s en maken het gebruik van parametrische statistische analyse. In dit artikel beschrijven we het gebruik van een flexibele endoscoop om de ernst van murine colitis en colon tumoren beoordelen en beschrijven een gestandaardiseerd protocol voor deze technologie gebruikte in de anatomische evaluatie van de perianale gebied, rectum en distale colon. We illustreren effectief oplossen van problemen tijdens endoscopie om trauma en artefacten te minimaliseren, en beschrijven we een reproduceerbare scoresysteemgebaseerd op gevalideerde gepubliceerde klinische parameters. Het scoresysteem integreert evaluatie van zowel intestinale ontstekingen en tumoren met behulp van een hoge mate van discriminatie met 12 mogelijke kwaliteiten van een ontsteking, tumor in kaart brengen en plotten opties, en een roman decimale eenheid (dwz, decimaal identifiers) om de bevindingen met specifieke diagnostische waarde te markeren ( dwz tumorontwikkeling, complicaties tijdens endoscopie, enz.). Het gebruik van de decimale identifiers zorgt voor een snelle opvolging van relevante verzamelingen gegevens voor verder stroomafwaarts analyse. Tot slot, betrouwbaarheid en validiteit testen van het scoresysteem voeren we in verschillende muismodellen van colitis en de colitis-geassocieerde kanker (dextransulfaatnatrium (DSS) geïnduceerde colitis, Clostridium difficile infectie, en azoxymethane / DSS-geïnduceerde dikke darm kanker).

<table><tbody><tr><td>Isoflurane, USP</td><td>Webster Veterinary</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Chirurgische smering</td><td>Savage laboratories</td><td>surgilube, 0281-0205-45</td><td></td></tr><tr><td>Fosfaatgebufferde zoutoplossing</td><td>Thermo Scientific</td><td>SH30256</td><td></td></tr><tr><td>RNAlater</td><td>Ambion</td><td>AM7021</td><td></td></tr><tr><td>Methyleenblauw 1% waterige oplossing</td><td>Fisher Science Education</td><td>S96393</td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Flexibele digitale ureteroscoop</td><td>Olympus America</td><td>URF-V</td><td></td></tr><tr><td>Videosysteemcentrum</td><td>Olympus America</td><td>VISERA Pro OTV-S7 Pro</td><td></td></tr><tr><td>Xenon lichtbron</td><td>Olympus America</td><td>VISERA Pro CLV-S40 Pro</td><td></td></tr><tr><td>Videorecorder</td><td>MediCapture, Inc.</td><td>MediCap USB200</td><td></td></tr><tr><td>Flexibele biopsiebekertang</td><td>Olympus America</td><td>FBC-3115</td><td></td></tr><tr><td>Anesthesieapparaat</td><td>Euthanex Corporation</td><td>EZ-7000 Classic System</td><td></td></tr></tbody></table>

flexibele colonoscopie in muizen aan de ernst van colitis en colorectale tumoren evalueer behulp van een gevalideerde endoscopische scoring system

Flexible Colonoscopy in Mice to Evaluate the Severity of Colitis and Colorectal Tumors Using a Validated Endoscopic Scoring System

Het gebruik van moderne endoscopie voor onderzoeksdoeleinden is sterk vergemakkelijkt ons begrip van gastro-intestinale aandoeningen. Met name experimentele endoscopie zeer nuttig voor studies die herhaalde evaluaties in een proefdier, zoals evaluatie mechanismen van chronische inflammatoire darmziekte en de progressie van colorectale kanker vereist zijn. Echter, de gebruikte studies over methoden zijn zeer variabel. Ten minste drie endoscopische scoring systemen verschenen voor murine colitis en gepubliceerde protocollen voor de beoordeling van colorectale tumoren niet de aanwezigheid van gelijktijdige colon ontsteking pakken. Dit onderzoek ontwikkelt en valideert een reproduceerbare endoscopische scoresysteem dat de evaluatie van zowel de ontsteking en tumoren tegelijkertijd integreert. Dit nieuwe scoresysteem heeft drie belangrijke componenten: 1) beoordeling van de omvang en de ernst van colorectale ontsteking (op basis van perianale bevindingen, transparantie van de wall, mucosale bloeden, en focale laesies), 2) kwantitatieve opname van tumorlaesies (raster kaart en grafiek), en 3) numerieke sortering van klinische gevallen door hun pathologische en onderzoek relevantie op basis van decimale eenheden met toegewezen categorieën waargenomen laesies en endoscopische complicaties (decimaal identifiers). De video-en handschrift hierin gepresenteerd werden bereid, na IACUC-goedgekeurde protocollen, zodat onderzoekers hun eigen experimentele muizen scoren met behulp van een goed gevalideerde en zeer reproduceerbare endoscopische methode, met de optie systeem distale onderscheiden van proximale endoscopische colitis (D-PECS ).

Het protocol en de beelden die in deze studie zijn bereid met een Olympus URF-V flexibele endoscoop 14 en NBI 11,15. Video beelden werden opgeslagen in MPEG-2 formaat en foto&#39;s in JPG, TIF, PNG, of DICOM formaat met maximaal 1280 x 1024 pixels, overdraagbaar naar standaard USB flash draagbare geheugens. NBI verhoogt de visuele contrast van hemoglobine bevattende weefsels. Normaal licht en NBI beeldvorming zijn de belangrijkste kenmerken van de normale anatomie van de colorectale mucosa en de ve...

In de afgelopen jaren zijn nieuwe generatie endoscopen ontpopt als belangrijk diagnostisch onderzoek hulpmiddelen voor het evalueren van muizen colitis en colorectale tumoren. We presenteren hier een gedetailleerd protocol voor endoscopische beoordeling van ontsteking en colorectale tumoren in muizen, evenals een nieuw scoresysteem dat decimale identifiers gebruikt om de endoscopische ernst van colitis en colorectale tumoren documenteren.

Flexibele colonoscopie in Muizen aan de ernst van colitis en Colorectale Tumoren Evalueer behulp van een gevalideerde Endoscopische Scoring System

The use of modern endoscopy for research purposes has greatly facilitated our understanding of gastrointestinal pathologies. In particular, experimental ...

Hallo.Ik ben Tomohiro Kani, een bezoekende pH van Nintendo University in Tokio, en ik ben Fabio Elli, directeur van het Digestive Health Research Center, a case Western Reserve University School of Medicine. In deze video zullen we onze methodologie beschrijven om colonoscopie bij muizen uit te voeren. Belicht de belangrijkheid om vertrouwd te raken met de normale endoscopische anatomie.Beschrijf hoe u effectief problemen tijdens endoscopie kunt oplossen om trauma en beeldartefacten te minimaliseren. En beschrijf ten slotte ons scoresysteem voor de beoordeling van intestinale ontsteking in het mu-oogmodel van colitis en colitis-geassocieerd kanker. Bedankt voor uw aandacht.Stel eerst het endoscopiesysteem in en bevestig de scope aan het videosysteemcentrum en de lichtbron. Steriliseer de scope en bevestig een spuit voor luchtinsufflatie. Schakel vervolgens het systeem in en pas de witbalans aan met het dier.Goed geanesthetiseerd en vastgehouden start de endoscopische onderzoek. Biopsiemonsters kunnen worden verkregen zoals nodig is. Na het scopen, verwarm de muis met een lamp voor herstel aan het einde.Het scoresysteem voor evaluatie van colonische ontsteking en colonische geassoci

flexible-colonoscopy-mice-to-evaluate-severity-colitis-colorectal

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

We tonen een protocol waarbij toediening van het genotoxisch azoxymethaan (AOM), gevolgd door drie cycli van het pro-ontstekingsmiddel dextransulfaat natrium (DSS) snel en efficiënt genereert colon tumoren in muizen met morfologische en moleculaire overeenkomsten met die van menselijke colitis geassocieerde kanker.

Modeling Colitis geassocieerde kanker met Azoxymethaan (AOM) en dextransulfaat natrium (DSS)

This video describes the generation of a colorectal mouse model by segmental adeno-cre infection. The infected colon segment leads to tumorigenesis within this segment of the mucosa, resulting in adenomas ultimately progressing to invasive and metastatic carcinoma. This model is an attractive platform for studies of cancer biology and preclinical therapeutic trials.

Segmental Adeno-Cre Infection: A Technique to Generate Isolated Colorectal Cancer using Genetically Engineered Mouse Models

Klein dier beeldvormende technieken laten seriële diagnostische onderzoeken en therapeutische interventies in vivo. Onlangs heeft de reikwijdte van de toepassingen aanzienlijk verbreed en omvat momenteel de beoordeling van het colon tumor ontwikkeling, wondgenezing en de monitoring van de ontsteking. Dit protocol illustreert deze diverse mogelijke toepassingen van muizen endoscopie.

Muizen Endoscopie voor In Vivo Multimodal Imaging van Carcinogenese en Evaluatie van intestinale wondgenezing en ontsteking

We beschrijven methoden voor longitudinaal bewaken van de werkzaamheid van therapieën voor de behandeling van colonische pathologieën bij muizen met behulp van een star endoscoop. Dit protocol kan gemakkelijk worden gebruikt voor de karakterisering van de therapeutische respons van een individuele tumor in levende muizen en ook voor het monitoren van mogelijke ziekterecidieven.

Niet-invasieve evaluatie van de werkzaamheid van nieuwe therapieën voor Intestinale Pathologieën gebruik van een serieel Endoscopische Imaging van levende muizen

Een protocol voor de oprichting van een genetisch gemanipuleerde muismodel van colorectale kanker door middel van segmentale adeno-cre infectie en zijn bewaking via hoge resolutie colonoscopie wordt gepresenteerd.

Een genetisch ontwikkeld muis model van sporadische colorectale kanker

Hier presenteren we een protocol waarin wordt beschreven van Allogene hematopoietische stamceltransplantatie en repetitieve mini-Endoscopische evaluaties van de distale dubbelpunt ter plaatse voor de aanwezigheid, de kenmerken en de ernst van Colon ontsteking binnen live kunt muizen intestinale graft - versus - host-ziekte lijden.

Inductie van intestinale Graft - versus host klauwzeer en haar Mini-Endoscopische beoordeling in levende muizen

Het gepresenteerde protocol beschrijft een facile chirurgische verwijdering van de appendix (caecal patch) in een muis gevolgd door de inductie van inflammatoire darmziekte-geassocieerde colorectale kanker. Dit Murine appendectomie model maakt onderzoek mogelijk naar de biologische rol van de appendix in de pathogenese van menselijke gastro-intestinale aandoeningen.

Murine appendectomie model van chronische colitis geassocieerde colorectale kanker door precieze lokalisatie van caecal patch

Hier geven we een gedetailleerde beschrijving van de procedure om colonoscopisch geleide knijpbiopten bij muizen te induceren en wondsluiting in realtime te volgen. Daarnaast zijn er methoden voor de bereiding van weefsels voor histologische, immunohistochemische en moleculaire analyses van het wondbed.

Colonoscopische geleide pinch-biopsieën bij muizen uitvoeren en daaropvolgende weefselveranderingen evalueren

Systematische scoring van darmontsteking met behulp van een gratis computerondersteund systeem is een krachtig hulpmiddel om histopathologische veranderingen in colitismodellen kwantitatief te vergelijken, gekenmerkt door de aanwezigheid van zweren en ontstekingsveranderingen. Histologische colitis score evaluatie versterkt klinische observaties en vergemakkelijkt de interpretatie van gegevens.

Systematische scoringsanalyse voor darmontsteking in een muriene dextran natriumsulfaat-geïnduceerde colitismodel

Een methode wordt beschreven voor de menselijke retinoblastoom tumoren verspreiden in muizen. Tumorcellen worden rechtstreeks geïnjecteerd in de ogen van het immuunsysteem van deficiënte muizen. Secundaire tumoren zijn met succes gebruik van beide cellen direct geoogst van menselijke tumoren en beschaafde tumorspheres.

Oprichting en Voortplanting van Human Retinoblastoom Tumoren in het immuunsysteem van deficiënte muizen

Leer een gevalideerde endoscopische methode voor het evalueren van colitis en colorectale tumoren bij muizen. Dit protocol maakt gestandaardiseerde beoordeling van darmontsteking mogelijk.

Flexibele colonoscopie in Muizen aan de ernst van colitis en Colorectale Tumoren Evalueer behulp van een gevalideerde Endoscopische Scoring System (Video) | JoVE Journal

Flexibele colonoscopie in Muizen aan de ernst van colitis en Colorectale Tumoren Evalueer behulp van een gevalideerde Endoscopische Scoring System

Meer video's verkennen