Flexibele colonoscopie in Muizen aan de ernst van colitis en Colorectale Tumoren Evalueer behulp van een gevalideerde Endoscopische Scoring System
16 oktober 2013
In de afgelopen jaren zijn nieuwe generatie endoscopen ontpopt als belangrijk diagnostisch onderzoek hulpmiddelen voor het evalueren van muizen colitis en colorectale tumoren. We presenteren hier een gedetailleerd protocol voor endoscopische beoordeling van ontsteking en colorectale tumoren in muizen, evenals een nieuw scoresysteem dat decimale identifiers gebruikt om de endoscopische ernst van colitis en colorectale tumoren documenteren.
Hallo.Ik ben Tomohiro Kani, een bezoekende pH van Nintendo University in Tokio, en ik ben Fabio Elli, directeur van het Digestive Health Research Center, a case Western Reserve University School of Medicine. In deze video zullen we onze methodologie beschrijven om colonoscopie bij muizen uit te voeren. Belicht de belangrijkheid om vertrouwd te raken met de normale endoscopische anatomie.
Beschrijf hoe u effectief problemen tijdens endoscopie kunt oplossen om trauma en beeldartefacten te minimaliseren. En beschrijf ten slotte ons scoresysteem voor de beoordeling van intestinale ontsteking in het mu-oogmodel van colitis en colitis-geassocieerd kanker. Bedankt voor uw aandacht.
Stel eerst het endoscopiesysteem in en bevestig de scope aan het videosysteemcentrum en de lichtbron. Steriliseer de scope en bevestig een spuit voor luchtinsufflatie. Schakel vervolgens het systeem in en pas de witbalans aan met het dier.
Goed geanesthetiseerd en vastgehouden start de endoscopische onderzoek. Biopsiemonsters kunnen worden verkregen zoals nodig is. Na het scopen, verwarm de muis met een lamp voor herstel aan het einde.
Het scoresysteem voor evaluatie van colonische ontsteking en colonische geassocieerde colonkanker wordt uitgelegd. Het instellen van het endoscopiesysteem. Het endoscopiesysteem omvat het videosysteemcentrum, een xenonlichtbron en een videorecorder.
We gebruiken een menselijke ureteroscoop voor colonoscopie bij muizen. Onze scope URFV is een flexibele video-scope die een CCD-sensor gebruikt. De buitendiameter van de inbrengbuis is 3,3 millimeter en het distale uiteinde is 2,8 millimeter in diameter.
Om te beginnen, bevestig de scope aan het videosysteemcentrum en lichtbron. Steriliseer vervolgens de scope en lensoppervlak met 70% ethanol. Bevestig vervolgens een drie millimeter spuit aan het werkkanaal.
Dit wordt gebruikt om de hoeveelheid intraluminale lucht te regelen met insufflatie of aspiratie. Schakel de hoofdschakelaar in en stel de witbalans in. Vergeet ook niet om in NBI-modus in te stellen Twee, het anesthetiserende muis.
Eerst zal ik inhalatieanesthesie demonstreren Met isof fluorine, we gebruiken vier tot 5%isof fluorine voor inductie. Nadat de muis geen beweging meer vertoont, verlaag de concentratie tot de onderhoudsdosis van één tot 2%Bevestig de muis op de tafel door de staart en de onderste ledematen vast te plakken. Staarttapen is vooral belangrijk om de muis stationair te houden tijdens het scopen.
Ook, intraperitoneale injectie van tri bromo. Ethanol kan worden gebruikt voor de anesthesie.Drie. Endoscopie Perianale laesies maken geen deel uit van de endoscopische evaluatie, maar zijn een belangrijke bevinding en moeten worden waargenomen vóór de inbrenging en niet worden verward met traumatisch bloeden.
Voordat u inbrengt, bedek de scope met chirurgische smering, zorg ervoor dat u de CCD-sensor niet bedekt. Breng de scope door de anus in. Deze initiële inbrenging moet zo voorzichtig mogelijk zijn, omdat blinde inbrenging het colon colonische slijmvlies kan beschadigen.
Schakel het licht in en begin met opnemen. Duw de luchtspuit langzaam en voorzichtig om een gezichtsveld te krijgen. Te veel luchtinsufflatie kan de mond doden.
De aanwezigheid van spontaan bloeden moet worden beoordeeld wanneer de endoscoop in het rectum of colonhoek wordt ingebracht. Handling past het zich verticaal aan en de koppelingscontrole is voor horizontale aanpassing. De coördinatie tussen deze twee controles is erg belangrijk.
Observeer de transparantie. In normale colon is de wand transparant met normale vaatwerk en zonder enige dikte. Transparantie wordt gedefinieerd als een transmurale zichtbaarheid van de vaten of extramurale organen.
De repetitieve beweging van inbrenging en uittrekken helpt bij de evaluatie in normale colon. Zowel kleine als grote vaten zijn zichtbaar tijdens het onderzoek. U kunt foto's of biopsiemonsters nemen zoals nodig is.
Controleer de aanwezigheid van contactbloeding. Bij het terugtrekken van de endoscoop is het niet nodig om de mucosa opzettelijk te schrapen. De nauwe bandbeeldmodus benadrukt de fijne structuren van vaten in slijmmembranen.
Het rectum is omgeven door spieren, terwijl de colon niet wordt vastgehouden door de omringende weefsels. Vanwege deze anatomische verschil zijn extramurale viscera niet zichtbaar in het rectum. Fecale pellets Zijn soms dicht bij de anus aanwezig.
Ze kunnen worden verwijderd met luchtinsufflatie, maar soms kunnen ze aanhouden en het endoscopische zicht belemmeren. In deze gevallen zullen we maximaal een mil PBS-klysma gebruiken om ontlasting weg te spoelen. Ontlasting wordt meestal na een paar minuten uitgescheiden.
Een wazige weergave veroorzaakt door de aanwezigheid van vlekken op de lens is ook een veel voorkomend probleem, vooral in het geval van colitis of bloeden. In deze situatie probeerden we de lens te reinigen met insufflatie van lucht. Deze procedure kan succesvol zijn bij het schoonmaken van de lens zonder de scope terug te trekken.
Peristaltiek Beweging is een van de normale fysiologische activiteiten van de darm. Omdat luchtinsufflatie niet succesvol is bij het dilatatie van het lumen tijdens peristalsis, moet u wachten tot de peristaltiekgolf passeert. Nummer vier, biopsie Biopsiemonsters worden verkregen met behulp van flexibele biopsiebekertangen.
De bekers worden geopend en gesloten door de handgreep. Breng de forceps in het werkkanaal. Wees voorzichtig om de darm niet te doorboren.
Open De bekers tot een geschikte maat en plaats de punt op het gebied van belang. Sluit de bekers voorzichtig en trek stevig. Verwijder het monster door het te spoelen met een geschikte oplossing.
Nummer vijf, herstel. Na het onderzoek, verwarm de muis tot het herstelt. We gebruiken een elektrische lamp voor het verwarmen zes scoren voor colonische ontsteking.
Ons scoresysteem bestaat uit vier parameters, één perianale laesies, twee, transparantie van de colonische wand, drie darmbloedingen, en vier focale laesies. Elke parameter kan worden beoordeeld van nul tot drie. De maximale totale score is 12.
Bovendien hebben we een schaal van decimale eenheden opgenomen die kan worden gebruikt om specifieke end
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's
Overzicht
Dit artikel presenteert een gedetailleerd protocol voor het uitvoeren van een colonoscopie bij muizen, met de focus op de beoordeling van darmontsteking en colorectale tumoren. De auteurs introduceren een nieuw scoringsysteem om de ernst van colitis en tumoren te documenteren met behulp van decimale identificatienummers.
Belangrijkste studiecomponenten
Wetenschappelijk vakgebied
- Neurowetenschappen
- Gastroenterologie
- Endoscopische technieken
Achtergrond
- Endoscopen van de nieuwe generatie zijn essentieel voor onderzoek naar colitis en colorectale tumoren bij muizen.
- Kennis van de normale endoscopische anatomie is cruciaal voor een effectieve beoordeling.
- Het minimaliseren van trauma en beeldartefacten tijdens de endoscopie is essentieel.
- Er wordt een scoringsysteem geïntroduceerd voor de beoordeling van intestinale inflammatie.
Doel van de studie
- Om een methodologie voor colonoscopie bij muizen te bieden.
- Om het belang van vertrouwd raken met de endoscopische anatomie te benadrukken.
- Om een scoringssysteem te presenteren voor het evalueren van darmontsteking.
Gebruikte methoden
- Endoscopische beoordeling van ontsteking en tumoren in muismodellen.
- Implementatie van een nieuw scoresysteem voor het documenteren van de ernst.
- Technieken voor probleemoplossing om endoscopisch trauma te minimaliseren.
- Gedetailleerd protocol voor het uitvoeren van coloscopie bij muizen.
Belangrijkste resultaten
- Succesvolle implementatie van endoscopische technieken in muismodellen.
- Vestiging van een betrouwbaar scoresysteem voor colitis en tumoren.
- Verbeterd inzicht in de normale endoscopische anatomie.
- Effectieve methoden voor probleemoplossing om de beeldkwaliteit te verbeteren.
Conclusies
- Het gepresenteerde protocol verbetert de beoordeling van colitis en tumoren bij muizen.
- Het scoresysteem biedt een gestandaardiseerde aanpak voor het documenteren van de ernst.
- Bekendheid met endoscopische technieken is essentieel voor nauwkeurige evaluaties.
Veelgestelde vragen
Industriële Relevantie voor Managers
Gevalideerde endoscopische scoring in muismodellen maakt een reproduceerbare, kwantitatieve beoordeling van de ernst van colitis en colorectale tumoren mogelijk, wat direct bijdraagt aan targetvalidatie en mechanistische risicoreductie in het onderzoek naar gastro-intestinale aandoeningen. De integratie van inflammatie- en tumorevaluatie binnen één enkele workflow verbetert het voorspellende vertrouwen en de translationele continuïteit van vroege ontdekking tot preklinische studies. Gestandaardiseerde scoringssystemen vergemakkelijken de vergelijkbaarheid tussen studies en de besluitvorming op portfolioniveau in biofarmaceutische R&D.
Strategische Toepassingen in Biofarmaceutische R&D
Vroegtijdige Ontdekking & Targetvalidatie
- Maakt een rigoureuze analyse van ziektemechanismen in modellen van chronische colitis en colorectale kanker mogelijk.
- Ondersteunt functionele doelwitvalidatie door in vivo kwantificering van inflammatie en tumorlast.
- Faciliteert mechanistische risicoreductie door middel van reproduceerbare, geblindeerde scoring van pathologische kenmerken.
- Verbetert het voorspellende vertrouwen voor daaropvolgende translationele studies.
Screening & Assayontwikkeling
- Biedt een gestandaardiseerde, kwantitatieve uitlezing voor het evalueren van potentiële interventies in muismodellen.
- Maakt een reproduceerbare beoordeling van zowel inflammatoire als neoplastische eindpunten in één enkele assay mogelijk.
- Ondersteunt de schaalbaarheid van de assay en harmonisatie tussen studies via gevalideerde scoringscriteria.
- Bereidt ziekte-relevante systemen voor op betrouwbare screening van verbindingen en evaluatie van de effectiviteit.
Translationeel & Preklinisch Onderzoek
- Lijnt preklinische eindpunten uit met klinische kenmerken van colitis en colorectale kanker voor translationele relevantie.
- Maakt continuïteit mogelijk van ontdekking tot preklinische validatie door integratie van ontsteking- en tumorbeoordeling.
- Ondersteunt risico-gecorrigeerde beslissingen over verdere ontwikkeling op basis van kwantitatieve, reproduceerbare pathologische scoring.
- Faciliteert de afstemming van biomarkers en de optimalisatie van ziektemodellen voor translationele studies.
Integratie van Pipeline & Workflow
Dit gevalideerde endoscopische scoringssysteem is gepositioneerd binnen het continuüm van ontdekking naar preklinisch onderzoek, waardoor hypothesetoetsing, evaluatie van lead-verbindingen en optimalisatie van translationele modellen mogelijk worden in onderzoek naar gastro-intestinale aandoeningen.
- Ontdekkingsbiologie: Ondersteunt hypothese-gestuurd onderzoek naar inflammatoire en neoplastische mechanismen in vivo.
- Screening: Levert gestandaardiseerde, kwantitatieve resultaten voor de beoordeling van de effectiviteit en veiligheid van verbindingen.
- Analytiek: Biedt reproduceerbare, geblindeerde scoringsgegevens voor een robuuste statistische vergelijking tussen experimentele groepen.
- Translationeel onderzoek: Slaat een brug tussen preklinische bevindingen en klinische eindpunten door inflammatie- en tumormetrieken te integreren.
- Bedrijfbrede herbruikbaarheid: Vestigt een herbruikbaar, gevalideerd platform voor lopende studies naar GI-ziektemodellen en vergelijkbaarheid tussen programma's.
Operationele & Bedrijfsimpact
- Wetenschappelijke waarde: Verhoogt het voorspellende vertrouwen en vermindert mechanistische ambiguïteit in modellen voor GI-ziekten.
- Operationele waarde: Standaardiseert de pathologische beoordeling, waardoor de reproduceerbaarheid en schaalbaarheid over studies heen worden verbeterd.
- Strategische waarde: Maakt geïnformeerde go/no-go-beslissingen en kapitaalefficiënt portfoliomanagement mogelijk.
- Impact op portfolio: Ondersteunt risicogebaseerde prioritering en de verdere ontwikkeling van programma's voor GI-ziekten.
Overwegingen voor implementatie
- Vereist expertise in muizendoscopie en pathologische scoring.
- Toegang tot flexibele endoscopiesystemen en gevalideerde scoringprotocollen is noodzakelijk.
- Standaardisatie tussen teams is vereist voor de generatie van reproduceerbare gegevens.
- Aanpassing kan nodig zijn voor verschillende muizenstammen of GI-ziektemodellen.
- Potentiële beperkingen omvatten variabiliteit tussen operators en een technische leercurve.
