Name: Contextuele en cued Fear Conditioning Test Met behulp van een video analysesysteem in Muizen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-03-01T15:45:00.000+00:00
Duration: 19 min 32 s
Description: Leer een gestandaardiseerd protocol voor contextuele en cued fear conditioning bij muizen met behulp van een geautomatiseerd videoanalysesysteem. Deze methode verbetert de betrouwbaarheid van gedragsbeoordelingen in neurowetenschappelijk onderzoek naar leren en geheugen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Sommige van de hier vermelde gegevens werden verkregen in het laboratorium van Dr Jacqueline N. Crawley in het Amerikaanse National Institute of Mental Health en we willen haar bedanken voor het toestaan ​​van ons om de gegevens in het document te tonen. We danken ook Kazuo Nakanishi voor zijn hulp bij het ontwikkelen ImageFZ programma voor gedragsanalyse. Dit onderzoek werd ondersteund door Grant-in-Steun voor Wetenschappelijk Onderzoek (B) (21300121), Grant-in-Steun voor Wetenschappelijk Onderzoek inzake innovatieve Areas (Comprehensive Brain Science Network) van het ministerie van Onderwijs, Wetenschap, Sport en Cultuur van Japan subsidie ​​uit Neuroinformatica Japan Center (NIJC), en subsidies van CREST van Japan Science and Technology Agency (JST).

<ol><li>Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCrawley%2C+JN+%22What%27s+wrong+with+my+mouse%3A+behavioral+phenotyping+of+transgenic+and+knockout+mice%22">What's wrong with my mouse: behavioral phenotyping of transgenic and knockout mice</a>. , John Wiley & Sons. New York. (2007).</li>
<li>Fanselow, M. S., Poulos, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neuroscience+of+mammalian+associative+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Annu.+Rev.+Psychol%22%5BJournal%5D)">The neuroscience of mammalian associative learning.</a> Annu. Rev. Psychol. 56, 207-234 (2005).</li>
<li>LeDoux, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emotion+circuits+in+the+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Annu.+Rev.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Emotion circuits in the brain.</a> Annu. Rev. Neurosci. 23, 155-184 (2000).</li>
<li>Nakajima, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comprehensive+behavioral+phenotyping+of+calpastatin-knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Brain%22%5BJournal%5D)">Comprehensive behavioral phenotyping of calpastatin-knockout mice.</a> Mol. Brain. 1, 7 (2008).</li>
<li>Ikeda, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+YWHAE%2C+a+gene+encoding+14-3-3epsilon%2C+as+a+possible+susceptibility+gene+for+schizophrenia%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Mol.+Genet%22%5BJournal%5D)">Identification of YWHAE, a gene encoding 14-3-3epsilon, as a possible susceptibility gene for schizophrenia.</a> Hum. Mol. Genet. 17, 3212-3222 (2008).</li>
<li>Sakae, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mice+lacking+the+schizophrenia-associated+protein+FEZ1+manifest+hyperactivity+and+enhanced+responsiveness+to+psychostimulants%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Mol.+Genet%22%5BJournal%5D)">Mice lacking the schizophrenia-associated protein FEZ1 manifest hyperactivity and enhanced responsiveness to psychostimulants.</a> Hum. Mol. Genet. 17, 3191-3203 (2008).</li>
<li>Fukuda, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Down-regulation+of+protocadherin-alpha+A+isoforms+in+mice+changes+contextual+fear+conditioning+and+spatial+working+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Down-regulation of protocadherin-alpha A isoforms in mice changes contextual fear conditioning and spatial working memory.</a> Eur. J. Neurosci. 28, 1362-1376 (2008).</li>
<li>Imayoshi, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Roles+of+continuous+neurogenesis+in+the+structural+and+functional+integrity+of+the+adult+forebrain%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Roles of continuous neurogenesis in the structural and functional integrity of the adult forebrain.</a> Nat. Neurosci. 11, 1153-1161 (2008).</li>
<li>Nakatani, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abnormal+behavior+in+a+chromosome-engineered+mouse+model+for+human+15q11-13+duplication+seen+in+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Abnormal behavior in a chromosome-engineered mouse model for human 15q11-13 duplication seen in autism.</a> Cell. 137, 1235-1246 (2009).</li>
<li>Takao, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comprehensive+behavioral+analysis+of+calcium%2Fcalmodulin-dependent+protein+kinase+IV+Knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Comprehensive behavioral analysis of calcium/calmodulin-dependent protein kinase IV Knockout mice.</a> PLoS ONE. 5, (2010).</li>
<li>Tamada, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decreased+exploratory+activity+in+a+mouse+model+of+15q+duplication+syndrome%3B+implications+for+disturbance+of+serotonin+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Decreased exploratory activity in a mouse model of 15q duplication syndrome; implications for disturbance of serotonin signaling.</a> PLoS ONE. 5, (2010).</li>
<li>Watanabe, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relaxin-3-deficient+mice+showed+slight+alteration+in+anxiety-related+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Relaxin-3-deficient mice showed slight alteration in anxiety-related behavior.</a> Front. Behav. Neurosci. 5, 50 (2011).</li>
<li>Takeuchi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((P301S+mutant+human+tau+transgenic+mice+manifest+early+symptoms+of+human+tauopathies+with+dementia+and+altered+sensorimotor+gating%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">P301S mutant human tau transgenic mice manifest early symptoms of human tauopathies with dementia and altered sensorimotor gating.</a> PLoS ONE. 6, (2011).</li>
<li>Koshimizu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adenomatous+polyposis+coli+heterozygous+knockout+mice+display+hypoactivity+and+age-dependent+working+memory+deficits%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Adenomatous polyposis coli heterozygous knockout mice display hypoactivity and age-dependent working memory deficits.</a> Front. Behav. Neurosci. 5, 85 (2011).</li>
<li>Yao, I., Takao, K., Miyakawa, T., Ito, S., Setou, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synaptic+E3+ligase+SCRAPPER+in+contextual+fear+conditioning%3A+extensive+behavioral+phenotyping+of+Scrapper+heterozygote+and+overexpressing+mutant+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Synaptic E3 ligase SCRAPPER in contextual fear conditioning: extensive behavioral phenotyping of Scrapper heterozygote and overexpressing mutant mice.</a> PLoS ONE. 6, (2011).</li>
<li>Shoji, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comprehensive+behavioral+analysis+of+ENU-induced+Disc1-Q31L+and+-L100P+mutant+mice%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Res.+Notes%22%5BJournal%5D)">Comprehensive behavioral analysis of ENU-induced Disc1-Q31L and -L100P mutant mice.</a> BMC Res. Notes. 5, 108 (2012).</li>
<li>Anagnostaras, S. G., Josselyn, S. A., Frankland, P. W., Silva, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Computer-assisted+behavioral+assessment+of+Pavlovian+fear+conditioning+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Learn.+Mem%22%5BJournal%5D)">Computer-assisted behavioral assessment of Pavlovian fear conditioning in mice.</a> Learn. Mem. 7, 58-72 (2000).</li>
<li>Miyakawa, T., Yamada, M., Duttaroy, A., Wess, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperactivity+and+intact+hippocampus-dependent+learning+in+mice+lacking+the+M1+muscarinic+acetylcholine+receptor%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Hyperactivity and intact hippocampus-dependent learning in mice lacking the M1 muscarinic acetylcholine receptor.</a> J. Neurosci. 21, 5239-5250 (2001).</li>
<li>Marchand, A. R., Luck, D., DiScala, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+an+improved+automated+analysis+of+freezing+behaviour+in+rats+and+its+use+in+trace+fear+conditioning%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Evaluation of an improved automated analysis of freezing behaviour in rats and its use in trace fear conditioning.</a> J. Neurosci. Methods. 126, 145-153 (2003).</li>
<li>Kopec, C. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+robust+automated+method+to+analyze+rodent+motion+during+fear+conditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">A robust automated method to analyze rodent motion during fear conditioning.</a> Neuropharmacology. 52, 228-233 (2007).</li>
<li>Wehner, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+trait+locus+analysis+of+contextual+fear+conditioning+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Genet%22%5BJournal%5D)">Quantitative trait locus analysis of contextual fear conditioning in mice.</a> Nat. Genet. 17, 331-334 (1997).</li>
<li>Quirk, G. J., Armony, J. L., LeDoux, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fear+conditioning+enhances+different+temporal+components+of+tone-evoked+spike+trains+in+auditory+cortex+and+lateral+amygdala%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Fear conditioning enhances different temporal components of tone-evoked spike trains in auditory cortex and lateral amygdala.</a> Neuron. 19, 613-624 (1997).</li>
<li>Chaudhury, D., Christopher, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circadian+modulation+of+learning+and+memory+in+fear-conditioned+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Circadian modulation of learning and memory in fear-conditioned mice.</a> Behav. Brain Res. 133, 95-108 (2002).</li>
<li>Valentinuzzi, V. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+circadian+phase+on+context+and+cued+fear+conditioning+in+C57BL%2F6J+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Learn.+Behav%22%5BJournal%5D)">Effect of circadian phase on context and cued fear conditioning in C57BL/6J mice.</a> Learn. Behav. 29, 133-142 (2001).</li>
<li>Frankland, P. W., Bontempi, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+organization+of+recent+and+remote+memories%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The organization of recent and remote memories.</a> Nat. Rev. Neurosci. 6, 119-130 (2005).</li>
<li>Contarino, A., Baca, L., Kennelly, A., Gold, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+assessment+of+conditioning+parameters+for+context+and+cued+fear+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Learn.+Mem%22%5BJournal%5D)">Automated assessment of conditioning parameters for context and cued fear in mice.</a> Learn. Mem. 9, 89-96 (2002).</li>
<li>Kinney, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deficits+in+trace+cued+fear+conditioning+in+galanin-treated+rats+and+galanin-overexpressing+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Learn.+Mem%22%5BJournal%5D)">Deficits in trace cued fear conditioning in galanin-treated rats and galanin-overexpressing transgenic mice.</a> Learn. Mem. 9, 178-190 (2002).</li>
<li>Hefner, K., Holmes, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ontogeny+of+fear-%2C+anxiety-+and+depression-related+behavior+across+adolescence+in+C57BL%2F6J+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Ontogeny of fear-, anxiety- and depression-related behavior across adolescence in C57BL/6J mice.</a> Behav. Brain Res. 176, 210-215 (2007).</li>
<li>Wellman, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+stress-coping+and+fear+extinction+and+abnormal+corticolimbic+morphology+in+serotonin+transporter+knock-out+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Impaired stress-coping and fear extinction and abnormal corticolimbic morphology in serotonin transporter knock-out mice.</a> J. Neurosci. 27, 684-691 (2007).</li>
<li>Valentinuzzi, V. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+measurement+of+mouse+freezing+behavior+and+its+use+for+quantitative+trait+locus+analysis+of+contextual+fear+conditioning+in+%28BALB%2FcJ+%C3%97+C57BL%2F6J%29F2+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Learn.+Mem%22%5BJournal%5D)">Automated measurement of mouse freezing behavior and its use for quantitative trait locus analysis of contextual fear conditioning in (BALB/cJ × C57BL/6J)F2 mice.</a> Learn. Mem. 5, 391-403 (1998).</li>
<li>Valentinuzzi, V. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+circadian+phase+on+context+and+cued+fear+conditioning+in+C57BL%2F6J+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Learn.+Behav%22%5BJournal%5D)">Effect of circadian phase on context and cued fear conditioning in C57BL/6J mice.</a> Learn. Behav. 29, 133-142 (2001).</li>
<li>Bothe, G. W. M., Bolivar, V. J., Vedder, M. J., Geistfeld, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+and+behavioral+differences+among+five+inbred+mouse+strains+commonly+used+in+the+production+of+transgenic+and+knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">Genetic and behavioral differences among five inbred mouse strains commonly used in the production of transgenic and knockout mice.</a> Genes Brain Behav. 3, 149-157 (2004).</li>
<li>Chen, C., Kim, J. J., Thompson, R. F., Tonegawa, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hippocampal+lesions+impair+contextual+fear+conditioning+in+two+strains+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Hippocampal lesions impair contextual fear conditioning in two strains of mice.</a> Behav. Neurosci. 110, 1177-1180 (1996).</li>
<li>Anagnostaras, S. G., Gale, G. D., Fanselow, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hippocampus+and+contextual+fear+conditioning%3A+Recent+controversies+and+advances%5BTitle%5D)+AND+%22Hippocampus%22%5BJournal%5D)">Hippocampus and contextual fear conditioning: Recent controversies and advances.</a> Hippocampus. 11, 8-17 (2001).</li>
<li>Akirav, I., Maroun, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+the+medial+prefrontal+cortex-amygdala+circuit+in+stress+effects+on+the+extinction+of+fear%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Plast%22%5BJournal%5D)">The role of the medial prefrontal cortex-amygdala circuit in stress effects on the extinction of fear.</a> Neural Plast. , 1-11 (2007).</li>
<li>Johansen, J. P., Cain, C. K., Ostroff, L. E., LeDoux, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+mechanisms+of+fear+learning+and+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Molecular mechanisms of fear learning and memory.</a> Cell. 147, 509-524 (2011).</li>
<li>Anagnostaras, S. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+assessment+of+pavlovian+conditioned+freezing+and+shock+reactivity+in+mice+using+the+video+freeze+system%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Automated assessment of pavlovian conditioned freezing and shock reactivity in mice using the video freeze system.</a> Front. Behav. Neurosci. 4, (2010).</li>
<li>Pham, J., Cabrera, S. M., Sanchis-Segura, C., Wood, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+scoring+of+fear-related+behavior+using+EthoVision+software%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Automated scoring of fear-related behavior using EthoVision software.</a> J. Neurosci. Methods. 178, 323-326 (2009).</li>
<li>Blanchard, D. C., Blanchard, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crouching+as+an+index+of+fear%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol.+Psychol%22%5BJournal%5D)">Crouching as an index of fear.</a> J. Comp. Physiol. Psychol. 67, 370-375 (1969).</li>
<li>Frankland, P. W., Bontempi, B., Talton, L. E., Kaczmarek, L., Silva, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+involvement+of+the+anterior+cingulate+cortex+in+remote+contextual+fear+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">The involvement of the anterior cingulate cortex in remote contextual fear memory.</a> Science. 304, 881-883 (2004).</li>
<li>Takao, K., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigating+gene-to-behavior+pathways+in+psychiatric+disorders%3A+the+use+of+a+comprehensive+behavioral+test+battery+on+genetically+engineered+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+N.+Y.+Acad.+Sci%22%5BJournal%5D)">Investigating gene-to-behavior pathways in psychiatric disorders: the use of a comprehensive behavioral test battery on genetically engineered mice.</a> Ann. N. Y. Acad. Sci. 1086, 144-159 (2006).</li>
<li>Takao, K., Yamasaki, N., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+brain-behavior+phenotypying+of+genetically-engineered+mice+on+research+of+neuropsychiatric+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Res%22%5BJournal%5D)">Impact of brain-behavior phenotypying of genetically-engineered mice on research of neuropsychiatric disorders.</a> Neurosci. Res. 58, 124-132 (2007).</li>
</ol>

Wij bevestigen dat er geen bekende belangenconflicten in verband met deze publicatie en er geen aanzienlijke financiële steun voor dit werk, dat de uitkomst kon zijn beïnvloed geweest.

De contextuele en cued vreesconditionering test is een van de meest gebruikte paradigma&#39;s te leren en geheugen te beoordelen. Deze test is een vorm van Pavlov-conditionering waarbij een associatie wordt gemaakt tussen een context en / of een geconditioneerde stimulus (auditieve cue) en een aversieve stimulus (elektrische footshock). Na zelfs een enkele koppeling van de context / auditieve cue en footshock, muizen vertonen langdurige bevriezing wanneer zij worden geconfronteerd met ofwel de context of de cue. In deze test wordt bevriezing gedrag gebruikt als een index van angst geheugen. Farmacologische en laesie studies hebben uitgewezen dat de vorming van het geheugen, de consolidatie en het ophalen worden gereguleerd door verschillende gebieden van de hersenen, zoals de amygdala, hippocampus en de prefrontale cortex 3,33-35. Bovendien hebben moleculaire genetica studies de rol van specifieke genen en moleculen betrokken bij leren en geheugen in deze hersengebieden met behulp van genetisch gemanipuleerde muizen 36 aangetoond. Daarom is deze test is simple en nuttig voor het verkennen van de neurobiologische basis onderliggende angst leren en geheugen. In deze film artikel hebben we ons protocol ingevoerd om onderzoekers te voorzien van gedetailleerde informatie te begrijpen en eenvoudig uitvoeren van de test. Invriezen gedrag werd gekwantificeerd door middel van directe observatie door menselijke onderzoekers. Een goed opgeleide onderzoeker wordt verwacht dat betrouwbare, stabiele resultaten over waarnemingen te produceren. Deze methode houdt potentiële problemen, zoals verschillen in de waarnemings werkwijze waarnemer vooroordelen en eenvoudige kwantificering fouten, waardoor het moeilijk om direct de resultaten te vergelijken van onafhankelijke onderzoekers en verschillende laboratoria. Een geautomatiseerde-fotocel computer meetsysteem is ook gebruikt 26,30-32. Dit systeem presenteert ook potentiële problemen bij het meten bevriezen gedrag. Vanwege de sensor regeling, kan dit systeem niet in staat zijn om kleine hoofdbewegingen dat zou Typica detecterenlly gescoord worden als &#39;actief&#39; door menselijke waarneming. Bovendien trillen tijdens bevriezing kan worden beschouwd als nonfreezing omdat wanneer een dier bevriest, intermitterende onderbrekingen in de fotocel wordt waargenomen als gevolg van trillen. Als een alternatieve methode, hebben geautomatiseerde beeld-en video-analysesystemen ontwikkeld 17-20,37,38. Anagnostaras et al.. 37 beschreven een paar systemen met beeldanalyse software programma&#39;s die goede validiteit te hebben en scoren invriezen goed 17,20,37-38. De meeste van deze systemen en analyseprogramma&#39;s moeten verkregen worden van commerciële leveranciers en zijn typisch kostbaar. We hebben de ImageFZ software voor de analyse van bevriezing gedrag, en dit programma wordt gedistribueerd als gratis softwareprogramma. ImageFZ detecteert de muis als een geheel van pixels (een deeltje) en discrimineert subtiele muisbewegingen als &quot;bevriezen&quot; of &quot;niet-bevriezing&quot; afhankelijk van de hoeveelheidgebied van de overlappende gebieden tussen deeltjes van elk paar opeenvolgende afbeeldingen. Zoals in de representatieve resultaten, metingen met het ImageFZ programma stroken met of nauwkeuriger dan verkregen met andere methoden. Zo is de ImageFZ programma meet automatisch het gedrag dat menselijke waarnemers oordelen als invriezen met behulp gedefinieerde criteria. Bovendien berekent het programma ImageFZ de afstand (cm) voor, tijdens en na blootstelling footshock, een beoordeling van de schok gevoeligheid en analyse van de bevriezing gedrag vergemakkelijken. Methodologische verschillen bestaan ​​tussen laboratoria. Deze verschillen kunnen leiden tot moeilijkheden bij de vergelijking van gegevens tussen laboratoria en repliceren leidt tot verschillende laboratoria. Stabielere en vergelijkbare gegevens te verkrijgen, is het noodzakelijk standaardiseren het testprotocol zoveel mogelijk. Het analysesysteem met ImageFZ tot de automatisering van testprocedures, die bijdragen totde standaardisatie van protocollen gebruikt in laboratoria. Verschillende gedragsreacties moeten worden overwogen wanneer het analyseren van bevriezing gedrag. Ten eerste, wanneer de dieren geconfronteerd met een angstige situatie, kunnen ze vluchten in plaats van invriezen 39. Vluchten is een van de angstreacties, en haar optreden zal leiden tot een onderschatting van angst geheugen. Ten tweede kan bevriezing afhankelijk zijn van een algemeen niveau van activiteit, en het activiteitenniveau in de experimentele en controle muizen moet worden onderzocht. Hoewel bijvoorbeeld muizen die het M1 muscarine acetylcholine receptor vertoonden verlaagde niveaus van bevriezen vergeleken met wildtype muizen, verschillende gedragstesten aangegeven dat de resultaten kunnen worden toegeschreven aan de hyperactiviteit fenotype plaats van de geheugenstoornis 18. ImageFZ berekent de afstand (cm) reisde door de proefpersonen. De gegevens zijn beschikbaar om te onderzoeken of er verschillen bestaan ​​in de algemene activiteit niveaus tussen onderwerpen. Als er een groep verschilde afgelegde afstand, een mogelijke aanpak van het probleem is om te overwegen de afgelegde afstand tijdens de eerste 2 minuten van de opleiding als de basislijn activiteit en een suppressieratio gebruiken (onderdrukking ratio = (activiteit tijdens het testen) / (activiteit tijdens basislijn + activiteit tijdens testing)) als een secundaire index van angst 17,40. Tenslotte kan een verschil in pijngevoeligheid, induceren de veranderingen in reactiviteit een elektrische footshock eventueel leiden tot variaties in bevriezen gedrag. ImageFZ berekent ook de afgelegde afstand (cm) in detail van 2 seconden voordat een blootstelling van 2 seconden footshock tot 2 seconden na blootstelling (gedurende 6 seconden), die kan worden gebruikt als een index van footshock gevoeligheid. Video-analysesystemen zijn ontwikkeld om de bevriezing gedrag albino, zwart, agouti meten en verdund bruine muizen. ImageFZ maakt gebruik van een zwarte vloer dienblad en zwarte roosters aan witte muizen te onderzoeken (zie figuur 1B). De zwarte roosters zijn gemaakt van speci<html> ally bewerkte metalen met gecoate zwarte verf en een elektrisch geleidingsvermogen vergelijkbaar met die van de niet-beklede metalen roosters, die doorgaans worden gebruikt voor zwarte muizen. ImageFZ analyseert ook de bevriezing gedrag bij ratten en andere knaagdieren door aanpassingen van het programma parameters. In de huidige versie van ImageFZ wordt het gedrag van de patiënt opgenomen met een videocamera van de bovenwand om bevriezing te analyseren. ImageFZ kan ook gebruikt worden in een set-up waar de beelden worden vastgelegd van de kant van de kamer. Bovendien regelt de ImageFZ maximaal 4 apparaten. Deze functie kan de onderzoeker om gelijktijdig te onderzoeken 4 muizen, bespaart tijd en het verminderen van de mogelijke invloeden van verschillen in de uitvoeringstijd van elk onderwerp en het testen te hebben op gedrag. Zo ImageFZ vereenvoudigt de testprocedure en analyse van bevriezing gedrag, en dit programma faciliteert het testen met minder arbeid en zonder enige training voor de gedragsexperimenten. e_content &quot;&gt; In de Miyakawa laboratorium hebben we meer dan 110 stammen van genetisch gemanipuleerde muizen en wildtype controle muizen in de contextuele en geactiveerde vreesconditionering test met de video analysesysteem om de effecten van een bepaald gen op leren en geheugen helderen geëvalueerd 41-42 We hebben een grote set van ruwe data De ruwe data die werd gebruikt voor gepubliceerde wetenschappelijke artikelen 4-16 verkregen voor meer dan 5.000 muizen worden opgenomen in de &#39;Mouse Fenotype Database&#39; als een openbare databank (URL:.. http: / / www.mouse-phenotype.org/). De huidige film artikel geeft gedetailleerde informatie over de details van onze experimentele procedure en bevordert het inzicht in de testsituatie.

De contextuele en cued vreesconditionering test is de gedrags-paradigma gebruikt om associatieve angst leren en geheugen bij knaagdieren 1-3 te beoordelen. Deze test is op grote schaal gebruikt om de neurobiologische mechanismen van angst leren en geheugen in transgene en knockout muizen 1,4-16 begrijpen. Invriezen gedrag, gedefinieerd als complete immobiliteit, met uitzondering van de ademhaling, is een gemeenschappelijke reactie op angstige situaties. In deze gedrags-paradigma, nadat de dieren zijn blootgesteld aan een koppeling van een auditieve cue met een elektrische footshock, ze reageren op de angst-producerende stimulus door het weergeven van bevriezing gedrag, dat wordt gemeten als een index van associatieve angst leren en geheugen. Deze test vereist minder uitgebreide uitrusting, minder lichamelijke inspanning door de onderzoeker, en veel minder trainingstijd voor muizen dan andere leer-en geheugentaken, het vergt gewoonlijk ongeveer 5-10 minuten / dag per muis voor 2 dagen. Hoewel de testprocedure is siMPLE en vergt weinig tijd uit te voeren, moet de onderzoeker zorgvuldig te observeren en meten muisgedrag, daarom werden verschillende geautomatiseerde meetsystemen ontwikkeld om de gedragsanalyse 17-20 voeren. Onze video-analysesysteem, die we ontwikkeld met de ImageFZ softwareprogramma, stelt ons in staat om gemakkelijk te analyseren bevriezing gedrag en produceren van zeer betrouwbare resultaten. Dit artikel geeft gedetailleerde informatie over onze testprocedure en beschrijft hoe de ImageFZ software programma te gebruiken.

<table><tbody><tr><td>ImageFZ-programma</td><td>Ontwikkeld door Tsuyoshi Miyakawa</td><td></td><td>Dit programma is verkrijgbaar via O'Hara &amp; Co., Tokyo, Japan en gratis te downloaden op http://www.mouse-phenotype.org/. Deze software draait op 32-bit Windows XP/Vista/7. </td></tr><tr><td>Conditioneringskamer</td><td>O&rsquo;Hara &amp; Co., Japan</td><td>CL-3002L</td><td>Voor muis.</td></tr><tr><td>Aangeduide testkamer</td><td>O&rsquo;Hara &amp; Co., Japan</td><td>CLT-3002L</td><td>Voor muis.</td></tr><tr><td>Interface</td><td>O&rsquo;Hara &amp; Co., Japan</td><td>CL-1040</td><td>De interface bevat een witte ruis/toongenerator, die kan worden bediend door het ImageFZ-programma.</td></tr><tr><td>Gecodeerde shockgenerator</td><td>O&rsquo;Hara &amp; Co., Japan</td><td>SGA-2040</td><td>De shockgenerator kan worden bediend door het ImageFZ-programma.</td></tr><tr><td>Shockrastertester (ampèremeter)</td><td>O&rsquo;Hara &amp; Co., Japan</td><td>SG-T</td><td></td></tr><tr><td>USB-video-opnameapparaat</td><td>XLR8</td><td>USB2IVOSX</td><td></td></tr><tr><td>Quad-beeldsplitser</td><td>Wireless Tsukamoto Co., Ltd., Japan</td><td>400AS</td><td></td></tr><tr><td>Geluiddichte kamer</td><td>O&rsquo;Hara &amp; Co., Japan</td><td>CL-4210</td><td></td></tr><tr><td>Freeze Monitor</td><td>San Diego Instruments, Inc., CA, USA</td><td></td><td>16 x 16 fotostraalarm ( 2,5 cm afstand)</td></tr></tbody></table>

contextuele en cued fear conditioning test met behulp van een video analysesysteem in muizen

Contextual and Cued Fear Conditioning Test Using a Video Analyzing System in Mice

De contextuele en cued vreesconditionering test is een van de gedragstesten dat het vermogen van muizen om te leren en te onthouden van een associatie tussen omgevingsfactoren en negatieve ervaringen beoordeelt. In deze test worden muizen in een conditioneringskamer geplaatst en krijgen snippers van een geconditioneerde stimulus (een auditieve cue) en een aversieve ongeconditioneerde stimulus (een elektrische footshock). Na een vertragingstijd worden de muizen blootgesteld aan dezelfde conditioneringskamer en verschillend gevormde kamer met voorstelling van de auditieve cue. Invriezen gedrag tijdens de test wordt gemeten als een index van angst geheugen. Om het gedrag automatisch te analyseren, hebben we een video-analyse-systeem met behulp van de ImageFZ software programma, dat beschikbaar is als gratis download op http://www.mouse-phenotype.org/ is ontwikkeld. Hier, om de details van ons protocol tonen, onze procedure voor de contextuele demonstreren en cued vreesconditionering test C57BL/6J-muizen met de ImageFZ syst weem. Daarnaast hebben we ons protocol gevalideerd en video analysesysteem uitvoering door bevriezing tijd gemeten door de ImageFZ systeem of een fotocel computer meetsysteem met die gescoord door een menselijke waarnemer vergelijken. Zoals in onze representatieve resultaten, verkregen door ImageFZ data waren vergelijkbaar met die welke door een menselijke waarnemer geanalyseerd, wat aangeeft dat de gedragsanalyse met het ImageFZ systeem is zeer betrouwbaar. De huidige film artikel geeft gedetailleerde informatie over de testprocedures en zal inzicht in de experimentele situatie te promoten.

In de vreesconditionering test menselijke onderzoekers gebruikt om de bevriezing gedrag Kwantificering via arbeidsintensieve directe observatie 26-29, maar onlangs fotocel computer metingen (bijv. de &#39;Freeze Monitor systeem) en beeld-analysesystemen zijn gebruikt om automatisch meten de bevriezing gedrag 26,30-32. ImageFZ is een geautomatiseerd beeld-analysesysteem dat resultaten vergelijkbaar met die verkregen door menselijke waarneming produceert, zoals hieronder beschreven. Hier hebben we de uitkomsten van de menselijke waarneming met die van ImageFZ analyse onder variërende parameters: &#39;Rate (beeld / sec)&#39; en &#39;Freezing criterium (pixels).&#39; In dit experiment, vijf mannelijke C57BL/6J muizen (gemiddelde lichaamsgewicht ± SD (g) 31,4 ± 3,55, gemiddelde ± SD lichaamsgrootte (pixels), 351,6 ± 62,2) werden bij 15-27 weken. De menselijke waarneming werd gedaan met behulp van een event-opname-programma (een Macintosh OS9 softwareprogramma), een toets in te drukken gebeurtenis die nog steedsd 2 seconden of meer wanneer een muis toonde een aanval van geen beweging werd beschouwd als &#39;bevriezing&#39;. Het percentage van de bevriezing werd berekend om de 60 seconden in elke test en gebruikt voor correlatie analyses. Het percentage van het bevriezen gescoord door de 2 waarnemers (interbeoordelaarsbetrouwbaarheid, voor het conditioneren, r = 0,879, want context test, r = 0,957, want gecued test, r = 0,866, voor alle gevallen, r = 0.888) werd gemiddeld om een ​​mens te genereren scoren. Correlaties tussen de bevriezing percentages gemeten door ImageFZ met elk frame rate (dwz 1, 2, en 4 fps) en die verkregen door menselijke waarnemingen werden onderzocht. Zoals geïllustreerd in figuur 4, werden de bevriezing percentages berekend door ImageFZ (1, 2, en 4 fps) sterk gecorreleerd met de gemiddelde waarde verkregen uit de metingen van de 2 waarnemers. Met name het vastleggen van beelden met een hogere framesnelheid leidt niet altijd tot de beste correlatie. Beeldanalyse bij 1 bps gegenereerde resultaten vergelijkbaar zijn met die verkregen uit menselijke waarnemers in each test. Correlaties tussen de bevriezing percentages gemeten door menselijke waarnemingen en het gebruik ImageFZ onder elke conditie van de &#39;Freezing criterium (pixels) &quot;(dwz 20, 30, en 40 pixels) werden onderzocht. De bevriezing percentages berekend met ImageFZ in &#39;Freezing criterium (pixels) &quot;van 20, 30 en 40 pixels zijn, in alle gevallen sterk gecorreleerd met die verkregen door menselijke waarnemingen (figuur 5). Zoals getoond in figuur 5D, wanneer de bevriezing criterium is ingesteld op een lage waarde, de subtiele beweging van een muis, worden beschouwd als &quot;bevriezing&quot; door menselijke waarnemers, zou worden beschouwd als &quot;niet bevriezen &#39;met ImageFZ. Indien daarentegen het criterium is ingesteld op een hoge waarde, de beweging van een muis, scoorde &quot;niet invriezen&quot; door menselijke waarnemers, zou worden beschouwd als &quot;bevriezing&quot; met ImageFZ (figuren 5C, 5F en 5I). Dus, om de meest betrouwbare resultaten te verkrijgen, elke parameter van het ImageFZ programma worden gekalibreerd onsdaarbij de gegevens gescoord door menselijke waarnemingen in elke testomgeving. Verder vergeleken we de door een menselijke waarnemer resultaten, met behulp van een fotocel computer meetsysteem (het Freeze monitor systeem), die verkregen met ImageFZ (zie figuur 6). De menselijke waarnemer werd verblind om de behandelde groep en de resultaten van ImageFZ scoren. Voor de parameterinstellingen van het Freeze Monitor systeem, gebruikten we 3 metingen van het percentage van het bevriezen van een eerder gevalideerd 30. Kortom, het aantal 10-seconden intervallen waarin de dieren vereiste meer dan 1 of 2 seconden tot de eerste nieuwe straal van het interval (1 sec 10 sec 10 sec en 2 sec, respectievelijk) en de wachttijd tussen het begin van elke 5 seconden interval overschrijden en de derde nieuwe bundel onderbreking binnen dit interval (Latency3) werden gemeten. De percentages van de intervallen waarin de muis werd bevriezing of het percentage van de totale tijd rerplicht te breken de derde fotocel werden berekend. De percentages invriezen gemeten in elk systeem zijn weergegeven in figuur 6. De groepen werden vergeleken met behulp van twee-weg herhaalde metingen ANOVA gevolgd door de t-test (zie tabel 1). De bevriezing percentages gemeten met ImageFZ (figuur 6B) waren vergelijkbaar met die behaald door menselijke waarneming (Figuur 6A) dan verkregen met behulp van een fotocel systeem (figuren 6C-E) gegevens. De bevriezing percentages gemeten met de ImageFZ programma in elke test waren sterk gecorreleerd met die behaald door menselijke waarneming (conditioneren, r = 0,947, context test, r = 0.970, geactiveerde test, r = 0,934), terwijl de correlaties tussen de bevriezing percentages gemeten met behulp van de fotocel computer meetsysteem (1sec 10sec, 2sec 10sec of Latency3) en de menselijke waarnemer waren lager (conditionering, r = 0.503, 0.593 en 0.761; context test, r = 0,772, 0,819 en 0,912) vergeleken met de correlaties tussen de bevriezing percentages gemeten met ImageFZ en menselijke waarneming (figuren 7A en 7B). Daarnaast figuur 7 blijkt dat de verschillen tussen de bevriezing percentages verkregen door menselijke waarneming en gebruik ImageFZ in elke muis werden de kleinste verschillen. Deze resultaten gaven aan dat de bevriezing percentages gemeten met ImageFZ waren vergelijkbaar met die verkregen door menselijke waarneming en ImageFZ erg goed is bij het meten van de hoeveelheid bevriezing. <img alt="Figuur 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50871/50871fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig1.jpg" /> Figuur 1. Apparaten voor de contextuele en cued vreesconditionering test. (A) Een acryl vierkante kamer voor de conditionering en context test, ( <strong&gt; B) metalen roosters op een witte plastic vloer voor zwart, agouti, of verdunde bruine muizen (boven) en electrifiable black metal roosters op een zwarte kunststof vloer voor witte muizen (onderaan); vergrote beelden van de roosters worden in de juiste paneel, (C) een witte ruis / toongenerator en een schok generator, (D) een geluiddichte ruimte, en (E) een acryl driehoekige ruimte met een vlakke vloer voor de cued test. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig1highres.jpg" target="_blank">Klik hier voor grotere afbeelding.</a> <img alt="Figuur 2" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50871/50871fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig2.jpg" /> Figuur 2. Schematische weergave van het protocol. (A) Overzicht van de contextuele en cued vreesconditionering test, (B) conditionering, (C) cONTEXT test, en (D) gecued test. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig2highres.jpg" target="_blank">Klik hier voor grotere afbeelding.</a> <img alt="Figuur 3" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50871/50871fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig3.jpg" /> Figuur 3. Beeldanalyse de ImageFZ softwareprogramma. Voor elk paar opeenvolgende afbeeldingen, de oppervlakte die (pixels) waarmee de muis bewogen wordt berekend door ImageFZ. Wanneer dit gebied is onder een bepaalde drempel (bijvoorbeeld 30 pixels) wordt het gedrag geacht worden te &#39;bevriezen&#39;. Wanneer de hoeveelheid van het gebied gelijk is aan de drempelwaarde overschrijdt, wordt het gedrag als &#39;non-bevriezing&#39; zijn. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig3highres.jpg" target="_blank">Klik hier voor grotere afbeelding.</a> <img alt="Figuur 4" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig4highres.jpg" width="500" /> Figuur 4. Vergelijkingen van de bevriezing percentages berekend op basis van beelden op verschillende framerates behulp ImageFZ met die gemeten door middel van de menselijke waarneming. De angst conditionering tests werden uitgevoerd met behulp van mannelijke C57BL/6J-muizen (n = 5). Tijdens de proeven, twee waarnemers scoorde de bevriezing gedrag. Tegelijkertijd werden live beelden vastgelegd op 4 fps met behulp van de ImageFZ programma. De bestanden die zijn gemaakt op 4 fps werden afgeslankt na extractie de frames overeen te komen met beelden die zijn vastgelegd op 1 fps of 2 fps. De parameter waarden van &#39;Rate (beeld / sec) werden ingesteld op 1, 2 of 4 fps, en invriezen percentages in elke 60-sec bin werden berekend uit beeldbestanden te ImageFZ offline analyse. Elke stip vertegenwoordigt een bevriezing percentage van elke 60-sec bin. Pearson&#39;s correlatiecoëfficiënten tussen de verkregen uit menselijke waarneming en ImageFZ analyse gegevens werden berekend.<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig4highres.jpg" target="_blank">Klik hier voor grotere afbeelding.</a> <img alt="Figuur 5" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig5highres.jpg" width="500" /> Figuur 5. De bevriezing percentages berekend uit de beelden op verschillende bevriezen criterium waarden met ImageFZ en de gemeten door menselijke waarnemingen werden vergeleken. Het vreesconditionering proeven werden mannelijke C57BL/6J muizen (n = 5). Tijdens de proeven, twee waarnemers opgenomen de bevriezing gedrag, en de live beelden werden vastgelegd met behulp van de ImageFZ programma. De bevriezing percentages per 60 sec bin werden berekend uit de afbeeldingen (1 beeld / sec) door ImageFZ offline analyse, waarin de parameterwaarden van &quot;Freezing criterium (pixels) om 20, 30 of 40 pixels. Elke stip vertegenwoordigt een bevriezing percentage van elke 60-sec bin. Pearson&#39;s correlatie cocoëfficiënten tussen de verkregen uit menselijke waarneming en de ImageFZ analyse gegevens werden berekend in elke test. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig5highres.jpg" target="_blank">Klik hier voor grotere afbeelding.</a> <img alt="Figuur 6" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50871/50871fig6highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig6.jpg" /> Figuur 6. De percentages van bevriezing werden gemeten met behulp van geautomatiseerde systemen en menselijke waarneming in ongeconditioneerde en geconditioneerde groepen mannelijke C57BL/6J muizen (n = 5 elke groep). (A) menselijke waarneming, (B) ImageFZ, (C) Freeze Monitor systeem 1 (1sec 10sec), (D) Freeze Monitor systeem 2 (2sec 10sec) en (E) Freeze Monitor system 3 (Latency3). Groep vergelijkingen werden uitgevoerd met behulp van twee-weg herhaalde metingen ANOVA gevolgd door de t-test (ongecoördineerdnditioned groep versus geconditioneerde groep, *, P &lt;0,05; †, p &lt;0,01). De verkregen met behulp ImageFZ waren vergelijkbaar met die scoorde door menselijke observatie data. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig6highres.jpg" target="_blank">Klik hier voor grotere afbeelding.</a> <img alt="Figuur 7" fo:content-width="4.3in" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig7highres.jpg" width="420" /> Figuur 7. Correlatie en frequentieverdeling van de verschillen tussen de bevriezing percentages, gemeten met behulp van geautomatiseerde systemen en de menselijke waarneming. (AB) Spreidingsdiagrammen en Pearson&#39;s correlatiecoëfficiënten tussen het vriespunt percentages gescoord door geautomatiseerde systemen en menselijke waarneming worden getoond. De bevriezing percentages, berekend op basis van ImageFZ, waren sterk gecorreleerd met die verkregen door menselijke waarneming. (CF) Voorkomen van minder dan 10% verschilschil tussen de bevriezing percentages verkregen uit geautomatiseerde systemen versus menselijke waarneming hoogste waren toen de gegevens geanalyseerd met behulp ImageFZ werden vergeleken met die door menselijke observatie geanalyseerd. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig7highres.jpg" target="_blank">Klik hier voor grotere afbeelding.</a> <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td></td><td> ANOVA </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> Voorwaarde </td><td> Tijd </td><td> Voorwaarde x Tijd </td></tr><tr><td> Dag 1 (conditionering) </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Menselijk </td><td> F (1,8) = 28.53, p = 0.0007 </td><td> F (7,56) = 20.79, p &lt;0,0001 </td><td> F (7,56) = 16.58, p &lt;0,0001 </td></tr><tr><td> ImageFZ </td><td> F (1,8) = 13.97, p = 0,0057 </td><td> F (7,56) = 21.40, p &lt;0,0001 </td><td> F (7,56) = 11,69, p &lt;0,0001 </td></tr><tr><td> Freeze Monitor (1sec10sec) </td><td> F (1,8) = 5,16, p = 0,0528 </td><td> F (7,56) = 2,39, p = 0,0329 </td><td> F (7,56) = 0,72, p = 0,6572 </td></tr><tr><td> Freeze Monitor (2sec10sec) </td><td> F (1,8) = 4,07, p = 0,0782 </td><td> F (7,56) = 3,44, p = 0.0039 </td><td> F (7,56) = 1,52, p = 0,1803 </td></tr><tr><td> Freeze Monitor (Latency3) </td><td> F (1,8) = 4,44, p = 0,0682 </td><td> F (7,56) = 9,94, p &lt;0,0001 </td><td> F (7,56) = 4,33, p = 0.0007 </td></tr><tr><td> Dag 2 (context) </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Menselijk </td><td> F (1,8) = 42,94, p = 0,0002 </td><td> F (4,32) = 1,91, p = 0,1336 </td><td> F (4,32) = 1,48, p = 0,2302 </td></tr><tr><td> ImageFZ </td><td> F (1,8) = 49,61, p = 0,0001 </td><td> F (4,32) = 2,06, p = 0,1087 </td><td> F (4,32) = 0,83, p = 0,5174 </td></tr><tr><td> Freeze Monitor (1sec10sec) </td><td> F (1,8) = 20,28, p = 0,002 </td><td> F (4,32) = 1,63, p = 0,1918 </td><td> F (4,32) = 0,55, p = 0,6997 </td></tr><tr><td> Freeze Monitor (2sec10sec) </td><td>F (1,8) = 40,20, p = 0,0002 </td><td> F (4,32) = 2,66, p = 0,0504 </td><td> F (4,32) = 1,20, p = 0,3306 </td></tr><tr><td> Freeze Monitor (Latency3) </td><td> F (1,8) = 35,30, p = 0.0003 </td><td> F (4,32) = 2,49, p = 0.0626 </td><td> F (4,32) = 1,09, p = 0,3793 </td></tr></tbody></table> Tabel 1. Vergelijkingen van de statistieken.

Dit artikel presenteert een protocol voor een contextuele en cued vreesconditionering test met een video-analysesysteem om angst leren en geheugen in muizen te beoordelen.

Contextuele en cued Fear Conditioning Test Met behulp van een video analysesysteem in Muizen

The contextual and cued fear conditioning test is one of the behavioral tests that assesses the ability of mice to learn and remember an association ...

De contextuele en acute angstconditioneringstest is een gedragstest die veel wordt gebruikt om het leervermogen van Lawrence te beoordelen. Onthoud associaties tussen een agressieve ervaring en omgevingssignalen. Er zijn echter enkele methodologische verschillen in deze test met de werkplek, wat kan resulteren in moeilijkheden bij het vergelijken van gegevens en het reproduceren van resultaten.Om stabielere en nauwkeurigere gegevens te verkrijgen, is het belangrijk om het testprotocol zoveel mogelijk te standaardiseren. In deze demonstratie laten we het protocol van de veldtest zien. De Angst Functioneren test is een eenvoudige, gevoelige en betrouwbare test voor het beoordelen van uw geheugen.Deze test wordt vaak gebruikt om neurologische en moleculaire mechanismen te begrijpen die ten grondslag liggen aan leren en geheugen, en ook om de cognitieve functie van potentiële muismodellen van psychiatrische stoornissen zoals posttraumatische stressstoornis en schizofrenie te evalueren. In de test wordt het gedrag bij confrontatie, dat wordt gemeten als een index van leren en geheugen, beoordeeld door de menselijke observator en sommige geautomatiseerde systemen om het gedrag automatisch te analyseren. We ontwikkelen een beeldanalysesysteem met behulp van beeld FG en beeld A gebaseerde softwareprogramma.We distribueren een dergelijk softwareprogramma en het kan gratis worden gedownload op dit adres. In deze demonstratie introduceren we ons testprotocol en het geautomatiseerde analysesysteem. Eerst laten we zien hoe de app veilig kan worden bediend als afbeelding van het softwareprogramma.Ten tweede demonstreren we de gedetailleerde protocollen van de test, inclusief de contexttest voor conditionering en de Q-test voor apparaatgebruik van het systeem. Ten slotte presenteren we een resultaten die aangeven dat het N-beeld FD-systeem zeer betrouwbare resultaten kan produceren. Laten we nu beginnen.Begin met de angstconditioneringstest snel. Een muis wordt in een kamer met een gradiëntvloer geplaatst. De OID wordt gepresenteerd als een auditeur.De auditeur wordt 30 seconden afgespeeld. Daarna wordt een elektrische voetschok gegeven. Deze koppeling van een auditeur en de voetschok wordt drie keer herhaald om de associatie tussen de auditeur en de elektrische voetschok te versterken.Tijdens de test wordt het vriesgedrag gemeten als een index van geassocieerd leren en onrechtvaardig geheugen. Ten tweede, na 24 uur, wordt de muis in dezelfde conditioneringskamer geplaatst en wordt het vriesgedrag beoordeeld. Om contextueel gecontroleerde angst te meten, wordt de muis vervolgens overgebracht naar een ander gevormde G zonder enige auditieve cue en daarna wordt de auditieve cue gepresenteerd.In deze test wordt het vriesgedrag gebruikt als een index van acute angstgeheugen. Tijdens de test wordt het gedrag van de muis opgenomen via een camera die is aangesloten op een computer. Het gedrag wordt beoordeeld als vries of niet-vries.Met behulp van het beeldsoftwareprogramma kan het programma het percentage vriestijd en afstandverkeer berekenen. Hier wordt een voorbeeld van beeldanalyse tijdens de test gedemonstreerd. Live beelden worden vastgelegd met een lengte per seconde.Het programma creëert een binair beeld van elke live afbeelding voor elk paar. Met opeenvolgende beelden wordt de hoeveelheid gebied waardoor de muis is bewogen, berekend door het beeldprogramma. Wanneer het gebied onder een bepaalde drempel ligt, wordt het gedrag als vries beoordeeld, wat over het algemeen wordt gedefinieerd als een volledige afwezigheid van enige beweging, behalve ademhaling en moeilijk te verslaan.Vriesgedrag dat korter is dan de gedefinieerde tijdsdrempel, wordt niet als vries beoordeeld. De drempelwaarde moet van tevoren worden ingesteld zodat deze de beste overeenkomst oplevert tussen vriestijden zoals gemeten door beeld Z en menselijke observaties. Wanneer de hoeveelheid gebied gelijk is aan de drempel of X drie Z, wordt het gedrag als niet-vries beschouwd.Hier demonstreren we ons testprotocol bij muizen met behulp van dit video-analysesysteem. In dit protocol is de operator geconstrueerd op een kamer met metalen roosters en onbedekt met een transparant leidingbeeld. FD kan een donker onderwerp onderscheiden van een witte achtergrond in elke vastgelegde videobeeld.Maar dit proces stelt ons in staat om het vriesgedrag van het onderwerp te analyseren dat de kamer op een witte vloer moet worden geplaatst om het gedrag van zwarte, goede of direct zwarte muizen te analyseren. Het vriesgedrag van aluminium muizen kan ook worden geanalyseerd door beeld D met behulp van zwarte metalen roosters Onder een zwarte regel zijn lichtgevende diodelichten aangebracht op het zeil boven het apparaat. De roosterregel wordt verlicht door LED-lichten.Een luidspreker verbonden met de witte ruisgenerator is gemonteerd op zeil boven het deksel. Er wordt een 55 witte ruis gepresenteerd als een auditieve cue. De roosters zijn verbonden met een schokgenerator om een elektrische voetschok te leveren.De schokwindtest wordt ingesteld op 0,3 miljoen paar voordat de test wordt gestart. De huidige intensiteit op het rooster moet worden gecontroleerd door een metaal omdat de schoktest kan worden verminderd door een opbouw van fe en urine ro de muizen, het testkamerkje wordt geplaatst in een geluiddichte loom om externe ruis te minimaliseren. Tijdens de test bevindt de beroepsrechter zich in een ander geluid dan het geluid waarin de coning- en contexttests worden uitgevoerd.Het bestaat uit een kamer met verschillende eigenschappen dan de coningkamer. Het is noodzakelijk om de sensorische codes zoveel mogelijk te wijzigen om een normale context te bieden, zodat de muis Nobel context zal waarnemen als niet gerelateerd aan de contingkamer. In dit protocol is het apparaat een acryl driehoekige kamer met een vlakke acryl regel en de transparante leiding.Een luidspreker is gemonteerd op zeil boven de leiding om een of drie cue te presenteren. Deze cue is dezelfde cue die aan de muizen werd gegeven bij hawing. Het verlichtingsniveau van de vloer is ingesteld om studies uit te voeren.Elke kamer is een kubus met een zeil gemonteerde opgeladen cab, apparaatcamera om het gedrag van de muis te bewaken. Voordat elke test begint, worden de acrylwanden en vloeren afgeveegd met een tong zo in super hoog gross water en de roosters worden schoongemaakt met

contextual-cued-fear-conditioning-test-using-video-analyzing-system

Research

JoVE Journal

Behavior

Gedrag

In het volgende experiment beschrijven we een protocol voor het trace vreesconditionering bij muizen. Deze vorm van associatief geheugen omvat een spoor periode dat de neutrale stimulus en de ongeconditioneerde stimulus scheidt.

Trace Angst Conditioning in Muizen

Hier beschrijven we de gedetailleerde methodologie vereiste stress-enhanced angst leren (SEFL) experimenten, een preklinische model van posttraumatische stress-stoornis, in zowel de ratten en muizen. Het model maakt gebruik van aspecten van Pavlov angst conditionering en bevriezing als een index van verbeterde angst in knaagdieren.

Angst stress-Enhanced Learning, een robuuste knaagdier Model van Posttraumatische Stress-Stoornis

We beschrijven een uitgebreid angst-conditionering protocol dat overtraining produceert en angst incubatie bij ratten. Dit protocol omvat een enkele trainingssessie met 25 tone-shock pairings (d.w.z. overtraining) en een vergelijking van geconditioneerde vriesreacties tijdens context- en cuetests 48 uur (korte termijn) en 6 weken (lange termijn) na de training.

Angst Incubatie met behulp van een uitgebreide Angst-Conditioning Protocol voor ratten

Defensieve gedragsreacties zijn afhankelijk van dreigingsintensiteit, nabijheid en context van blootstelling. Op basis van deze factoren ontwikkelden we een klassiek conditioneringsparadigma dat duidelijke overgangen oproept tussen geconditioneerd bevriezing en vlieggedrag binnen individuele onderwerpen. Dit model is cruciaal voor het begrijpen van de pathologieën die betrokken zijn bij angst, paniek en posttraumatische stressstoornissen.

Een nieuw Pavloviaans angstconditioneringsparadigma om bevriezing en vlieggedrag te bestuderen

Om vluchtgedrag in een angstige context te bestuderen, introduceren we een aangepast angstconditioneringsprotocol. Dit protocol zorgt ervoor dat muizen consequent vluchtgedrag vertonen tijdens cue-presentatie in de angstconditionering.

Gemodificeerde angstconditionering voor het induceren van vlieggedrag bij muizen

Het observationele angstparadigma beoordeelt victueuze bevriezing bij knaagdieren als een model voor affectieve empathie. Deze procedure omvat het blootstellen van waarnemende knaagdieren aan conspecifieke demonstranten die aversieve voetschokken ontvangen om empathische bevriezingsreacties op te roepen. Door observatieve angsttests te gebruiken, kunnen onderzoekers de neurale mechanismen die ten grondslag liggen aan affectieve empathie onderzoeken.

Observationele angst als een model van affectieve empathie bij muizen

Potentiëring van de verrassingsreflex wordt gemeten via elektromyografie van de orbicularis oculi-spier tijdens een lage (onzekere) en hoge (zekere) waarschijnlijkheid van elektrische schokken in de Threat Probability Task. Dit biedt een objectieve maatstaf voor verschillende negatieve emotionele toestanden (angst/angstigheid) voor onderzoek naar psychopathologie, middelengebruik/misbruik en brede affectieve wetenschap.

Met behulp van de Threat Probability Task aan angst en vrees Tijdens Onzekere en bepaalde Threat Beoordelen

Dit artikel beschrijft een nieuw protocol voor de kwantitatieve meting van sociale motivatie bij muizen met behulp van operante conditionering voor een sociale beloning. Het protocol is nuttig voor het meten van sociale motivatie bij muizenmodellen van autisme en andere stoornissen van sociaal gedrag.

Het kwantificeren van Sociale Motivatie in Muizen met behulp van operante conditionering

Ultrasone vocalisaties (USV's) bij muizen verschillen afhankelijk van leeftijd, geslacht, conditie en genetische achtergrond. Door twee ultrasone zenders tegelijkertijd op verschillende locaties uit te zenden, kan deze tweeduidige test muiserkenning en voorkeursreacties op verschillende kenmerken van USV's evalueren.

Het bepalen van Ultrasonic Vocalisatie Voorkeuren in Muizen met behulp van een twee-keuze afspelen Test

De hier gepresenteerde voorbereiding voor snorhaar-gesignaleerde ooglimconditioning bij muizen met een vaste kop stimuleert precies specifieke snorharen terwijl muizen kunnen lopen op een cilindrische loopband. Een snorhaarstimulatie geconditioneerde stimulus (CS) gekoppeld aan een periorbitale schok ongeconditioneerde stimulus (US) resulteert in betrouwbaar associatief leren op dit apparaat.

-Bakkebaard gesignaleerd Eyeblink klassieke conditionering in-Head vaste Muizen

Leer een gestandaardiseerd protocol voor contextuele en cued fear conditioning bij muizen met behulp van een geautomatiseerd videoanalysesysteem. Deze methode verbetert de betrouwbaarheid van gedragsbeoordelingen in neurowetenschappelijk onderzoek naar leren en geheugen.

Contextuele en cued Fear Conditioning Test Met behulp van een video analysesysteem in Muizen

Meer video's verkennen