Name: Een verbeterde methode voor nauwkeurige en snelle meting van Vliegprestaties in Drosophila (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-02-13T13:45:00.000+00:00
Duration: 6 min 18 s
Description: Leer een verbeterde methode voor het meten van vliegprestaties in Drosophila met behulp van een vluchtcilinder en digitale beeldanalyse. Deze techniek maakt snelle, nauwkeurige screening van mutaties en neurodegeneratie mogelijk.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd ondersteund door de National Institutes of Health verleent F32 NS078958 (DTB) en R01 AG033620 (BG).

1. Monteer Flight Tester <ol><li> Veilige vlucht cilinder Ring Stand 1 behulp kettingklemmen. (Laat ongeveer 3 cm onder de cilinder voor wegen gerecht.) (Opmerking: De vlucht cilinder we gebruiken is 90 cm lang met een diameter van 13,5 cm.) </li><li> Plaats Weeg met een dun laagje minerale olie onder de cilinder vlucht. </li><li> Secure trechter Ring Stand 2 met behulp van een ring klem en klauw klem. De hoogte van de trechter, zodat de onderkant van de trechter gelijk ligt met de bovenkant van de cilinder vlucht. (Opmerking: de tip diameter van de trechter moet kleiner zijn dan de buitendiameter van flacons geplaatst in de zaaipijp zodat de injectieflacons niet door zal vallen zijn.) </li><li> Steek hangende buis in de bovenkant van de trechter en vast met een klauw klem. (Opmerking: We maken gebruik van een druppel buis die is 25 cm lang Dropping fly-bevattende flesjes uit deze hoogte maakt consistente uitwerpen van alle vliegen met uniforme kracht De binnendiameter van de valpijp moet sligh zijn..tgevoerd groter dan de buitendiameter van de flacon om de flacon vrij vallen.) </li><li> Snijd polyacrylamide vel (len) naar de juiste grootte. (Opmerking: Om te helpen bij het plaatsen en verwijderen van de plaat, moet de breedte iets kleiner dan de binnenste omtrek van de cilinder vlucht zijn). </li><li> Breng een dun laagje van Tangle-Trap naar de plaat. Laat zitten 1 uur voor gebruik. (Let op: Laat voldoende ruimte vrij aan de bovenkant en onderkant van het vel (ongeveer 3 cm) ongecoat om het laken voor het inbrengen / verwijderen begrijpen.) </li><li> Plaats de polyacrylamide blad in de cilinder vlucht. </li><li> Monteer de camera track met grenen steunbeugels. (Let op: zorg ervoor dat de onderkant van de baan de camera kan ondersteunen zonder het blokkeren van de lens zie figuur 1B..) </li><li> Stoppers toevoegen en vastschroeven. (Let op: plaats de stoppers op locaties waarmee de camera om de hele kunststof plaat in panoramische modus te bekijken.) </li></ol> 2. Run Experiment <ol> &lt;li&gt; Verzamel flacons van vliegen te testen. Voor het beste resultaat, gebruik niet meer dan 20 vliegen / flacon. </li><li> Tik voorzichtig vliegen naar onderkant van flesje, loskoppelen en vervolgens invoegen in valpijp en laat flacon. (Opmerking: Het flesje naar beneden valt de daling buis totdat hij de smalle trechter opening raakt Wanneer de flacon raakt de trechter, worden de vliegen uitgeworpen in de cilinder vlucht..) </li><li> Til de druppel buis naar de lege flacon te verwijderen. (Opmerking: Meerdere flacons van vliegen van dezelfde testgroep kan worden getest op een polyacrylamide vel We vinden dat tot 200 vliegen (10 flacons van 20 vliegen per stuk) kunnen worden getest en gemakkelijk afgebeeld op een vel.. </li><li> Verwijder het plastic en leg het op een vlakke witte ondergrond. (Opmerking: wit poster boord mogen worden gebruikt als bankje tops zijn donker gekleurd.) </li><li> Monteer de camera spoor over de plastic plaat. De camera moet voldoende hoog boven het blad aan zowel de boven-en onderkant van het blad in het gezichtsveld hebben. </li><li> Schuif de camera langs the spoor terwijl de &quot;capture&quot;-knop ingedrukt om een ​​panoramisch beeld te verwerven. </li><li> Het aantal vliegen de landing in de olie kan handmatig worden geteld voor elk onderzoek. </li><li> Herhaal stappen 2.2-2.7 alle omstandigheden in een bepaald experiment. De vliegen worden verwijderd van de plaat tussen elke proef. Alternatief kunnen meerdere bladen worden gebruikt, een nieuw vel voor elk onderzoek. </li></ol> 3. Data Collection <ol><li> Beeldbestanden opent met behulp van ImageJ software. </li><li> Gewas beelden indien nodig alleen de landing oppervlakte omvatten. (Dit is het gebied bedekt met Tangle-Trap.) </li><li> Beelden omzetten naar 8-bits grijsschaal. </li><li> Maak een &quot;drempel&quot; om te filteren op de witte achtergrond. (Afbeelding → Pas → Threshold). </li><li> Stel de parameters voor elke vlieg met het menu &quot;deeltjes te analyseren&quot; te identificeren. (Analyze → Analyseer Particles) Definieer de parameters die worden gebruikt om een ​​deeltje te identificeren. Met onze opgezet, vinden we dat het gebruik van eengebied van 5-90 pixels 2 en een circulariteit van 0,4-1,0 zal nauwkeurig te identificeren alle monsters. </li><li> Meet de locatie van elke vliegen met de gegenereerde lijst coördinaten voor elk deeltje. De x-coördinaat in pixels worden omgezet in centimeter tot de overloop hoogte berekenen. </li><li> Importeer tabel in een spreadsheet (zoals Microsoft Excel). </li></ol>

<ol><li>Benzer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+dissection+of+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Sci.+Am%22%5BJournal%5D)">Genetic dissection of behavior.</a> Sci. Am. 229, 24-37 (1973).</li>
<li>Ali, Y. O., Escala, W., Ruan, K., Zhai, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assaying+locomotor%2C+learning%2C+and+memory+deficits+in+Drosophila+models+of+neurodegeneration%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Assaying locomotor, learning, and memory deficits in Drosophila models of neurodegeneration.</a> J. Vis. Exp. , e2504(2011).</li>
<li>de Vries, S. E., Clandinin, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optogenetic+Stimulation+of+Escape+Behavior+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Optogenetic Stimulation of Escape Behavior in Drosophila melanogaster.</a> J. Vis. Exp. , e50192(2013).</li>
<li>Mundiyanapurath, S., Certel, S., Kravitz, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studying+aggression+in+Drosophila+%28fruit+flies%29%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Studying aggression in Drosophila (fruit flies).</a> J. Vis. Exp. , e155(2007).</li>
<li>Nichols, C. D., Becnel, J., Pandey, U. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+to+assay+Drosophila+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Methods to assay Drosophila behavior.</a> J. Vis. Exp. , e3795(2012).</li>
<li>Shiraiwa, T., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proboscis+extension+response+%28PER%29+assay+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Proboscis extension response (PER) assay in Drosophila.</a> J. Vis. Exp. , e193(2007).</li>
<li>Lloyd, T. E., Taylor, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flightless+flies%3A+Drosophila+models+of+neuromuscular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+N.Y.+Acad.+Sci%22%5BJournal%5D)">Flightless flies: Drosophila models of neuromuscular disease.</a> Ann. N.Y. Acad. Sci. 1184, e1-e20 (2010).</li>
<li>Atkinson, N. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+separation+of+two+behavioral+phenotypes+by+a+mutation+affecting+the+promoters+of+a+Ca-activated+K+channel%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Molecular separation of two behavioral phenotypes by a mutation affecting the promoters of a Ca-activated K channel.</a> J. Neurosci. 20, 2988-2993 (2000).</li>
<li>Atkinson, N. S., Robertson, G. A., Ganetzky, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+component+of+calcium-activated+potassium+channels+encoded+by+the+Drosophila+slo+locus%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">A component of calcium-activated potassium channels encoded by the Drosophila slo locus.</a> Science. 253, 551-555 (1991).</li>
<li>Elkins, T., Ganetzky, B., Wu, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Drosophila+mutation+that+eliminates+a+calcium-dependent+potassium+current%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">A Drosophila mutation that eliminates a calcium-dependent potassium current.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 83, 8415-8419 (1986).</li>
<li>Gargano, J. W., Martin, I., Bhandari, P., Grotewiel, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+iterative+negative+geotaxis+%28RING%29%3A+a+new+method+for+assessing+age-related+locomotor+decline+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Gerontol%22%5BJournal%5D)">Rapid iterative negative geotaxis (RING): a new method for assessing age-related locomotor decline in Drosophila.</a> Exp. Gerontol. 40, 386-395 (2005).</li>
<li>Fry, S. N., Rohrseitz, N., Straw, A. D., Dickinson, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visual+control+of+flight+speed+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">Visual control of flight speed in Drosophila melanogaster.</a> J. Exp. Biol. 212, 1120-1130 (2009).</li>
<li>Mronz, M., Lehmann, F. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+free-flight+response+of+Drosophila+to+motion+of+the+visual+environment%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">The free-flight response of Drosophila to motion of the visual environment.</a> J. Exp. Biol. 211, 2026-2045 (2008).</li>
</ol>

De auteurs hebben geen belangenconflicten te onthullen.

Met behulp van de hier beschreven methoden, zijn we in staat om vliegprestaties van een groot aantal van Drosophila mutanten snelle beoordeling, waardoor een grotere efficiëntie dan voorheen mogelijk was. Voor onze experimenten hebben we routinematig scheiden mannen en vrouwen en hen op te voeden bij lage dichtheid (minder dan 20 vliegen / flacon) om agressie die vleugels kunnen beschadigen beperken. Een andere belangrijke overweging is om goed te controleren voor verschillen in vliegprestatie gevolg van versch...

Drosophila is lange tijd gebruikt om de genetische basis van het gedrag 1 te bestuderen, en onderzoekers hebben een aantal manieren om verschillende gedragingen 2-6 analyseren ontwikkeld. Vliegen zijn bijzonder nuttig bij het ​​verstrekken van bruikbare modellen van neuromusculaire aandoeningen 7 geweest. Een veel voorkomende test gebruikt om motorische gedrag te bestuderen is vliegprestaties. De oorspronkelijke vlucht tester is nuttig voor het identificeren vlucht defecte mutanten en voor de kwantitatieve beoordeling van de vlucht het vermogen 1, maar het heeft een aantal tekortkomingen die zijn aanvraag voor high throughput schermen beperken: het gebruik van geoliede cilinders is rommelig en omslachtig, bepaalde functies zoals de lengte van de cilinder en invoering van ongedierte in de buis met variabele kracht kunnen kwantitatieve nauwkeurigheid, en het is moeilijk om levende vliegen herstellen van de tester. Om deze beperkingen te overwinnen, hebben we de vlucht tester gemodificeerd om een ​​aantal verbeteringen. We voegden een &quot;drop tuworden &quot;om vliegen de variabiliteit tussen experimenten en gebruikers elimineren introduceren. We maken gebruik van verwijderbare acryl platen bekleed met een kleefstof die zorgt voor eenvoudiger opruimen en herstel van individuele vliegen. We hebben de lengte van de vlucht buis verhoogd tot kwantitatieve nauwkeurigheid en betrouwbaarheid te verbeteren. Tenslotte maken we gebruik van een digitale camera en imaging software om de landing hoogten van vliegen te berekenen. Wij geloven dat deze verbeteringen zullen nuttig zijn in elk laboratorium geïnteresseerd in het uitvoeren van grootschalige genetische screens voor gebreken in vliegprestaties zijn.

<table><tbody><tr><td>Putty knife</td><td>Home Depot</td><td>630147</td><td><a href="http://www.homedepot.com">www.homedepot.com</a></td></tr><tr><td>Pine back band moulding (2x)</td><td>Home Depot</td><td>156469</td><td><a href="http://www.homedepot.com">www.homedepot.com</a></td></tr><tr><td>Furring Strip Board</td><td>Home Depot</td><td>164704</td><td><a href="http://www.homedepot.com">www.homedepot.com</a></td></tr><tr><td>Tangle-Trap Insect Trap Coating</td><td>BioControl Network</td><td>268941</td><td><a href="http://www.biconet.com">www.biconet.com</a></td></tr><tr><td>Laptop Computer&nbsp;</td><td>Apple</td><td></td><td><a href="http://www.apple.com/mac/">www.apple.com/mac/</a></td></tr><tr><td>Mineral oil</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP26291</td><td><a href="http://www.fishersci.com">www.fishersci.com</a></td></tr><tr><td>White poster board</td><td>Staples</td><td>247403</td><td><a href="http://www.staples.com">www.staples.com</a></td></tr><tr><td>Polystyrene weighing dish</td><td>Fisher Scientific</td><td>S67091A</td><td><a href="http://www.fishersci.com">www.fishersci.com</a></td></tr><tr><td>ImageJ Software</td><td>National Institutes of Health</td><td></td><td><a href="http://rsb.info.nih.gov/ij/">http://rsb.info.nih.gov/ij/</a></td></tr><tr><td>Digital camera</td><td>Sony</td><td>DSC-TX7</td><td><a href="http://www.store.sony.com">www.store.sony.com</a></td></tr><tr><td>Fine forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td></td><td><a href="http://www.finescience.com">www.finescience.com</a></td></tr><tr><td>Polycarbonate cylinder (drop tube)</td><td>McMaster-Carr</td><td>8585K62</td><td><a href="http://www.mcmaster.com">www.mcmaster.com</a></td></tr><tr><td>Flight cylinder (acrylic)</td><td>McMaster-Carr</td><td>8486K943</td><td><a href="http://www.mcmaster.com">www.mcmaster.com</a></td></tr><tr><td>Polycarbonate sheets</td><td>McMaster-Carr</td><td>85585K25</td><td><a href="http://www.mcmaster.com">www.mcmaster.com</a></td></tr><tr><td>ring stand (2x)</td><td>Fisher Scientific</td><td>S47808</td><td><a href="http://www.fishersci.com">www.fishersci.com</a></td></tr><tr><td>Ring support</td><td>Fisher Scientific</td><td>S47791</td><td><a href="http://www.fishersci.com">www.fishersci.com</a></td></tr><tr><td>Three-prong extension clamps (x2)</td><td>Fisher Scientific</td><td>05-769-7Q</td><td><a href="http://www.fishersci.com">www.fishersci.com</a></td></tr><tr><td>Funnel</td><td>Fisher Scientific</td><td>10-500-3</td><td><a href="http://www.fishersci.com">www.fishersci.com</a></td></tr><tr><td>chain clamps (2x)</td><td>VWR</td><td>21573-275</td><td><a href="http://www.vwr.com">www.vwr.com</a></td></tr><tr><td>Glass vials</td><td>VWR</td><td>66020-198</td><td><a href="http://www.vwr.com/">www.vwr.com</a></td></tr></tbody></table>

een verbeterde methode voor nauwkeurige en snelle meting van vliegprestaties in<em&gt; drosophila</em

An Improved Method for Accurate and Rapid Measurement of Flight Performance in Drosophila

Drosophila heeft bewezen een bruikbaar model systeem voor de analyse van het gedrag, met inbegrip van de vlucht zijn. De eerste vlucht tester betrokken dropping vliegt in een geoliede maatcilinder; landing hoogte aanwezig is een maat voor de vliegprestaties door het beoordelen hoe ver vliegen zal vallen voordat het produceren van voldoende stuwkracht om contact met de wand van de cilinder te maken. Hier beschrijven we een bijgewerkte versie van de vlucht tester met vier belangrijke verbeteringen. Eerst voegden we een &quot;drop tube&quot; zodat alle vliegen alstublieft de cilinder vlucht op een vergelijkbare snelheid tussen processen, waardoor variabiliteit tussen gebruikers. Ten tweede, we vervangen de olie coating met uitneembare kunststof platen bekleed in Tangle-Trap, een lijm ontwikkeld om levende insecten vangen. Ten derde gebruiken we een langere cilinder om meer accurate discriminatie vlucht vermogen mogelijk te maken. Vierde gebruiken we een digitale camera en imaging software om het scoren van vliegprestaties automatiseren. Deze verbeteringen zorgen voor de rapid, kwantitatieve beoordeling van vlieggedrag, handig voor grote datasets en grootschalige genetische screens.

<html> Figuur 1A toont een schema van de bijgewerkte vlucht tester montage. Figuur 1B illustreert het spoor ontwerp laat de camera een panoramisch beeld te nemen zonder het blokkeren van het gezichtsveld. Representatieve resultaten worden getoond in Figuur 2, waar de prestaties van slowpoke mutantvliegen, die een bekende vlucht defect 8-10 hebben vlucht, vergeleken met wildtype Canton-S vliegt. Controle vliegt vaste land nabij de bovenkant va...

Hier beschrijven we een methode voor een snelle en nauwkeurige meting van vliegprestaties in Drosophila, waardoor high-throughput screening.

Een verbeterde methode voor nauwkeurige en snelle meting van Vliegprestaties in<em&gt; Drosophila</em

Drosophila has proven to be a useful model system for analysis of behavior, including flight. The initial flight tester involved dropping flies into an ...

Het algemene doel van deze procedure is om de vliegprestaties bij Drosophila snel en nauwkeurig te meten. Dit wordt bereikt door vliegen eerst in een vliegcilinder te laten vallen. De tweede stap van de procedure is het vastleggen van het landingsvlak met een digitale camera.De laatste stap is het analyseren van de gegevens met behulp van beeldsbehandelingssoftware door de landingshoogte van elke vlieg te meten. Uiteindelijk helpt deze procedure bij het identificeren van mutaties en aandoeningen zoals veroudering of neurodegeneratie, die het vliegvermogen belemmeren, en helpt het bij het kwantificeren van de vliegprestaties. Het belangrijkste voordeel van deze techniek ten opzichte van bestaande methoden, zoals de oorspronkelijke vliegtester, is dat deze geschikter is voor high-throughput screenings van mutanten en andere condities die het vliegen belemmeren.We kwamen voor het eerst op het idee voor deze methode toen we beseften hoeveel tijd het kostte om een groot aantal genotypen te testen met de oorspronkelijke vluchttester. Bevestig de vluchtcilinder aan een statief met behulp van klemmen. Laat ongeveer drie centimeter ruimte onder de cilinder vrij voor de weegschaal.Vul de wegschaal met een dunne laag minerale olie en schuif deze onder de vliegcilinder. Bevestig de trechter aan een tweede statief. Pas de hoogte van de trechter aan zodat de onderkant van de trechter gelijk ligt met de bovenkant van de vliegcilinder.Het smalste gedeelte van de trechter moet smaller zijn dan een vliegenflacon. De diameter van de valbuis moet iets groter zijn dan een vliegenflacon, zodat de flacon vrij naar beneden kan vallen. Plaats de valbuis in de bovenkant van de trechter en zet deze vast met een drieklauwklem.Snijd vervolgens uit een polyacrylamidevel een rechthoekig stuk met de lengte van de vliegcilinder en een breedte die iets kleiner is dan de binnenomtrek van de vliegcilinder. Breng een dunne laag tangle trap-lijm aan op het vel, waarbij aan de boven- en onderzijde voldoende ruimte onbehandeld blijft omHet vel vast te kunnen houden. Nadat de lijm op het vel een uur heeft kunnen drogen, schuift u het vel met de lijmzijde naar binnen in de vliegcilinder.Zet vervolgens de camerabaan in elkaar met behulp van steunbeugels van dennenhout. Zorg ervoor dat de onderkant van de baan de camera kan ondersteunen zonder de lens te blokkeren. Schroef daarna de stoppers vast op posities waar ze het zicht van de camera op het plastic vel niet belemmeren.Verzamel vliegen in vials voor testen, met maximaal 20 vliegen per vial. Tik de vliegen voorzichtig naar de bodem van de vial. Verwijder de stop van de vial en plaats deze in de druppelbuis.Laat het flacon los. Wanneer het flacon de wanden van de vernauwende trechter raakt, worden de vliegen in de vliegcilinder geworpen. Til de valbuis op om het lege flacon te verwijderen en voeg indien gewenst meer vliegen toe.Tot 200 vliegen uit 10 vials kunnen eenvoudig worden getest en afgebeeld op een enkele polyacrylamideplaat. Verwijder nu de plastic plaat en plaats deze op een vlak, wit oppervlak; een wit posterkarton kan worden gebruikt als de werkbladen donker gekleurd zijn. Monteer de camerabaan boven de plastic plaat.De camera moet voldoende hoog boven het vel bevindt om zowel de boven- als de onderkant van het vel in het gezichtsveld te hebben. Schuif de camera langs de rail terwijl u de opnameknop ingedrukt houdt om een panoramabeeld te verkrijgen. Het aantal vliegen dat in de olie in de schaal onder de vliegkamer landt, kan handmatig worden geteld.Voor elke test tussen de herhalingen door kunnen de vliegen van het vel worden verwijderd en kan het vel opnieuw worden gebruikt. Open de afbeeldingsbestanden in ImageJ-software en snijd de afbeeldingen indien nodig bij zodat alleen het landingsvlak zichtbaar is. Het gebied dat is gecoat met de entangle-val.Zet de afbeeldingen om naar grijswaarden van acht bits en maak een drempelwaarde aan om de witte achtergrond weg te filteren. Stel de parameters zo in dat elke vlieg kan worden geïdentificeerd.Definieer de parameters via het menu analyze particles. Dit wordt gebruikt om een partikel te identificeren met behulp van de demonstratieopstelling. Een oppervlakte van 5 tot 90 pixels² en een circulariteit van 0,4 tot 1,0 zullen alle monsters nauwkeurig identificeren.Meet nu de positie van elke vlieg met behulp van de gegenereerde lijst met coördinaten voor elk deeltje. De X-coördinaat in pixels kan worden omgezet naar centimeters. Importeer de tabel in een spreadsheet om de landingshoogte te berekenen en ga vervolgens over tot de analyse.De vliegprestaties van slow poke mutantenvliegen, die een bekend vliegdefect hebben, werden vergeleken met wild type canton s vliegen. Alle vliegen waren drie dagen oud en werden opgekweekt bij kamertemperatuur; de controlevliegen landden consistent nabij de bovenkant van de cilinder. De spreiding van de landing was veel groter bij de slow poke mutanten.De gemiddelde landingshoogte voor cantons was met 73 centimeter significant groter dan die van slow poke-mutanten met 44 centimeter. Na deze procedure kunnen aanvullende methoden, zoals histologie, worden gebruikt om verdere vragen te beantwoorden over de structurele integriteit van vliegspieren, motorische neuronen of neuromusculaire juncties. Na het bekijken van deze video zou u een goed begrip moeten hebben van hoe u de vliegprestaties in oph snel kunt beoordelen.

an-improved-method-for-accurate-rapid-measurement-flight-performance

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

De studie van complexe locomotorisch gedrag...

Hoge-resolutie video-Tracking van Locomotion in Adult Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster is een genetisch en gedragsmatig soepel model systeem dat is gebruikt om de moleculaire en cellulaire basis van een groot aantal belangrijke biologische processen meer dan een eeuw een begrip. Drosophila goed is benut om inzicht te krijgen in de genetische basis van vlieg gedrag.

Methoden om Assay Drosophila Gedrag

Deze video beschrijft het Drosophila activity monitor (DAM) systeem dat wordt gebruikt om de motorische activiteit te volgen. Onderzoekers gebruiken activiteitsgegevens verzameld van de DAM om circadiaanse ritmes bij fruitvliegen te bestuderen. De aanbevolen protocolclip laat zien hoe u vliegen in het apparaat laadt en activiteitsgegevens opneemt voor circadiane experimenten.

Drosophila Activity Monitor (DAM): een methode om de motorische activiteit bij vliegen te meten

Drosophila melanogaster zijn nuttig bij het ​​bestuderen van genetische of ecologische manipulaties die gedrag zoals spontane motorische activiteit beïnvloeden. Hier beschrijven we een protocol dat monitoren met infrarood stralen en data analyse software om spontane bewegingsactiviteit kwantificeren gebruikt.

Bepaling van de Spontane bewegingsactiviteit in<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Met behulp van een webcam en een combinatie van gratis en goedkope software programma's, kan locomotief patronen in Drosophila melanogaster worden geanalyseerd om verschillen in de snelheid, afstand en tijd van de verschillende motorische activiteiten op te sporen.

Een Low-cost methode voor het analyseren van de inbeslagneming-achtige activiteit en beweging in<em&gt; Drosophila</em

Metabole stoornissen behoren tot een van de meest voorkomende ziekten bij mensen. De genetisch handelbaar modelorganisme D. melanogaster kan worden gebruikt om nieuwe genen te identificeren die metabolisme regelen. Dit artikel beschrijft een relatief eenvoudige methode die het mogelijk maakt het bestuderen van de stofwisseling in vliegen door het meten van hun CO 2-productie.

Meting van Metabolic Rate in<em&gt; Drosophila</em&gt; Gebruik respirometrietest

Eenvoudige tests voor het meten van ethanolgevoeligheid en snelle tolerantie bij Drosophila vergemakkelijken het gebruik van dit modelorganisme voor het onderzoeken van deze belangrijke ethanol-gerelateerde gedragingen. Hier wordt een relatief eenvoudige, schaalbare test beschreven voor het meten van ethanolgevoeligheid en snelle tolerantie bij vliegen.

Een goedkope, Scalable Behavioral Test voor het meten Ethanol Sedatie Gevoeligheid en Rapid Tolerantie in<em&gt; Drosophila</em

Dit stapsgewijze protocol analyseert Drosophila negatieve geotaxis gedrag met behulp van een geautomatiseerd systeem van meerdere cilinders die honderden vliegen en synchroniseert hun optreden door een elektromotor. Bij synchronisatie, is vliegen negatieve geotaxis gedrag vehiculumcontrolegroep, digitaal opgenomen en geanalyseerd met behulp van de zelf ontworpen RflyDetection software.

Een geautomatiseerde snelle iteratieve negatieve Geotaxis Assay voor het analyseren van volwassen klimmen gedrag in een Drosophila Model van neurodegeneratie

Hier presenteren we een protocol om automatisch te bepalen door de motorische prestaties van Drosophila op het veranderen van temperatuur met behulp van een programmeerbare temperatuurgevoelig arena die snelle en nauwkeurige temperatuurveranderingen in tijd en ruimte produceert.

Een automatische methode om te bepalen van de prestaties van Drosophila in antwoord op temperatuurveranderingen in ruimte en tijd

De huidige methoden om de alcoholgevoeligheid in Drosophila te meten zijn ontworpen om groepen vliegen te testen. We presenteren een eenvoudige, goedkope, hoge doorvoer test voor de beoordeling van alcohol sedatie gevoeligheid in grote aantallen enkele vliegen. De methode vereist geen gespecialiseerde gereedschappen en kan worden uitgevoerd in elk laboratorium met behulp van gemeenschappelijke materialen.

High-Throughput Methode voor het meten van alcohol sedatie tijd van individuele Drosophila melanogaster

Het huidige protocol beoordeelt de locomotorische activiteit van Drosophila door de beweging van vliegen in een handgemaakte arena te volgen en te analyseren met behulp van open-source software Fiji, compatibel met plug-ins om pixels van elk frame te segmenteren op basis van high-definition video-opname om parameters van snelheid, afstand, enz. Te berekenen.

Een eenvoudige techniek om locomotorische activiteit in Drosophila te testen

Leer een verbeterde methode voor het meten van vliegprestaties in Drosophila met behulp van een vluchtcilinder en digitale beeldanalyse. Deze techniek maakt snelle, nauwkeurige screening van mutaties en neurodegeneratie mogelijk.

Een verbeterde methode voor nauwkeurige en snelle meting van Vliegprestaties in

Meer video's verkennen