Name: Evaluatie van de vaatfunctie bij patiënten met chronische nierziekte (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-06-16T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 50 s
Description: Leer hoe vasculaire functie bij patiënten met chronische nierziekte wordt geëvalueerd met behulp van flow-mediated dilatatie en pulsgolf-snelheidsmetingen. Deze methode helpt onderzoekers endotheelfunctie en arteriële stijfheid in vivo te bestuderen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

De auteurs danken Nina Bispham voor haar technische bijstand. Dit werk werd ondersteund door de American Heart Association (12POST11920023), en de NIH (K23DK088833, K23DK087859).

Dit protocol volgt de richtlijnen van de Colorado Multiple Institutional Review Board (COMIRB). 1. Voorbereiding voor testsessie <ol><li> Deelnemers moeten deze beperkingen volgen voor de meeste nauwkeurige metingen: 12 uur snel uit voedsel en cafeïne, 12 uur terughoudendheid uit te oefenen, 12 uur terughoudendheid van roken, indien van toepassing,&gt; 4 halfwaardetijd terughoudendheid van medicijnen indien mogelijk (misschien niet haalbaar in een bevolking, zoals patiënten CKD), en pre-menopauzale vrouwen moeten worden getest in dagen 1-7 van de menstruele cyclus van hormonale invloeden te minimaliseren. </li><li> Bereid 500 ml dissociatie buffer door toevoeging van 2 ml 0,5 M ethyleendiaminetetra-azijnzuur (EDTA), 0,05 g heparine (180 USP eenheden / mg) en 2,5 g runderserumalbumine tot 476,8 ml met fosfaat gebufferde zoutoplossing (PBS) en pH van 7,4. Dit kan worden opgeslagen bij 4 ° C gedurende enkele maanden. </li><li> Zet op echografie, computer, en de niet-invasieve hemodynamischeWorkstation (NIHem; arteriële stijfheid apparatuur). Sluit de kabels uitvoeren van de echo op de computer R-top trekker doos. </li></ol> 2. Verzamelen en verwerken van vasculaire endotheelcellen <ol><li> Een getrainde verpleegkundige of arts voert de collectie (stappen 2.2-2.5, 2.7) en een onderzoeker verzamelt en verwerkt de draden (stappen 2.6, 2,8-2,19) </li><li> Prep de antecubitale site met een actueel antiseptische, een tourniquet toepassen, lokaliseren ader, en canule met een 18 G katheter. Plaats een heplock adapter op het uiteinde van de IV. </li><li> Trek steriele handschoenen en zet steriele gefenestreerde gordijnen op de site. </li><li> Plaats 2 J-draden op de gordijnen. Trek de boog van de &quot;J&quot; naar de &quot;J&quot;-vorm afwikkelen van beide draden. </li><li> Haal het beschermkapje van de heplock en voeden J-draad in de ader van ongeveer 8 cm. Druk heen en weer een paar keer voordat het verwijderen van de draad. Vermijd grove bloed op de draad. </li><li> Gebruik kniptang om de draden te knippen, zodat ze passen in een50 ml conische buis met ~ 30 ml dissociatie buffer </li><li> Herhaal stap 2.5 voor de tweede draad. </li><li> Herhaal stap 2.6 voor de tweede draad. Terug buis nat laboratorium. </li><li> Pak de draden met een pincet en houd de draden binnenzijde van de buis, maar boven de oplossing. Gedurende 10 minuten, gebruik een gemotoriseerde pipetter herhaaldelijk verzamelen de dissociatie buffer van de 50 ml conische buis en laat hem dus het loopt over de lengte van de draden te spoelen en trillen de draden, dan schud het overtollige vocht van de draden in de buis. </li><li> Centrifugeer gedurende 7 minuten bij 400 xg en 4 ° C. </li><li> Bereid de formaldehyde-oplossing in folie bedekt buis door het combineren van 100 ml formaldehyde-oplossing + 900 ml PBS. </li><li> Verwijder langzaam tube van centrifuge, zet de vacuümpomp, plaats een pipet tip over einde van zuigslang en laat ~ 400 ml in de buis, stofzuigen van de rest zonder de pellet te verstoren. </li><li> Dek af met folie en pipet 1 ml formaldehyde-oplossing inde buis om het monster op te lossen. Niet opnieuw in suspensie. Incubeer gedurende 10 minuten bij kamertemperatuur. </li><li> Bereid 8 dia&#39;s door middel van etikettering met onderwerp en studiebezoek informatie en het trekken van een ovaal op elk glaasje met een pap pen. </li><li> Voeg 15 ml PBS, resuspendeer en centrifugeer gedurende 5 minuten bij 400 xg en 4 ° C. </li><li> Herhaal stap 2.15, voeg 12 ml PBS, resuspendeer en centrifugeer gedurende 6 minuten bij 400 xg en 4 ° C. </li><li> Verwijder langzaam tube van centrifuge, zet de vacuümpomp, plaats een pipet tip over einde van zuigslang en laat ~ 2 ml in de buis, stofzuigen van de rest zonder de pellet te verstoren. </li><li> Resuspendeer en pipet gelijkmatig over de 8 dia&#39;s in de ovale gebieden. </li><li> Plaats in incubator bij 37 ° C gedurende 5 uur en bewaar bij -80 ° C tot aan analyse (monsters goed voor vele jaren). </li></ol> 3. Beoordeling van MKZ BA en aPWV <ol><li> Heb onderzoeksonderwerp veranderen in besteedbaar shorts en hebben him / haar plat achterover liggen in een rustige, afm, klimaat gecontroleerde ruimte. </li><li> Plaats het juiste aantal ECG voor de specifieke ultrageluid en arteriële stijfheid apparaat (de procedure wordt de niet-invasieve hemodynamische Workstation [NIHem] arteriële stijfheid, die 4 elektroden vereist meten) en bloeddrukmanchet op onderwerp. </li><li> Na 20 min, beginnen bloeddrukmetingen. Voer minstens 3, en herhaal tot metingen zijn binnen 5 mmHg, rust 2 min. tussen elke meting. </li><li> Begin tonometrie door palpatie van de arteria brachialis puls en het plaatsen van de tonometer naar brachialis golfvormen opnemen met behulp van het softwareprogramma. </li><li> Herhaal dit voor de radiale, dijbeen en halsslagaders. </li><li> Meet de afstand tot elk van deze sites uit de supersternal inkeping met een meetlint (brachialis, radiale en carotis) en aangepaste heerser / remklauw (dijbeen). </li><li> Bereken carotis-brachialis, carotis-radiale en carotis-femorale (aPWV) met behulp van het softwareprogramma. </li><li> Plaatsonderarm bloeddruk manchet net distaal van het olecranon proces en opnemen ten minste 10 cardiale cycli van de uitgangssituatie armslagader echobeelden en snelheid van de bloedstroom metingen, met een vasculaire software ingesteld op modus te activeren. Een mechanische arm kan worden gebruikt om de ultrasone sonde stabiliseren indien gewenst. </li><li> Blaas onderarm bloeddrukmanchet tot 250 mmHg en beginnen timer. Instrueer deelnemer heel stil blijven. </li><li> Begin opname snelheden met een vasculaire software ingesteld op modus activeren wanneer de timer leest 04:45. Trigger laat de manchet om 5:00 en verander de ultrageluid om B-mode (diameter) beelden op te nemen als de klok luidt 05:10. </li><li> Doorgaan met opnemen tot de klok luidt 07:00. </li><li> Record minstens 10 cardiale cycli van de uitgangssituatie armslagader ultrasound beelden met een vasculaire software ingesteld op modus te activeren. </li><li> Neem bloeddruk onderwerp. Als systolische bloeddruk&gt; 100 mmHg, plaatst 0,4 mg sublinguaal nitroglycerine onder het onderwerp &amp;# 39; s tong en beginnen met timer, tenzij de patiënt heeft nog een contra-indicatie. </li><li> Begin met het opnemen B-mode (beelden diameter) als de klok luidt 03:00 met de vasculaire software ingesteld op de modus te activeren. </li><li> Stoppen met opnemen als de klok luidt 08:00. </li><li> Monitor bloeddruk tot het terugkeert naar de uitgangswaarde </li></ol> 4. Voorbereiden van humane navelstreng endotheelcellen (HUVEC) controleglaasjes <ol><li> Grow HUVECs om doorgang 5-6 en ~ 80% confluentie. </li><li> Trypsinize met 3 ml trypsine of wat noodzakelijk is voor de schotel / kolf. </li><li> Neutraliseer trypsine met een gelijk volume van trypsine neutraliserende oplossing. </li><li> Centrifugeer bij 200 xg gedurende ~ 5 minuten en verwijder trypsine en neutraliserende oplossing vacuüm. </li><li> Resuspendeer in ~ 10 ml PBS te wassen. </li><li> Centrifugeer bij 200 xg ~ 5 minuten. Verwijder PBS. </li><li> Verwijder de PBS en vast te stellen in 1800 pi PBS + 200 pi formaldehyde. </li><li> Resuspendeer in PBS (~ 10 ml). </li><li> Centrifugeer bij 200 xg ~5 min. Verwijder PBS, resuspendeer in een geschikt volume -200 pl per dia. </li><li> Store glijbanen bij -80 ° C tot klaar voor analyse (monsters zal goed voor vele jaren). </li></ol> Kleuring van vasculaire endotheelcellen 5. <ol><li> Neem schuift uit -80 ° C vriezer en wacht 5 minuten bij kamertemperatuur (deze procedure is voor een partij van 10 dia&#39;s, waaronder een HUVEC controle dia). </li><li> Veeg overtollig water met een delicate opdracht veeg (denk centrum van dia niet aanraken). </li><li> Re-hydrateren de dia&#39;s door het toevoegen van veranderde PBS aan elke dia en laat ze gedurende 10 minuten. </li><li> Terwijl de dia&#39;s staan, bereiden 5% ezel serum en andere oplossingen. <ol><li> Bereid 5% ezel serum door toevoeging van 300 pi serum ezel 5.700 gl veranderde PBS (tot pH 7,4) gedurende 10 slides (verhoging dit bedrag meer). </li><li> Verdun het primaire antilichaam van belang in 1000 ui 5% serum. Bijvoorbeeld, nitrotyrosine en NADPHoxidase (1:300 en 1:1,500) worden gebruikt als markers van oxidatieve stress. </li><li> Bereid secundaire AF568 door het verdunnen van 5 ul van AF568 tot 1500 μll van 5% serum. </li><li> Bereid VE cadherine door het verdunnen van 2 ui VE cadherine tot 1000 ul 5% serum. </li><li> Bereid AF488 door verdunnen 5 pl VE cadherine tot 1000 ul 5% serum. </li><li> Houd AF568, VE cadherine en AF488 onder folie door het hele proces en plaats dan op rocker in 4 ° C koelkast tijdens de voorbereiding glijbanen. </li></ol></li><li> Na 10 min van rehydratie, droge dia&#39;s met een delicate taak vegen. </li><li> Voeg 5% ezel serum gedurende 60 minuten en leg een stuk plastic paraffine folie over het omcirkelde gebied om volledige dekking van de chemische waarborgen. </li><li> Gooi de plastic paraffine film en droge dia&#39;s met een delicate taak te vegen. Niet wasbaar. Voeg primair antilichaam gedurende 60 minuten en leg een stuk plastic paraffine folie over het omcirkelde gebied om ervoor te zorgenvolledige dekking van de chemische stof. </li><li> Gooi de plastic paraffine film, spoelen met gewijzigde PBS uit spuit fles en genieten in dia kolommen voor 5 minuten. Terwijl de dia&#39;s worden weken, zet ze in een donkere kamer. Werken in het donker voor alle overige stappen. </li><li> Droge dia&#39;s met Kimwipes, voeg AF568 (secundair antilichaam) gedurende 45 minuten en leg een stuk plastic paraffine folie over het omcirkelde gebied om volledige dekking van de chemische waarborgen. Dekken tegen licht. </li><li> Gooi de plastic paraffine film in de biologisch gevaarlijk afval container. Spoel met gewijzigde PBS uit spuit fles, en dan genieten in kolommen voor 5 minuten. </li><li> Droge dia&#39;s met Kimwipes, voeg dan VE Cadherine gedurende 60 minuten en leg een stuk plastic paraffine folie over het omcirkelde gebied om volledige dekking van de chemische waarborgen. Dekken tegen licht. </li><li> Gooi de plastic paraffine film in de biologisch gevaarlijk afval container. Spoel met gewijzigde PBS uit spuit fles, en dan genieten in kolommen voor 5 minuten. </li><li> Droge dia&#39;s meteen delicate taak vegen, voeg AF488 30 minuten en leg een stuk plastic paraffine folie over het omcirkelde gebied om volledige dekking van de chemische waarborgen. Dekken tegen licht. </li><li> Gooi de plastic paraffine film in de biologisch gevaarlijk afval container. Spoel met gewijzigde PBS uit spuit fles, en dan genieten in kolommen voor 5 minuten. </li><li> Droge dia&#39;s met een delicate taak af te vegen en laat dia&#39;s drogen gedurende 20 minuten. Dekken tegen licht. </li><li> Voeg een druppel alleen van fluoroshield montage medium met 4 &#39;, 6-diamidino-2-fenylindool hydrochloride (DAPI) aan elke dia en elk met een dekglas. </li><li> Plaats de glaasjes in 4 ° C koelkast afgedekt met folie. Imaging moet worden voltooid binnen 48 uur. </li></ol> 6. Beeldvorming en-analyse van de vasculaire endotheliale cellen <ol><li> Bereid microscoop voor beeldvorming lood endotheelcellen volgens de specificaties van de specifieke microscoop. Een eenzijdig blinde technicus moet een bepaald eiwit te analyseren voor een vleermuisch van cellen. </li><li> Scannen dia&#39;s systematisch. Identificeer endotheelcellen door positieve kleuring voor VE Cadherine en bevestig nucleaire integriteit door positieve kleuring voor DAPI. </li><li> Afbeelding 30 cellen per glijbaan voor latere analyse. Herhaal dit voor elke dia in het gebrandschilderde partij, met inbegrip van de HUVEC. </li><li> Analyseer de intensiteit van de kleuring van het primaire antilichaam van belang met een kwalitatieve software. </li><li> Om de mogelijke verstorende effect van verschillen in intensiteit kleuring verschillende kleuring sessies verslag waarden verhouding van eiwitexpressie in de verzamelde endotheelcellen hetzelfde eiwit expressie in de HUVEC minimaliseren. </li></ol>

De auteurs verklaren dat zij geen concurrerende financiële belangen.

Het verkrijgen van nauwkeurige resultaten voor MKZ BA en aPWV vereist het verwerven van ultrasound beelden van uitstekende kwaliteit en de druk golfvormen, respectievelijk. Centraal in dit passend en voortgezette opleiding en het gebruik van elke techniek door de exploitant 44. Bovendien is het essentieel om controle zo veel externe variabelen die de resultaten mogelijk kunnen beïnvloeden door normalisatie van de testsessie (bijv. eerdere 12 uur vasten, klimaatkamer, enz.) 44...

Chronische nierziekte (CKD) is een belangrijk probleem voor de volksgezondheid dat epidemische proporties heeft bereikt, waaraan ongeveer 11,5% van de bevolking in de Verenigde Staten alleen 1. Het risico van cardiovasculaire dood of cardiovasculaire gebeurtenis bij patiënten met CKD aanzienlijk verhoogd vergeleken met de algemene bevolking 2-4. Hoewel patiënten met CKD vertonen een hoge prevalentie van traditionele cardiovasculaire risicofactoren, dit verklaart slechts een deel van hun verhoogde incidentie van hart-en vaatziekten (HVZ) 5. Vasculaire disfunctie is een belangrijke niet-traditionele cardiovasculaire risicofactor steeds meer erkenning op het gebied van nefrologie 6-9. Hoewel veel veranderingen waarschijnlijk bijdragen tot de ontwikkeling van arteriële disfunctie onder de meest zorgwekkende zijn de ontwikkeling van vasculaire endotheliale dysfunctie, meestal beoordeeld als verminderde endotheel-afhankelijke dilatatie (EDD) en verstijving van de large elastische slagaders 10. Verschillende technieken bestaan ​​om EDD en grote elastische slagader stijfheid te beoordelen, maar de meest gebruikte zijn armslagader flow-gemedieerde dilatatie MKZ BA en aorta pulse wave velocity (aPWV), respectievelijk. Een andere veel gebruikte techniek om EDD beoordelen meet onderarm doorbloeding farmacologische middelen zoals acetylcholine middels veneuze occlusie plethysmografie 11,12. Echter, deze methode vereist catheterisatie van de arteria brachialis, dat is meer invasief dan MKZ BA en kan worden gecontra-indiceerd bij patiënten met CKD. Een alternatieve techniek om arteriële stijfheid evalueren is aan de locale arteriële compliantie (het omgekeerde van stijfheid) van de halsslagader te meten, hoewel dit niet zo veel gebruikt of gevalideerd met klinische eindpunten aPWV 13. Patiënten met CKD tonen zowel een gestoorde MKZ BA 14-16 en verhoogde aorta pulse wave velocity aPWV 13,17,18, zelfs voorafgaand aan dialyse nodig. Belangrijk vanuit een klinisch oogpunt, beide invasieve maatregelen van vasculaire dysfunctie onafhankelijke voorspellers van toekomstige cardiovasculaire gebeurtenissen en mortaliteit zowel bij patiënten met CKD 19-21, alsmede in andere populaties 22-26. Deze technieken kunnen worden toegepast voor het bestuderen van verschillende populaties risico op CVD, waaronder patiënten met CKD. De exacte mechanismen waardoor arteriële disfunctie ontwikkelt in CKD zijn onvolledig begrepen; echter verminderde stikstofoxide (NO) biobeschikbaarheid is kritisch medewerker 27-30 en een gemeenschappelijk mechanisme van zowel verminderde EDD en verhoogde arteriële stijfheid 10,31. In CKD, is oxidatieve stress verhoogd en draagt ​​bij aan de vermindering van NOx biologische beschikbaarheid 32-34. Oxidatieve stress wordt gedefinieerd als overmatige biobeschikbaarheid van reactive oxygen species (ROS) ten opzichte van de antioxidante verdedigingsmechanismen. Fysiologische stimuli, incLuding inflammatoire signalering promoten oxidant enzymsystemen produceren ROS, zoals superoxide anion (O 2 ● -) (bijvoorbeeld de oxidant enzym NADPH oxidase.) 35. De productie van superoxide leidt uiteindelijk tot minder biologische beschikbaarheid van stikstofoxide (NO). Erosie biobeschikbaarheid kunnen op hun beurt bijdragen aan de ontwikkeling van CKD, zoals endotheliale dysfunctie is een onafhankelijke voorspeller van incident CKD 36. Dit is consistent met diergegevens aangeeft dat eNOS remming induceert hypertensie (systemische en glomerulaire), glomerulaire ischemie, glomerulosclerose en tubulo-interstitiële schade 37. Inderdaad, verminderde NO biobeschikbaarheid lijkt noodzakelijk voor de ontwikkeling en progressie van experimentele nierziekte die ziekte bij de mens nabootst, hetgeen duidt op een belangrijke rol voor het disfunctioneren van het endotheel in de menselijke CKD 38,39. Markers van vasculaire oxidatieve stress kan worden beoordeeld in vascular endotheelcellen verzameld uit menselijke proefpersonen, met behulp van een techniek die oorspronkelijk ontwikkeld door Colombo et al.. 40 en gewijzigd Seals et al. 41-43. Met behulp van 2 steriele J-draden, worden de cellen verzameld uit de antecubitale ader, teruggewonnen, vaste, en later positief geïdentificeerd als endotheelcellen en voor de expressie van eiwitten van belang met behulp van immunofluorescentie geanalyseerd. Wij bieden hier een bespreking van deze methodologie die gebruikt kan worden om a) maatregel MKZ BA; b) meten aPWV; c) meten vasculaire endotheliale cel eiwit expressie van markers van oxidatieve stress. De focus ligt op patiënten met CKD, niet die chronische dialyse.

<table><tbody><tr><td>J-draad</td><td>St. Jude</td><td>404584</td><td>2 per collectie</td></tr><tr><td>Wegwerp korte broek (MediShorts)</td><td>Quick Medical</td><td>4507</td><td></td></tr><tr><td>Niet-invasieve hemodynamische werkstation (NIHem)</td><td>Cardiovascualr Engineering</td><td>N/A</td><td>Bevat een aangepaste liniaal.  Een alternatief systeem is de Sphygmocor</td></tr><tr><td>Ultrasound</td><td>G.E.</td><td>Model: Vivid7 Dimension</td><td>We gebruiken een G.E., maar er zijn veel bedrijven en modellen</td></tr><tr><td>Vasculaire software (Vascular Imager)&nbsp;</td><td>Medical Imaging Applications</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>R-golf trigger box</td><td>Medical Imaging Applications</td><td>N/A</td><td>op maat gemaakt</td></tr><tr><td>Rapid Cuff Inflation System</td><td>Hokanson</td><td>Model: Hokanson E20</td><td></td></tr><tr><td>Onderarm bloeddrukmanchet</td><td>Hokanson</td><td>N/A</td><td>aangepaste manchet met 6,5 x 34 cm blaas </td></tr><tr><td>HUVECs</td><td>Invitrogren</td><td>C-015-5C</td><td></td></tr><tr><td>Ezelsserum</td><td>Jackson</td><td>017-000-121</td><td></td></tr><tr><td>Pap pen</td><td>Research Products International</td><td>195505</td><td></td></tr><tr><td>VE Cadherin</td><td>Abcam</td><td>ab33168</td><td></td></tr><tr><td>AF568</td><td>Life Technologies</td><td>A11011</td><td>afhankelijk van de specificaties van microscpe </td></tr><tr><td>AF488</td><td>Life Technologies</td><td>A11034</td><td>afhankelijk van de specificaties van microscpe </td></tr><tr><td>Nitrotyrosine antilichaam </td><td>Abcam</td><td>ab7048</td><td></td></tr><tr><td>NADPH oxidase antilichaam</td><td>Upstate</td><td>07-001</td><td></td></tr><tr><td>DAPI </td><td>Vector</td><td>H-1200</td><td></td></tr><tr><td>Delicaat taakdoekje (Kimwipe) </td><td>Fisher Scientific</td><td>06-666-A</td><td></td></tr><tr><td>Kunststof paraffine film (parafilm) </td><td>Fisher Scientific</td><td>13-374-10</td><td></td></tr><tr><td>Confocale microscoop </td><td>Olympus</td><td>Model: FV1000 FCS/RICS</td><td>er bestaan veel opties </td></tr></tbody></table>

evaluatie van de vaatfunctie bij patiënten met chronische nierziekte

Assessment of Vascular Function in Patients With Chronic Kidney Disease

Patiënten met chronische nierziekte (CKD) hebben significant verhoogd risico op hart-en vaatziekten (HVZ) in vergelijking met de algemene bevolking, en dit is slechts gedeeltelijk te verklaren door de traditionele CVD risicofactoren. Vasculaire disfunctie is een belangrijke niet-traditionele risicofactor, gekenmerkt door vasculaire endotheliale dysfunctie (meestal beoordeeld als verminderde endotheel-afhankelijke dilatatie [EDD]) en verstijving van de grote elastische arteriën. Terwijl verschillende technieken bestaan ​​om EDD en grote elastische slagader stijfheid, beoordeelt de meest gebruikte zijn armslagader flow-gemedieerde dilatatie (MKZ BA) en aorta pulse wave velocity (aPWV), respectievelijk. Beide invasieve maatregelen van vasculaire dysfunctie onafhankelijke voorspellers van toekomstige cardiovasculaire gebeurtenissen bij patiënten met en zonder nierziekte. Patiënten met CKD tonen zowel een verminderde MKZ BA, en verhoogde aPWV. Hoewel de exacte mechanismen die vasculaire dysfunctie devesnoeit in CKD zijn onvolledig begrepen, verhoogde oxidatieve stress en een verdere verlaging van stikstofmonoxide (NO) biobeschikbaarheid dragen in belangrijke mate. Cellulaire veranderingen oxidatieve stress kan worden beoordeeld door het verzamelen van vasculaire endotheelcellen uit de antecubitale ader en het meten van eiwitexpressie van merkers van oxidatieve stress met immunofluorescentie. Wij bieden hier een bespreking van deze methoden om MKZ BA, aPWV, en vasculaire endotheliale cel eiwit expressie te meten.

MKZ BA wordt gekwantificeerd als de piek verandering in diameter van de slagader volgende reactieve hyperemie. Aldus is de diameter in rust ten opzichte van de diameter na het einde van een 5 min bloeddrukmanchet occlusie periode (figuur 1). Een representatief ultrasone beeld van de arteria brachialis Paneel A toont en Paneel B toont een grafiek van de R-golf gated verandering in diameter van leeglopen van de manchet tot 2 minuten na, zoals verkregen met behulp van commercieel verkrijgbare so...

De mate van vasculaire dysfunctie en bij te dragen fysiologische mechanismen kunnen bij patiënten met chronische nierziekte worden beoordeeld door het meten van de arteria brachialis flow-gemedieerde dilatatie, aorta-pulse wave velocity, en vasculaire endotheliale cel eiwit expressie.

Evaluatie van de vaatfunctie bij patiënten met chronische nierziekte

Patients with chronic kidney disease (CKD) have significantly increased risk of cardiovascular disease (CVD) compared to the general population, and this ...

Het algemene doel van het volgende experiment is om de vasculaire functie bij patiënten met chronische nierziekte te beoordelen; dit wordt bereikt door eerst vasculaire endotheelcellen van patiënten te verzamelen. Vervolgens wordt de aortale polsgolfsnelheid bepaald om de stijfheid van grote elastische arteriën te meten. Daarna wordt de stroomgemedieerde dilatatie van de arteria brachialis gemeten om de vasculaire endotheelfunctie te beoordelen.Uiteindelijk kunnen resultaten worden behaald die de vasculaire endotheelfunctie karakteriseren. Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van kernvragen binnen het vasculaire vakgebied, zoals wat er op cellulair niveau gebeurt met de expressie van diverse eiwitten. Over het algemeen zullen personen die nieuw zijn met deze methode moeite hebben, aangezien uitgebreide oefening en training vereist zijn om echografie te beheersen.De procedure zal worden gedemonstreerd door Lonnie Perino, een onderzoeksassistent uit mijn laboratorium. Begin met het voorbereiden van de plek met een topisch antisepticum. Plaats vervolgens steriele geperforeerde doeken over de plek.Een getrainde verpleegkundige of arts dient een IV-lijn te plaatsen en een hep-lo

assessment-vascular-function-patients-with-chronic-kidney

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Een niet-invasieve procedure om endotheelfunctie te beoordelen wordt aangetoond met behulp van de Endo-PAT 2000.

Het beoordelen van Endotheliale vaatverwijdende functie met de Endo-PAT 2000

Capillaroscopy is een niet-invasieve, relatief goedkope methode voor het direct visualiseren van de microcirculatie. De onderarm doorbloeding techniek biedt geaccepteerde niet-invasieve metingen van endotheelfunctie.

Niet-invasieve evaluatie van microvasculaire en endotheelfunctie

Het huidige artikel beschrijft de methodologische overwegingen voor verschillende niet-invasieve beoordelingen van vasculaire functie en morfologie die vaak worden gebruikt in medisch onderzoek om verschillende stadia van atherosclerose te beoordelen.

Een methodologische aanpak van niet-invasieve Assessments van de vaatfunctie en morfologie

Dit protocol beschrijft een volledige nier werk-up die moet worden uitgevoerd in muismodellen van glomerulaire ziekte. De methoden toestaan voor gedetailleerde mechanistisch, functionele en structurele analyse van glomerulaire functie, die kan worden toegepast op alle Muismodellen van glomerulaire ziekte.

Beoordeling van de nierfunctie in muismodellen van glomerulaire ziekte

We beschrijven de evaluatie van een bepalingscoëfficiënt tussen vat en perfusiedichtheid van de parafoveale oppervlakkige capillaire plexus om de bijdrage van bloedvaten groter dan capillairen aan de perfusiedichtheid te identificeren.

Evaluatie van capillaire en andere vaatbijdrage aan maculaperfusiedichtheid gemeten met optische coherentietomografie angiografie

Dit protocol beschrijft de chirurgische stappen van murine gemeenschappelijke iliacale arterioveneuze fistelcreatie. We hebben dit model ontwikkeld om hemodialyse-toegangsgerelateerde ledemaat pathofysiologie te bestuderen.

Een muizenmodel van hemodialyse toegangsgerelateerde handdisfunctie

Point-of-care echografie (POCUS) wordt vaak gebruikt om het hemodynamische circuit te beoordelen en de aanwezigheid van veneuze congestie te detecteren. Het Venous Excess Ultrasound (VExUS) scoresysteem is ontwikkeld om clinici te helpen bij het voorspellen van de impact van veneuze congestie op orgaandisfunctie. Dit artikel heeft tot doel de beeldacquisitie en -interpretatie van VExUS te beschrijven.

Demystificerende veneuze overtollige echografie (VExUS): beeldacquisitie en interpretatie

Dit artikel presenteert een stapsgewijs protocol voor de isolatie en functionele evaluatie van menselijke renale arteriële takken, waardoor preklinische studies voor farmaceutische ontwikkeling worden vergemakkelijkt.

Microdissectie op meerdere niveaus en functioneel-structurele profilering van menselijke renale arteriële takken

De methodologie voor het verzamelen van high-density event-related mogelijke gegevens, terwijl patiënten met de ziekte van Alzheimer het uitvoeren van een erkenning van het geheugen taak is beoordeeld. Dit protocol zal onder meer afhankelijk voorbereiding, kwaliteitsborging, data-acquisitie en data-analyse.

Het onderzoeken van de Kenmerken van episodisch geheugen met behulp van Event-related potentials bij patiënten met de ziekte van Alzheimer

Spectral Karyotypering (SKY) is een geavanceerde cytogenetica techniek om genomische en chromosomale afwijkingen te identificeren. Deze techniek profiteert van chromosoom schilderkunst probes, waarmee indeling van alle chromosomen. SKY kan ook worden aangegeven complexe chromosoomafwijkingen en de segregatie defecten in muizen en mensen met diverse ziekten, waaronder polycystische nierziekte.

Spectral Karyotypering naar chromosoomafwijkingen bij mensen en muizen Studie met polycysteuze nierziekte

Leer hoe vasculaire functie bij patiënten met chronische nierziekte wordt geëvalueerd met behulp van flow-mediated dilatatie en pulsgolf-snelheidsmetingen. Deze methode helpt onderzoekers endotheelfunctie en arteriële stijfheid in vivo te bestuderen.

Evaluatie van de vaatfunctie bij patiënten met chronische nierziekte

Meer video's verkennen