Name: Hoornvlies donorweefsel Voorbereiding voor Descemet Endothelial Keratoplastie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-09-17T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 46 s
Description: Leer een gecontroleerde manuele weefseldissectie voor endotheliale keratoplastiek met veilige en herhaalbare scheiding van het Descemet-membraan. Deze methode verbetert chirurgische efficiëntie en vermindert het risico op weefselverlies.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

1 Instellen van steriele veld <ol><li> Don juiste kledij inclusief pet en masker. Draag oogbescherming wanneer in de verwerkingsruimte. </li><li> Bereid de verwerkingsruimte. Bij gebruik verwerkingsruimte handhaven continue werking van de ventilator positieve druk in de kamer te creëren. </li><li> Verzamel alle benodigdheden. Controleer vervaldata, integriteit van de verpakkingen, en sterilisatie-indicator. </li><li> Was de handen en don niet-steriele handschoenen. </li><li> Open de steriele kits een steriele voorwaarden te creëren. Bij gebruik van een verwerkingsruimte, plaatst u de kits op de tafel en aseptisch open de wraps. Niet gebruik maken van de buitenste 1 ½ cm van de wikkel als onderdeel van het steriele veld zoals dit segment steriel beschouwd. </li><li> Met behulp van aseptische techniek, open en vallen steriele artikelen op steriele veld, tenzij reeds een deel van de premade verpakking. </li><li> Verplaats microscoop zodat het boven het steriele veld Schakel lichtbron microscoop en oculairen aanpast wanneer nodig. </li><li> OBTain hoornvlies te worden gestript (in bewaring media) en de plaats naast de geprepareerde steriele verwerkingsruimte. Draai de dop van het bekijken van de kamer en laat het rusten op de top van het bekijken van de kamer basis met geen discussies bezig. Gooi niet-steriele handschoenen. </li><li> Open een paar steriele handschoenen en steriel toga met een handdoek. </li><li> Voeren chirurgische scrub. Trek steriele toga, dan steriele handschoenen. </li><li> Open instrument dozen, zodat alle leveringen zijn toegankelijk. Open vocht ondoordringbaar gordijn om het werkgebied te creëren. </li><li> Bevestig de naald met een 5 cc spuit. Met een hemostaat, bereidt de 30 G naald door een bocht 1 mm van de afschuining, en een bocht 1 mm vanaf de basis (een &quot;S&quot; vorm te vormen). </li><li> Monteer de glazen spuit voor de trypaanblauw vlek door het plaatsen van de zuiger in de spuit en vinger het aandraaien van de zuiger. Bevestig canule. </li><li> Bevestig de canule naar de gebalanceerde zoutoplossing (BSS) fles. </li><li> Scheid de trephine punch uit het vacuüm bloken zet apart. Centreer de vacuüm blok binnen het gezichtsveld van de microscoop. </li><li> Breng het vacuüm blok in beeld door het aanpassen van de microscoop instellingen. </li></ol> 2 Procedure voor donorweefsel Voorbereiding <ol><li> Til het deksel van het bekijken van de kamer met behulp van folie plein als een barrière. Met de andere hand en met behulp van een tang, zachtjes begrijpen hoornvlies door sclera RIM om hoornvlies te verwijderen. Vervang het deksel van het bekijken van de kamer. </li><li> Volledig indrukken van de zuigkracht spuit, plaats dan hoornvlies epitheel naar beneden in het vacuüm blok en ervoor te zorgen dat deze in het midden. (Figuur 1) </li><li> Voorzichtig lagere zitplaatsen ring op het vacuüm blok met behulp van de gids berichten. Schakel drukvermindering langzaam loslaten zuiger van de spuit zuigkracht. Verwijder de zitting ring en zet apart. (Figuur 2). </li><li> Voer een gedeeltelijke trephination te scoren door het membraan van Descemet. </li><li> Pas microscoop zoom en focus zodat het weefsel goed wordt gevisualiseerd. </li><li&gt; Kantel het vacuüm blok en een steriele wattenstaafje speer geplaatst aan de limbus om overtollig medium te verwijderen. (Figuur 3) </li><li> Plaats genoeg vlek op de limbus op de rand van de ingesneden membraan van Descemet vlekken. Laat de vlek op het endotheel gedurende 60-90 sec. (Figuur 4) </li><li> Verwijder vlek: <ol><li> Kantelen vacuüm blok naar de vlek giet het hoornvlies en op gaasje. </li><li> Gebruik de chirurgische speren om overtollige vlek te verwijderen uit het limbale gebied van het hoornvlies, het verzorgen van de endotheel niet aanraakt. (Figuur 5) </li></ol></li><li> Gebruik enkele druppels BSS aan het hoornvlies van kleuroplossing spoelen en desinfectiedoekje Spears overmaat BSS verwijderen. (Figuur 6) </li><li> Plaats 1-2 druppels van BSS op de sclera velg om weefsel te voorkomen uitdrogen. Herhaal de gehele procedure nodig. </li><li> Voeren gedeeltelijke dissectie van Descemet: <ol><li> Beginnen waar de slang aan te sluitens de vacuümblok, met geopende tang, plaats een punt aan de rand van de score merk en voorzichtig gescheiden membraan van Descemet en het endothelium van het stroma. (Figuur 7). </li><li> Aparte Descemet en endotheel niet meer dan 1 mm van de rand en scoorde blijven dissectie 360 ​​° rond. (Figuur 8). </li><li> Opmerking locatie van elke micro scheuren door een stip op de vacuum blok met de huid marker. OPMERKING: Als de trephine niet helemaal wist door te dringen door middel van Descemet, gebruik maken van de schuine rand van de voorbereide 30 G naald om de score via membraan Descemet waar nodig, gevolgd door een tweede toepassing van vlekken als nodig te voltooien. Als hechting Descemet van de gedeeltelijke versnijding wordt belemmerd, verwijder het endotheel buiten de trephinated gebied als dat nodig is. </li></ol></li><li> Gebruik een tang om elke endotheliale tags die de score merk overlappen verwijderen. </li> &lt;li&gt; Denk aan de locatie van eerder gemarkeerde micro tranen en draai het vacuüm blok, zodat de grootste is op 6 uur. Dit zal de scharnier van de klep worden. </li><li> Met behulp van de pincet, pak de Descemet op 12 uur. Voorzichtig te scheiden van de membraan van Descemet van het stroma van het schillen naar het scharnier. Maak het scharnier door het stoppen van de scheiding van 2 mm van de score mark. OPMERKING: Perifere randen van flap zal beginnen om tijdens de scheiding te scrollen. (Figuur 9). </li><li> Leg de klep weer op zijn plaats op het stroma. Gebruik BSS en wattenstaafje speren aan het endotheel unscroll en terug te sturen naar zijn oorspronkelijke positie. (Figuur 10A-C) </li><li> Verwijder de resterende vloeistof uit tussen Descemet membraan en stroma met steriel wattenstaafje speren, zodat de klep blijft in stand. (Figuur 11) </li><li> Gebruik steriele wattenstaafje speren om te genieten van het overtollige vocht uit de sclera vlakbij het scharnier. Gebruik de huid marker om een ​​gelijkspeln pijlpunt op de sclera rand naar het midden van het scharnier, verwijdert overtollige inkt met een steriel wattenstaafje speer. (Figuur 12) </li><li> Laat vacuüm door indrukken van de zuiger van de spuit verbonden met het vacuüm blok. Terwijl vacuüm wordt uitgeschakeld, een tang om het hoornvlies van het vacuüm blok te verwijderen. </li><li> Til het deksel van het bekijken van de kamer met behulp van folie plein als een barrière. Plaats het hoornvlies in het bekijken van de kamer, endotheliale kant naar boven, en plaats het deksel van het bekijken van de kamer. </li><li> Herhaal bovenstaande procedure stappen met partner hoornvlies, indien van toepassing. Gebruik gaas om het vacuüm blok schoon te maken voordat de verwerking van de tweede weefsel. </li><li> Draai het bekijken deksel over (s) en verwijder weefsel uit de verwerkingsruimte. </li><li> Breken het steriele veld door het afstoten van onderdelen volgens Biohazardous afvalbeheerplan. Verontreinigde handschoenen, en toga. Was de handen en don niet-steriele handschoenen. </li><li> Uitvoeren van post-cut evaluatie spleetlamp en spiegelende microscopie van het hoornvlies (s)en noteer de bevindingen. </li></ol>

<ol><li>Fernandez, M., Afshari, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+Keratoplasty%3A+From+DLEK+to+DMEK%5BTitle%5D)+AND+%22Middle+East+African+Journal+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Endothelial Keratoplasty: From DLEK to DMEK.</a> Middle East African Journal of Ophthalmology. 17 (1), 5-8 (2010).</li>
<li>Kruse, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Stepwise+Approach+to+Donor+Preparation+and+Insertion+Increases+Safety+and+Outcome+of+Descemet+Membrane+Endothelial+Keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">A Stepwise Approach to Donor Preparation and Insertion Increases Safety and Outcome of Descemet Membrane Endothelial Keratoplasty.</a> Cornea. 30 (5), 580-587 (2011).</li>
<li>Dapena, I., Moutsouris, K., Droutsas, K., Ham, L., van Dijk, K., Melles, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardized+%27No-Touch%27+Technique+for+Descemet+Membrane+Endothelial+Keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Standardized 'No-Touch' Technique for Descemet Membrane Endothelial Keratoplasty.</a> Archives of Ophthalmology. 129, 88-94 (2011).</li>
<li>Tourtas, T., Laaser, K., Bachmann, B., Cursiefen, C., Kruse, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Descemet+Membrane+Endothelial+Keratoplasty+versus+Descemet+Stripping+Automated+Endothelial+Keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Descemet Membrane Endothelial Keratoplasty versus Descemet Stripping Automated Endothelial Keratoplasty.</a> American Journal of Ophthalmology. 153 (6), 1082-1090 (2012).</li>
<li>Guerra, F., Anshu, A., Price, M., Price, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+Keratoplasty%3A+fellow+eyes+comparison+of+Descemet+stripping+automated+endothelial+keratoplasty+and+Descemet+membrane+endothelial+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">Endothelial Keratoplasty: fellow eyes comparison of Descemet stripping automated endothelial keratoplasty and Descemet membrane endothelial keratoplasty.</a> Cornea. 30 (12), 1382-1386 (2011).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%222012+Eye+Banking+Statistical+Report%3A+Surgical+Use+and+Indications+for+Corneal+Transplant+Statistical+Report+Analysis%22">2012 Eye Banking Statistical Report: Surgical Use and Indications for Corneal Transplant Statistical Report Analysis</a>. , Eye-Bank Association of America. (2012).</li>
<li>Price, M., Price, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Descemet%27s+stripping+endothelial+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Descemet's stripping endothelial keratoplasty.</a> Current Opinion Ophthalmology. 18 (4), 290-294 (2007).</li>
<li>Woodward, M., Titus, M., Mavin, K., Shtein, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corneal+Donor+Tissue+Preparation+for+Endothelial+Keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Corneal Donor Tissue Preparation for Endothelial Keratoplasty.</a> Journal of Visualized Experiments. (64), e3847(2012).</li>
<li>Price, M., Price, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Descemet%27s+membrane+endothelial+keratoplasty+surgery%3A+update+on+the+evidence+and+hurdles+to+acceptance%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Descemet's membrane endothelial keratoplasty surgery: update on the evidence and hurdles to acceptance.</a> Current Opinion Ophthalmology. 24 (4), 329-335 (2013).</li>
<li>Venzano, D., Pagani, P., Randazzo, N., Cabiddu, F., Traverrso, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Descemet+Membrane+air-bubble+separation+in+donor+cornea%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cataract+and+Refractive+Surgery%22%5BJournal%5D)">Descemet Membrane air-bubble separation in donor cornea.</a> Journal of Cataract and Refractive Surgery. 36 (12), 2022-2027 (2010).</li>
<li>Price, F., Price, M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPrice%2C+F+%22DSEK%3A+What+you+need+to+know+about+endothelial+keratoplasty%22">DSEK: What you need to know about endothelial keratoplasty</a>. , SLACK Inc.. Thorofare, NJ. (2009).</li>
<li>Studeny, P., Sivekova, D., Lieheova, K., Vokrojova, M., Kuchynka, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hybrid+technique+of+lamellar+keratoplasty+%28DMEK-S%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Hybrid technique of lamellar keratoplasty (DMEK-S).</a> Journal of Ophthalmology. 2013, 2013.254383(2013).</li>
<li>Muraine, M., Gueudry, J., He, Z., Piselli, S., Lefevre, S., Toubeau, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+technique+for+the+preparation+of+corneal+grafts+for+Descemet+membrane+endothelial+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Novel technique for the preparation of corneal grafts for Descemet membrane endothelial keratoplasty.</a> American Journal of Ophthalmology. 156 (5), 851-859 (2013).</li>
<li>Lie, J. T., Birbal, R., Ham, L., van der Wees, J., Melles, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Donor+tissue+preparation+for+Descemet+membrane+endothelial+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cataract+Refractive+Surgery%22%5BJournal%5D)">Donor tissue preparation for Descemet membrane endothelial keratoplasty.</a> Journal of Cataract Refractive Surgery. 34 (9), 1578-1583 (2008).</li>
<li>Kruse, F. E., Laaser, K., Cursiefen, C., Heindl, L. M., Schlotzer-Schrehardt, U., Riss, S., Bachmann, B. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+stepwise+approach+to+donor+preparation+and+insertion+increases+safety+and+outcome+of+Descemet+membrane+endothelial+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">A stepwise approach to donor preparation and insertion increases safety and outcome of Descemet membrane endothelial keratoplasty.</a> Cornea. 30 (5), 580-587 (2011).</li>
<li>Rudolph, M., Kaaser, L., Bachmann, B., Cursiefen, C., Epstein, D., Kruse, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corneal+higher-order+aberrations+after+Descemet%E2%80%99s+membrane+endothelial+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Corneal higher-order aberrations after Descemet’s membrane endothelial keratoplasty.</a> Ophthalmology. 119 (3), 528-535 (2012).</li>
<li>Price, F., Price, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+endothelial+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">Evolution of endothelial keratoplasty.</a> Cornea. 32, 28-32 (2013).</li>
<li>Dapena, I., Dapena, L., Dirisamer, M., Ham, L., Melles, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visual+acuity+and+endothelial+cell+density+following+Descemet+membrane+endothelial+keratoplasty+%28DMEK%29%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Soc+Esp+Oftalmol%22%5BJournal%5D)">Visual acuity and endothelial cell density following Descemet membrane endothelial keratoplasty (DMEK).</a> Arch Soc Esp Oftalmol. 86 (12), 395-401 (2011).</li>
</ol>

Hassan Tausif en Dr Navasuja Chandrasekaran hebben niets te onthullen. Drs. Mian, Shtein en Woodward zijn medische bestuurders voor de Michigan Eye Bank. Mr Mavin, de heer Titus, en mevrouw Johnson zijn medewerkers van Midwest Eye Banken.

De corneale endotheliale cellaag speelt een cruciale rol bij het handhaven helderheid hoornvlies door dehydratatie. Ziekten van de endotheliale cellen kan leiden tot aanzienlijke visuele beperking. DMEK beoogt de zieke endotheelcellen te vervangen door een donor transplantaat bestaande uit membraan van Descemet en endotheliale cellaag. Donorweefsel preparaat met een intact DM en adequate aantal endotheelcellen zijn essentieel voor de overleving van het transplantaat weefsel. Het scheuren van DM tijdens donorweefsel voor...

Endotheliale Keratoplastie (EK) is in korte tijd vervangen penetrerende hoornvliestransplantatie (PKP) als de procedure van de keuze voor de behandeling van endotheliale ziekten goed voor meer dan 50% van alle transplantaties uitgevoerd in de Verenigde Staten in 2012 6. PKP wordt beperkt door langdurig herstel van de gezichtsscherpte met hoog astigmatisme en refractieve instabiliteit, verlies van bol integriteit en-hechting gerelateerde complicaties. Vroege generatie EK procedures, waaronder Deep Lamellar endotheliale Keratoplastie (dlek) betrokken handleiding dissectie van hoornvliesstroma met transplantatie van gedeeltelijke dikte donor weefsel. Deze procedures waren succesvol in het transplanteren van donor endotheelweefsel met behoud van een intact hoornvlies maar waren technisch uitdagend en resulteerde in beperkte best gecorrigeerde gezichtsscherpte als gevolg van een onregelmatig hoornvlies gelamelleerde-interface 1. De huidige EK procedure van keuze is Descemet Strippen endotheliale Keratoplastie (DSEK) die het hoornvlies clar biedtteit met een sneller herstel van het gezichtsvermogen, minimaliseert postoperatieve refractie en astigmatisme, en vermindert het risico van traumatische wonddehiscentie met behoud van het hoornvlies 7. Deze procedure omvat het verwijderen van het zieke membraan van Descemet en het endothelium en vervanging door gedeeltelijke dikte donor hoornvlies bevattende een nieuwe endotheliale cellaag. De donor hoornvlies wordt ontleed met een microkeratoom met het achterste weefsel getransplanteerd 8 bereiden. Voorbereiding van de donor weefsel door de eye-banken is behulpzaam geweest bij de snelle groei geweest, en wellicht ook het succes van deze procedure. De bijna 16-voudige toename van DSEK procedures in de Verenigde Staten tussen 2005 en 2012 komt overeen met bijna de helft van het weefsel in voorbereiding van de eye-banken 6. Hoewel DSEK gezichtsscherpte kan verbeteren naar 20/40 of beter, de meeste patiënten niet 20/20 visie te realiseren als gevolg van stromale interface van waas en verhoogde lichtverstrooien van de toevoeging van donor stromale weefsel 7. De EK chirurgische techniek heeft geleid tot Descemet endotheliale Keratoplastie (DMEK) die transplantatie van alleen donor Descemet (DM) en endotheel gaat. Deze procedure heeft een hoger percentage van de patiënten die 20/20 vision, sneller visueel herstel, en een lager risico op endotheliale afwijzing 9 te bereiken. Echter, de voorbereiding van donor weefsel is een grotere uitdaging als gevolg van de dunnere graft afmetingen.

<table><tbody><tr><td>VisionBlue</td><td>D.O.R.C., Zuiland, Nederland</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Barron vacuum punch</td><td>Katena, Denville, New Jersey</td><td>K20-2112</td><td></td></tr></tbody></table>

hoornvlies donorweefsel voorbereiding voor descemet endothelial keratoplastie

Corneal Donor Tissue Preparation for Descemet's Membrane Endothelial Keratoplasty

Descemet Membrane Endothelial Keratoplastie (DMEK) is een vorm van hoornvliestransplantatie waarin slechts een enkele cellaag, de corneale endotheel, samen met de basaalmembraan (Descemet) geïntroduceerd op de ontvanger achterste stroma 3. In tegenstelling tot Descemet Stripping Automated endotheliale Keratoplastie (DSAEK), waar extra donor stroma wordt geïntroduceerd, wordt er geen onnatuurlijke stroma-to-stroma-interface gemaakt. Hierdoor wordt de natuurlijke anatomie van het hoornvlies zo veel mogelijk te verhogen waardoor de hersteltijd en gezichtsscherpte 4 bewaard. Endotheliale Keratoplastie (EK) is de procedure van de keuze voor de behandeling van endotheliale dysfunctie. De voordelen van het EK onder meer een snelle herstel van het gezichtsvermogen, het behoud van oculaire integriteit en minimale refractieve verandering als gevolg van het gebruik van een kleine, perifere incisie 1. DSAEK gebruikt donorweefsel bereid met gedeeltelijke dikte stroma en endotheel. De snelle success en het gebruik van deze procedure kan worden toegeschreven aan de beschikbaarheid van de eye-bank voorbereid voorgesneden weefsel. De voordelen van een eye-bank voorbereiding van donor weefsel onder eliminatie van de behoefte aan gespecialiseerde apparatuur in de operatiekamer en de beschikbaarheid van een back-up donor weefsel in het geval van weefsels perforatie tijdens de bereiding. Bovendien kunnen hoge volume bereiding van donorweefsel door eye-bank technici verbeterde kwaliteit van donorweefsel verschaffen. DSAEK kan best gecorrigeerde gezichtsscherpte hebben beperkt door oprichting van een stroma-interface tussen de donor en de ontvanger hoornvlies. Afschaffing van deze interface met transplantatie van alleen donor Descemet en endotheel in DMEK kunnen visuele resultaten te verbeteren en complicaties te verminderen na het EK 5. Vergelijkbaar met DSAEK, succes op lange termijn en de acceptatie van DMEK is afhankelijk van het gemak van de beschikbaarheid van voorgesneden, oog-bank bereid donor weefsel. Hier presenteren we een stapsgewijze aanpak voor donorweefsel voorbereiding die enkele barri kan vermindereners eye-banken worden geconfronteerd bij het verstrekken DMEK enten.

Een duidelijke scheiding tussen DM en endotheel uit stroma is essentieel bij de voorbereiding van voorgesneden weefsel voor DMEK. Vijftig donor cornea met een gemiddelde leeftijd van 65 ± 6 jaar (bereik 55-75), dood doorlooptijd van 5,9 ± 2,3 dagen (bereik 1-10) en endotheelcellen dichtheid (ECD) van 2616 ± 321 cellen / mm 2 ( range 2,049-3,247) werden gebruikt om de haalbaarheid en de reproduceerbaarheid van de chirurgische bereidingstechniek beoordelen door twee oogbank technici. Het slagingspercentage was ...

Endotheliale keratoplastiek is een chirurgische techniek die voortdurend evolueert als ontwikkelingen leiden tot transplantatie van dunnere transplantaten met elkaar successie 1. Hier presenteren we een techniek voor gecontroleerde handmatige weefsel dissectie om veilige en reproduceerbare scheiding van endotheel en Descemet membranen van donor corneoscleral knoppen voor transplantatie 2 mogelijk te maken.

Hoornvlies donorweefsel Voorbereiding voor Descemet Endothelial Keratoplastie

Descemet&#8217;s Membrane Endothelial Keratoplasty (DMEK) is a form of corneal transplantation in which only a single cell layer, the corneal endothelium, ...

Het algemene doel van deze procedure is om Demas-endotheelweefsel voor te bereiden voor DMEC-insertie. Dit wordt bereikt door eerst een gedeeltelijke trefinatie uit te voeren en kleurstof aan te brengen om het te visualiseren. Vervolgens wordt een 360 graden gedeeltelijke dissectie bij de TATed-lijn uitgevoerd tussen het S-stroma en het demas-membraan.Vervolgens wordt het Demas-membraan handmatig van het stromabedje gepeld, waarbij slechts een kleine scharnier is bevestigd. Ten slotte wordt het Demas-membraan teruggeplaatst op het stromabedje en wordt eventueel resterend vocht tussen hen verwijderd. Uiteindelijk is Demas-membraan endotheliale ker plasty met voorgesneden weefselpreparaten een veilige en herhaalbare vorm van gecontroleerde handmatige weefseldissecatie die wordt gebruikt om endotheelziekte te behandelen.Het belangrijkste voordeel van de oogbank die de gedecimeerde membraan-endotheel ker plasty donorweefsels voorbereidt, is dat het het risico op weefselverlies tijdens de voorbereiding vermindert en de efficiëntie in de operatiekamer voor de chirurg verbetert. Over het algemeen kunnen chirurgen bij deze techniek aanvankelijk worstelen omdat ze het moeilijk kunnen vinden om het scheuren van het Demas-membraan te voorkomen, vooral tijdens de gedeeltelijke dissectie en het desme-strippen. Visuele demonstratie van deze techniek is cruciaal omdat de scheidingsstappen moeilijk te beschrijven zijn. In het bijzonder zal de succesvolle afbakening tussen deses en stroma worden gedemonstreerd door Lauren Johnson, de manager van weefselverwerking van het Midwest Ibis, Michigan-laboratorium.Om Demas-endotheelweefsel voor te bereiden, moet u de juiste kleding aantrekken, inclusief een muts en een masker, en oogbescherming dragen in de verwerkingskamer. Bereid de verwerkingskamer voor door eerst de ventilator aan te zetten om een positieve druk te creëren. Organiseer alle benodigdheden en controleer, met schoongewassen handen en steriel handschoenen, de vervaldata, integriteit van de verpakkingen en sterilisatie-indicatoren. Vervolgens stelt u een steriel werkveld in door de verpakkingen asseptisch te openen.Vermijd het gebruik van de buitenste anderhalve inch van de verpakking als onderdeel van het steriele werkveld, aangezien dit gedeelte als onsterieel wordt beschouwd. Laat de steriele items op het steriele werkveld vallen. Plaats vervolgens de microscoop boven het steriele werkveld. Zet de lichtbron aan en pas de oculairen zo nodig aan terwijl u hoornvliesweefsel verkrijgt om te worden gestrippingt.Plaats het naast het voorbereide steriele verwerkingsgebied. Draai het dopje van de bekijkingskamer los en laat het rusten op de top van de bekijkingskamer zonder draad. Gooi de niet-steriele handschoenen weg. Open vervolgens een paar steriele handschoenen en een steriele jas met handdoek.Voer een chirurgische scrub uit voordat u de steriele jas en vervolgens steriele handschoenen aantrekt. Open de instrumentendozen zodat alle benodigdheden toegankelijk zijn en open een vochtdicht scherm om het werkgebied te creëren. Monteer de glazen spuit voor de trian-blauwe kleurstof door de plunjer in de spuit te plaatsen en de plunjer met de vinger vast te draaien.Bevestig een canule aan de trian-blauwe spuit en een tweede canule aan de fles met gebalanceerde zoutoplossing. Scheid de TR verfijnde pons van de vacuümblok en zet deze opzij. Centreer vervolgens de vacuümblok binnen het gezichtsveld van de microscoop voordat u de microscoopinstellingen aanpast om de vacuümblok in focus te brengen.Gebruik een folievierkant als barrière, til met de tegenovergestelde hand en met behulp van pincetten de deksel van de bekijkingskamer op. Pak de hoorn op door de sclera rand te grijpen om de hoorn uit het opslagmedium te verwijderen. Vervolgens vervangt u de deksel van de bekijkingskamer en drukt u een zuigspuit volledig in.Plaats vervolgens de hoorn met de epitheliale kant naar beneden op de vacuümblok en zorg ervoor dat deze gecentreerd is. Gebruik de geleidingsposten om de zitring op de vacuümblok voorzichtig neer te laten. Verwijder de zitring en zet deze opzij met het weefsel scherp en goed zichtbaar onder de microscoop.Voer een gedeeltelijke trefinatie uit om door het demas-membraan te scoren. Kantel de vacuümblok en gebruik een steriele wattenstaaf om overtollig medium bij de limbus te verwijderen. Plaats vervolgens voldoende kleurstof bij de limbus om de rand van de score te kleuren.Laat de demas-membraan de kleurstof 60 tot 90 seconden op het endotheel laten. Gebruik vervolgens chirurgische speeren om overtollige kleurstof uit het limbale gebied van de hoorn te verwijderen. Zorg ervoor dat u het endotheel niet aanraakt met verschillende druppels BSS.Spoel de hoorn van de kleurstofoplossing en gebruik steriele wattenstaafjes om overtollig BSS te verwijderen. Plaats vervolgens een tot twee druppels BSS op de sclera rand om te voorkomen dat het weefsel uitdroogt. Herhaal zo nodig gedurende de procedure om een gedeeltelijke dissectie van het desme-membraan met open pincetten uit te voeren, plaats één punt aan de rand van de scoremerk en scheid voorzichtig het desme-membraan en endotheel van het stroma.Scheid Descemet's membraan en endotheel, niet meer dan één tot twee millimeter van de gescoorde rand, en zet de dissectie 360 graden voort. Noteer de locatie van eventuele microscheuren door een huidmarker te gebruiken om een stip op de vacuümblok te plaatsen. Gebruik pincetten om eventuele overlappende endotheeltags met de scoremerk te verwijderen.Loceer vervolgens de eerder gemarkeerde microscheuren en draai de vacuümblok zodat de grootste op zes uur staat. Dit wordt de scharnier van de flap. Gebruik vervolgens de pincetten om het SMAs-membraan om twaalf uur vast te grijpen.Scheid ver

corneal-donor-tissue-preparation-for-descemet-s-membrane-endothelial

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

De paper beschrijft een vereenvoudigde techniek om accijnzen hoornvlies en het netvlies weefsels uithalen van de oculaire bol van de menselijke postmortale donoren. De techniek die hier beschreven zal helpen om accijnzen goede kwaliteit weefsels worden gebruikt voor transplantatie, chirurgisch of wetenschappelijke doeleinden zonder deze te beschadigen andere weefsels van het oculair wereld.

Een vereenvoudigde methode voor<em&gt; In situ</em&gt; Excisie van het hoornvlies en het verwijderen van de ingewanden van retinaal weefsel van Human Ocular Globe

Endotheliale hoornvliestransplantatie is een chirurgische techniek voor de behandeling van posterieure hoornvlies ziekten. Mechanische microkeratoom dissectie van het weefsel resultaten voor te bereiden in dunnere, meer symmetrische enten met minder endotheelcellen verlies en betere resultaten. Dissecties kunnen worden uitgevoerd op het oog bank voorafgaand aan de cornea transplantatie.

Cornea donorweefsel Voorbereiding voor endothelial keratoplasty

Wij rapporteren een methode voor de fabricage van micropockets binnen electrospun membranen waarin celgedrag te bestuderen. Specifiek beschrijven we een combinatie van microstereolithography en elektrospinnen voor de productie van PLGA (poly (lactide-co-glycolide)) corneale biomateriaal inrichtingen voorzien microfeatures.

Combinatie van Microstereolithography en Electrospinning naar Membranen Uitgerust met Niches voor cornearegeneratie Produce

Muizen zijn gebruikt als een model voor het bestuderen van vele vormen van transplantatie, inclusief hoornvliestransplantatie.  We beschrijven in dit rapport een muismodel voor zowel acute als late-term hoornvliestransplantatie.

Muizen hoornvliestransplantatie: een model om de meest voorkomende vorm van een orgaantransplantatie Bestudeer

Er wordt een volledig laserprocedure voorgesteld in de endotheeltransplantatie. De chirurgische techniek is gebaseerd op het gebruik van een femtosecondelaser om het donorweefsel voor te bereiden. Vervolgens wordt de laserlastechniek gebruikt om het donorendotheel op de juiste positie te bevestigen.

Een &quot;All-laser&quot; Endothelial Transplant

Een voorbeeld van adenovirale gentherapie in humane diabetische orgaan-gecultiveerde hoornvliezen wordt gepresenteerd met als doel de normalisatie van vertraagde wondgenezing en een duidelijk verminderde expressie van epitheliale stamcelmarkers in deze hoornvliezen. Het beschrijft ook de optimalisering van dit proces in stamcel-verrijkte limbale epitheelculturen.

Adenovirale Gentherapie voor Diabetische keratopathie: Effecten op wondgenezing en Stem Cell Marker Expressie in Human Organ-gekweekte Corneas en Limbale epitheelcellen

Dit protocol beschrijft een nieuwe driedimensionale in vitro model, waar hoornvlies stromale cellen en gedifferentieerde neuronale cellen samen worden gekweekt om te helpen bij het onderzoek en het begrijpen van de interacties van de twee celtypes.

Hoornvlies weefselengineering: Een In Vitro Model van de interacties die stromale-zenuwen van het hoornvlies, menselijke

We beschrijven het gebruik van full-field optische coherentiemicroscopie als een methode voor een hoogwaardige beoordeling van corneadonorstroma. Dit protocol kan worden gebruikt om kenmerken te identificeren die wijzen op gezondheid of ziekte, en is gericht op het verbeteren van de screening en selectie van donorweefsels, en dus de resultaten van keratoplastiek.

Full-field optische coherentiemicroscopie voor histologie-achtige analyse van stromale kenmerken in hoornvliestransplantaten

Hier presenteren we een protocol om hoornvliesendodelialcellen (CEC) los te koppelen van het membraan (DM) van Descemet met behulp van een neodymium:YAG (Nd:YAG) laser als ex vivo ziektemodel voor bullous keratopathie (BK).

Ontwikkeling van een niet-invasieve, laser-assisted experimenteel model van hoornvlies endotheel celverlies

Dit protocol beschrijft de kritieke stappen die nodig zijn om hoornvliesendotheliale celculturen uit explants van menselijk of schapenweefsel vast te stellen en te kweken. Er wordt ook een methode gepresenteerd voor het subculturen van hoornvliescellen op membranous biomaterialen.

Groei van menselijke en schapen hoornvlies endotheliale cellagen op biomateriële membranen

Descemet's Stripping Only is een experimentele procedure waarbij patiënten met centrale cornea guttae als gevolg van Fuchs Endothelial Corneal Dystrophy het membraan van Descemet laten strippen voor perifere cellen om de endotheellaag te regenereren. We presenteren een nieuwe methodologie die DSO simuleert in dystrofische menselijke hoornvliezen ex vivo met versnelde genezing gestimuleerd door eFGF1 (NM141).

Een menselijk hoornvliesorgaancultuurmodel van Descemet's strippen alleen met versnelde genezing gestimuleerd door gemanipuleerde fibroblastgroeifactor 1

Leer een gecontroleerde manuele weefseldissectie voor endotheliale keratoplastiek met veilige en herhaalbare scheiding van het Descemet-membraan. Deze methode verbetert chirurgische efficiëntie en vermindert het risico op weefselverlies.

Hoornvlies donorweefsel Voorbereiding voor Descemet Endothelial Keratoplastie

Meer video's verkennen