De Rabbit Bloed-shunt model voor de studie van Acute en Late Late gevolgen van subarachnoïdale bloeding: Technische aspecten

Het algemene doel van deze procedure is om een onafhankelijk onderzoeker, intracranele druk of ICP gecontroleerde bloedshunt, acuut subarachnoïdaal bloeden of SAH model in de konijn te vestigen. Dit wordt bereikt door eerst de subclavia-slagader te canuleren. In de tweede stap wordt digitale subtractie angiografie uitgevoerd, en vervolgens worden neuromonitoringsondes en een spinale toegangsnaald in de laatste stap geplaatst.

De spinale toegangsnaald en de subclavia-slagader zijn verbonden met een shunt om onderzoeker-onafhankelijke ICP-gecontroleerde acute SAH te induceren, uiteindelijk kan de ICP-cerebrale bloedstroom of CBF en cardiorespiratoire respons van het dier op het acute SAH worden gemonitord. Deze methode kan helpen om belangrijke vragen in het neurovasculaire veld te beantwoorden, zoals hoe vroege hersenschade en vertraagde cerebrale vaatspecimina bijdragen aan een ongunstig resultaat en mortaliteit. Na aneurismale subic-bloeding Begin door het gesedateerde konijn in een rugligging te plaatsen met zowel de voor- als achterpoten vastgezet op het operatieoppervlak.

Installeer een driekanaals elektrocardiogram als zodanig. Plaats drie subcutane elektroden in een driehoekige vorm op de ventrale kant van het konijn. Desinfecteer vervolgens de huid met povidon-jodium of iets dergelijks over de rechter pictoral-spier rond het midden van de derde van de clavicula, bedek het dier met steriele lakens.

Na het infiltreren van de pectoralis-spier met lokaal anestheticum, maak een laterale paramous-huidincisie en leg de pectoralis-spier bloot. Splits de spiervezel superieur en inferieur door middel van blinde dissectie totdat de subclavia-slagader kan worden gevisualiseerd. Vervolgens dissecteert u de subclavia-slagader onder de microscoop met behulp van twee rechte micro-forceps en vervolgens legt u deze distaal een ligatuur om het blootgestelde proximale uiteinde met behulp van vier O polyfilament-naden en een gebogen micro-forceps.

Gebruik vervolgens een gebogen micro-schaar om de wand van de subclavia-slagader in te snijden en de slagader retrograde te canuleren. Bevestig vervolgens de katheter met een dubbele knoopligatuur naar de proximale ligatuur, en bevestig bovendien de katheter met een dubbele knoopligatuur naar de distale ligatuur om arteriële draaiing of buiging van de proximale delen van de slagader te voorkomen, en om glijden of massale bloeding te voorkomen. Verzamel vervolgens bloedmonsters voor de status van het arteriële bloedgasanalyse en bewaak continu de standaard cardiovasculaire en respiratoire parameters.

Plaats een extern maatbepalingsapparaat over de hoeken van de onderkaak om de angiografie te kalibreren en om een ​​nauwkeurige vergelijking van de post hoc metingen van de baseline en follow-up vaatdiameter mogelijk te maken. Voer vervolgens retrograde intra-arteriële bolusinjectie van niet-ionische IOP IOL uit door middel van de gecanuleerde slagader, en spoel de canule onmiddellijk met zoutoplossing om occlusie van de ladder te voorkomen. Na baseline digitale subtractie angiografie, plaatst u het konijn opnieuw in rugligging, zorg ervoor dat u de intra-arterielle katheter niet manipuleert of verplaatst.

Verbind de arteriële bloeddrukbewaking en begin met het continu bewaken van de standaard cardiovasculaire en respiratoire parameters, inclusief elektrocardiogram, arteriële bloeddruk, perifere zuurstofsaturatie, uitgeademde kooldioxide en kerntemperatuur. Breng de gegevens via de analoog-uitvoerinterface over naar een analoog-digitaal converter datalogger en sla op. Plaats het hoofd in een houder onder een hoek van 30 graden gericht naar beneden en desinfecteer vervolgens de huid over het hoofd en de nek met povidon-jodium drie keer gedurende één minuut.

Na het bedekken van het nieuwe chirurgische gebied met steriele lakens, maak een midline-huidincisie. Breng een kleine chirurgische retractor in om drie ronde osteotomieën te maken volgens de uiterlijke schedellandmerken en kalibreer de neuromonitoringsondes. Plaats de intracraniale druk en de interparenchymale laserdoppler-bloedstroomsondes en verzegel de boorgaten met botwas om het schedeldak vloeistofdicht te houden en om een ​​gesloten schedelconditie mogelijk te maken om de steady state van I-C-P-C-P-P en MAP te behouden.

Breng vervolgens een 22 gauge 40 millimeter pedaatrische spinale toegangsnaald transcutaan in de cisterna magna. Schuif vervolgens de naald naar beneden langs de botachtige externe occipitale protuberantie totdat een opening wordt gedetecteerd. Bevestig de juiste positionering van de naald door het spontaan druppelen van hersenvocht te observeren met het hoofd van het konijn naar beneden gekanteld op een hoek van 20 tot 30 graden gedurende enkele minuten.

Gebruik nu een met bloed gevulde drukbewakingsbuis om de spinale toegangsnaald in de cisterna magna aan te sluiten op de driewegs stopkraan die is bevestigd aan de eerder gecanuleerde subclavia-slagader. Open vervolgens de shuntverbinding tussen de subclavia-slagader en het CI-sternum magna om subarachnoïdaal bloeden te induceren. Na het openen van de shunt begint de intracraniale druk te stijgen naar waarden dicht bij de diastolische bloeddruk.

Op dat moment stopt de stroom in de shunt als het intracraniale plateau meer dan 10 seconden wordt gehandhaafd, of als de druk spontaan daalt, sluit de shunt nadat de intracraniale druk zijn piek heeft bereikt, houd de spinale toegangsnaald op zijn plaats totdat de druk terugkeert naar een stabiele staat dicht bij de baselinewaarden. Verwijder tenslotte de cerebrale bloedstroom-fijne naald en intracraniale druksondes. Verzegel de boorgaten met botwas, gebruik vervolgens neomycinesulfaat om een ​​nauwgezette wondirrigatie uit te voeren en naai de huid.

Naai eerst de huid over de boorgaten. Breng vervolgens het konijn in rugligging en verwijder de subclavia-slagaderkatheter, naai de pectoralis-spier en de huid. Het rabide bloedshuntmodel van SAH dat in dit rapport wordt beschreven, produceert vroege hersenschade in de hippocampus basale cortex en het cerebrale vaatstelsel al binnen 24 uur na de letsels, waarbij een kenmerkende bloedverdeling wordt geïnduceerd.

Bovendien activeert dit model matige tot ernstige graden van vertraagde cerebrale vasospasm