Name: Permanente Ligatie van de linker anterior Aflopend Kransslagader in Muizen: Een model van Post-myocardinfarct Remodelling en hartfalen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-12-02T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 37 s
Description: Leer de techniek van permanente ligatie van de linker voorafdalende kransslagader bij muizen. Dit model onderzoekt hartremodellering en hartfalen na myocardinfarct met invasieve hemodynamische metingen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd ondersteund door Onderzoekstoelagen grant OT/13/090 van de KU Leuven en door grant G0A3114N van de FWO-Vlaanderen.

NB: Alle in dit hoofdstuk beschreven experimentele procedures werden goedgekeurd door de Institutional Animal Care en Onderzoek Raadgevend Comité van de Katholieke Universiteit Leuven (Project: 154/2013-B De Geest). 1. Permanente Ligatie van de Left Anterior Descending coronaire <ol><li> Verdoven de muis door intraperitoneale toediening van 40 mg / kg tot 70 mg / kg natriumpentobarbital. Zorg ervoor dat de muis zijn juiste vlak van anesthesie bereikt wanneer het niet meer reageert een stevige teen knijpen. Controleer altijd de juiste verdoving deze manier voorafgaand aan elke chirurgische ingreep of interventie. Gebruik smerende oogzalf droogheid van de cornea te voorkomen tijdens het onder narcose. Zorg preoperatieve analgésie 2-4 uur voor het begin van de procedure (buprenorfine 0,05 mg / kg SQ). <ol><li> Gelden consistente aseptische technieken tijdens overleven chirurgie. Uitvoering van procedures die remmen om een ​​maximaal mogelijke omvang microbiële concontaminatie zodat significante infectie of suppuration niet optreedt. Deze procedures omvatten het gebruik van steriele instrumenten en steriele materialen, desinfectie van het operatiegebied, en verwijdering van bont / haar over de operatiewond en ontsmetting van deze site. </li></ol></li><li> Intuberen de muis met een zelf bereide afgestompte 20-gauge naald. <ol><li> Zet de muis in rugligging met hyperextensie van het hoofd. <ol><li> Focus het licht op de nek regio. Til de tong met een afgestompte pincet. De ingang van de larynx duidelijk te zien. </li><li> Passeer de afgestompte naald door het strottenhoofd in de luchtpijp onder direct zicht. Beoordeel correcte intubatie van de muis op het beademingsapparaat (slagvolume in pl: 3 x lichaamsgewicht (g) + 155; frequentie: 120 slagen per minuut). </li></ol></li><li> Als alternatief verbeteren visualisatie van endotracheale intubatie door eerst zorgvuldig het blootstellen van de luchtpijp. <ol><li> Maak een 5 mm mid-hals incisie en trekkenspierweefsel net boven de luchtpijp. </li><li> Voer de intubatie met een chirurgische stereomicroscoop voor directe visualisatie van de luchtpijp. Til de tong en voer het zelf-bereide afgestompt 20 gauge naald in de luchtpijp. Bevestig correcte intubatie van de muis op het beademingsapparaat (slagvolume in pl: 3 x lichaamsgewicht (g) + 155; frequentie: 120 slagen per minuut). </li></ol></li></ol></li><li> Houd de muis in rugligging en zet de muis met tape. Voeren een operatie aan een verwarming pad om onderkoeling te voorkomen. <ol><li> Scheren en desinfecteren van de huid met Betadine. Zorg ervoor dat de linker achterpoot kruist de juiste achterste ledematen om een ​​beter zicht op de linker ventrikel te verkrijgen tijdens de operatie. </li></ol></li><li> Maak een kleine dwarse cutane incisie tot aan het borstbeen en het scheiden van de onderliggende huid en spieren. </li><li> Trek de m opzij. pectoralis minor en de m. pectoralis major met een 5-0 zijden hechtdraad. </li><li> Maak een incision in de derde intercostale ruimte door het invoegen van een afgestompte pincet. </li><li> Beweeg de pincet onder de intercostale spieren van lateraal naar mediaal tot het borstbeen is bereikt. Punctie het thoraxwand door op de pincet vanuit de huid. Voltooi de thoracotomie door het zorgvuldig snijden van de intercostale spieren net boven de pincet met een kleine schaar. Met deze techniek om puncturing van de longen voorkomen. </li><li> Zet een spons ondergedompeld in 0,9% NaCl in de holte naar de longen beschermen. Introduceer een wond spreider (borst oprolmechanisme) in de intercostale ruimte om de blootstelling van de linkerkant van het hart te verkrijgen. Vanaf nu, het linker atrium, de linker ventrikel en de linker voorste dalende kransslagader zijn zichtbaar onder de stereomicroscoop. </li><li> Voer een ligatie van de linker voorste dalende kransslagader met een 6-0 Prolene ligatuur ongeveer 1 mm onder de punt van de linker atrium. Dit is distaal van de eerste diagonale tak. OPMERKING: U kunt ook met 7-0 (0.05 Mm diameter) of 8-0 draden (0.04 mm diameter) worden gebruikt. De naald is een C-1 13 mm 3/8 cirkel taper Point naald. Succesvolle ligatie van de linker voorste dalende kransslagader induceert onmiddellijke verkleuring, waardoor een bleke verschijnen myocardium in het getroffen gebied. </li><li> Verwijder de wond strooier (borst oprolmechanisme). <ol><li> Plaats drie 6-0 Ti-Cron hechtingen rond de intercostale ruimte. Voor het aandraaien van de hechtingen, verwijder de spons uit de borstholte en opnieuw uitbreiden van de longen door het blokkeren van de uitstroom van de ventilator. Door dit te doen, de longen opnieuw te verbinden met de pariëtale pleura. </li><li> Vervolgens trek de hechtingen strak en herhaal re-expansie door te drukken op de borst. Bevestig de succesvolle afsluiting van de thorax met een kleine hoeveelheid zoutoplossing (geen luchtbellen worden gezien wanneer het uitoefenen van druk op de borst). </li><li> Kijk door de intercostale spieren om de normale groei van de longen te bevestigen. Herpositioneren beide pectoralis spieren, die als eenextra barrière voor de preventie van een pneumothorax. </li></ol></li><li> Sluit de huid met 5-0 zijde-hechtingen. </li><li> Koppel de muis van de ventilator en laat herstel op de verwarming pad. Heeft een dier niet onbeheerd achter, totdat het voldoende weer bij bewustzijn is om borstligging behouden. Heeft een dier dat een operatie heeft ondergaan om het gezelschap van andere dieren tot volledig hersteld niet meer terug. </li><li> Consequent postoperatieve analgesie (buprenorfine 0,05 mg / kg SQ BID gedurende minstens 48 uur na de operatie). </li></ol> 2. In vivo invasieve hemodynamische metingen in Muizen <ol><li> Voor de procedure onderdompelen 1,0 Franse Millar drukkatheter in steriel water bij 37 ° C gedurende ten minste 30 min signaaldrift minimaliseren. Elektronisch kalibreren van de druksensor op 0 mm Hg en 100 mm Hg en registreren van gegevens bij 2000 Hz. </li><li> Voeren anesthesie door intraperitoneale toediening van 1,4 g / kg urethaan. Controleer datde muis de juiste vlak van anesthesie bereikt wanneer het niet meer reageert een stevige teen knijpen. </li><li> Plaats de verdoofde muis in rugligging. Veilig zijn ledematen met tape. Handhaven van de lichaamstemperatuur met een verwarmingselement en monitor met een rectale sonde. Scheer de nek regio en maak een middellijn incisie in de nek regio om de schildklier bloot. </li><li> Bevestig de hals met verbogen naalden. </li><li> Trek afgezien van de speekselklier en de juiste gemeenschappelijke halsslagader bloot. De nervus vagus, die een witte draad lijkt, ligt langs de slagader. Haal voorzichtig de halsslagader van de nervus vagus via een gebogen pincet. </li><li> Laat een gebogen pincet onder de rechter halsslagader te scheiden van andere weefsels. Verwijder bindweefsel rond de slagader. </li><li> Passeer twee 6-0 zijde draden onder de juiste gemeenschappelijke halsslagader. Maak een strakke knot op de bovenste draad, die wordt geplaatst in de richting van het hoofd, in de buurt, en fixeren met een Kocher (distale occlusie ligatie). Passeer de Proximal draad twee keer van links naar rechts en bevestig met 2 kochers (proximale niet-occlusieve draad). </li><li> Houd de halsslagader vochtig door het droppen van een steriele 0,9% NaCl. Drogen overtollige vloeistof met wattenstaafjes. </li><li> Een insnijding in de rechter halsslagader met een 26-gauge naald tussen het distale en het proximale ligatie niet-occlusieve draad. </li><li> Breng de druksensor in de slagader. Controleer of er geen bloedverlies. Duw de 1,0 Franse Millar drukkatheter voren en pas de proximale niet- occlusieve draad zodanig dat de katheter goed kan door het draad onder het sleutelbeen. <ol><li> Minimaliseren bloedverlies tijdens aanpassing van de proximale niet-occlusieve draad. Laat de druksensor te veel en bevordert tegelijk want het is zeer fragiel niet comprimeren. Sinds de proximale draad de slagader niet mag afsluiten, moet het vat gevuld blijven met bloed. </li></ol></li><li> Beginnen met het opnemen van de druk signaal. Een arteriële druk signaal Fluctuates in een gezonde muis tussen een diastolische druk van 60 - 70 mm Hg en een systolische druk van 100-120 mm Hg. </li><li> Richt de katheter via de anonyma slagader en via de aorta in de linker ventrikel. De ventriculaire druk schommelt tussen 0 mm Hg en 100-120 mm Hg. Laat de katheter te stabiliseren in de linker ventrikel. Noteer het signaal gedurende 30 min tot 60 min, afhankelijk van de experimentele eisen. </li><li> Na voltooiing van het experiment, genieten de katheter Alconox 1% gedurende 30 min. Was de katheter met Milli-Q water. Bewaar de katheter in een schuim blok. </li><li> Win gegevens van de opname software voor verdere analyse. <ol><li> Voor data-analyse, overwegen een tijdsinterval waarin de druk stabiel is. Minstens 10 opeenvolgende hartcycli van de geregistreerde gegevens van belang. </li><li> Gebruik LabChart software versie 8.0 of vergelijkbaar met de hartslag, de maximale systolische linker ventrikel druk, de minimale diastolische linker ventr analyserenicular druk, de pieksnelheid van isovolumetrische linker ventriculaire contractie (dP / dt max), de pieksnelheid van isovolumetrische linker ventriculaire relaxatie (dP / dt min), het eind-diastolische linker ventriculaire druk, en de tijdconstante van de isovolumetrische linker ventrikel drukval (tau) 7. OPMERKING: De eind-diastolische druk komt overeen met de druk aan de tijd die vlak boven de drukgolf veroorzaakt door isovolumetrische contractie. De berekening van tau is gebaseerd op het aanbrengen van de linker ventriculaire druk in een mono-exponentiële verval kromme, uitgedrukt als P (t) = P 0 e -t / tau + b, In deze formule P (t) is de linker ventriculaire druk op tijdstip t na de maximale negatieve waarde van dP / dt is bereikt. De parameter B komt overeen met de theoretische asymptoot, die een vereenvoudigde benadering kan worden verondersteld nul. Verbeterde isovolumetrische ontspanning resulteert in een kleinere waarde van tau. </li></ol></li></ol&gt;

<ol><li>He, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Risk+factors+for+congestive+heart+failure+in+US+men+and+women%3A+NHANES+I+epidemiologic+follow-up+study%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Intern+Med%22%5BJournal%5D)">Risk factors for congestive heart failure in US men and women: NHANES I epidemiologic follow-up study.</a> Arch Intern Med. 161, 996-1002 (2001).</li>
<li>Anversa, P., Sonnenblick, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemic+cardiomyopathy%3A+pathophysiologic+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Cardiovasc+Dis%22%5BJournal%5D)">Ischemic cardiomyopathy: pathophysiologic mechanisms.</a> Prog Cardiovasc Dis. 33, 49-70 (1990).</li>
<li>Erlebacher, J. A., Weiss, J. L., Weisfeldt, M. L., Bulkley, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+dilation+of+the+infarcted+segment+in+acute+transmural+myocardial+infarction%3A+role+of+infarct+expansion+in+acute+left+ventricular+enlargement%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Early dilation of the infarcted segment in acute transmural myocardial infarction: role of infarct expansion in acute left ventricular enlargement.</a> J Am Coll Cardiol. 4, 201-208 (1984).</li>
<li>Shimizu, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Excessive+cardiac+insulin+signaling+exacerbates+systolic+dysfunction+induced+by+pressure+overload+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Excessive cardiac insulin signaling exacerbates systolic dysfunction induced by pressure overload in rodents.</a> J Clin Invest. 120, 1506-1514 (2010).</li>
<li>Tirziu, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+hypertrophy+in+the+absence+of+external+stimuli+is+induced+by+angiogenesis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Myocardial hypertrophy in the absence of external stimuli is induced by angiogenesis in mice.</a> J Clin Invest. 117, 3188-3197 (2007).</li>
<li>Theilmeier, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-density+lipoproteins+and+their+constituent%2C+sphingosine-1-phosphate%2C+directly+protect+the+heart+against+ischemia%2Freperfusion+injury+in+vivo+via+the+S1P3+lysophospholipid+receptor%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">High-density lipoproteins and their constituent, sphingosine-1-phosphate, directly protect the heart against ischemia/reperfusion injury in vivo via the S1P3 lysophospholipid receptor.</a> Circulation. 114, 1403-1409 (2006).</li>
<li>Weiss, J. L., Frederiksen, J. W., Weisfeldt, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemodynamic+determinants+of+the+time-course+of+fall+in+canine+left+ventricular+pressure%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Hemodynamic determinants of the time-course of fall in canine left ventricular pressure.</a> J Clin Invest. 58, 751-760 (1976).</li>
<li>Bohl, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Refined+approach+for+quantification+of+in+vivo+ischemia-reperfusion+injury+in+the+mouse+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Refined approach for quantification of in vivo ischemia-reperfusion injury in the mouse heart.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 297, 2054-2058 (2009).</li>
<li>Van Craeyveld, E., Jacobs, F., Gordts, S. C., De Geest, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-density+lipoprotein+receptor+gene+transfer+in+hypercholesterolemic+mice+improves+cardiac+function+after+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Low-density lipoprotein receptor gene transfer in hypercholesterolemic mice improves cardiac function after myocardial infarction.</a> Gene Ther. 19, 860-871 (2012).</li>
<li>Gordts, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beneficial+effects+of+selective+HDL-raising+gene+transfer+on+survival%2C+cardiac+remodelling+and+cardiac+function+after+myocardial+infarction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Beneficial effects of selective HDL-raising gene transfer on survival, cardiac remodelling and cardiac function after myocardial infarction in mice.</a> Gene Ther. 20, 1053-1061 (2013).</li>
<li>Junqueira, L. C., Bignolas, G., Brentani, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Picrosirius+staining+plus+polarization+microscopy%2C+a+specific+method+for+collagen+detection+in+tissue+sections%5BTitle%5D)+AND+%22Histochem+J%22%5BJournal%5D)">Picrosirius staining plus polarization microscopy, a specific method for collagen detection in tissue sections.</a> Histochem J. 11, 447-455 (1979).</li>
<li>Patten, R. D., Hall-Porter, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+animal+models+of+heart+failure%3A+development+of+novel+therapies%2C+past+and+present%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Heart+Fail%22%5BJournal%5D)">Small animal models of heart failure: development of novel therapies, past and present.</a> Circ Heart Fail. 2, 138-144 (2009).</li>
<li>Zolotareva, A. G., Kogan, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+experimental+occlusive+myocardial+infarction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cor+Vasa%22%5BJournal%5D)">Production of experimental occlusive myocardial infarction in mice.</a> Cor Vasa. 20, 308-314 (1978).</li>
<li>Michael, L. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+ischemia+and+reperfusion%3A+a+murine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Myocardial ischemia and reperfusion: a murine model.</a> Am J Physiol. 269, 2147-2154 (1995).</li>
<li>Salto-Tellez, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+infarction+in+the+C57BL%2F6J+mouse%3A+a+quantifiable+and+highly+reproducible+experimental+model%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Pathol%22%5BJournal%5D)">Myocardial infarction in the C57BL/6J mouse: a quantifiable and highly reproducible experimental model.</a> Cardiovasc Pathol. 13, 91-97 (2004).</li>
<li>Fernandez, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+coronary+arteries+of+the+C57BL%2F6+mouse+strains%3A+implications+for+comparison+with+mutant+models%5BTitle%5D)+AND+%22J+Anat%22%5BJournal%5D)">The coronary arteries of the C57BL/6 mouse strains: implications for comparison with mutant models.</a> J Anat. 212, 12-18 (2008).</li>
<li>Kumar, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+mouse+coronary+anatomy+and+myocardial+infarction+consequent+to+ligation%5BTitle%5D)+AND+%22Coron+Artery+Dis%22%5BJournal%5D)">Distinct mouse coronary anatomy and myocardial infarction consequent to ligation.</a> Coron Artery Dis. 16, 41-44 (2005).</li>
<li>Clauss, S. B., Walker, D. L., Kirby, M. L., Schimel, D., Lo, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patterning+of+coronary+arteries+in+wildtype+and+connexin43+knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Dyn%22%5BJournal%5D)">Patterning of coronary arteries in wildtype and connexin43 knockout mice.</a> Dev Dyn. 235, 2786-2794 (2006).</li>
<li>Icardo, J. M., Colvee, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Origin+and+course+of+the+coronary+arteries+in+normal+mice+and+in+iv%2Fiv+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Anat%22%5BJournal%5D)">Origin and course of the coronary arteries in normal mice and in iv/iv mice.</a> J Anat. 199, 473-482 (2001).</li>
<li>Yoldas, A., Ozmen, E., Ozdemir, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macroscopic+description+of+the+coronary+arteries+in+Swiss+albino+mice+%28Mus+musculus%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+S+Afr+Vet+Assoc%22%5BJournal%5D)">Macroscopic description of the coronary arteries in Swiss albino mice (Mus musculus).</a> J S Afr Vet Assoc. 81, 247-252 (2010).</li>
<li>James, T. N., Burch, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+supply+of+the+human+interventricular+septum%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Blood supply of the human interventricular septum.</a> Circulation. 17, 391-396 (1958).</li>
<li>Gao, X. M., Xu, Q., Kiriazis, H., Dart, A. M., Du, X. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+model+of+post-infarct+ventricular+rupture%3A+time+course%2C+strain-+and+gender-dependency%2C+tensile+strength%2C+and+histopathology%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Res%22%5BJournal%5D)">Mouse model of post-infarct ventricular rupture: time course, strain- and gender-dependency, tensile strength, and histopathology.</a> Cardiovasc Res. 65, 469-477 (2005).</li>
<li>Muthuramu, I., Jacobs, F., Singh, N., Gordts, S. C., De Geest, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+homocysteine+lowering+gene+transfer+improves+infarct+healing%2C+attenuates+remodelling%2C+and+enhances+diastolic+function+after+myocardial+infarction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Selective homocysteine lowering gene transfer improves infarct healing, attenuates remodelling, and enhances diastolic function after myocardial infarction in mice.</a> PLoS One. 8, 63710(2013).</li>
<li>Eaton, L. W., Weiss, J. L., Bulkley, B. H., Garrison, J. B., Weisfeldt, M. L. Regional cardiac dilatation after acute myocardial infarction: recognition by two-dimensional echocardiography. N Engl J Med. 300, 57-62 (1979).</li>
<li>Erlebacher, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Late+effects+of+acute+infarct+dilation+on+heart+size%3A+a+two+dimensional+echocardiographic+study%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Late effects of acute infarct dilation on heart size: a two dimensional echocardiographic study.</a> Am J Cardiol. 49, 1120-1126 (1982).</li>
<li>Schuster, E. H., Bulkley, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expansion+of+transmural+myocardial+infarction%3A+a+pathophysiologic+factor+in+cardiac+rupture%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Expansion of transmural myocardial infarction: a pathophysiologic factor in cardiac rupture.</a> Circulation. 60, 1532-1538 (1979).</li>
<li>Jugdutt, B. I., Michorowski, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+infarct+expansion+in+rupture+of+the+ventricular+septum+after+acute+myocardial+infarction%3A+a+two-dimensional+echocardiographic+study%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Role of infarct expansion in rupture of the ventricular septum after acute myocardial infarction: a two-dimensional echocardiographic study.</a> Clin Cardiol. 10, 641-652 (1987).</li>
<li>Pacher, P., Nagayama, T., Mukhopadhyay, P., Batkai, S., Kass, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+cardiac+function+using+pressure-volume+conductance+catheter+technique+in+mice+and+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Measurement of cardiac function using pressure-volume conductance catheter technique in mice and rats.</a> Nat Protoc. 3, 1422-1434 (2008).</li>
<li>Vanden Bergh, A., Flameng, W., Herijgers, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parameters+of+ventricular+contractility+in+mice%3A+influence+of+load+and+sensitivity+to+changes+in+inotropic+state%5BTitle%5D)+AND+%22Pflugers+Arch%22%5BJournal%5D)">Parameters of ventricular contractility in mice: influence of load and sensitivity to changes in inotropic state.</a> Pflugers Arch. 455, 987-994 (2008).</li>
</ol>

Geen van de auteurs meldt concurrerende financiële belangen.

Chronische veranderingen in myocardiale structuur en functie, kan de ontwikkeling van de linker ventriculaire disfunctie, en progressie van hartfalen te onderzoeken in verschillende muizenmodellen 12. Remodellering en disfunctie kan worden geïnduceerd door myocardinfarct of drukoverbelasting secundaire aorta vernauwing dwarse, of kunnen worden onderzocht in genetische modellen van gedilateerde cardiomyopathie 12. Uiteraard is het meest uitgesproken voordeel van muismodellen is de beschikbaarheid va...

Hartfalen is een syndroom waarbij het hart niet in staat is om bloed te pompen in een tempo dat overeenkomt met de cellulaire zuurstofbehoefte in rust of tijdens stress. Het wordt gekenmerkt door vochtretentie, kortademigheid en vermoeidheid, met name bij inspanning. Hartfalen is een groeiend probleem voor de volksgezondheid, de belangrijkste oorzaak van ziekenhuisopnames en een belangrijke doodsoorzaak. Ischemische hartziekte is de belangrijkste oorzaak van hartfalen1.
Ventriculaire remodellering verwijst naar veranderingen in structuur, grootte en vorm van de linker ventrikel. Met andere woorden, ventriculair remodelleren betreft een verandering van de linker ventrikel architectuur. Deze architectonische hermodellering van de linker ventrikel wordt veroorzaakt door letsel (bijv. myocardinfarct), door drukbewaking (bijv. systemische arteriële hypertensie of aortastenose) of door volumebelasting (bijv. mitralis-insufficiëntie). Aangezien ventriculair remodelleren de wandspanning beïnvloedt, heeft het een diepgaande impact op de hartfunctie en op de ontwikkeling van hartfalen.
Verlies van myocardweefsel na een acuut myocardinfarct resulteert in een verminderde systolische ejectie en een verhoogde linker ventrikel eind-diastolische volume en druk. Het Frank-Starling mechanisme, wat inhoudt dat een verhoogd eind-diastolisch volume resulteert in een verhoogde druk die tijdens de systolische fase wordt ontwikkeld, kan helpen om de cardiale output te herstellen. De bijkomende verhoogde wandspanning kan echter regionale hypertrofie in het niet-infarcteerde segment veroorzaken, terwijl in het infarcteerde gebied expansie en verdunning kunnen optreden. Experimentele dierstudies tonen aan dat het infarcteerde ventrikel hypertrofieert en dat de mate van hypertrofie afhankelijk is van de grootte van het infarct2.
Het verlies van myocardweefsel na een acuut myocardinfarct resulteert in een plotselinge toename van de belastingsomstandigheden. Post-infarct remodellering vindt plaats in een omgeving van volumebelasting, omdat het uitgerekt en verdunde infarcteerde weefsel het linker ventrikel volume verhoogt. Een verhoogd ventrikelvolume impliceert niet alleen verhoogde preload (passieve ventrikelwandspanning aan het einde van de diastole) maar ook verhoogde afterload (totale myocardwandspanning tijdens systolische ejectie). Afterload is verhoogd omdat de systolische straal is vergroot. Daarom wordt ventrikelremodellering na een myocardinfarct gekenmerkt door gemengde kenmerken van volumebelasting en drukbewaking.
Het myocard bestaat uit 3 geïntegreerde componenten: cardiomyocyten, extracellulaire matrix en de capillaire microcirculatie. Alle 3 componenten zijn betrokken bij het hermodelleringsproces. Matrix-metalloproteïnasen geproduceerd door ontstekingscellen veroorzaken afbraak van intermyocytaire collageen steunen en cardiomyocyte glijdering. Dit leidt tot infarctexpansie gekenmerkt door de onevenredige verdunning en dilatatie van het infarctsegment3. In latere stadia van hermodellering wordt interstitiële fibrose geïnduceerd, wat een negatief effect heeft op de diastolische eigenschappen van het hart.
Het vasculaire en cardiomyocyte compartiment in het myocard moet in het proces van ventrikelremodellering in balans blijven om weefselhypoxie te voorkomen4,5. Of hypertrofie progresseert tot hartfalen of niet, kan kritisch afhankelijk zijn van dit evenwicht tussen het vasculaire en cardiomyocyte compartiment in het myocard.
Een model van permanente ligatie van de linker voorste dalende kransslagader bij muizen wordt gebruikt om ventrikelremodellering en cardiale functie na een myocardinfarct te onderzoeken. Dit model is fundamenteel anders in termen van doelstellingen en pathofysiologische relevantie in vergelijking met het model van tijdelijke ligatie van de linker voorste dalende kransslagader. In dit laatste model van ischemie/reperfusie letsel, kan de initiële omvang van het infarct worden gemoduleerd door factoren die de myocardiale salvage na reperfusie beïnvloeden6. In tegenstelling daarmee is het infarctgebied 24 uur na permanente ligatie van de linker voorste dalende kransslagader vastgesteld. De cardiale functie in dit model zal worden beïnvloed door 1) het proces van infarctexpansie, infarct genezing en littekenvorming; en 2) de gelijktijdige ontwikkeling van linker ventrikel dilatatie, cardiale hypertrofie en ventrikelremodellering.

<table><tbody><tr><td>Buprenorfine (Buprenex)</td><td>Bedford Laboratories</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Natrium Pentobarbital (Nembutal)</td><td>Ceva</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Betadine</td><td>VWR internationals</td><td>200065-400</td><td></td></tr><tr><td>5 - 0 zijden hechtdraad</td><td>Ethicon, Johnson &amp; Johnson Medical</td><td>K890H</td><td></td></tr><tr><td>6 - 0 proleen hechtdraad&nbsp;</td><td>Ethicon, Johnson &amp; Johnson Medical</td><td>F1832</td><td></td></tr><tr><td>6 - 0 Ti- Cron hechtdraad</td><td>Ethicon, Johnson &amp; Johnson Medical</td><td>F1823</td><td></td></tr><tr><td>Urethaan&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>94300</td><td></td></tr><tr><td>Alconox</td><td>Alconox Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ventilator, MiniVent Model 845</td><td>Hugo Sachs</td><td>73-0043</td><td></td></tr><tr><td>Borst retractor of Thorax retractor</td><td>Kent Scientific corporation</td><td>INS600240</td><td>ALM Zelfhoudend, gekarteld, 7 cm lang, 4 x 4 "L" gevormde tanden, 3 mm x 3 mm</td></tr><tr><td>1.0 French Millar drukkatheter&nbsp;</td><td>Millar Instruments&nbsp;</td><td>SPR - 1000/NR</td><td></td></tr><tr><td>Powerlab</td><td>ADInstruments Pty Ltd.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>LabChart&reg; software</td><td>ADInstruments Pty Ltd.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rectaal sonde</td><td>ADInstruments Pty Ltd.</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

permanente ligatie van de linker anterior aflopend kransslagader in muizen: een model van post-myocardinfarct remodelling en hartfalen

Permanent Ligation of the Left Anterior Descending Coronary Artery in Mice: A Model of Post-myocardial Infarction Remodelling and Heart Failure

Hartfalen is een syndroom waarbij het hart faalt om bloed te pompen met een snelheid evenredig met mobiele zuurstofbehoefte in rust of tijdens stress. Het wordt gekenmerkt door het vasthouden van vocht, kortademigheid en vermoeidheid, met name bij inspanning. Hartfalen is een groeiend probleem voor de volksgezondheid, de belangrijkste oorzaak van ziekenhuisopname, en een belangrijke oorzaak van sterfte. Ischemische hartziekten is de belangrijkste oorzaak van hartfalen. Kamerdilatatie verwijst naar veranderingen in structuur, grootte en vorm van de linker ventrikel. Deze architecturale hermodellering van de linker ventrikel wordt geïnduceerd door verwonding (bijvoorbeeld myocardinfarct) door drukoverbelasting (bijvoorbeeld systemische arteriële hypertensie en aortastenose), of volume overbelasting. Sinds ventriculaire remodeling beïnvloedt muur stress, het heeft een grote invloed op de hartfunctie en op de ontwikkeling van hartfalen. Een model van permanente ligatie van de linker anterior descending kransslagader bij muizen wordt gebruikt om de ventriculaire remodeling en hartfunctie post-myocardinfarct onderzoeken. Dit model is fundamenteel anders dan in termen van doelstellingen en pathofysiologische relevantie ten opzichte van het model van voorbijgaande ligatie van de linker voorste dalende kransslagader. In dit laatste model van ischemie / reperfusie schade, de aanvankelijke omvang van het infarct worden gemoduleerd door factoren die myocardiale salvage na reperfusie beïnvloeden. Daarentegen wordt het infarct gebied op 24 uur na permanente ligatie van de linker voorste dalende kransslagader vast. Hartfunctie bij dit model zal worden beïnvloed door 1) het proces van uitbreiding van het infarct, infarct genezing en littekenvorming; en 2) de gelijktijdige ontwikkeling van de linker ventrikel dilatatie, hypertrofie van het hart, en ventriculaire remodeling. Naast het model van permanente ligatie van de linker voorste dalende kransslagader, de techniek van invasieve hemodynamische meaopnieuw metingen bij muizen wordt in detail gepresenteerd.

De mate van myocardiaal infarct kan worden beoordeeld door Evans blue / 2,3,5-trifenyltetrazoliumchloride (TTC) double kleuring. TTC is een redox indicator, die wordt omgezet dieprode 1,3,5-triphenylformazan in levend weefsel door de activiteit van verscheidene dehydrogenases in aanwezigheid van NADH 8. Figuur 1 toont een representatief deel van het hart 24 uur na ligatie van de linker voorste dalende kransslagader. Blauw-gekleurde vlakken geven niet-ischemische / normale regio&#39;s. Het myo...

Hartfalen is de belangrijkste oorzaak van ziekenhuisopname en een belangrijke doodsoorzaak. Een model van permanente ligatie van de linker voorste afdalende kransslagader bij muizen wordt toegepast om ventriculaire remodellering en cardiale disfunctie na een myocardinfarct te onderzoeken. De techniek van invasieve hemodynamische metingen bij muizen wordt gepresenteerd.

Permanente Ligatie van de linker anterior Aflopend Kransslagader in Muizen: Een model van Post-myocardinfarct Remodelling en hartfalen

Heart failure is a syndrome in which the heart fails to pump blood at a rate commensurate with cellular oxygen requirements at rest or during stress. It ...

Het algemene doel van de volgende experimenten is om de techniek van permanente ligatie van de linker voorste aflopende kransslagader bij muizen te presenteren. Dit model wordt toegepast om cardiale remodellering en de ontwikkeling van hartfalen na een hartinfarct te onderzoeken. In het eerste deel van de video wordt de procedure van permanente ligatie gedemonstreerd, terwijl in het tweede deel de evaluatie van de hartfunctie, met behulp van in vivo invasieve hemodynamische metingen bij muizen, wordt getoond.Het model van permanente ligatie van de linker voorste aflopende kransslagader zal worden gedemonstreerd door Marlin Locks, senior dierentechnicus van het centrum voor moleculaire vasculaire biologie. Eja, promovendus van microgroep, zal de techniek van invasieve hemodynamische metingen bij muizen presenteren. Begin door een licht op het nekgebied van een verdoofde muis te richten.Til vervolgens de tong van het dier op met een stompe pincet zodat de ingang van de larynx duidelijk zichtbaar is. Breng een zelfgemaakte stompe naald van 20 gauge door de larynx in de luchtpijp en verbind de muis vervolgens met de beademingsapparaat om te beoordelen of de intubatie correct is geplaatst. Zet de muis vast op een verwarmingskussen om hypothermie te voorkomen.Zorg ervoor dat de linker achterpoot de rechter achterpoot kruist voor een beter zicht op de linker ventrikel tijdens de operatie. Maak vervolgens een kleine transversale cutane incisie tot aan het borstbeen en scheid de onderliggende huid en spieren. Gebruik een vijf nul zijdedraad om de pectoralisspieren opzij te trekken en plaats vervolgens een stomp pincet om een incisie te maken in de derde intercostale ruimte.Beweeg het pincet onder de intercostalespieren van de laterale naar de mediale kant tot het borstbeen is bereikt. Duw vervolgens het pincet van binnenuit door naar de huid om de thoracale wand te doorboren. Snijd tenslotte voorzichtig de intercostalespier net boven het pincet af om de thoracotomie te voltooien.Zorg ervoor dat de longen niet worden doorboord, plaats een spons gedrenkt in 0,9% natriumchloride in de holte om de longen te beschermen en introduceer vervolgens een borstretractor in de intercostale ruimte om het linker atrium, linker ventrikel en linker voorste aflopende kransslagader bloot te leggen. Ligereer nu de linker voorste aflopende kransslagader met een enkele zes nul proline ligatuur ongeveer één millimeter onder de punt van het linker atrium en distaal van de eerste diagonale tak. Succesvolle ligatie zal een onmiddellijke verkleuring veroorzaken, resulterend in een bleek myocard uiterlijk binnen het getroffen gebied.Plaats nu drie zes nul tronnaden rond de intercostale ruimte en verwijder de spons uit de borstholte. Expandeer de longen opnieuw door de uitstroom van de beademingsapparaat te blokkeren en trek vervolgens de naden strak en druk op de borst om de herexpansie te herhalen. Gebruik een kleine hoeveelheid zoutoplossing om een gebrek aan luchtbellen en de succesvolle sluiting van de thorax te bevestigen.Kijk vervolgens door de intercostalespier om de normale expansie van de longen te bevestigen. Positioneer beide pectoralisspieren opnieuw om als extra barrière te dienen voor het voorkomen van een pneumothorax en gebruik vijf nul zijdedraad om de huid te sluiten. Ontkoppel vervolgens de muis van de beademingsapparaat en verwarm het dier op het verwarmingskussen tot het volledig is hersteld.Voordat u begint met de hemodynamische metingen, dompelt u een 1,0 Franse Miller-drukkatheter onder in steriel water bij 37 graden Celsius om de signaaldrift te minimaliseren. Na minimaal 30 minuten kalibreert u de druksensor elektronisch op nul en 100 millimeter kwik en registreert u de basislijngegevens op 2000 hertz. Zet vervolgens de verdoofde muis in rugligging op een verwarmingskussen, waarbij de temperatuur van het dier wordt gecontroleerd met een rectale sonde. Scheer het nekgebied en maak vervolgens een middenlijnsnede om de schildklier bloot te leggen.Fixeer vervolgens de nek met gebogen naalden en trek de speekselklier opzij om de rechter gemeenschappelijke halsslagader bloot te leggen. Identificeer nu de nervus vagus, die lijkt op een witte draad en langs de slagader ligt, en gebruik een gebogen pincet om de slagader voorzichtig van de zenuw te scheiden. Breng het gebogen pincet onder de rechter gemeenschappelijke halsslagader om het van de andere weefsels te scheiden en verwijder eventueel bindweefsel rond de slagader.Breng vervolgens twee zes nul zijdedraden onder de rechter gemeenschappelijke halsslagader en maak een strakke knoop op de bovenste draad. Plaats de draad in de richting van het hoofd, sluit hem en fixeer hem met een distale ligatie. Breng vervolgens de proximale draad twee keer van links naar rechts en fixeer hem met twee proximale niet-occlusieve draden op dit moment ook.Houd de halsslagader vochtig door steriele 0,9% natriumchloride op de slagader te druppelen. Gebruik vervolgens een 26 gauge naald om een incisie te maken in de rechter gemeenschappelijke halsslagader tussen de distale ligatie en de proximale niet-occlusieve draad. Breng de druksensor in de slagader.Duwt vervolgens voorzichtig de drukkatheter naar voren en pas de proximale niet-occlusieve draad zodanig aan dat de katheter voorzichtig door de draad, onder de sleutelbeen, kan passeren en zodat het vat gevuld blijft met bloed. Begin nu met het opnemen van het druksignaaL In een gezonde muis fluctueert het arteriële druksignaaL tussen een diastolische druk van 60 tot 70 millimeter kwik en een systolische druk van 100 tot 120 millimeter kwik.Richt de katheter via de innominaatarterie en de aorta in het linker ventrikel. De ventrikeldruk zal fluctueren tussen nul en 100 tot 120 millimeter kwik. Ten slotte, na het toestaan dat de katheter zich stabiliseert in het linker ventrikel, registreert u het signaal gedurende 30 tot 60 minuten.Afhankelijk van de experimentele vereisten kan de omvang van het myocardinfarct worden beoordeeld door Evans Blue, TTC dubbelkleuring. Hier worden representatieve secties van het hart 24 uur na ligatie van de linker voorste aflopende kransslagader getoond. De blauw gek

permanent-ligation-left-anterior-descending-coronary-artery-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Deze video laat zien hoe u een snelle en betrouwbare model te gebruiken om pathobiological en pathofysiologische processen van myocardischemie te bestuderen.

LAD-Ligatie: een muizenmodel van myocardinfarct

De chirurgische procedure gebruikt om experimentele myocardinfarct bij de muis begint met linker thoractomie tussen de derde en vierde ribben om visualiseren het voorste oppervlak van het hart en linker long. De linker coronaire arterie geligeerd, wordt de borst gesloten en de muis mag spontaan herstellen.

Gewijzigd Techniek voor Coronary Artery Ligatie in Muizen

In this video, we describe a surgical procedure to generate a mouse model of myocardial infarction by permanently ligating the left anterior descending coronary artery.

Generating Murine Model of Myocardial Infarction: A Surgical Procedure for Permanent Ligation of Left Anterior Descending Coronary Artery in Mouse Model

We introduceren een chirurgische methode experimentele ischemie / reperfusie (I / R) letsel veroorzaken simuleren myocardiaal infarct (MI) in muismodellen die zorgt voor meer duidelijkheid in positionering van de ligatie van de LAD (LAD) om de reproduceerbaarheid te verhogen MI van experimenten in muizen.

Een muizenmodel van myocard ischemie-reperfusie schade door de eileiders van de LAD

We bieden een betrouwbare methode voor ligatie van de linker voorwaartse dalende slagader (LAD) in een muismodel. Deze methode is relatief minder invasief dan andere methoden, waarbij endotracheale intubatie, een linkszijdige thoracotomie-aanpak en thoracentese betrokken zijn. Deze methode kan worden gebruikt als model voor zowel acuut als chronisch myocardinfarct (MI).

Murine Left Anterior Descending (LAD) coronaire Ligatie: een verbeterde en vereenvoudigd model voor myocardinfarct

Hierin beschrijven we een chirurgische ingreep die laat zien hoe u permanente ligatie van de linker-anterieure aflopende coronaire slagader bij muizen bereikt. Dit model is van groot belang om de pathofysiologie van myocardiaal infarct en de gelijktijdige biologische processen te onderzoeken.

Murine myocardinfarct model met behulp van permanente Ligatie van linker anterieure aflopende coronaire slagader

Hier beschrijven we een eenvoudige en reproduceerbare methode die myocardinfarct of myocardischemie-reperfusieletsel bij muizen kan induceren door precisieligatie van de linker voorste dalende kransslagader door middel van micromanipulatie.

Inductie van myocardinfarct en myocardischemie-reperfusieletsel bij muizen

Er zijn verschillende verschillen tussen de rechter en linker ventrikels. De pathofysiologie van het rechterventrikelinfarct (RVI) is echter niet opgehelderd. In het huidige protocol wordt een reproduceerbare methode voor het genereren van RVI-muismodellen geïntroduceerd, die een middel kan bieden om het mechanisme van RVI te verklaren.

Generatie en karakterisering van rechterventrikel myocardinfarct geïnduceerd door permanente ligatie van de rechter kransslagader bij muizen

Hier wordt een chirurgische procedure gepresenteerd voor permanente ligatie van de linker kransslagader bij muizen. Dit model kan worden gebruikt om de pathofysiologie en bijbehorende ontstekingsreactie na een hartinfarct te onderzoeken.

Ligatie van de linker kransslagader: een chirurgisch muizenmodel van myocardinfarct

Tal van genetische manipulaties en / of intramyocardial injecties van genen, eiwitten, cellen en / of biomaterialen wordt toegevoegd aan de dimensie van de tijd in studies van de acute ischemie / reperfusie schade en chronische remodeling bij muizen. Deze video illustreert de microchirurgische procedures voor ischemie / reperfusie, permanent coronaire ligatie, en intramyocardial injectie studies.

Kransslagader Ligatie en Intramyocardial Injectie in een muizenmodel van Infarction

Leer de techniek van permanente ligatie van de linker voorafdalende kransslagader bij muizen. Dit model onderzoekt hartremodellering en hartfalen na myocardinfarct met invasieve hemodynamische metingen.

Permanente Ligatie van de linker anterior Aflopend Kransslagader in Muizen: Een model van Post-myocardinfarct Remodelling en hartfalen (Video) | JoVE Journal

Permanente Ligatie van de linker anterior Aflopend Kransslagader in Muizen: Een model van Post-myocardinfarct Remodelling en hartfalen

Meer video's verkennen