Name: Een muizenmodel van reversibele en irreversibele Eenzijdige Ureteric Obstructie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-12-20T15:00:00.000+00:00
Duration: 14 min 5 s
Description: Leer een muismodel van reversibele en irreversibele unilaterale ureterobstructie met histologische analyse. Deze methode toont nierletsel en herstel na obstructieverwijdering voor onderzoek naar weefselremodellering.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Het huidige onderzoek werd ondersteund door subsidies van Kidney Research UK (ST4/2011), de Cunningham Trust (CT11/14), de Mrs AE Hogg Charitable Trust voor nieronderzoek en de Renal Endowment Fund van het Royal Infirmary of Edinburgh.

Algemeen Begeleiding: Animal experimenten werden uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijnen en voorschriften opgelegd door de Dieren (wetenschappelijke procedures) Act 1986. Dit protocol en de bijbehorende video-protocol zijn voor zowel een standaard UUO en een R-UUO, die kan worden uitgevoerd op vele muisstammen. In de bijbehorende video worden beide procedures uitgevoerd op mannelijke C57BL / 6-muizen van 8 weken. De in de sectie representatieve resultaten gegevens werden verkregen uit mannelijke FVB / n muizen. Opmerking: Dit protocol en bijbehorende video beschreven hoe een standaard UUO voeren en R-UUO gebruikmaking van de linker ureter, maar dezelfde technieken kunnen gemakkelijk worden toegepast op de juiste ureter. 1. Dierlijke Voorbereiding en Laparotomie <ol><li> Voer alle procedures met steriel (geautoclaveerd) instrumenten en verbruiksgoederen. </li><li> Injecteer ketamine hydrochloride (70 mg / kg) en medetomidine hydrochloride (1 mg / kg) intraperitoneaal te verdovende muis. Opmerking: De duur van de resulterende verdoving vlak 4 uur en geen aanvullende verdoving vereist. </li><li> Bevestig de diepte van de anesthesie door het verlies van reflexen bijvoorbeeld, teen knijpen. </li><li> Verwijder al het haar rond de incisie gebied en de voorbereiding van de buikhuid voor een operatie via de toepassing van een verdunde chloorhexidine oplossing. </li><li> Plaats de muis op een verwarmde chirurgische pad in een liggende positie en bevestig de ledematen aan de pad met behulp van low-tack plakband. </li><li> Tijdens de procedure controleren de muis op tekenen van verbrandingen ten gevolge van de verwarmde chirurgische pad. Als het mogelijk is gebruik maken van een niet-elektrische warmtebron. </li><li> Dien analgeticum door een subcutane injectie van buprenorfine hydrochloride (0.06mg / kg) en oog smeermiddel op drogen cornea voorkomen. </li><li> Voeg een middellijn laparotomie en een insnijding van de avasculaire linea alba middels weefsel scheiden schaar om toegang tot de buikholte krijgen. </li><li> Draperen de muis en plaats een colibriretractor in de incisie. </li></ol> 2. Eenzijdige Ureteric Obstructie <ol><li> Met behulp van gesteriliseerde wattenstaafjes de linker ureter bloot door het verplaatsen van de darmen naar de rechterkant van de buikholte en bedek ze met vochtige doeken. </li><li> Met behulp van schuine tang isoleren en til de linker urineleider. </li><li> Om een ​​ureteric obstructie te creëren, afbinden van de linker ureter tweemaal met 6 / O zwart gevlochten zijden hechtdraad ergens tussen de blaas en nierbekken. Voor de lange termijn experimenten, gebruiken absorbeerbare hechting voor alle abdominale ingrepen. Als alternatief kan een ligerende clip worden toegepast op de ureter. </li><li> De blaas van de ureter te isoleren, verdelen de ureter tussen de twee hechtingen. </li><li> Vervang de darmen voorzichtig in de peritoneale holte. </li><li> Volg de in paragraaf 4 vermelde stappen - herstel na operaties en Zorg aan de incisie te sluiten en het ombuigen van de anesthesie. </li></ol> 3. Voorbereiding voor Reversible Eenzijdige Ureteric Obstructie <ol><li> Bereid een muis voor de operatie en isoleren van de linker ureter zoals beschreven in de stappen 1,1-2,2 hierboven. </li><li> Een ureteric obstructie die kan worden omgekeerd maken ligeren van de linker ureter tweemaal met 6 / O zwart gevlochten zijden hechtdraad dichtbij de blaas. Laat één uiteinde van de bovenste hechtdraad zolang deze wordt gebruikt om de zachte walled plastic buizen verankeren plaats rond de ureter. </li><li> Voeg een langssleuf in een 5 mm lengte van zachte walled plastic buis zodanig dat het open om te worden toegepast op de urineleider kunnen worden gespreid. Elke zachte ommuurde silicone plastic buis met een inwendige diameter van 1 mm en buitendiameter van 2 mm, worden gebruikt. </li><li> Plaats de zachte ommuurde plastic buizenstelsel zachtjes rond de urineleider. Verzeker dat de lange hechtdraad Uit het midden van de spleet in de buis eenmaal is gesloten rond de ureter. </li><li> Plaats een lengte van 6 / O zwart gevlochten zijden hechtdraad rond de zachte ommuurde buis bijvoeging van de urineleider en bindeenmaal. Plaats nu het lange uiteinde van de hechtdraad, die uit het midden van de spleet in de buis, in langsrichting over de buis zodanig dat het ligt bovenop de eerder gebonden hechtdraad. </li><li> Bind de hechtdraad gelegen rond de buis tweemaal om de slang en de lange hechtdraad einde in plaats rond de urineleider te verankeren. Opmerking: adhesievorming de ureter en de zachte walled plastic buis te voorkomen kan een adhesie reductieoplossing worden toegepast op het gebied rond de buis. </li><li> Vervang de darmen voorzichtig in de peritoneale holte. </li></ol> 4. Post-operatief herstel en Zorg <ol><li> Sluit het buikvlies met festonsteek met behulp van 5 / O zwart gevlochten zijden hechtdraad en benaderen de huid met behulp van metalen huid clips. </li><li> Om het risico van postoperatieve infectie minimaliseren, breng een antiseptisch zoals jood / alcoholoplossing de buikhuid. </li><li> Gedeeltelijk omgekeerde anesthesie met atipamezolhydrochloride (2 mg / kg) subcutaan. </li&gt; <li> Dien fluïda door een subcutane injectie van 1 ml verwarmd zoutoplossing. </li><li> Toezien op de muis totdat hij bij bewustzijn is. </li><li> Laat de muis te herstellen in een verwarmde doos bij 29 ° C gedurende 24 uur. Bevochtigd voer kunnen ook zijn voorzien om fluïdum en voedingsopname bevorderen. </li><li> Laat de muis te herstellen tot een gewenst niveau van obstructie, kenmerkend 7 dagen induceren. </li><li> Voor de lange termijn herstel experimenten, bieden lopende analgetica. Als de muis te vorderen langer dan 7 dagen, verwijder de huid clips 7 dagen na de operatie. </li><li> Zodra de gewenste obstructie is geïnduceerd, hetzij omgekeerde UUO, zoals hieronder beschreven, of euthanaseren de muis door cervicale dislocatie en verzamel de nieren voor histopathologisch onderzoek. </li></ol> 5. Omkeerbare Eenzijdige Ureteric Obstructie <ol><li> Voor het uitvoeren van een R-UUO bereiden een muis, die de voorbereiding voor R-UUO heeft ondergaan, voor een operatie, zoals beschreven in stap 10,1-1,7. </li><li> Indien aanwezig, neem de skin clips splitsen of verwijderen hechtingen in het peritoneum toegang tot de buikholte krijgen. Opmerking: Als de urineleider werd gehinderd voor een lange termijn experiment huid clips moeten zijn verwijderd 7 dagen na toepassing. </li><li> Bereid de muis en isoleer de linker ureter zoals beschreven in stap 1,8 tot 2,2. </li><li> Met behulp van schuine pincet, gratis de zachte ommuurde plastic slang van elke granulomateuze weefsel dat kan hebben gevormd. </li><li> Snijd de hechtdraad die de plastic slang rond de verstopte urineleider met een scalpel en verwijder de slang. </li><li> Bevestig succesvolle UUO door beoordeling van de aanwezigheid van hydronephrosis in de linker nier, dient de nier ook verschijnen bleek. </li><li> Verdeel de ureter tussen de hechtingen. </li><li> Overgebleven lengte van ureter, aan de nieren, een klein stukje steriel gaas. Dit wordt gebruikt om het urinesediment en dode cellen die wegtrekken uit de ureter een verzamelennd nierbekken wanneer de hechtdraad wordt verwijderd. </li><li> Verdeel de ureter hierboven, maar nabij de hechtdraad en laat de nier uitlekken op het gaas. Laat de onderste hechtdraad, het dichtst bij de blaas, intact. Dit is om te voorkomen dat urine lekt uit de blaas en in de peritoneale holte. </li><li> Zodra de ureter en nierbekken zijn geleegd toepassen lange 6 / O zwart gevlochten zijden hechtdraad aan het einde van de resterende lengte van de ureter. Dit wordt gebruikt om de ureter blaas anastomose later uitgevoerde steun. </li><li> Volg de onderstaande stappen om de resterende duur van de urineleider anastomose in de blaas: <ol><li> Draai de ureter, zodat het ligt anterior naar de uitgangspositie en ligt over de nier. </li><li> Plaats één 9 / O polyamide monofilament hechtmateriaal tacking 2 mm van het uiteinde van de ureter, zodat blijkt in de richting van de blaas. Let erop dat de hechting blijft in de gespierde jas en niet de urineleider lumen voeren. De overstag hechtdraad will worden gebruikt om de ureter in de blaas verankeren. </li><li> Om een ​​kanaal door de blaas te maken, langs een 21G naald diagonaal door de blaas, zodat deze uit naar de voorzijde (ventrale) wand van de blaas. </li><li> Rusten een eyed naalden in de schuine kant van de 21G naald. Gebruik de 21G naald om de ogen naald te begeleiden bij de blaas. De ogen naald wordt gebruikt om de ureter maken door de blaas. </li><li> Leid de 9 / O tacking hechtdraad, toegepast op de ureter in stap 5.11.2, door de eerste incisie in de blaas en uit door de blaaswand nabij de ingang. Zodra de ureter wordt door de blaas wordt deze gekoppeld aan de ureter naar de blaas verankeren. </li><li> Plaats de lange 6 / O zwart gevlochten zijden hechtdraad aangebracht op het einde van de ureter in stap 5.10 door de ogen naald. </li><li> Trekken voorzichtig de ogen naald uit de blaas tegelijkertijd voor zorgen dat de urineleider ook wordt getrokken door de blaas. </li><li> Zodra de ureter Uit the blaas verwijder de ogen naald en een klem toepassing op de lange hechting aan het einde van de ureter om terugtrekken terug in de blaas te voorkomen. </li><li> Om de urineleider binnen plaats te verankeren in de blaas, bind de 9 / O polyamide monofilament tack hechtdraad, toegepast in stap 5.11.5. </li><li> Gelden aanvullende enkele 9 / O polyamide monofilament stropdas hechtingen, zoals beschreven in de stappen 5.11.2 en 5.11.5 op twee locaties rond het toegangspunt tot het stevig verankeren van de urineleider in de blaas. </li><li> De achterkant van geopende schaar, drukt de blaaswand weer iets meer van de opkomende urineleider bloot. </li><li> Verdeel de ureter boven de lange hechting aan het einde van de ureter. De ureter moet terugtrekken in het lichaam van de blaas. Het is gebruikelijk om urine stroomt uit de opening in de blaas te observeren, bevestigt de open lumen van de ureter. </li><li> Sluit de uitgang wond in de blaas met een 9 / O polyamide monofilament hechtdraad. </li></ol></li><li> Plaats voorzichtig de darmen inde peritoneale holte. </li><li> Post-operatieve zorg, zoals beschreven in de stappen 4,1-4,8. </li><li> Laat de muis om te herstellen totdat de nieren wordt gedecomprimeerd, meestal 7 dagen. </li><li> Aan de experimentele eindpunt, euthanaseren de muis door cervicale dislocatie en het verzamelen van de nieren voor histopathologische analyse. </li></ol>

<ol><li>Chevalier, R. L., Forbes, M. S., Thornhill, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ureteral+obstruction+as+a+model+of+renal+interstitial+fibrosis+and+obstructive+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Ureteral obstruction as a model of renal interstitial fibrosis and obstructive nephropathy.</a> Kidney Int. 75, 1145-1152 (2009).</li>
<li>Kipari, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nitric+oxide+is+an+important+mediator+of+renal+tubular+epithelial+cell+death+in+vitro+and+in+murine+experimental+hydronephrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Nitric oxide is an important mediator of renal tubular epithelial cell death in vitro and in murine experimental hydronephrosis.</a> Am J Pathol. 169, 388-399 (2006).</li>
<li>Henderson, N. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Galectin-3+expression+and+secretion+links+macrophages+to+the+promotion+of+renal+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Galectin-3 expression and secretion links macrophages to the promotion of renal fibrosis.</a> Am J Pathol. 172, 288-298 (2008).</li>
<li>Kitamoto, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+liposome+clodronate+on+renal+leukocyte+populations+and+renal+fibrosis+in+murine+obstructive+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Sci%22%5BJournal%5D)">Effects of liposome clodronate on renal leukocyte populations and renal fibrosis in murine obstructive nephropathy.</a> J Pharmacol Sci. 111, 285-292 (2009).</li>
<li>Tapmeier, T. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reimplantation+of+the+ureter+after+unilateral+ureteral+obstruction+provides+a+model+that+allows+functional+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Reimplantation of the ureter after unilateral ureteral obstruction provides a model that allows functional evaluation.</a> Kidney Int. 73, 885-889 (2008).</li>
<li>Cochrane, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+structural+and+functional+repair+in+a+mouse+model+of+reversal+of+ureteral+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Renal structural and functional repair in a mouse model of reversal of ureteral obstruction.</a> J Am Soc Nephrol. 16, 3623-3630 (2005).</li>
<li>Puri, T. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+kidney+disease+induced+in+mice+by+reversible+unilateral+ureteral+obstruction+is+dependent+on+genetic+background%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Chronic kidney disease induced in mice by reversible unilateral ureteral obstruction is dependent on genetic background.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 298, F1024-F1032 (2010).</li>
<li>Heikkila, J., Holmberg, C., Kyllonen, L., Rintala, R., Taskinen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+risk+of+end+stage+renal+disease+in+patients+with+posterior+urethral+valves%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">Long-term risk of end stage renal disease in patients with posterior urethral valves.</a> J Urol. 186, 2392-2396 (2011).</li>
<li>Ravanan, R., Tomson, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Natural+history+of+postobstructive+nephropathy%3A+a+single-center+retrospective+study%5BTitle%5D)+AND+%22Nephron+Clin+Pract%22%5BJournal%5D)">Natural history of postobstructive nephropathy: a single-center retrospective study.</a> Nephron Clin Pract. 105, c165-c170 (2007).</li>
<li>Bascands, J. L., Schanstra, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Obstructive+nephropathy%3A+insights+from+genetically+engineered+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Obstructive nephropathy: insights from genetically engineered animals.</a> Kidney Int. 68, 925-937 (2005).</li>
<li>Park, H. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postobstructive+regeneration+of+kidney+is+derailed+when+surge+in+renal+stem+cells+during+course+of+unilateral+ureteral+obstruction+is+halted%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Postobstructive regeneration of kidney is derailed when surge in renal stem cells during course of unilateral ureteral obstruction is halted.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 298, F357-F364 (2010).</li>
<li>Manson, S. R., Niederhoff, R. A., Hruska, K. A., Austin, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endogenous+BMP-7+is+a+critical+molecular+determinant+of+the+reversibility+of+obstruction-induced+renal+injuries%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Endogenous BMP-7 is a critical molecular determinant of the reversibility of obstruction-induced renal injuries.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 301, F1293-F1302 (2011).</li>
<li>Manson, S. R., Niederhoff, R. A., Hruska, K. A., Austin, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+BMP-7-Smad1%2F5%2F8+pathway+promotes+kidney+repair+after+obstruction+induced+renal+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">The BMP-7-Smad1/5/8 pathway promotes kidney repair after obstruction induced renal injury.</a> J Urol. 185, 2523-2530 (2011).</li>
<li>Chaves, L. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contrasting+effects+of+systemic+monocyte%2Fmacrophage+and+CD4%2B+T+cell+depletion+in+a+reversible+ureteral+obstruction+mouse+model+of+chronic+kidney+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Dev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Contrasting effects of systemic monocyte/macrophage and CD4+ T cell depletion in a reversible ureteral obstruction mouse model of chronic kidney disease.</a> Clin Dev Immunol. 2013, 836-989 (2013).</li>
<li>Haque, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Longitudinal+changes+in+MRI+markers+in+a+reversible+unilateral+ureteral+obstruction+mouse+model%3A+preliminary+experience%5BTitle%5D)+AND+%22J+Magn+Reson+Imaging%22%5BJournal%5D)">Longitudinal changes in MRI markers in a reversible unilateral ureteral obstruction mouse model: preliminary experience.</a> J Magn Reson Imaging. 39, 835-841 (2014).</li>
<li>Bai, Z. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arterially+transplanted+mesenchymal+stem+cells+in+a+mouse+reversible+unilateral+ureteral+obstruction+model%3A+in+vivo+bioluminescence+imaging+and+effects+on+renal+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Med+J%22%5BJournal%5D)">Arterially transplanted mesenchymal stem cells in a mouse reversible unilateral ureteral obstruction model: in vivo bioluminescence imaging and effects on renal fibrosis.</a> Chinese Med J. 126, 1890-1894 (2013).</li>
<li>Chaabane, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+functional+decline+and+glomerulotubular+injury+are+arrested+but+not+restored+by+release+of+unilateral+ureteral+obstruction+%28UUO%29%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Renal functional decline and glomerulotubular injury are arrested but not restored by release of unilateral ureteral obstruction (UUO).</a> Am J Physiol Renal Physiol. 304, F432-F439 (2013).</li>
<li>Thornhill, B. A., Burt, L. E., Chen, C., Forbes, M. S., Chevalier, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variable+chronic+partial+ureteral+obstruction+in+the+neonatal+rat%3A+a+new+model+of+ureteropelvic+junction+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Variable chronic partial ureteral obstruction in the neonatal rat: a new model of ureteropelvic junction obstruction.</a> Kidney Int. 67, 42-52 (2005).</li>
<li>Thornhill, B. A., Chevalier, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variable+partial+unilateral+ureteral+obstruction+and+its+release+in+the+neonatal+and+adult+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Variable partial unilateral ureteral obstruction and its release in the neonatal and adult mouse.</a> Methods Mol Biol. 886, 381-392 (2012).</li>
</ol>

De auteurs hebben geen concurrerende of tegenstrijdige belangen te onthullen.

Obstructie van de nier kan zowel inheemse als getransplanteerde nieren aantasten en leidt tot nierbeschadiging en littekenvorming. Het R-UUO-model is relevant voor menselijke ziekten, aangezien patiënten vaak een obstructie van het nierkanaal hebben die secundair is aan prostaathypertrofie, posterior urethrale kleppen, enz. dat decompressie vereist en patiënten vaak worden achtergelaten met significante resterende nierfunctiestoornissen waarvoor momenteel geen behandelingsopties bestaan en die uiteindelijk kunnen leiden ...

Het algemene doel van het experimentele model dat hier wordt beschreven, is om obstructieve nefropathie te induceren door unilaterale ureterobstructie (UUO), die ofwel onomkeerbaar (UUO) ofwel omkeerbaar (R-UUO) kan zijn. Een eenvoudig onomkeerbaar model van UUO wordt gepresenteerd waarbij de linkerureter permanent wordt geobstrueerd door ligatie met een hechtdraad of door het aanbrengen van een ligatieclip. Dit resulteert in een duidelijke dilatatie van de ureter samen met verminderde renale bloedstroom en glomerulaire filtratie. Nierbiopsie toont tubulaire dilatatie en steeds ernstiger interstitiële renale ontsteking en fibrose. Onomkeerbare UUO is een nuttig model en is door veel onderzoekers gebruikt bij de studie van zowel renale ontsteking als fibrose.1-4 Hoewel het onomkeerbare model van UUO enige chirurgische expertise vereist, is het relatief eenvoudig en wordt het vaak gebruikt om inzicht te krijgen in de pathogenese van interstitiële nierbeschadiging en de daaruit voortvloeiende fibrose. Ook gepresenteerd is een minder vaak gebruikt R-UUO-model dat een wijziging gebruikt van de methode die oorspronkelijk werd beschreven door Tapmeier et al.5 Het R-UUO-model heeft veel potentieel voor de toekomst voor de studie van inflammatoire en immuunprocessen, cellulaire en weefselregeneratie en het daaropvolgende weefselremodellering na het verwijderen van een schadelijk stimulus.
Het meer uitdagende R-UUO-model is door een beperkt aantal onderzoekers gebruikt, waarbij sommige groepen een aanzienlijk andere chirurgische techniek hanteren dan hier beschreven6,7, hoewel met interessante resultaten. In het gepresenteerde R-UUO-model wordt de ureter geligateerd om volledige ureterobstructie te induceren voor een periode die voldoende is om het gewenste niveau van beschadiging en fibrose te induceren: 7 dagen van UUO werd gekozen in de hier beschreven methode. De ureterobstructie wordt omgekeerd en de nier wordt gedurende een periode, bepaald door de onderzoeker, gedecomprimeerd voordat de muizen worden gedood en de nier voor analyse wordt verwijderd: 7 dagen decompressie werd gekozen in de hier beschreven methode, hoewel een langere periode zou worden gekozen als de resolutiebereiding van ontsteking en fibrose werd bestudeerd. Hoewel de hier beschreven methode aanzienlijke chirurgische expertise vereist, biedt deze verschillende voordelen ten opzichte van andere R-UUO-modellen. De toepassing van zachte, beklede kunststofbuisjes op de geobstrueerde ureter voorkomt overmatige ureterdilatatie en dit vergemakkelijkt de daaropvolgende manipulatie en anastomose van de ureter. Verder wordt in het beschreven R-UUO-model de ureter verdeeld, waardoor de verwijdering van eventueel resterend urinesediment en puin mogelijk is. Dit bevestigt dat de resterende ureterholte gede-obstrueerd en doorlaatbaar is voorafgaand aan anastomose met de blaas.
Experimenten die zowel de onomkeerbare als de omkeerbare UUO-modellen omvatten, kunnen onderzoekers een krachtig inzicht bieden in de moleculaire en cellulaire mechanismen van zowel beschadiging als daaropvolgende resolutiebereiding en regeneratie. Daarom zou het hier beschreven R-UUO-model zeer relevant zijn voor onderzoekers die geïnteresseerd zijn in post-inflammatoire weefselremodellering en hoe deze kan worden gemoduleerd.

<table><tbody><tr><td>Blunt Dissecting Scissors</td><td>Fine Science Tools</td><td>14072-10</td><td></td></tr><tr><td>Spring Scissors &ndash; straight</td><td>Fine Science Tools</td><td>15000-10</td><td></td></tr><tr><td>Toothed forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>11021-12</td><td></td></tr><tr><td>Angled forceps x 2</td><td>Fine Science Tools</td><td>00649-11</td><td></td></tr><tr><td>Straight forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>00632-11</td><td></td></tr><tr><td>Colibri 3 cm wire retractor</td><td>Fine Science Tools</td><td>17000-03</td><td></td></tr><tr><td>Castroviejo needle holder with lock</td><td>Fine Science Tools</td><td>12565-14</td><td></td></tr><tr><td>Wound clip applicator</td><td>Fine Science Tools</td><td>12031-07</td><td></td></tr><tr><td>7 mm wound clips</td><td>Fine Science Tools</td><td>12032-07</td><td></td></tr><tr><td>Castroviejo micro needle holder with lock</td><td>Fine Science Tools</td><td>12060-01</td><td></td></tr><tr><td>OPMI pico microscope</td><td>Carl Zeiss</td><td>S100</td><td></td></tr><tr><td>Heat electronic pad</td><td>Cozee Comfort</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>6/O silk braided suture</td><td>Harvard Apparatus</td><td>72-3287</td><td></td></tr><tr><td>9/O Dafilon (polyamide) suture</td><td>B-Braun</td><td>G1111434</td><td></td></tr><tr><td>5/O braided silk suture</td><td>Harvard Apparatus</td><td>51-7680</td><td></td></tr><tr><td>Regular bevel needle, 1 inch, 21G</td><td>Becton, Dickinson and Company</td><td>305175</td><td></td></tr><tr><td>1 ml syringe slip tip</td><td>Becton, Dickinson and Company</td><td>300184</td><td></td></tr><tr><td>Wypall paper swabs</td><td>Kimberley-Clark</td><td>L40</td><td>Gesteriliseerde (Autoclaaf)</td></tr><tr><td>Cotton wool buds</td><td>Johnson and Johnson</td><td>n/a</td><td>Gesteriliseerde (Autoclaaf)</td></tr><tr><td>Plain drapes</td><td>Guardian</td><td>CB03</td><td>Gesteriliseerde (Autoclaaf)</td></tr><tr><td>Soft wall silicone rubber tubing</td><td></td><td></td><td>Silicone buis - interne diameter 1,0 mm; externe diameter 2,0 mm; wanddikte 0,6 mm</td></tr><tr><td>(Lacri-Lube) Witte zachte paraffine 57,3%, minerale olie 42,5% en lanoline alcohols 0,2%</td><td>Allergan Ltd</td><td>21956GB10X</td><td></td></tr><tr><td>(Videne) Povidon-jodium 10%</td><td>Ecolab Ltd</td><td>PL 04509/0041</td><td></td></tr><tr><td>(Vetalar V) Ketamine hydrochloride</td><td>Pfizer Animal Health</td><td>Vm 42058/4165</td><td>100mg/ml oplossing</td></tr><tr><td>(Domitor) Medetomidine hydrochloride</td><td>Orion Pharma</td><td>Vm 06043/4003</td><td>1mg/ml</td></tr><tr><td>(Vetergesic) Buprenorphine hydrochloride</td><td>Alsto Animal Health</td><td>Vm 00063/4002</td><td>0,3mg/ml</td></tr><tr><td>(Antisedan) Atipamezole hydrochoride</td><td>Orion Pharma</td><td>Vm 06043/4004</td><td>5mg/ml</td></tr><tr><td>(Adept) 4% Icodextrin</td><td>Baxter</td><td></td><td>Adhesie reductie oplossing</td></tr><tr><td>NaCl 0,9%</td><td>Baxter</td><td>FKE1323</td><td></td></tr></tbody></table>

een muizenmodel van reversibele en irreversibele eenzijdige ureteric obstructie

A Murine Model of Irreversible and Reversible Unilateral Ureteric Obstruction

Obstructie van de nier kan zowel invloed hebben op native als getransplanteerde nieren en leidt tot nierbeschadiging en littekenvorming. Hier wordt een model van obstructieve nefropathie gepresenteerd dat wordt veroorzaakt door unilaterale ureterobstructie (UUO), die ofwel onomkeerbaar (UUO) ofwel omkeerbaar (R-UUO) kan zijn. In het onomkeerbare UUO-model kan de ureter gedurende variabele periodes worden geblokkeerd om steeds ernstiger nierontsteking en interstitiële fibrotische littekenvorming te induceren. In het omkeerbare R-UUO-model wordt de ureter geblokkeerd om hydronefrose, tubulaire dilatatie en ontsteking te induceren. Na een geschikte periode wordt de ureterobstructie chirurgisch omgekeerd door anastomose van de eerder geblokkeerde, doorgesneden ureter met de blaas om volledige decompressie van de nier en herstel van de urinestroom naar de blaas mogelijk te maken. Het onomkeerbare UUO-model is gebruikt om verschillende aspecten van nierondersteking en littekenvorming te onderzoeken, inclusief de pathogenese van de ziekte en het testen van potentiële ontstekingsremmende of antifibrotische therapieën. Het meer uitdagende model van R-UUO is door sommige onderzoekers gebruikt en biedt aanzienlijk onderzoekspotentieel omdat het de studie van ontstekings- en immuunprocessen en weefselremodellering mogelijk maakt in een beschadigde en gelittekende nier na verwijdering van de schadelijke stimulus. Als gevolg hiervan biedt het R-UUO-model onderzoekers de mogelijkheid om de resolutiekwestie van nierondersteking samen met belangrijke aspecten van weefselreparatie te onderzoeken. Deze experimentele modellen zijn relevant voor de menselijke ziekte, aangezien patiënten vaak met obstructie van de nierkanaaltjes worden gepresenteerd die decompressie vereisen en vaak worden achtergelaten met aanzienlijke resterende nierbeschadiging waarvoor geen huidige behandelingsopties bestaan en die mogelijk tot een eindstadium van nierfalen kunnen leiden.

Het uiterlijk van de nierveranderingen aanzienlijk na ureterale obstructie en wordt bleker en gespannen palpatie met de tijd (Figuur 1). Er is steeds dilatatie van de ureter proximaal van de obstructie en het nierbekken. De nier wordt steeds atrofische de duur van obstructieve nefropathie toeneemt met verlengde obstructie resulteert in een sterke verdunning van de renale cortex en medulla. Naar aanleiding van de omkering van de ureteric obstructie, de kleur van de nier wordt donkerder als de doorbloedin...

Het muismodel van onomkeerbare eenzijdige ureterische obstructie (UUO) wordt gepresenteerd samen met het model van omkeerbare UUO waarbij de ureterische obstructie wordt verlicht door anastomose van de afgesneden ureter in de blaas. Deze modellen maken de studie van nierontsteking en littekenvorming mogelijk, evenals weefselremodellering.

Een muizenmodel van reversibele en irreversibele Eenzijdige Ureteric Obstructie

Obstruction of the kidney may affect native or transplanted kidneys and results in kidney injury and scarring. Presented here is a model of obstructive ...

Deze video presenteert een muismodel van obstructieve neuropathie geïnduceerd door unilaterale ureterobstructie, die ofwel onomkeerbaar of omkeerbaar kan zijn; er worden histologische gegevens gepresenteerd die de resulterende structurele beschadiging en het herstel daarvan na het ongedaan maken van de obstructie belichten. Deze schematische weergave illustreert de belangrijkste stappen van dit model. Hier zien we de linker nier, de ureter en de blaas.Een standaard unilaterale ureterobstructie wordt geïnduceerd door ligatie van de ureter. De ureter raakt gedilateerd en de nier wordt na verloop van tijd hydronefrotisch. Om een reversibele unilaterale ureterobstructie uit te voeren, wordt de ureter dicht bij de blaas geligeerd en wordt een zachte plastic buis, in het grijs weergegeven, rond de ureter aangebracht op het punt van de obstructie.Om overmatige ureterdilatatie te beperken, raakt de nier na verloop van tijd hydronefrotisch en wordt deze vervolgens op een voor de studie geschikt tijdstip gedestrueerd. Na zeven dagen in dit experiment wordt de zachte wandbuis verwijderd en wordt de ureter net boven het niveau van de ligatie doorgesneden. De onbelemmerde ureter wordt via een a

a-murine-model-irreversible-reversible-unilateral-ureteric

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

This video demonstrates the procedure to generate a unilateral ureteral obstruction mouse model. The procedure involves cutting one of the ureters of the mouse to obstruct urine flow.

Unilateral Ureteral Obstruction Murine Model: A Surgical Procedure to Obstruct the Urinary Flow from a Kidney in Mouse Models

We beschrijven een methode voor het evalueren van de microRNA-expressie in de nieren van muizen met eenzijdige ureterale obstructie (UUO) door kwantitatieve reverse-transcriptie polymerase kettingreactie. Dit protocol is geschikt voor het bestuderen van niermicroRNA expressieprofielen bij muizen met UUO en in de context van andere pathologische aandoeningen.

Kwantitatieve real-time PCR-evaluatie van microRNA-expressies in muisnier met eenzijdige ureterale obstructie

Hier presenteren we een protocol met behulp van 2-fotonmicroscopie in München Wistar Fromter-ratten met oppervlakteglomeruli om de effecten van langdurige ureterale obstructie op glomerulaire dynamiek en functie te kwantificeren.

2-fotonenmicroscopie gebruiken om de effecten van chronische unilaterale ureterale obstructie op glomerulaire processen te kwantificeren

Het huidige protocol beschrijft een stapsgewijs, reproduceerbaar model van eenzijdige ureterobstructie.

Een onrijp muizenmodel van omkeerbare unilaterale ureterobstructie

Dit protocol beschrijft een methode voor het induceren van unilaterale ureterobstructie (UUO) bij muizen om de progressie van weefselfibrose bij obstructieve nefropathie te bestuderen. Het omvat chirurgische ingrepen, postoperatieve zorg en methoden voor de beoordeling van fibrose.

Unilateraal ureterobstructiemodel voor het onderzoeken van interstitiële fibrose van de nier

Dit artikel bevat gedetailleerde instructies om onderzoekers in staat te stellen omkeerbare unilaterale ureterobstructie bij muizen uit te voeren met behulp van een gestandaardiseerd model dat analyse mogelijk maakt van de structurele en functionele resultaten op lange termijn na de omkering van langdurige ureterobstructie.

Een muismodel om de structurele en functionele resultaten op lange termijn te evalueren na de omkering van langdurige unilaterale ureterobstructie

Cholestase is een klinische aandoening die vaak voorkomen door zowel chirurgen en gastro-enterologen. Oprichting van een reversibele cholestatische rat model kan een uitdaging zijn in het licht van de kleinere afmetingen en de unieke hepatopancreatobiliary anatomie bij ratten. Deze video artikel demonstreert de creatie van een reversibele cholestatische model.

Creatie van Omkeerbare Cholestatische Rat Model

Een betrouwbare en herhaalbare manier om een ​​eenzijdige cervicale dwarslaesie het gebruik van de oneindige horizon botslichaam te produceren wordt beschreven. De methode maakt gebruik van een speciaal ontworpen frame en vast te klemmen aan de wervelkolom te stabiliseren. De gestandaardiseerde procedure en biomechanische letsel parameters resulteren in een toereikende en duurzame verwondingen.

Een Contusive model van eenzijdige cervicale ruggenmerg letsel met behulp van de Oneindige Horizon Impactor

Chirurgisch trauma veroorzaakt een ontstekingsreactie. Cytokines en endogene liganden zijn bekend voor het moduleren van een myocard infarct grootte na ischemie en reperfusie. We presenteren een aangepaste gesloten kist model van muizen ischemie en reperfusie met behulp van gewichten opknoping om de effecten van thoracotomie te minimaliseren.

Een murine Closed-borst Model van myocardiale ischemie en reperfusie

Een murine model van cutane wondgenezing die kunnen worden gebruikt om therapeutische samenstellingen te beoordelen fysiologische en pathofysiologische instellingen.

Muizenmodel van wondgenezing

Leer een muismodel van reversibele en irreversibele unilaterale ureterobstructie met histologische analyse. Deze methode toont nierletsel en herstel na obstructieverwijdering voor onderzoek naar weefselremodellering.

Een muizenmodel van reversibele en irreversibele Eenzijdige Ureteric Obstructie

Meer video's verkennen