Name: Eliciting and Analyzing Male Mouse Ultrasonic Vocalization (USV) Songs (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-05-09T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 44 s
Description: Leer hoe je ultrasone vocalisaties van mannelijke muizen opneemt en analyseert in verschillende sociale contexten. Deze methode helpt onderzoekers communicatie en neuropsychiatrische stoornissen bestuderen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd ondersteund door de fondsen van Howard Hughes Medical Institute aan EDJ. Wij bedanken Pr. Sylvie Granon (NeuroPSI - Universiteit Parijs Zuid-XI - FRANKRIJK) om ons de luidsprekerhardware uit te lenen. We bedanken ook leden van het Jarvis Lab voor hun steun, discussies, correcties en opmerkingen over dit werk, met name Joshua Jones Macopson voor hulp bij cijfers en tests. Wij danken Dr. Gustavo Arriaga voor hulp met de Mouse Song Analyzer-software, die het voor ons opvullen naar V1.3 en andere aspecten van dit protocol. V1.0 van de software is ontwikkeld door Holy and Guo, en v1.1 en v1.3 door Arriaga.

<ol><li>Amato, F. R., Scalera, E., Sarli, C., Moles, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pups+call%2C+mothers+rush%3A+does+maternal+responsiveness+affect+the+amount+of+ultrasonic+vocalizations+in+mouse+pups%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Genet%22%5BJournal%5D)">Pups call, mothers rush: does maternal responsiveness affect the amount of ultrasonic vocalizations in mouse pups.</a> Behav. Genet. 35, 103-112 (2005).</li>
<li>Panksepp, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Affiliative+behavior%2C+ultrasonic+communication+and+social+reward+are+influenced+by+genetic+variation+in+adolescent+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+ONE%22%5BJournal%5D)">Affiliative behavior, ultrasonic communication and social reward are influenced by genetic variation in adolescent mice.</a> PloS ONE. 2, e351(2007).</li>
<li>Moles, A., Costantini, F., Garbugino, L., Zanettini, C., D'Amato, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+vocalizations+emitted+during+dyadic+interactions+in+female+mice%3A+a+possible+index+of+sociability%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic vocalizations emitted during dyadic interactions in female mice: a possible index of sociability.</a> Behav. Brain Res. 182, 223-230 (2007).</li>
<li>Chabout, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adult+male+mice+emit+context-specific+ultrasonic+vocalizations+that+are+modulated+by+prior+isolation+or+group+rearing+environment%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+ONE%22%5BJournal%5D)">Adult male mice emit context-specific ultrasonic vocalizations that are modulated by prior isolation or group rearing environment.</a> PloS ONE. 7, e29401(2012).</li>
<li>Yang, M., Loureiro, D., Kalikhman, D., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Male+mice+emit+distinct+ultrasonic+vocalizations+when+the+female+leaves+the+social+interaction+arena%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Male mice emit distinct ultrasonic vocalizations when the female leaves the social interaction arena.</a> Front. Behav. Neurosci. 7, (2013).</li>
<li>Petric, R., Kalcounis-Rueppell, M. C. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/275453174_Female_and_male_adult_brush_mice_Peromyscus_boylii_use_ultrasonic_vocalizations_in_the_wild">Female and male adult brush mice (Peromyscus boylii) use ultrasonic vocalizations in the wild.</a> Behaviour. 150, 1747-1766 (2013).</li>
<li>Bishop, S. L., Lahvis, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+autism+diagnosis+in+translation%3A+shared+affect+in+children+and+mouse+models+of+ASD%5BTitle%5D)+AND+%22Autism+Res%22%5BJournal%5D)">The autism diagnosis in translation: shared affect in children and mouse models of ASD.</a> Autism Res. 4, 317-335 (2011).</li>
<li>Lahvis, G. P., Alleva, E., Scattoni, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Translating+mouse+vocalizations%3A+prosody+and+frequency+modulation%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+%26+Behav%22%5BJournal%5D)">Translating mouse vocalizations: prosody and frequency modulation.</a> Genes Brain & Behav. 10, 4-16 (2011).</li>
<li>Scattoni, M. L., Gandhy, S. U., Ricceri, L., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unusual+repertoire+of+vocalizations+in+the+BTBR+T%2Btf%2FJ+mouse+model+of+autism%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+ONE%22%5BJournal%5D)">Unusual repertoire of vocalizations in the BTBR T+tf/J mouse model of autism.</a> PloS ONE. 3, (2008).</li>
<li>Arriaga, G., Zhou, E. P., Jarvis, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Of+mice%2C+birds%2C+and+men%3A+the+mouse+ultrasonic+song+system+has+some+features+similar+to+humans+and+song-learning+birds%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+ONE%22%5BJournal%5D)">Of mice, birds, and men: the mouse ultrasonic song system has some features similar to humans and song-learning birds.</a> PloS ONE. 7, (2012).</li>
<li>Holy, T. E., Guo, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+songs+of+male+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic songs of male mice.</a> PLoS Biol. 3, 2177-2186 (2005).</li>
<li>Portfors, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Types+and+functions+of+ultrasonic+vocalizations+in+laboratory+rats+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Amer.+Assoc.+Lab.+Anim.+Science%3A+JAALAS%22%5BJournal%5D)">Types and functions of ultrasonic vocalizations in laboratory rats and mice.</a> J. Amer. Assoc. Lab. Anim. Science: JAALAS. 46, 28-28 (2007).</li>
<li>Wohr, M., Schwarting, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Affective+communication+in+rodents%3A+ultrasonic+vocalizations+as+a+tool+for+research+on+emotion+and+motivation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Tissue+Res%22%5BJournal%5D)">Affective communication in rodents: ultrasonic vocalizations as a tool for research on emotion and motivation.</a> Cell Tissue Res. , 81-97 (2013).</li>
<li>Pasch, B., George, A. S., Campbell, P., Phelps, S. M. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0003347211001795">Androgen-dependent male vocal performance influences female preference in Neotropical singing mice.</a> Animal Behav. 82, 177-183 (2011).</li>
<li>Asaba, A., Hattori, T., Mogi, K., Kikusui, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sexual+attractiveness+of+male+chemicals+and+vocalizations+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Sexual attractiveness of male chemicals and vocalizations in mice.</a> Front. Neurosci. 8, (2014).</li>
<li>Balaban, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bird+song+syntax%3A+learned+intraspecific+variation+is+meaningful%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+USA%22%5BJournal%5D)">Bird song syntax: learned intraspecific variation is meaningful.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 85, 3657-3660 (1988).</li>
<li>Byers, B. E., Kroodsma, D. E. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S000334720800496X">Female mate choice and songbird song repertoires.</a> Animal Behav. 77, 13-22 (2009).</li>
<li>Hanson, J. L., Hurley, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+presence+and+estrous+state+influence+mouse+ultrasonic+courtship+vocalizations%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+ONE%22%5BJournal%5D)">Female presence and estrous state influence mouse ultrasonic courtship vocalizations.</a> PloS ONE. 7, (2012).</li>
<li>Pomerantz, S. M., Nunez, A. A., Bean, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+behavior+is+affected+by+male+ultrasonic+vocalizations+in+house+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+%26+Behav%22%5BJournal%5D)">Female behavior is affected by male ultrasonic vocalizations in house mice.</a> Physiol. & Behav. 31, 91-96 (1983).</li>
<li>White, N. R., Prasad, M., Barfield, R. J., Nyby, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((40-+and+70-kHz+Vocalizations+of+Mice+%28Mus+musculus%29+during+Copulation%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+%26+Behav%22%5BJournal%5D)">40- and 70-kHz Vocalizations of Mice (Mus musculus) during Copulation.</a> Physiol. & Behav. 63, 467-473 (1998).</li>
<li>Hammerschmidt, K., Radyushkin, K., Ehrenreich, H., Fischer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+mice+respond+to+male+ultrasonic+%27songs%27+with+approach+behaviour%5BTitle%5D)+AND+%22Biology+Letters%22%5BJournal%5D)">Female mice respond to male ultrasonic 'songs' with approach behaviour.</a> Biology Letters. 5, 589-592 (2009).</li>
<li>Ey, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Autism+ProSAP1%2FShank2+mouse+model+displays+quantitative+and+structural+abnormalities+in+ultrasonic+vocalisations%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">The Autism ProSAP1/Shank2 mouse model displays quantitative and structural abnormalities in ultrasonic vocalisations.</a> Behav. Brain Res. 256, 677-689 (2013).</li>
<li>Chabout, J., Sarkar, A., Dunson, D. B., Jarvis, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Male+mice+song+syntax+depends+on+social+contexts+and+influences+female+preferences%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Behav.+Neurosci.+9%22%5BJournal%5D)">Male mice song syntax depends on social contexts and influences female preferences.</a> Front. Behav. Neurosci. 9. 76, (2015).</li>
<li>Hoffmann, F., Musolf, K., Penn, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Freezing+urine+reduces+its+efficacy+for+eliciting+ultrasonic+vocalizations+from+male+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+%26+Behav%22%5BJournal%5D)">Freezing urine reduces its efficacy for eliciting ultrasonic vocalizations from male mice.</a> Physiol. & Behav. 96, 602-605 (2009).</li>
<li>Roullet, F. I., Wohr, M., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+urine-induced+male+mice+ultrasonic+vocalizations%2C+but+not+scent-marking%2C+is+modulated+by+social+experience%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Female urine-induced male mice ultrasonic vocalizations, but not scent-marking, is modulated by social experience.</a> Behav. Brain Res. 216, 19-28 (2011).</li>
<li>Barthelemy, M., Gourbal, B. E., Gabrion, C., Petit, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+the+female+sexual+cycle+on+BALB%2Fc+mouse+calling+behaviour+during+mating%5BTitle%5D)+AND+%22Die+Naturwissenschaften%22%5BJournal%5D)">Influence of the female sexual cycle on BALB/c mouse calling behaviour during mating.</a> Die Naturwissenschaften. 91, 135-138 (2004).</li>
<li>Byers, S. L., Wiles, M. V., Dunn, S. L., Taft, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+estrous+cycle+identification+tool+and+images%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+ONE%22%5BJournal%5D)">Mouse estrous cycle identification tool and images.</a> PloS ONE. 7, (2012).</li>
<li>Whitten, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modification+of+the+oestrous+cycle+of+the+mouse+by+external+stimuli+associated+with+the+male%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Modification of the oestrous cycle of the mouse by external stimuli associated with the male.</a> J. Endocrinol. 13, 399-404 (1956).</li>
<li>Whitney, G., Coble, J. R., Stockton, M. D., Tilson, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ULTRASONIC+EMISSIONS%3A+DO+THEY+FACILITATE+COURTSHIP+OF+MICE%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiolog.+Psych%22%5BJournal%5D)">ULTRASONIC EMISSIONS: DO THEY FACILITATE COURTSHIP OF MICE.</a> J. Comp. Physiolog. Psych. 84, 445-452 (1973).</li>
<li>Asaba, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+social+environment+imprints+female+preference+for+male+song+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+ONE%22%5BJournal%5D)">Developmental social environment imprints female preference for male song in mice.</a> PloS ONE. 9, 87186(2014).</li>
<li>Neunuebel, J. P., Taylor, A. L., Arthur, B. J., Egnor, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+mice+ultrasonically+interact+with+males+during+courtship+displays%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Female mice ultrasonically interact with males during courtship displays.</a> eLife. 4, (2015).</li>
<li>Burkett, Z. D., Day, N. F., Penagarikano, O., Geschwind, D. H., White, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VoICE%3A+A+semi-automated+pipeline+for+standardizing+vocal+analysis+across+models%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">VoICE: A semi-automated pipeline for standardizing vocal analysis across models.</a> Scientific Reports. 5, 10237(2015).</li>
<li>Grimsley, J. M., Gadziola, M. A., Wenstrup, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+classification+of+mouse+pup+isolation+syllables%3A+from+cluster+analysis+to+an+Excel-based+%22mouse+pup+syllable+classification+calculator%22%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Automated classification of mouse pup isolation syllables: from cluster analysis to an Excel-based "mouse pup syllable classification calculator".</a> Front. Behav. Neurosci. 6, (2012).</li>
<li>Grimsley, J. M. S., Monaghan, J. J. M., Wenstrup, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+social+vocalizations+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+ONE%22%5BJournal%5D)">Development of social vocalizations in mice.</a> PloS ONE. 6, (2011).</li>
<li>Portfors, C. V., Perkel, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+ultrasonic+vocalizations+in+mouse+communication%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">The role of ultrasonic vocalizations in mouse communication.</a> Curr. Opin. Neurobiol. 28, 115-120 (2014).</li>
<li>Merten, S., Hoier, S., Pfeifle, C., Tautz, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+role+for+ultrasonic+vocalisation+in+social+communication+and+divergence+of+natural+populations+of+the+house+mouse+%28Mus+musculus+domesticus%29%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+ONE%22%5BJournal%5D)">A role for ultrasonic vocalisation in social communication and divergence of natural populations of the house mouse (Mus musculus domesticus).</a> PloS ONE. 9, 97244(2014).</li>
<li>Neilans, E. G., Holfoth, D. P., Radziwon, K. E., Portfors, C. V., Dent, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discrimination+of+ultrasonic+vocalizations+by+CBA%2FCaJ+mice+%28Mus+musculus%29+is+related+to+spectrotemporal+dissimilarity+of+vocalizations%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+ONE%22%5BJournal%5D)">Discrimination of ultrasonic vocalizations by CBA/CaJ mice (Mus musculus) is related to spectrotemporal dissimilarity of vocalizations.</a> PloS ONE. 9, 85405(2014).</li>
<li>Holfoth, D. P., Neilans, E. G., Dent, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discrimination+of+partial+from+whole+ultrasonic+vocalizations+using+a+go%2Fno-go+task+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Acoust.+Soc.+Am%22%5BJournal%5D)">Discrimination of partial from whole ultrasonic vocalizations using a go/no-go task in mice.</a> J. Acoust. Soc. Am. 136, 3401(2014).</li>
<li>Asaba, A., Kato, M., Koshida, N., Kikusui, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determining+Ultrasonic+Vocalization+Preferences+in+Mice+using+a+Two-choice+Playback%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Determining Ultrasonic Vocalization Preferences in Mice using a Two-choice Playback.</a> J Vis Exp. , (2015).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dit protocol biedt aanpakken om mannelijke muizencommissie vocalisaties in het laboratorium te verzamelen, te kwantificeren en te bestuderen over een groot aantal meestal vrouwelijke gerelateerde stimuli. Zoals eerder in Chabout, et al. 23 en in de representatieve resultaten heeft het gebruik van deze methode ons mogelijk gemaakt om contextafhankelijke vocalisaties en syntaxen te ontdekken die voor de ontvangende vrouwtjes van belang zijn. De standaardisatie van deze stimuli zorgt voor het verzamelen van een betrouwbaar aantal USV&#39;s en laat gedetailleerde analyses van de mannelijke feestliedjes en repertoires toe. Wanneer een live vrouw aanwezig is bij de man, laat het protocol ons niet toe om de emitter van de vocalisaties duidelijk te identificeren. Echter, eerdere studies toonden aan dat de meerderheid van de vocalisaties die in deze context werden uitgezonden, door de man 26 , 29 waren . De meeste studies gebruiken een conspecific (man of vrouw)Als een stimulans voor de mannen geloven dat het aantal vrouwelijke vocalisaties in deze context onbeduidend is 4 , 5 , 22 , 30 . Echter, in een recent papier gebruikte triangulatie om de vocalisatie van de emitter in gelokaliseerde condities 31 te lokaliseren, en bleek dat het vrouwelijk binnen een dyad draagt ​​bij tot ~ 10% van de USV&#39;s. In het onderhavige protocol kan het gebruik van het verdoofde vrouw de gebruiker de mannelijke vocalisaties bestuderen in de aanwezigheid van een vrouw zonder haar vocalisering. In tegenstelling tot de verwachtingen van deze recente studie 31 , vonden we geen verschil in het aantal lettergrepen dat is uitgezonden tussen de FE en AF-omstandigheden 23 . Het is mogelijk dat levende vrouwtjes niet significant bijgedragen hebben aan de opnames of dat de mannen minder minder in aanwezigheid van levende vrouwen versus verdoofd femdenales. Desalniettemin geloven we dat toekomstige experimenten het gebruik van deze triangulatie methode moeten overwegen om het potentiële effect van de vrouwelijke bijdrage te beoordelen. Er zijn andere software beschikbaar die de stappen die we hebben beschreven kunnen doen, hoewel we niet voldoende geloven op de vragen die we hebben gevraagd met behulp van een combinatie van drie programma&#39;s: Software A, Mouse Song Analyzer software script C met software B, de Syntaxanalysesoftware met behulp van een D + E-berekening van de spreadsheetsoftware en een syntaxdecorator met behulp van R. Bijvoorbeeld, in een recent document werd een software genaamd VoICE voorgesteld waarmee de gebruiker akoestische variabelen automatisch uit de sonogrammen of rechtstreeks op eenheden die handmatig werden gehaald Geselecteerd door de gebruiker 32 . Maar de geautomatiseerde of semi-geautomatiseerde sequentieanalyses zijn niet zo gedetailleerd als onze aanpak. Sommige commerciële software kan de akoestische eigenschappen automatisch analyseren, maar bieden geen automAtische classificatie van de lettergrepen; De gebruiker moet daarna de verschillende lettergrepen sorteren. Grimsley, Gadziola, et al. 33 ontwikkelde een Tabel-based virtueel muis vocaal orgelprogramma dat clusters lettergrepen op basis van gedeelde akoestische eigenschappen, maar biedt geen automatische detectie van de lettergrepen. Hun programma 34 is uniek omdat het nieuwe sequenties van opgenomen liedjes maakt met behulp van Markov-modellen, en heeft dus meer geavanceerde functies dan eenvoudig bewerken. De meeste eerdere communicatiestudies op muizen hebben zich gericht op de emitter&#39;s zijde 35 , 36 . Weinig studies hebben de kant 30 , 37 , 38 van de ontvanger onderzocht . Afspeel- en discriminatieprotocollen geven een eenvoudige test om de kant van de ontvanger te bestuderen, zoals die ook onlangs beschreven door Asaba, Kato, etal. 39 . In die studie gebruikden de auteurs een twee-keus testbox gescheiden met akoestisch schuim in plaats van de hier beschreven Y-labyrint. Beide keuzemogelijkheden hebben voor- en nadelen. Ten eerste isoleren de Y-doolhof het geluid niet van de ene arm naar de andere, maar de twee-keuzedoos doet het. Door het Y-doolhofontwerp te gebruiken, kan het dier echter snel de twee liedjes die gelijktijdig worden gespeeld, evalueren en naar de gewenste voorkeur gaan. Niettemin bepalen experimenten met behulp van afspeel experimenten de betekenis en daarmee de functies van de vocalisaties die worden gegenereerd voor specifieke dieren. Concluderend, na het beheersen van de technieken van dit protocol en analyses, moeten de lezers veel vragen kunnen aanpakken die de context, de genetica en de neurobiologie van muisgebruikers beïnvloeden. Met behulp van B6D2F1 / J muizen trekken de vrouwelijke geassocieerde stimuli bijna altijd USV&#39;s uit de mannen die we in ons lab hebben getest. Het is cruciaal voor colCt genoeg lettergrepen (&gt; 100 in 5 minuten) om een ​​sterke statistische analyse te kunnen verkrijgen. Voor het oplossen van problemen, als er geen USV&#39;s zijn opgenomen (of niet genoeg), controleer dan de configuratie om ervoor te zorgen dat er geluiden worden opgenomen. Doe een live inspectie van wat er in de kooi gebeurt tijdens opname door na het introduceren van de stimulus het real-time sonogram op het computerscherm te bekijken. Probeer het mannetje om een ​​nacht na een seksueel volwassen / ontvankelijke vrouw opnieuw te openbinden en houd ze dan enkele dagen of maximaal een week voor de opname opnieuw. Op basis van anekdotische waarnemingen vinden we dat sommige mannen zelden veel zingen (voor bijna de volledige 5 minuten) en niet veel de volgende dag, en dan weer een andere dag. We kennen niet de reden waarom zulke binnenvakvariatie optreedt, maar we vermoeden dat het waarschijnlijk een motivatie of seizoensgebonden is voor de mannen en de estrusstaat voor vrouwelijke urine. Als er geen USV&#39;s zijn opgenomen, probeer het dier op meerdere dagen op te nemen om deze variabele effecten op te halen. UnlIke in zangvogels, we hebben geen openlijke verschillen in het aantal zingen op basis van de tijd van de dag genoteerd. We vinden dat de mannen niet zingen veel (&lt;100 lettergrepen in 5 minuten) voordat ze 7 weken oud zijn. De hier beschreven detectiemethoden kunnen duizenden lettergrepen en alle akoestische parameters in een paar minuten herhalen. Maar als een automatische detectiemethode is het zeer gevoelig voor achtergrondgeluid. Met behulp van de Muis Song Analyzer detectie software met lawaaierige opnamen (bijv. Van dieren die zijn opgenomen met beddengoed) kunnen aanpassingen van de detectie &quot;drempel&quot; nodig zijn om meer flexibiliteit mogelijk te maken. Dit zal echter ook het aantal verkeerde positieve lettergrepen verhogen en de automatische detectie kan mislukken. Onder dergelijke omstandigheden kan handmatige codering worden gebruikt. Zoals eerder vermeld is het aantal, de repertoire en de latentie van vocalisaties veel variabel afhankelijk van de spanning, dus men moet parameters wijzigen (opname lengte,Stimulus, geautomatiseerde lettergreepdetectie, enz. ) Voor sommige stammen om optimale opnames voor statistische analyses te waarborgen.

In vergelijking met mensen produceren muizen zowel lage als hoge frequentie vocalisaties, die later bekend staan ​​als ultrasone vocalisaties (USV&#39;s) boven ons gehoorbereik. De USV&#39;s worden geproduceerd in een verscheidenheid van contexten, waaronder van moeder-pup herwinning, jeugdinteracties, tegenovergestelde of hetzelfde geslachtsvolwasseneninteracties 4 , 12 . Deze USV&#39;s bestaan ​​uit een divers multisyllabic repertoire dat manueel 9 of automatisch 10 , 11 kan categoriseren. De rol van deze USV&#39;s in communicatie is in de afgelopen jaren onder toenemend onderzoek geweest. Deze omvatten het gebruik van de USV&#39;s als uitleesingen van muismodellen van neuropsychiatrische, ontwikkelings- of gedragsstoornissen 7 , 8 en interne motiverende / emotionele toestanden 13 . De USV&#39;s zijn van mening dat betrouwbare informatie over de e wordt overgedragenMitter&#39;s toestand die nuttig is voor de ontvanger 14 , 15 . In 2005 bracht Holy and Guo 11 het idee dat volwassen mannelijke muizen USV&#39;s werden georganiseerd als een opvolging van multisyllabische oproepelementen of lettergrepen die vergelijkbaar zijn met zangvogels. Bij veel soorten biedt een multisyllabische repertoire de emitter de lettergrepen op verschillende manieren te combineren en ordenen om de potentiële informatie die door het lied wordt gedragen te vergroten. Variatie in deze syntaxis wordt geacht een ethologische relevantie te hebben voor seksueel gedrag en mate voorkeuren 16 , 17 . Uitgaande studies toonden aan dat mannelijke muizen de relatieve samenstelling van lettergreepstypen die zij voor, tijdens en na de aanwezigheid van een vrouw 5 , 18 kunnen veranderen, veranderen. Dat wil zeggen, de volwassen mannelijke muizen gebruiken hun USV&#39;s voor het gedrag van het hof, ofwel om te trekkenOf in contact houden met een vrouw, of om paring 19 , 20 , 21 te vergemakkelijken. Ze worden ook uitgezonden in mannelijke interacties, waarschijnlijk sociale informatie overdragen tijdens interacties 4 . Om deze veranderingen in repertoires vast te leggen, meet de wetenschappers meestal de spectrale eigenschappen (akoestische parameters, zoals amplitude, frequenties, enz. ), Aantal USV&#39;s lettergrepen of oproepen en latentie aan de eerste USV. Echter, weinig bekijken in werkelijkheid de sequentiedynamiek van deze USV&#39;s in detail 22 . Onlangs ontwikkelde onze groep een nieuwe methode om dynamische veranderingen in de USV-lettergreepsequenties te meten 23 . We hebben aangetoond dat de lettergreep in een lied over (syntaxis) niet willekeurig is, dat het verandert afhankelijk van de sociale context en dat de luisterende dieren deze veranderingen als ethologisch relevant detecteren. Wij noteren thBij veel onderzoekers die dierencommunicatie bestuderen, verbinden de term &#39;syntax&#39; niet dezelfde betekenis als syntaxis die in menselijke toespraak wordt gebruikt. Voor dierlijke communicatiestudies bedoelen we gewoon een geordende, niet-willekeurige volgorde van geluiden met enkele regels. Voor mensen zijn bovendien specifieke sequenties bekend om specifieke betekenissen te hebben. We weten niet of dit het geval is voor muizen. In dit document en bijbehorende video streven wij ernaar om betrouwbare protocollen te leveren om mannelijke muizencommissie USV&#39;s in verschillende contexten op te nemen en afspelen te verrichten. Het gebruik van drie opeenvolgende gebruikt software voor: 1) geautomatiseerde opnames; 2) lettergreep detectie en codering; En 3) een diepgaande analyse van de lettergreep en syntaxis wordt aangetoond ( figuur 1 ). Dit stelt ons in staat om meer te weten te komen over mannelijke muizen USV structuur en functie. Wij geloven dat dergelijke methoden gegevensanalyses vergemakkelijken en nieuwe horizonten kunnen openbaren om normale en abnormale vocale communicatie in mou te herkennen.Zie respectievelijk modellen van communicatie en neuropsychiatrische aandoeningen.

<table><tbody><tr><td>Sound proof beach cooler</td><td>Zie Gus papier voor meer info over specifiek soort</td><td></td><td>Binnenafmetingen (L 27 x B 23 x H 47 cm):</td></tr><tr><td>Condenser ultrasound microfoon CM16/CMPA</td><td>Avisoft Bioacoustics, Berlijn, Duitsland</td><td>#40011</td><td>Inclusief verlengkabel&nbsp;</td></tr><tr><td>Ultrasound Gate 1216H geluidskaart</td><td>Avisoft Bioacoustics, Berlijn, Duitsland</td><td>#34175</td><td>12 kanaals geluidskaart</td></tr><tr><td>Ultrasound Gate Player 216H</td><td>Avisoft Bioacoustics, Berlijn, Duitsland</td><td>#70117</td><td>2 kanalen afspeelspeler</td></tr><tr><td>Ultrasonic Electrostatic Speaker ESS polaroid</td><td>Avisoft Bioacoustics, Berlijn, Duitsland</td><td>#60103</td><td>2 afspeelspeakers</td></tr><tr><td>Testkooi&nbsp;</td><td>Ace</td><td>#PC75J</td><td>30 x 8 x 13 cm hoogte; plexiglas</td></tr><tr><td>plexiglas scheiding</td><td>zelfgemaakt</td><td>-</td><td>4 x 13 cm plexiglas met 1 cm gaten</td></tr><tr><td>Videocamera</td><td>Logitech</td><td>C920</td><td>logitech HD Pro webcam C920</td></tr><tr><td>Verwarmingspad&nbsp;</td><td>Sunbeam</td><td>722-810-000</td><td></td></tr><tr><td>Y-labyrint&nbsp;</td><td>Zelfgemaakt</td><td>-</td><td>Binnenafmetingen (L 30 x B 11 x H 29 cm):</td></tr><tr><td>Pincet</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Software</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Avisoft Recorder (Software A)</td><td>Avisoft Bioacoustics, Berlijn, Duitsland</td><td>#10101, #10111, #10102, #10112</td><td>http://www.avisoft.com</td></tr><tr><td>MATLAB R2013a (Software B)</td><td>MathWorks</td><td>-</td><td>MATLAB R2013a (8.1.0.604)</td></tr><tr><td>Mouse Song Analyzer v1.3 (Software C)</td><td>Op maat ontworpen door Holy, Guo, Arriaga, &amp; Jarvis; Werkt met software B</td><td></td><td>http://jarvislab.net/wp-content/uploads/2014/12/Mouse_Song_Analyzer_ v1.3-2015-03-23.zip</td></tr><tr><td>Microsoft Office Excel 2013 (Software D)</td><td>Microsoft</td><td>-</td><td>Microsoft Office Excel</td></tr><tr><td>Song Analysis Guide v1.1 (Software E)</td><td>Op maat ontworpen door Chabout &amp; Jarvis. Excel rekenbladen, werkt met software D</td><td></td><td>http://jarvislab.net/wp-content/uploads/2014/12/Song-analysis_Guided.xlsx</td></tr><tr><td>Syntax decoder v1.1 (Software F)</td><td>Op maat ontworpen door Sakar, Chabout, Dunson, Jarvis - in R studio</td><td></td><td>https://www.rstudio.com/products/rstudio/download/</td></tr><tr><td>Graphiz (Software G)</td><td>AT&amp;T Research en anderen&nbsp;</td><td></td><td>http://www.graphviz.org</td></tr><tr><td>Avisoft SASLab (Software H)</td><td>Avisoft Bioacoustics, Berlijn, Duitsland</td><td>#10101, #10111, #10102, #10112</td><td>http://www.avisoft.com</td></tr><tr><td>Reagentia</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Xylazine (20 mg/mL)</td><td>Anased</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Ketamine HCl (100 mg/mL)</td><td>Henry Schein</td><td>#045822</td><td></td></tr><tr><td>gedestilleerd water</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Oogzalf&nbsp;</td><td>Puralube Vet Ointment&nbsp;</td><td>NDC 17033-211-38</td><td></td></tr><tr><td>Wattenstaafjes</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Petrischaal</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

eliciting and analyzing male mouse ultrasonic vocalization (usv) songs

Eliciting and Analyzing Male Mouse Ultrasonic Vocalization (USV) Songs

Muizen produceren ultrasone vocalisaties (USV&#39;s) in een verscheidenheid aan sociale contexten gedurende de ontwikkeling en volwassenheid. Deze USV&#39;s worden gebruikt voor moeder-pup retrieval 1 , jeugdinteracties 2 , tegengestelde en hetzelfde geslachtsinteracties 3 , 4 , 5 en territoriale interacties 6 . Gedurende decennia zijn de onderzoekers gebruikt als proxies om neuropsychiatrische en ontwikkelings- of gedragsstoornissen 7 , 8 , 9 te bestuderen en meer recentelijk mechanismen en evolutie van vocale communicatie bij vertebraten 10 te begrijpen. Binnen de seksuele interacties produceren volwassen mannelijke muizen USV-liedjes, die een aantal eigenschappen hebben die vergelijkbaar zijn met hoflieden van zangvogels 11 . Het gebruik van een dergelijke multisyllabische reperToires kunnen de potentiële flexibiliteit en informatie die ze dragen, vergroten, omdat ze kunnen worden gevarieerd in de wijze waarop elementen worden georganiseerd en gecombineerd, namelijk syntaxis. In dit protocol wordt een betrouwbare methode beschreven om USV-liedjes uit mannelijke muizen in verschillende sociale contexten te ontwaken, zoals blootstelling aan verse vrouwelijke urine, verdovende dieren en estrusvrouwen. Dit omvat voorwaarden om een ​​grote hoeveelheid lettergrepen uit de muizen te induceren. We verminderen de opname van omgevingsgeluiden met goedkope geluidskamers, en presenteren een kwantificeringsmethode om de USV&#39;s automatisch te detecteren, classificeren en analyseren. Het laatstgenoemde omvat evaluatie van bellen, vocale repertoire, akoestische parameters en syntaxis. Verschillende benaderingen en inzicht in het gebruik van afspelen om de voorkeur van een dier voor specifieke liedsoorten te bestuderen worden beschreven. Deze methoden werden gebruikt om akoestische en syntaxveranderingen te omschrijven in verschillende contexten in mannelijke muizen en liedvoorkeuren bij vrouwelijke muizen.

In het huidige protocol werden veranderingen in vocaal gedrag en syntaxis van mannelijke B6D2F1 / J-muizen gekenmerkt. Door dit protocol te gebruiken, waren we in staat om gemiddeld 675 ± 98,5 ingedeelde lettergrepen gemiddeld gemiddeld per mannetje per 5 minuten te registreren in reactie op vrouwelijke UR, 615,6 ± 72 in FE, 450 ± 134 in AF, 75,6 ± 38,9 in AM en 0,2 ± 0,1 in mannelijke urine (n = 12 mannen). De tarieven waren ~ 130 lettergrepen / min voor vrouwelijke UR, ~ 120 lettergrepen / min voor FE, of ~ 100 lettergrepen / min voor AF contexten ( Figuur 5A ). Mannetjes produceren een veel grotere lettergreep als reactie op vers verzamelde urine ten opzichte van de overgenomen urine 10 , 23 in de nacht . Mannetjes zingen ook aanzienlijk minder in aanwezigheid van een verdoofd mannelijk of vers mannelijk urine Figuur 5A ). Mannelijk veranderen ook hun repertoire over context 23 . Bijvoorbeeld, B6D2F1 / J mannen stijgen aanzienlijk<html> Productie van meerdere lettersprings &quot;m&quot; categorie lettergrepen in de vrouwelijke urine conditie ( figuur 5B ). Ze veranderen ook akoestische eigenschappen van individuele lettergrepen in de context. Bijvoorbeeld, B6D2F1 / J mannetjes zingen lettergrepen bij een hogere amplitude en bandbreedte in de vrouwelijke urine context, en hogere spectrale zuiverheid in de wakker vrouwelijke context in vergelijking met de anderen ( Figuur 6 ) 23 . Dit protocol biedt ook een middel om dynamische kenmerken van de volgorde te meten en dus veranderingen in de syntaxis. Met behulp van een aangepaste methode van Ey, et al. 22 gebruiken we de ISI om de kloof tussen sequenties te definiëren ( Figuur 7A ) 23 , en gebruik dan de leemten om temporale patronen van lettergreepsequenties te onderscheiden en te analyseren. We lieten zien dat langere sequentielengten in de wakker vrouwelijke context worden geproduceerd ( figuur 7B )F &quot;&gt; 23. Deze techniek stelt ons in staat om de verhouding van complexe sequenties te berekenen (gecomponeerd door ten minste 2 voorkomingen van het m-lettertype) tegenover eenvoudige sequenties (samengesteld uit een of geen&quot; m &quot;type en dus meestal door&quot; S &#39;type). We hebben geconstateerd dat bij vrouwen met B6D2F1 / J de vrouwelijke urinecontext een hogere verhouding heeft geactiveerd ten opzichte van de andere ( Figuur 7C ) 23 , wat aangeeft dat ze meer complexe lettergrepen in de vrouwelijke urine conditie hebben geproduceerd, maar ook dat dergelijke lettergrepen worden verdeeld Over meer sequenties. We kunnen ook de voorwaardelijke overgangswaarschijnlijkheden berekenen van het ene lettertype naar het andere (24 overgangs types totaal inclusief de overgangen van en naar de &quot;stilte&quot; -status) 23 . We hebben geconstateerd dat de muizen in verschillende contexten de keuze hebben van overgangstypes voor gegeven start lettergrepen en dat er meer syntax div isVervanging in de vrouwelijke urine conditie ( Figuur 8 ) 23 . Deze waarnemingen zijn in overeenstemming met eerdere rapporten die aantonen dat mannen de akoestische eigenschappen of repertoire samenstelling van hun vocalisaties kunnen veranderen in reactie op verschillende stimuli en ervaringen 4 , 5 , 24 . Tenslotte biedt het onderhavige protocol richtlijnen om vrouwelijke voorkeuren te testen met afspelen. We vonden dat B6D2F1 / J vrouwtjes liever complexere liedjes verkiezen (met 2 of meer &quot;m&quot; lettergrepen) ten opzichte van eenvoudige liedjes 23 . De meeste vrouwen kiezen ervoor om bij de Y-doolhof te blijven die de complexe liedjes speelde ( figuur 4B ). <img alt="Figuur 1" src="/files/ftp_upload/54137/54137fig1.jpg" /> Figuur 1: Stroomschema van SofTware gebruiken en analyses. Elk programma en bijbehorende code krijgt een letternaam om hun identiteit en gebruik in de hoofdtekst te helpen uit te leggen. In () zijn de specifieke programma&#39;s die we in ons protocol gebruiken. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54137/54137fig1large.jpg" target="_blank">Klik hier om een ​​grotere versie van deze figuur te bekijken.</a> <img alt="Figuur 2" src="/files/ftp_upload/54137/54137fig2.jpg" /> Figuur 2: Instellen voor het opnemen van mannelijke muizenliedjes. (A) Afbeelding van een geluidsdempende opnamebox en opstelling om USV vocalizations op te nemen. (B) Voorbeeld sonogram van een opname gemaakt met Software A ( Tabel 1 ), met inbegrip van gedetailleerde spectrale functies, berekend door &quot;Mouse Song Analyzer v1.3&quot;: duur, inter-lettergreep interval (ISI), piekfrequentie min (Pf min) Piekfrequentie max (Pf max), piekfrequentie start (Pf start), piekfrequentie<html> Einde (Pf einde) en bandbreedte. (C) Sonogrammen van een ander mannelijk zingen naar een levend vrouw, in de geluidsdempende doos en buiten de doos op de laboratoriumbank in dezelfde kamer. Onze anekdotische waarnemingen geven aan dat de opnames in de doos van hetzelfde dier groter volume (sterkere intensiteit) en minder harmonische tonen, maar geen bewijs van echo&#39;s in de doos zonder geluidskuim. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54137/54137fig2large.jpg" target="_blank">Klik hier om een ​​grotere versie van deze figuur te bekijken.</a> <img alt="Figuur 3" src="/files/ftp_upload/54137/54137fig3.jpg" /> Afbeelding 3: Screenshot van het venster &quot;Mouse Song Analyzer v1.3&quot; whis_gui Met de verschillende opties die beschikbaar zijn voor analyses. De getoonde parameters zijn gebruikt om mannelijke USV&#39;s op te nemen in de cijfers en data analyses gepresenteerd (behalve de min notitie duur was 3 ms).<html> .com / files / ftp_upload / 54137 / 54137fig3large.jpg &quot;target =&quot; _ blank &quot;&gt; Klik hier om een ​​grotere versie van deze figuur te bekijken. <img alt="Figuur 4" src="/files/ftp_upload/54137/54137fig4.jpg" /> Figuur 4: Vrouwelijke keuzes tussen afspelen van complexe en eenvoudige nummers. (A) Afbeelding van de gebruikte Y-dool apparaat en afmetingen. (B) Tijd van de vrouwtjes in elke arm, ofwel uit een complexe (vrouwelijke urine opgewekte) of simpeler (wakker vrouwelijk uitgesproken) liedje van hetzelfde mannetje. Gegevens worden voor n = 10 B6D2F1J vrouwelijke muizen voorgesteld als gemiddelde ± SE, waarbij ook individuele waarden worden getoond; 9 van de 10 vrouwtjes liet een voorkeur zien voor het complexere lettergreep / sequentielied. * P &lt;0,05 gepaarde student t-test. Figuur gewijzigd van Chabout, et al. 23 met toestemming.Leeg &quot;&gt; Klik hier om een ​​grotere versie van deze figuur te zien. <img alt="Figuur 5" src="/files/ftp_upload/54137/54137fig5.jpg" /> Figuur 5: Aantal uitgezonden stemplaten en Repertoire over de voorwaarden . (A) Afleesbaar productiepercentage van mannen in verschillende contexten. (B) Repertoire composities van mannen wanneer aanwezig in vrouwelijke urine (UR), verdoofd vrouw (AF), wakker vrouw (FE) en verdovende mannelijke (AM) contexten. Gegevens worden weergegeven als gemiddelde ± SEM. * P &lt;0,03; ** p &lt;0,005; *** p &lt;0,0001 voor post-hoc gepaarde student t-test na Benjamini en Hochberg correctie (n = 12 mannen). Figuur uit Chabout, et al. 23 met toestemming. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54137/54137fig5large.jpg" target="_blank">Klik hier om een ​​grotere versie van deze figuur te bekijken.</a> together.within-page = &quot;1&quot;&gt; <img alt="Figuur 6" src="/files/ftp_upload/54137/54137fig6.jpg" /> Figuur 6: Voorbeelden van spectrale eigenschappen in verschillende contexten. (A) Amplitude. * P &lt;0,025 voor post-hoc gekoppelde student t-test na correctie. (B) Frequentiebereik of bandbreedte. *: P &lt;0,041; **: p &lt;0,005; ***: p &lt;0,0001 na correctie. (C) Spectrale zuiverheid van de lettergrepen. * P: &lt;0,025; **: p &lt;0,005; ***: p &lt;0,0001 na correctie. Afkortingen: vrouwelijke urine (UR), verdoofd vrouw (AF), wakker vrouw (FE) en verdoofd man (AM). Cijfers gemodificeerd uit Chabout, et al. 23 met toestemming. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54137/54137fig6large.jpg" target="_blank">Klik hier om een ​​grotere versie van deze figuur te bekijken.</a> 37fig7.jpg &quot;/&gt; Figuur 7: Sequence Measurements. (A) Gebruik van de ISI om de sequentie te scheiden. Korte ISI (SI) en medium ISI (MI) worden gebruikt om lettergrepen in een reeks te scheiden, en lange ISI over 250 ms (LI) scheiden twee sequenties. (B) Lengte van de sequenties, gemeten als aantal lettergrepen per sequentie, geproduceerd door mannen in verschillende contexten. *: P &lt;0,025; ** p &lt;0,005; *** p &lt;0,0001 na correctie. (C) Verhouding van complexe liedjes over eenvoudige liedjes geproduceerd door mannen in verschillende contexten. * P &lt;0,041; ** p &lt;0,005; *** p &lt;0,0001 na correctie. Gegevens worden weergegeven als gemiddelde ± SEM (n = 12 mannen). Figuur uit Chabout, et al. 23 met toestemming. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54137/54137fig7large.jpg" target="_blank">Klik hier om een ​​grotere versie van deze figuur te bekijken.</a> Figuur 8: Syllabiele Syntaxdiagrammen van Sequenties op basis van Voorwaardelijke Voorwaarden voor elke Context. De dikte van de pijl is evenredig aan de voorwaardelijke waarschijnlijkheid van een overgangstype in elke context, gemeten uit n = 12 mannen: P (voorkomen van een overgang die de start lettergreep geeft). Voor de duidelijkheid worden zeldzame overgangen onder een waarschijnlijkheid van 0,05 niet getoond. Figuur uit Chabout, et al. 23 met toestemming. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54137/54137fig8large.jpg" target="_blank">Klik hier om een ​​grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>

Muizen produceren een complex multisyllabic repertoire van ultrasone vocalisaties (USV&#39;s). Deze USV&#39;s worden op grote schaal gebruikt als uitlezingen voor neuropsychiatrische stoornissen. Dit protocol beschrijft enkele van de praktijken die we hebben geleerd en ontwikkeld om consequent de akoestische eigenschappen en syntaxis van muisliedjes te induceren, verzamelen en analyseren.

Mice produce ultrasonic vocalizations (USVs) in a variety of social contexts throughout development and adulthood. These USVs are used for mother-pup ...

Het algemene doel van deze procedure is om betrouwbaar ultrasone vocalisaties of USV's van een volwassen mannelijke muis te verzamelen en akoestische analyse uit te voeren in verschillende sociale contexten. Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van belangrijke vragen over vocale communicatie en bijbehorende stoornissen. Dit omvat neuro-psychiatrische stoornissen en autistische stoornissen met behulp van muismodellen.Een van de belangrijkste voordelen van deze techniek is dat het een manier biedt om USV's in verschillende contexten op te roepen. Over het algemeen kunnen personen die nieuw zijn met deze methode moeite hebben om hun muizen te laten zingen, dus je moet je muizen voorzichtig en zachtjes behandelen om ze te laten zingen. Standaard dierenhuisvesting is voldoende voor dit protocol.Stel mannetjes drie dagen voor het maken van een opname in neutrale kooien bloot aan een seksueel volwassen ontvankelijke vrouwtje gedurende één nacht. In elke kooi kunnen tot drie mannetjes worden gekoppeld aan één vrouwtje. Verwijder de volgende dag de vrouwtjes.Houd de mannetjes in hun groep nog minstens twee dagen voor de eerste opnamesessie. Om USV's van een voorbereide man te registreren, draag het dier voorzichtig bij de staart over naar een schone kooi zonder beddengoed. Plaats deze kooi in een geluiddichte doos.Bedek vervolgens de kooi met de open gaasdeksel. Sluit de doos en laat het dier zich er 15 minuten aan wennen. Bereid ondertussen een stimulans voor de test voor zoals beschreven in de volgende sectie. Om verse urinemonsters te gebruiken, verzamel ze binnen vijf minuten na de opnamesessie.Pak eerst een muis bij de nek zoals voor een druginjectie. Gebruik vervolgens een wattenstaafje dat door een pincet wordt vastgehouden en wrijf voorzichtig en druk op de blaas van het dier om een druppel urine te extraheren en het volledig met het wattenstaafje te weken. Selecteer vervolgens een muis uit een andere kooi en herhaal het proces met hetzelfde wattenstaafje.Het gebruik van een mix van verse urines is belangrijk. Bewaar het wattenstaafje op een schone schaal tot het nodig is. Om een alert vrouwtje als stimulus voor te bereiden, selecteer er een dat zich in de pre-oestrus of oestrus fase bevindt. Het muisje zal een wijde vaginale opening en roze omliggend weefsel hebben.Isoleer zo'n vrouwtje tot het nodig is. Om een verdoofde muis voor te bereiden, zorgt u gewoon voor anesthesie zoals gebruikelijk. Bevestig de verdoofde toestand met een teenprik en breng oogzalf aan.Bewaar het verdoofde dier tot het nodig is in een schone kooi op een papieren handdoek met een verwarmingskussen onder de kooi ingesteld op minimale warmte. Zorg ervoor dat u regelmatig de ademhaling en lichaamstemperatuur van de dieren controleert. De verdoofde muis kan in maximaal drie opeenvolgende sessies worden gebruikt.Klik bij het klaar zijn voor opname op de opnameknop in de software terwijl u tegelijkertijd het stimulus presenteert. Om urine of een levend dier te presenteren, plaatst u deze eenvoudig in de kooi. Om een verdoofd dier te presenteren, plaatst u het echter op de bovenkant van de kooideksel.Sluit vervolgens de doos stil en neem USV's op gedurende ongeveer vijf minuten. Om een opname te beëindigen, drukt u op het stopvierkant in de software. Controleer het verdoofde dier minstens elke 15 minuten.Totdat het de borstliggende positie heeft herwonnen. Daarna kan het worden teruggezet in zijn eigen kooi. Reinig de testkooi tussen de tests met 70% alcohol en gedistilleerd water.Verwerk de akoestische opnames met behulp van de muissong-analysesoftware. Hun lettergrepen, akoestische structuur en syntaxis kunnen dus worden geanalyseerd en eventueel opnieuw worden gestructureerd voor afspelen. Was eerst het afspeelapparaat met 70% alcohol gevolgd door gedistilleerd water.Gebruik een zwart gekleurde, ondoorzichtige y-labyrint met armen van 30 centimeter. Boor aan de uiteinden van twee armen gaten op vloerniveau die passen bij de ultrasoon luidsprekers. Na het wassen, droog de doolhof af met een handdoek.Eenmaal droog, zet op met de afspeelsprekers en gemonteerde overhead videocamera. Om de test te starten, plaatst u het vrouwtje eerst in het labyrint voor een 10 minuten durende aanpassingsperiode. Als het vrouwtje na 10 minuten niet in de startarm is, duwt u haar voorzichtig terug naar de startarm en sluit u voorzichtig het plastic scheidingsvenster.Start vervolgens de video-opname en start de audio-opnames op loopweergave. Speel bijvoorbeeld een liedje af dat is vastgelegd door urinestimulatie in de ene arm en speel het liedje af dat is vastgelegd door vrouwelijke stimulatie in de andere arm. Laat het vrouwtje nu vijf minuten lang het labyrint verkennen.Dit vormt één sessie. Na vijf minuten stopt u de opname en plaatst u het vrouwtje terug in de startarm. Houd haar daar een minuut terwijl u schoonmaakt met gedistilleerd water om eventuele urine of uitwerpselen te verwijderen.Doe dit tussen alle sessies door. Voor de tweede sessie, schakel de opgenomen weergave naar de tegenovergestelde armen en neem de vrouw op die dit scenario gedurende vijf minuten verkent. Voor de derde en vierde sessies herhaalt u de twee vorige sessieparameters voor een totaal van 20 minuten testopnames.Stop altijd de video-opname aan het einde van alle sessies. Een week later voert u nog een test uit op dezelfde groep dieren. Maar gebruik verschillende liedjesvoorbeelden.Doe dit om de betrouwbaarheid van de bevindingen te versterken. Voor analyse meet u de tijd die de vrouwtjes in elke arm doorbrengen voor elke sessie. Met behulp van het gepresenteerde protocol werden veranderingen in vocaal gedrag en syntaxis van mannelijke B6D2F1J muizen gekenmerkt.Tijdens een opname van vijf minuten reageerde een gemiddelde man heel anders op de drie stimuli. Mannen veranderden ook hun repertoire in verschillende contexten. Bijvoorbeeld, als reactie op verse urine, produceer

eliciting-and-analyzing-male-mouse-ultrasonic-vocalization-usv-songs

Research

JoVE Journal

Behavior

Gedrag

Ultrasone vocalisaties (USV's) bij muizen verschillen afhankelijk van leeftijd, geslacht, conditie en genetische achtergrond. Door twee ultrasone zenders tegelijkertijd op verschillende locaties uit te zenden, kan deze tweeduidige test muiserkenning en voorkeursreacties op verschillende kenmerken van USV's evalueren.

Het bepalen van Ultrasonic Vocalisatie Voorkeuren in Muizen met behulp van een twee-keuze afspelen Test

Ultrasone vocalisaties van muizen worden gebruikt als proxy's om de genetische basis van vocale communicatiedeficiënties te modelleren in muismodellen voor neuropsychiatrische stoornissen. Het huidige protocol beschrijft drie experimentele contexten die betrouwbaar ultrasone vocalisaties oproepen bij pups (gedurende de ontwikkeling) en volwassen muizen (interacties tussen dieren van hetzelfde geslacht, interacties tussen mannetjes en vrouwtjes in oestrus).

Opname Mouse Ultrasone geluiden om sociale communicatie Evalueer

Locomotorische activiteit (LMA) is een eenvoudige en gemakkelijk uitgevoerde meting van het gedrag bij muizen. Koppeling van video tracking software (VTS) en LMA maakt verbetering van specificiteit en gevoeligheid, vooral in vergelijking met de handmatige, lijn kruising werkwijze LMA analyse. Daarnaast VTS staat lange-termijn follow-up van de muis LMA.

Muis Kort-en langlopende bewegingsactiviteit Analyzed door Video Tracking Software

Dit artikel presenteert een protocol voor een contextuele en cued vreesconditionering test met een video-analysesysteem om angst leren en geheugen in muizen te beoordelen.

Contextuele en cued Fear Conditioning Test Met behulp van een video analysesysteem in Muizen

Het distractor-response binding paradigma wordt beschreven. Het kan worden gebruikt om licht te werpen op de invloed van irrelevante stimuli, die concurreren met doelen voor een reactie, kunnen hebben op menselijk handelen. Zowel effecten op het ophalen van reacties als effecten op de remming van afleiding kunnen binnen het paradigma worden geanalyseerd.

Irrelevante stimuli en Actie Controle: Het analyseren van de invloed van Genegeerd Stimuli via de Distractor-Response Binding Paradigm

Dit manuscript beschrijft een Morris water maze (MWM) protocol dat is aangepast voor gebruik met een veelgebruikte muismodel van de ziekte van Alzheimer. De MWM wordt veel gebruikt in transgene muismodellen. Implementatie van een procedure die gevoelig is voor de achtergrondstam van het muismodel is essentieel voor het detecteren van verschillen tussen groepen.

Morris Water Maze Test: Optimalisatie voor Mouse Strain en testomgeving

Dit stapsgewijze protocol analyseert Drosophila negatieve geotaxis gedrag met behulp van een geautomatiseerd systeem van meerdere cilinders die honderden vliegen en synchroniseert hun optreden door een elektromotor. Bij synchronisatie, is vliegen negatieve geotaxis gedrag vehiculumcontrolegroep, digitaal opgenomen en geanalyseerd met behulp van de zelf ontworpen RflyDetection software.

Een geautomatiseerde snelle iteratieve negatieve Geotaxis Assay voor het analyseren van volwassen klimmen gedrag in een Drosophila Model van neurodegeneratie

Tijdens het kijken van de media-inhoud presenteren we detectie, acquisitie en analyse van eyeblink tarieven.

Met behulp van elektro-encefalografie metingen en hoge kwaliteit Video-opname voor het analyseren van visuele perceptie van Media-inhoud

Dit artikel introduceert een geautomatiseerde T-maze apparaat dat we uitgevonden, en een protocol op basis van dit apparaat voor het analyseren van vertraging gebaseerde besluitvorming en inspanning gebaseerde besluitvorming in gratis bewegende knaagdieren.

Een geautomatiseerde T-maze op basis van apparatuur en Protocol voor het analyseren van de vertraging en inspanning-gebaseerde besluitvorming in gratis verplaatsen knaagdieren

Dit protocol meet ruimtelijke leren en geheugen met behulp van de Barnes doolhof. Een roman jonkvrouw-in-nood-paradigma wordt gebruikt ter beoordeling van motorische activiteit en prosociaal gedrag in muizen.

Analyseren van ruimtelijke leren en prosociaal gedrag in muizen met behulp van de Barnes doolhof en Damsel-in-nood paradigma 's

Leer hoe je ultrasone vocalisaties van mannelijke muizen opneemt en analyseert in verschillende sociale contexten. Deze methode helpt onderzoekers communicatie en neuropsychiatrische stoornissen bestuderen.

Eliciting and Analyzing Male Mouse Ultrasonic Vocalization (USV) Songs

Meer video's verkennen