Name: Vein Interpositie Model: Een geschikt model om te studeren Bypass Graft Patency (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-01-15T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 22 s
Description: Leer het vene-interpositiemodel in ratten om bypassgraftpatentie en myointimale hyperplasie te bestuderen. Deze methode biedt inzicht in vasculaire biologie en chirurgische technieken.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De auteurs danken Christiane Pahrmann voor haar technische bijstand. Deze studie werd gefinancierd door de Deutsche Stiftung fuer Herzforschung (F / 28/14). DW werd gesteund door de Travel Award van de International Society for Heart en Lung Transplantation. TD ontving de Else Kröner Excellence Stipendium van het Else-Kröner-Fresenius-Stiftung (2012_EKES.04). SS ontving onderzoek subsidies van de Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG; DE2133 / 2-1, TD en SCHR992 / 3- 1, SCHR992 / 4-1, SS).

Dieren kregen humane zorg in overeenstemming met de Gids voor de beginselen van proefdieren, opgesteld door het Institute of Laboratory Animal Resources en gepubliceerd door de National Institutes of Health. Alle dieren protocollen zijn goedgekeurd door de bevoegde lokale overheid ( &quot;Amt für Gesundheit und Verbraucherschutz, Hansestadt (Bureau voor Gezondheid en Consumentenbescherming) Hamburg&quot;). 1. Animal Care <ol><li> Verkrijgen van Lewis ratten (LEW / Crl) ratten en ROSA / luciferase-LEW transgene ratten met een gewicht van 300-350 g van het Instituut van proefdieren. </li><li> Houd de ratten onder gebruikelijke voorwaarden in geventileerde kasten en hen voeden standaard rat chow en geautoclaveerd water ad libitum. </li><li> Voer een graft transplantatie met behulp van de ROSA / luciferase-LEW transgene ratten als donoren en de syngene LEW / Crl ratten als de ontvangers. </li></ol> 2. Voorbereiding van de Donor Rat <ol><li> Gebruik een inlaation kamer naar een rat met isofluraan (2,5-3%) verdoven. </li><li> Plaats de rat op zijn rug en de anesthesie met een masker over de mond en neus handhaven. Controleer of er voldoende diepte van de anesthesie door knijpen de achterpoten en de controle op de afwezigheid van reflexen. Breng wat vet zalf om de ogen te voorkomen droogheid terwijl onder verdoving. </li><li> Spreid de achterpoten en hun positie te bepalen met behulp van tape. </li><li> Scheer de lies haar met een tondeuse en ontsmet het hele gebied met behulp van povidonjood, gevolgd door 80% ethanol. Herhaal de desinfectie stap tweemaal. LET OP: De chirurgische gebied, gaas en chirurgische instrumenten moeten worden gesteriliseerd. Zorg voor een steriele veld gedurende de procedure en slijtage eenmalig gebruik, steriele chirurgische handschoenen, maskers, en petten. </li><li> Onder een microscoop, het uitvoeren van een verticale insnijding langs de linea inguinalis. Gebruik twee tang om voorzichtig scheiden van de onderhuidse weefsels en bloot de oppervlakkige epigastrische ader van zijn origin de femorale ader. Zorgvuldig isoleren epigastrische oppervlakkige ader van de omliggende weefsels. </li><li> Stop bloedstroom in de ader oppervlakkige epigastrische met twee micro klemmen. </li><li> Oogst een ongeveer 0,5 tot 1 cm segment van de ader door voorzichtig optillen van de geïsoleerde ader met een tang en snijden door het vat met microscissors. Laat de micro klemmen op het vaartuig stomp om bloedverlies te voorkomen. Leg het verwijderde stukje ader op steriel gaasje. Plaats voorzichtig een 30 G naald in het ene uiteinde van de geoogste ader en spoel het vat met heparine (50 eenheden / ml). LET OP: Behandel de ader met zorg en beschadiging tijdens het heffen, snijden, en blozen te vermijden. Zorg ervoor dat u het transplantaat te spoelen met de juiste hoeveelheid heparine. </li><li> Houd het segment schip in 1% lidocaïne op ijs tot transplantatie in de ontvanger rat een schip kramp te voorkomen. </li><li> Euthanaseren de donor rat door het verhogen van de narcose tot 5% isofluraan. Na 2-3 minuten, open de buik langs de linea alba, dwars door het middenrif, en verwijder het hart om de circulatie te stoppen. </li></ol> 3. Voorbereiding van de ontvanger Rat <ol><li> Verdoven en bevestig de ontvanger rat op dezelfde manier als de donor rat. </li><li> Scheer de mediale zijde van de benen met een tondeuse en ontsmet driemaal met gebruikmaking van povidon-jood en 80% ethanol. </li><li> Bewaken van de diepte van de anesthesie en ervoor te zorgen dat het voldoende is door controle op de afwezigheid van reflexen als knijpen de achterpoten. </li><li> Voer een mediane dijbeen insnijding van de knie tot de lies plooi. Onder een microscoop gebruikt 2 tang om de femorale arterie gescheiden van zijn omgeving. </li><li> Gebruik micro klemmen om de bloedstroom te stoppen. Plaats de proximale klem, gevolgd door het distale klem. </li><li> Knip een korte segment van de geklemde dijbeenslagader met microscissors en gooi deze weg. Kort de resterende arteriële stomp met microscissors, het creëren van een kloof die is1-2 mm groter dan de ader graft. Spoel de arteriële stomp met heparine met behulp van een 30 G naald. OPMERKING: Als de adventitia steekt iets buiten het schip stomp, een tang om het iets te trekken over het einde van het vat en verwijderen van een stuk. </li><li> Plaats de geoogste ader uit stap 2.8 tussen de arteriële stompen en de lengte aan te passen, zodat deze voldoende past in het gat. Let op de richting van de ader. </li><li> Voer de proximale anastomose eerst met behulp van een 10-0 prolene hechtdraad. Gedrag enkele steken in de getoonde (figuur 1D) orde. Begin met een hechting aan elke zijkant voor het toevoegen van drie hechtingen aan de buikzijde. Daarna plaatst drie steken aan de rugzijde van het vaartuig de anastomose te voltooien. </li><li> Sluit het distale vaten met het transplantaat gebruikmaking van dezelfde techniek als de proximale anastomose bij stap 3.8. Nogmaals, te beginnen met een hechting aan elke zijkant en leg drie hechtingen aan de ventrale side en de rugzijde. </li><li> Plaats twee 1-mL spuiten met fibrinelijm component 1 en 2. Til het transplantaat met een tang en drop ongeveer 100 ul van fibrinelijm component 1 in het kader van het transplantaat, gevolgd door component 2. OPMERKING: Zorg ervoor dat de onderdelen 1 en 2 worden toegepast in een verhouding 1: 1. </li><li> Plaats het implantaat terug op zijn plaats en drop een extra 100 pi componenten 1 en 2 boven het transplantaat. Zorg ervoor dat de lijm heeft zowel betrekking op het transplantaat en de anastomose om anastomotisch insufficiëntie en over-uitzetting van de ader graft te voorkomen. </li><li> Open voorzichtig de distale klem, gevolgd door de proximale. </li><li> Bevestig een succesvolle operatie door te controleren op een zichtbare puls in de getransplanteerde ader en slagader distaal van het transplantaat. </li><li> Verwijder overtollige lijm, die sluiting huid belemmert. Gebruik een tang om de uitgeharde lijm te tillen en verwijder de overtollige met microscissors. Sluit de lagen huid met 5-0 Prolene hechtingen. </li><li> Injecteren 4-5 mg / kg Carprofen subcutaan alvorens de rat om wakker te worden. Laat de dieren niet onbeheerd achter te laten tot het voldoende bewustzijn heeft herwonnen om borstligging handhaven. Houd het dier in een kooi totdat deze volledig is hersteld. </li><li> Voeg Metamizool aan het drinkwater (50 mg Metamizool per 100 ml) als pijnstillers voor de volgende 3 dagen en dagelijks toezicht het dier. </li></ol> 4. Duplex Sonography LET OP: Gebruik duxplex echografie om de bloedstroom te visualiseren non-invasief bij ratten 14. <ol><li> Verdoven een rat in een inductie kamer (isofluraan 2%). Plaats de rat op zijn rug en anesthesie te onderhouden met een gezichtsmasker voor de neus. </li><li> Gebruik tondeuses en ontharingscrème om het haar rond het gebied van de dij te verwijderen. </li><li> Toepassen ultrasoongel de dij. Zorg ervoor dat er geen luchtbellen. Acquire duplex echografie beelden met behulp van een MS 400 transducer (midden frequentie: 30 MHz) met een beeldsnelheid van 230-400 frames / sec. </li></ol> 5. Histopathologie LET OP: Oogst en vlekken op het schip met Masson&#39;s trichroomkleuring voor morfometrische analyse 15. <ol><li> Bevestig de geoogste vat in 4% paraformaldehyde gedurende de nacht en dehydrateren in toenemende concentraties ethanol. Insluiten het monster in paraffine en snijd het in 5 micrometer dikke plakken met behulp van een microtoom. OPMERKING: Paraformaldehyde is giftig en moet met speciale zorg worden behandeld. </li><li> Deparaffinize de dia&#39;s alvorens ze te kleuren met trichroomkleuring oplossing. Dehydrateer de gebrandschilderde dia&#39;s, verwijder ze met xyleen, en zet ze in de montage medium. Na het drogen van de dia&#39;s, bekijk de monsters met een microscoop. </li></ol> 6. Bioluminescentie Imaging (BLI) LET OP: De postoperatieve transplantaat werd gevolgd in de tijd in vivo door het meten van lichtgevende signaal 16. <ol><li> Los 1 g D-luciferine kaliumzout in 22 ml PBS en injecteren intraperitoneaal in de ratten (375 mg / kg lichaamsgewicht). Wacht 15 min voor de luciferine circuleren in het dier. </li><li> Plaats de rat in een real-time bioluminescente kwantificering systeem en toegang tot de bioluminescentie signaal. </li></ol>

<ol><li>Sabik, J. F., 3rd, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Understanding+saphenous+vein+graft+patency%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Understanding saphenous vein graft patency.</a> Circulation. 124, 273-275 (2011).</li>
<li>Goldman, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+patency+of+saphenous+vein+and+left+internal+mammary+artery+grafts+after+coronary+artery+bypass+surgery%3A+results+from+a+Department+of+Veterans+Affairs+Cooperative+Study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Long-term patency of saphenous vein and left internal mammary artery grafts after coronary artery bypass surgery: results from a Department of Veterans Affairs Cooperative Study.</a> J Am Coll Cardiol. 44, 2149-2156 (2004).</li>
<li>Fitzgibbon, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+bypass+graft+fate+and+patient+outcome%3A+angiographic+follow-up+of+5%2C065+grafts+related+to+survival+and+reoperation+in+1%2C388+patients+during+25+years%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Coronary bypass graft fate and patient outcome: angiographic follow-up of 5,065 grafts related to survival and reoperation in 1,388 patients during 25 years.</a> J Am Coll Cardiol. 28, 616-626 (1996).</li>
<li>O'Brien, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wound+healing+around+and+within+saphenous+vein+bypass+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thorac+Cardiovasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Wound healing around and within saphenous vein bypass grafts.</a> J Thorac Cardiovasc Surg. 114, 38-45 (1997).</li>
<li>El-Kurdi, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovine+femoral+artery+bypass+grafting+using+saphenous+vein%3A+a+new+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Ovine femoral artery bypass grafting using saphenous vein: a new model.</a> J Surg Res. 193, 458-469 (2015).</li>
<li>Yuda, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Angiotensin+II+receptor+antagonist%2C+L-158%2C809%2C+prevents+intimal+hyperplasia+in+dog+grafted+veins%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Angiotensin II receptor antagonist, L-158,809, prevents intimal hyperplasia in dog grafted veins.</a> Life Sci. 68, 41-48 (2000).</li>
<li>McCann, R. L., Hagen, P. O., Fuchs, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aspirin+and+dipyridamole+decrease+intimal+hyperplasia+in+experimental+vein+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Aspirin and dipyridamole decrease intimal hyperplasia in experimental vein grafts.</a> Ann Surg. 191, 238-243 (1980).</li>
<li>Thomas, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+studying+vein+graft+failure+and+therapeutic+interventions%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Animal models for studying vein graft failure and therapeutic interventions.</a> Curr Opin Pharmacol. 12, 121-126 (2012).</li>
<li>Hu, Y., Xu, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+mouse+model+of+vein+bypass+graft+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+Lung+Circ%22%5BJournal%5D)">New mouse model of vein bypass graft atherosclerosis.</a> Heart Lung Circ. 11, 182-188 (2002).</li>
<li>Salzberg, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+neointimal+formation+after+surgical+vein+grafting+in+a+murine+model+of+type+2+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Increased neointimal formation after surgical vein grafting in a murine model of type 2 diabetes.</a> Circulation. 114, I302-I307 (2006).</li>
<li>Abbott, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laboratory+animals%3A+the+Renaissance+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Laboratory animals: the Renaissance rat.</a> Nature. 428, 464-466 (2004).</li>
<li>Lindblad-Toh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome+sequencing%3A+three%27s+company%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Genome sequencing: three's company.</a> Nature. 428, 475-476 (2004).</li>
<li>Yu, P., Nguyen, B. T., Tao, M., Campagna, C., Ozaki, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rationale+and+practical+techniques+for+mouse+models+of+early+vein+graft+adaptations%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+vascular+surgery%22%5BJournal%5D)">Rationale and practical techniques for mouse models of early vein graft adaptations.</a> Journal of vascular surgery. 52, 444-452 (2010).</li>
<li>Olver, D. T., Lacefield, J. C., Shoemaker, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+of+bidirectional+flow+in+the+sciatic+vasa+nervorum%5BTitle%5D)+AND+%22Microvascular+research%22%5BJournal%5D)">Evidence of bidirectional flow in the sciatic vasa nervorum.</a> Microvascular research. 94, 103-105 (2014).</li>
<li>Stubbendorff, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inducing+myointimal+hyperplasia+versus+atherosclerosis+in+mice%3A+an+introduction+of+two+valid+models%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+visualized+experiments+%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Inducing myointimal hyperplasia versus atherosclerosis in mice: an introduction of two valid models.</a> Journal of visualized experiments : JoVE. , (2014).</li>
<li>Conradi, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunobiology+of+fibrin-based+engineered+heart+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+cells+translational+medicine%22%5BJournal%5D)">Immunobiology of fibrin-based engineered heart tissue.</a> Stem cells translational medicine. 4, 625-631 (2015).</li>
<li>Dashwood, M. R., Tsui, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%27No-touch%27+saphenous+vein+harvesting+improves+graft+performance+in+patients+undergoing+coronary+artery+bypass+surgery%3A+A+journey+from+bedside+to+bench%5BTitle%5D)+AND+%22Vascular+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">'No-touch' saphenous vein harvesting improves graft performance in patients undergoing coronary artery bypass surgery: A journey from bedside to bench.</a> Vascular Pharmacology. 58, 240-250 (2013).</li>
<li>Bekler, H. I., Rosenwasser, M. P., Akilina, Y., Bulut, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+an+absorbable+collagen+cover+%28NeuraWrap%29+improves+patency+of+interpositional+vein+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+orthopaedica+et+traumatologica+turcica%22%5BJournal%5D)">The use of an absorbable collagen cover (NeuraWrap) improves patency of interpositional vein grafts.</a> Acta orthopaedica et traumatologica turcica. 44, 157-161 (2010).</li>
<li>Geurts, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Knockout+rats+via+embryo+microinjection+of+zinc-finger+nucleases%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Knockout rats via embryo microinjection of zinc-finger nucleases.</a> Science. 325, 433(2009).</li>
<li>Moreno, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Creation+and+characterization+of+a+renin+knockout+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Creation and characterization of a renin knockout rat.</a> Hypertension. 57, 614-619 (2011).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Deze video toont een rat ader tussenkomst model te onderzoeken vein graft verlies en om voor de exploratie van de onderliggende pathologische processen en het testen van nieuwe geneesmiddelen of therapeutische opties. Anesthesie is een cruciaal aspect van chirurgische procedures. Een continue inhalatieve anesthesie wordt aanbevolen, aangezien dit een veilige en eenvoudige methode, vooral tijdens langdurige operaties. Dit kan van groot belang zijn tijdens de trainingsfase Indien de operatie d...

Coronaire ziekten en hun complicaties behoren tot de belangrijkste doodsoorzaken wereldwijd. Huidige therapeutische strategieën gericht op het herstel van de bloedstroom, hetzij door het verwijden van de vernauwde vat of door het creëren van een bypass. Coronaire bypass (CABG) met behulp van veneuze autografts werd voor het eerst beschreven in 1968 en is verfijnd door de jaren heen. Naast de revascularisatie van de linker anterieure dalende kransslagader, worden saphena leidingen meestgebruikte 1. Echter, graft doorgankelijkheid blijft de achilleshiel van vene transplantaten (SVG). Een jaar na de operatie, graft doorgankelijkheid is 85%, gedaald tot 61% na tien jaar 2,3. Onthulling van de pathofysiologische mechanismen en oorzaken van SVG doorgankelijkheid verlies is dan ook een belangrijke taak. Deze video toont een rat ader tussenkomst model om veneuze graft verlies te onderzoeken. De algemene doelstellingen van deze methode zijn om de onderliggende pathobiological verkennenen -fysiologische processen tijdens progressie van de ziekte en een geschikt model voor het geneesmiddel of therapeutische optie testen te ontwikkelen. Door het transplanteren van de oppervlakkige epigastrische ader in het arteriële systeem, dit model nauw bootst de klinische setting van een coronaire bypass operatie. Chirurgisch trauma, ischemie, en de muur stress zijn belangrijke triggers van pathologische vasculaire veranderingen en worden nagebootst in de beschreven model. Verschillende modellen en soorten zijn beschikbaar om veneuze graft doorgankelijkheid verlies te onderzoeken. Grote diermodellen, zoals varkens 4, 5 schapen, honden 6, 7 en apen, lijken van menselijke vaten en anatomische structuren en aldus mogelijk maken complexe therapeutische strategieën, zoals bypass stenting of nieuwe chirurgische technieken te testen 8. Echter, speciale behuizing, apparatuur en personeel nodig. Bovendien hoge kosten en de noodzaak voor een extra anesthesist tijdens chirurgie belemmeren het bredere toepassing. Smalle dieren, met inbegrip van ratten, zijn gemakkelijk te hanteren, geen speciale behuizing vereisen, en hebben beheersbare kosten. Vergeleken met muismodellen 9,10, ratmodellen het voordeel van betere bedienbaarheid en dus minder variabiliteit in het resultaat. Ratten zijn fysiologisch en genetisch meer vergelijkbaar met de mens dan muizen 11,12. Daarnaast hebben de meeste wild-type muizen zich alleen ontwikkelen beperkte myointima 13, die muismodellen gevoelig zijn voor II typefouten te maken. De histologie van de muis belangrijkste aderen zoals de vena cava inferior, slechts uit enkele cellagen en maakt vroegtijdige evaluatie 13 moeilijk. Een verder nadeel is de kleine hoeveelheid weefsel beschikbaar voor verdere analyse na transplantatie herstel. De in deze video beschreven model is reproduceerbaar, goedkoop en gemakkelijk uit te voeren en kan snel en betrouwbaar worden vastgesteld. Het is vooral geschikt om te beoordelen dure experimentele therapeutische middelen, zoals virale vectorenvoor gentherapie, op een economische wijze.

<table><tbody><tr><td>Rat LEW/Crl</td><td>Charles River</td><td>Stock number 004</td><td></td></tr><tr><td>Rat LEW-Tg(Gt(ROSA)26Sor- 1 luc)11Jmsk</td><td>Institute of laboratory animals, Kyoto University, Japan</td><td>NBPR rat number 0299</td><td>http://www.anim.med.kyoto-u.ac.jp/NBR/</td></tr><tr><td>PFA 4%</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>#157135S</td><td>20%</td></tr><tr><td>hair clipper</td><td>WAHL</td><td>8786-451A ARCO SE</td><td></td></tr><tr><td>Forene</td><td>AbbVie</td><td>PZN 10182054 Art.Nr.: B506</td><td>Isoflurane</td></tr><tr><td>microsurgical clamp</td><td>Fine Science Tools</td><td>18055-04</td><td>Micro-Serrefine - 4 mm</td></tr><tr><td>clamp applicator</td><td>Fine Science Tools</td><td>18056-14</td><td></td></tr><tr><td>hair removal creme</td><td>Rufin cosmetic</td><td>27618</td><td></td></tr><tr><td>Povidone-Iodine</td><td>Betadine Purdue Pharma</td><td>NDC:67618-152</td><td></td></tr><tr><td>10-0 Ethilon suture</td><td>Ethicon</td><td>2814G</td><td></td></tr><tr><td>5-0 prolene suture</td><td>Ethicon</td><td>EH7229H</td><td></td></tr><tr><td>Rimadyl</td><td>Pfizer</td><td>400684.00.00</td><td>Carprofen</td></tr><tr><td>Novaminsulfon</td><td>Ratiopharm</td><td>PZN 03530402</td><td>Metamizol</td></tr><tr><td>Heparin</td><td>Rotexmedica</td><td>PZN: 3862340</td><td>25.000 I.E./ ml</td></tr><tr><td>Xylocain 1%</td><td>AstraZeneca</td><td>PZN: 1137907</td><td>Lidocaïne</td></tr><tr><td>EVICEL</td><td>J&amp;J Med.Ethicon Biosur</td><td>PZN 7349697 Art. Nr.:EVK01DE</td><td>Fibrine lijm</td></tr><tr><td>NaCl 0.9%</td><td>B.Braun</td><td>PZN 06063042 Art. Nr.: 3570160</td><td></td></tr><tr><td>Vevo 770 high-resolution in vivo micro-imaging system</td><td>VisualSonics</td><td></td><td>duplex sonography</td></tr><tr><td>Ecogel 100 ultrasound gel</td><td>Eco-med</td><td>30GB</td><td></td></tr><tr><td>D-Luciferin Firefly, potassium salt</td><td>Biosynth</td><td>L-8220</td><td></td></tr><tr><td>PBS pH 7.4</td><td>Gibco</td><td>10010023</td><td></td></tr><tr><td>Xenogen Ivis 200</td><td>Perkin Elmer</td><td></td><td>Bioluminescence imaging</td></tr><tr><td>Weigerts iron hematoxylin Kit</td><td>Merck</td><td>1.15973.0002</td><td>Trichrome staining</td></tr><tr><td>Resorcine-Fuchsine Weigert</td><td>Waldeck</td><td>2.00E-30</td><td>Trichrome staining</td></tr><tr><td>Acid Fuchsin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F8129-25G</td><td>Trichrome staining</td></tr><tr><td>Ponceau S solution</td><td>Serva Electrophoresis</td><td>33427</td><td>Trichrome staining</td></tr><tr><td>Azophloxin</td><td>Waldeck</td><td>1B-103</td><td>Trichrome staining</td></tr><tr><td>Molybdatophosphoric acid hydrate</td><td>Merck</td><td>1.00532.0100</td><td>Trichrome staining</td></tr><tr><td>Orange G</td><td>Waldeck</td><td>1B-221</td><td>Trichrome staining</td></tr><tr><td>Light Green SF</td><td>Waldeck</td><td>1B-211</td><td>Trichrome staining</td></tr><tr><td>Vitro-Clud</td><td>Langenbrinck</td><td>04-0001</td><td></td></tr><tr><td>Glacial Acetic Acid</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>537020</td><td></td></tr><tr><td>37% HCl</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H1758</td><td></td></tr><tr><td>Xylene</td><td>Th. Geyer</td><td>3410</td><td></td></tr><tr><td>Paraffin</td><td>Leica biosystems</td><td>REF 39602004</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol absolute</td><td>Th. Geyer</td><td>2246</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol 96%</td><td>Th. Geyer</td><td>2295</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol 70%</td><td>Th. Geyer</td><td>2270</td><td></td></tr><tr><td>Slide Rack</td><td>Ted Pella</td><td>21057</td><td></td></tr><tr><td>Staining dish</td><td>Ted Pella</td><td>21075</td><td></td></tr><tr><td>Bepanthen Eye and Nose ointment</td><td>Bayer</td><td>1578675</td><td>Eye ointment</td></tr></tbody></table>

vein interpositie model: een geschikt model om te studeren bypass graft patency

Vein Interposition Model: A Suitable Model to Study Bypass Graft Patency

Bypass-grafting is een gevestigde behandelmethode voor coronaire hartziekte. De open blijvendheid van de grafts blijft de achilleshiel van safenvenegrafts. Onderzoeksmodellen voor bypass-graftfalen zijn essentieel voor een beter begrip van de pathobiologische en pathofysiologische processen tijdens het verlies van open blijvendheid van de grafts. Grote diermodellen, zoals varkens of schapen, lijken op menselijke anatomische structuren maar vereisen speciale faciliteiten en apparatuur. Deze video beschrijft een rattenvene-interpositiemodel om het verlies van open blijvendheid van de venegrafts te onderzoeken. Ratten zijn goedkoop en gemakkelijk te hanteren. Vergeleken met muismodellen, maakt de geschikte grootte van ratten betere handelbaarheid mogelijk en biedt het de mogelijkheid om voldoende materiaal te verkrijgen voor verdere diverse analyses. In het kort, de inferieure epigastrische vene van een donorrat wordt geoogst en gebruikt om een segment van de femorale ader te vervangen. Anastomose wordt uitgevoerd via enkele steken en verzegeld met fibrinekleefstof. De open blijvendheid van de grafts kan niet-invasief worden gemonitord met behulp van duplex-sonografie. Myointimale hyperplasie, de belangrijkste oorzaak van open blijvendheid van grafts, ontwikkelt zich geleidelijk en kan worden berekend aan de hand van histologische dwarsdoorsneden.

De ader tussenkomst rat model is geschikt voor de ontwikkeling van myointima hyperplasie en veneuze graft falen bestuderen. Dieren goed herstellen van de operatie en toon uitstekende fysieke conditie na de operatie. Figuur 1 toont de belangrijkste operatiestappen. Nadat de huid incisie langs de linea inguinalis, de epigastrische oppervlakkige ader en liesslagader geïdentificeerd (Figuur 1A). Het oogsten van het transplantaat moet zorgvuldig worden uitgevoerd zonder beschadiging van het ...

Deze video demonstreert een model om de ontwikkeling van myointimale hyperplasie na veneuze interpositiechirurgie bij ratten te bestuderen.

Vein Interpositie Model: Een geschikt model om te studeren Bypass Graft Patency

Bypass grafting is an established treatment method for coronary artery disease. Graft patency continues to be the Achilles heel of saphenous vein grafts. ...

Het algemene doel van deze procedure is om bypass-graft-patentie te bestuderen in een rat-vene-interpositiemodel. Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van belangrijke vragen in het gebied van bypass-chirurgie, zoals de onderliggende weg van biologische en fysiologische processen tijdens bypass-occlusie. Het grote voordeel van deze techniek is dat de chirurgische procedure eenvoudig en snel is, en kan worden gebruikt om nieuwe therapeutische behandelingen en sporen in vivo te bestuderen.De techniek wordt gedemonstreerd door Grigol Tediashvili, een micro-chirurg uit ons laboratorium. Controleer vóór de operatie op een voldoende diepte van anesthesie door in de achtervoeten van de rat te knijpen en het ontbreken van reflexen te controleren. Breng vervolgens wat dierenartszalf aan op de ogen om uitdroging tijdens anesthesie te voorkomen.Spreid vervolgens de achterpoten en fixeer hun positie met tape. Scheer vervolgens het inguinale haar met een haartjes en desinfecteer vervolgens het gebied uitgebreid met povidon-jodium gevolgd door 80%alcohol. Herhaal deze wisselende scrubs in totaal drie keer.Nu onder een microscoop een verticale incisie langs de linea inguinalis uitvoeren. Gebruik vervolgens twee pincetten om de onderhuidse weefsels voorzichtig te scheiden en de oppervlakkige epigastrische ader tot aan de oorsprong op de femorale ader bloot te leggen. Doe dit heel voorzichtig, omdat de ader kwetsbaar is.Stop vervolgens de bloedstroom door de oppervlakkige epigastrische ader met twee klemmen. Verzamel nu een segment van de ader. Til de geïsoleerde ader voorzichtig op en snij door het vat met micro-schaars.Plaats vervolgens het aderstuk op steriel gaas. Schuif daar voorzichtig een 30-gauge naald in een uiteinde en spoel de ader met heparine. Breng vervolgens de ader over in 1%lidocaine en bewaar het op ijs om spasmen te voorkomen.Euthanasie nu de donorrat door de anesthesie te verhogen tot 5%isofluraan. Bereid vervolgens de ontvangerrat voor op de anastomoses op dezelfde manier als de donorrat tot aan de scheerstap. Na twee tot drie minuten van 5% isofluaan, opent u de buik van de donorrat langs de linea alba, snijdt u door het diafragma en verwijdert u het hart om de circulatie te stoppen.Ga door met het voorbereiden van de ontvangerrat voor de operatie. Scheer de mediale zijde van de benen met een haartjes en desinfecteer de huid met drie wisselende scrubs van povidon-jodium en 80%ethanol. Voordat u verder gaat, voert u nog een teenprik uit om de anesthesie te controleren.Voer nu een mediane femorale incisie uit vanaf het knie tot aan de inguinale vouw. Gebruik onder de microscoop twee pincetten om de femorale ader van zijn omgeving te scheiden. Gebruik vervolgens twee microklemmen om de bloedstroom te stoppen, waarbij de proximale klem eerst wordt geplaatst.Snijd vervolgens een kort segment van de geklemde femorale ader uit en gooi het weg. Verkort de resterende arteriële stomp om een opening te laten die één tot twee millimeter groter is dan de venenaft. Spoel vervolgens de arteriële stomp met heparine uit een 30-gauge naald.Als de adventitia iets uitsteekt voorbij de vaastomp, gebruik pincetten om de adventitia lichtjes over het uiteinde van het vat te trekken en verwijder vervolgens een stukje adventitia. Plaats nu het verzamelde aderstuk tussen de arteriële stompen in de juiste oriëntatie en pas de grootte van de opening aan voor een goede pasvorm. Voer nu eerst de proximale anastomose uit met behulp van 10-0 proleennaald.Begin met het naaien van elke laterale zijde en voeg vervolgens nog drie hechtingen toe aan de ventrale zijde. Werk af met drie steken aan de dorsale zijde. Verbind vervolgens de distale vaten met behulp van dezelfde techniek, beginnend met een draad aan elke laterale zijde, gevolgd door drie steken aan de ventrale zijde en vervolgens afwerken aan de dorsale zijde.Na het voltooien van de anastomosen, laad twee ene-milliliter spuiten met de componenten van de fibrine lijm. Til vervolgens voorzichtig de graft op met pincetten en breng ongeveer 100 microliter van component één onder de graft aan, gevolgd door 100 microliter van component twee. De twee componenten moeten altijd in dezelfde volumes worden toegevoegd.Plaats nu de graft terug op zijn plaats en breng 100 microliter van elk component aan over de graft om de graft en de anastomose volledig te bedekken. Dit voorkomt anastomotische insufficiëntie en overmatige verwijding van de venenaft. Open nu voorzichtig de klemmen, beginnend met de distale klem.Bevestig vervolgens een succesvolle operatie door een zichtbare puls in de getransplanteerde ader en distale ader van de graft te controleren. Voordat u de huid sluit, verwijdert u eventuele overtollige lijm die de sluiting kan belemmeren. Sluit vervolgens de huidlagen met 5-0 proleennaalden.Voordat de rat wakker wordt, injecteer vier tot vijf milligram carprofen per kilogram subcutaan. Houd het dier in de gaten totdat het voldoende bewustzijn heeft herkregen om sternal te blijven liggen. Geef de rat vervolgens een thuiscamer zonder andere dieren.Bied de komende drie dagen metamizole in het drinkwater aan en controleer dagelijks de herstel van de rat. Zodra volledig hersteld, kan de rat bij andere ratten worden gehuisvest. Dieren herstellen goed van de operatie en vertoonden een uitstekende fysieke conditie na de operatie.Succesvolle integratie van de ader in de femorale ader en graft-patentie na transplantatie werd non-invasief bevestigd met behulp van duplex-echografie. Door de ader van een luke-positieve rat naar een luke-negatieve rat te transplanteren, werd bioluminescentie-beeldvorming gebruikt om de aanwezigheid van de graft te controleren. Er werd vastgesteld dat myointimale hyperplasie zich geleidelijk in de graft ontwikkelt over tijd.Histologische kleuring met Masson's trichrome toont myointimale formatie binnen de interne elastische lamina. Om te bevestigen dat het model de dynamica van myointimale hyper

vein-interposition-model-suitable-model-to-study-bypass-graft

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Neointimale hyperplasie is de primaire oorzaak van vernauwing in aderen arterialized. Wij stellen een nieuw protocol waarbij de juiste externe halsader is geënt met behulp van de manchet techniek in de gemeenschappelijke halsslagader van Sprague Dawley ratten. De overleving was 100% op het tijdstip van het offer.

Opleiding van een geavanceerde Microchirurgische Techniek: tussenkomst van externe halsader Graft in de gemeenschappelijke halsslagader bij ratten

This video demonstrates the interposition of the rabbit carotid artery with the jugular vein to induce venous intimal hyperplasia by subjecting the veins to arterial pressure. This model will help investigate molecular and genetic interventions to attenuate the progression of intimal hyperplasia after revascularization surgeries.

Carotid Artery and Jugular Vein Interposition: A Technique to Induce Venous Intimal Hyperplasia in Rabbit Model

Gevasculariseerde Composite Allotransplantations (VCA) hebben een klinische realiteit. Echter, brede klinische toepassing van VCA beperkt door chronische multi-drug immunosuppressie. De auteurs presenteren een betrouwbare en reproduceerbare grote diermodel om immunomodulerende strategieën die kunnen minimaliseren of potentieel elimineren de noodzaak van immunosuppressie in VCA vertalen.

Een Gemodificeerde Heterotope Varkens Hind Limb Transplant Model for Translational Gevasculariseerd Composite allotransplantatie (VCA) Onderzoek

Om onze kennis van cellulaire en moleculaire neotissue vorming te verbeteren, werd een muizenmodel van het TEVG recent ontwikkelde. De transplantaten werden geïmplanteerd infrarenale vena cava tussenvoeging enten in C57BL / 6 muizen. Dit model behaalt dezelfde resultaten als die bereikt bij onze klinische onderzoek, maar over een veel kortere tijd-cursus.

Implantatie van de vena cava inferior Interpositie Graft in muismodel

De mechanismen die leiden tot de ontwikkeling van intimale hyperplasie (IH) en bypass falen nog steeds slecht begrepen. Deze studie beschrijft een ex vivo-systeem voor de menselijke aderen onder gecontroleerde flow en druk perfuseren. Verder is de efficiëntie van het extern wapeningsnet beperken de ontwikkeling van IH werd geëvalueerd.

Procedure for Human aderen Ex Vivo Perfusie en Externe Reinforcement

Deze methode beschrijft de plaatsing van de spreekbeurt ader enten bij konijnen, de transductie van de transplantaties en de verwezenlijking van duurzaam transgenic expressie. Hierdoor kan het onderzoek van fysiologische en pathologische rollen van transgenen en hun eiwitproducten in geënte aderen, en het testen van gentherapieën voor ader graft ziekte.

Een konijn Model van duurzaam transgenic expressie in de halsslagader aan gemeenschappelijke halsslagader spreekbeurt transplantaten

Het huidige protocol is gericht op het experimenteel creëren van veneuze intimale hyperplasie door het onderwerpen van aderen aan arteriële bloeddruk voor het ontwikkelen van strategieën om veneuze intimale hyperplasie te verzachten na revascularisatie chirurgie met behulp van adergrafts.

Een konijn veneuze interposition model nabootsen revascularisatie chirurgie met behulp van ader grafts te beoordelen Intimal Hyperplasie onder arteriële bloeddruk

In dit protocol werd nieuwe varkensaderbypass-enting uitgevoerd via een kleine incisie in de linkerborstwand zonder cardiopulmonale bypass. Er werd een postoperatief pathologisch onderzoek gedaan, dat intimale verdikking aantoonde.

Vaststelling en evaluatie van een model voor varkensaderziekte

Dit protocol maakt de in vivo kwantificering van veneuze compliantie en rekbaarheid mogelijk met behulp van katheterisatie en 3D-angiografie als overlevingsprocedure, waardoor een verscheidenheid aan mogelijke toepassingen mogelijk is.

Kwantificering van inferieure Vena Cava-compliantie en rekbaarheid in een in vivo schapenmodel met behulp van 3D-angiografie

Deze studie presenteert een varkensmodel voor het evalueren van transplantaten met een kleine diameter in dijbeenslagaders. Het model bootst de menselijke vasculaire dynamiek na en beoordeelt uitgebreid de doorgankelijkheid van het transplantaat, de hemodynamica en de vasculaire remodellering. Het biedt een waardevol platform voor het testen van vasculaire transplantaten en het monitoren ervan met Doppler-echografie en angiografie.

Implantatie van een femurvasculair transplantaat in een varkensmodel om vasculaire transplantaten met een kleine diameter te testen

Leer het vene-interpositiemodel in ratten om bypassgraftpatentie en myointimale hyperplasie te bestuderen. Deze methode biedt inzicht in vasculaire biologie en chirurgische technieken.

Vein Interpositie Model: Een geschikt model om te studeren Bypass Graft Patency

Meer video's verkennen