Name: ADSC-sheet transplantatie ter voorkoming Strictuur na Extended slokdarmkanker Endoscopische Submucosale Dissection (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-02-10T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 57 s
Description: Leer ADSC-sheet transplantatie ter voorkoming van slokdarmstrictuur na uitgebreide endoscopische submucosale dissectie in een varkensmodel. Deze celtherapie verbetert weefselherstel en vermindert fibrose.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Deze studie werd ondersteund en gefinancierd door de Avenir Foundation (Fondation de l'Avenir, 255 rue de Vaugirard, 75719 Paris cedex 15, Parijs, Frankrijk). Deze studie zou nooit zijn uitgevoerd zonder de onschatbare hulp van het veterinaire team van het Laboratorium voor Biochirurgisch Onderzoek van de Alain Carpentier Foundation.

Alle dieren werden behandeld volgens de Animal Research Ethics Committee (richtlijnen van het Franse ministerie van Landbouw). Het protocol kreeg de goedkeuring van de lokale ethische commissie bevoegd voor dierlijke experimenten op de Paris Descartes University (registratienummer MESR 2.035,02, Faculteit der Geneeskunde Paris Descartes, Parijs, Frankrijk). 1. ADSC Cultuur en Labeling <ol><li> Verkrijgen bevestigde ADSCs uit een privé-instelling. Cultuur allogene ADSCs bij 37 ° C en 5% CO2 met alfa-minimaal essentieel medium dat 10% foetaal kalfs- serum en 1% antibiotica (penicilline en streptomycine). </li><li> Verkrijgen ongeveer 24 x 10 6 ADSCs per dier onder toepassing van standaard procedures celexpansie (37 ° C en 5% CO2). Oogst de ADSCs met een standaard trypsine-oplossing (10 ml voor T150 schotel). Voer cel tellen met een hemocytometer. </li><li> Voer cel labelen van de dag vóór de transplantatie met behulp van de PKH67 kleuring procedure hieronder beschreven. Opmerking: Het doel van de kleuring procedure te cell tracking mogelijk na transplantatie. <ol><li> Om 2 x 10 6 ADSCs labelen bereiden Oplossing A (2 x 10 6 cellen met 100 pl verdunningsmiddel C) en oplossing B (4 pl PKH67 met 1 ml Diluent C). </li><li> Incubeer Oplossingen A en B gedurende 2 min. Voeg vervolgens 100 ul foetaal kalfs- serum gedurende 1 min. </li><li> Spoel de oplossing met 300 pl gecitreerd RPMI (298,5 pl RPMI en 1,5 pl citraat) en centrifugeer bij 1500 xg gedurende 5 minuten. Herhaal deze handeling 2 keer. Handhaving van de gelabelde cellen en hen te beschermen tegen licht tot blad bouw. </li></ol></li></ol> 2. Dubbelklik ADSC-sheet Construct <ol><li> De dag voor transplantatie, stelt een 12-well temperatuur reagerende celkweekschaal met 4 ml per putje van het celkweekmedium, hierboven beschreven, voor PKH-labeling. Het zaad van de schotel met 1,5 x 10 6 PKH-labeled cellen per putje en incubeer gedurende 12 uur (37 ° C en 5% CO2). </li><li> Op de dag van de transplantatie, maak de confluente cellaag door incuberen van de schotel bij kamertemperatuur gedurende 30 min. </li><li> Zuig voorzichtig één ADSC blad met een pipet en combineer het op een hydrofoob papier (1,5 cm diameter). Gebruik dit document als een ondersteuning membraan. </li><li> Pak een andere ADSC vel en voorzichtig deponeren het op de top van de andere om een ​​double-layer constructie te verkrijgen. </li><li> Herhaal deze procedure zo nodig (4 per dier) zoveel ADSC-sheet constructies te verkrijgen. </li></ol> 3. Oesofageale endoscopische submucosale dissectie (ESD) <ol><li> Op de dag van de transplantatie, pre-medicijnen de dieren 10 mg / kg ketamine intramusculair en induceren ze met 8 mg / kg intraveneus propofol. Voer vervolgens intubatie en de anesthesie met isofluraan 2,5% inademing te handhaven. </li><li> Zodra het dier onder narcose Voer ESD met gastroscope een videoscope en een elektrochirurgische eenheid. <ol><li> Gebruik een endoscopische mes en zachte coagulatie hemi-omtrek dorsale merken variëren van 40 cm tot 45 cm van de tandboog verkrijgen. </li><li> Injecteer glycerol oplossing die indigokarmijn kleurstof in de submucosa van de scheiding van de slijmvlieslaag van de spierlaag. </li><li> Gebruik een endoscopische mes met endocut I-modus om de omtrek incisies te verkrijgen. </li><li> Gebruik een endoscopische mes gedwongen coagulatiemodus de submucosale dissectie uitvoeren, zich van het proximale naar het distale insnijding incisie. </li></ol></li><li> Aan het einde van de ESD procedure, observeert de hemi-omtrek, 5 cm lang oesofageale litteken blootstellen van de spierlaag. </li></ol> 4. Endoscopische Transplantatie <ol><li> Onmiddellijk na de ESD, endoscopisch transplantatie dieren met 4 dubbele ADSC-sheet constructies. <ol><li> Pak een ADSC vel construct met endoscopische tang enbeschermen tijdens het vervoer naar de wond met behulp van een grote, transparante endoscopische cap. </li><li> Breng het gehele oppervlak van het vel ADSC construct aan de zweer bed. </li><li> Voorzichtig toepassen ADSC vel construct voor 10 minuten om een ​​complete en stabiele engraftment verkrijgen. Voor toepassing, gebruik endoscopische tang of een endoscopische dop en breng het hele oppervlak van de ADSC bouwen op de slokdarm submucosale laag. </li></ol></li><li> Herhaal deze procedure vier keer voor elk dier met het oog op vier getransplanteerde en hechtende dubbele cel-sheet constructies te verkrijgen. NB: Het doel is om bij benadering de helft van de gewonde gebied te dekken. </li></ol> 5. Postoperatieve evaluatie en follow-up <ol><li> Voor elk dier, zorgen na ESD analgesie met intramusculaire injectie van 0,2 mg / kg morfine drie keer per dag gedurende de eerste dag en 28 dagen tegen zuurbehandeling van esomeprazol (40 mg / dag). Voer profylactisch antibiotica met amoxicillin (1 g / dag) gedurende 7 dagen. Machtigen vloeistoffen op dag 1 en vaste stoffen op de volgende dag. </li><li> Follow-up met dieren voor 28 dagen. Het verkrijgen van de dagelijkse klinische evaluaties met behulp van Mellow Pinkas dysphagia scores 16 en gewichtsverschil tussen metingen. </li><li> Multimodaal stricture evaluatie: onder algemene verdoving, op geregelde dagen 3, 14 en 28, het uitvoeren van een multimodale evaluatie van de vernauwing optreden. <ol><li> Voer een endoscopische evaluatie met behulp van litteken beschrijving, vernauwing meting, en papier ondersteuning membraan detectie. Meet de vernauwing met de gastroscope te steken door de vernauwing (de diameter van de gastroscope is 8 mm). Let op het litteken, met aandacht voor de inflammatoire aspect (mucosale erythema, mucosale oedeem, en mucosale spontane bloeden) en de aan- of afwezigheid van de papiersteun membraan binnen het litteken. </li><li> Solliciteer PCLE groene sonde door het gastroscope operator kanaal direct in het litteken bed. Zoeken naar een spontaneen georganiseerde groene signaal compatibel met PKH67-gelabelde ADSC-sheet construct aanslaan. </li><li> Voer 2 orthogonale incidenties van bariet esophagography met een radiologische hoepel (voorzijde en links-zijdig incidentie). Houd het kleinste incidentie van strictuur evaluatie (mate van vernauwing (%) = [1- (lengte van de korte as onder stenose / lengte van de normaalas onder stenose) x 100)]) 17, 18. </li></ol></li><li> Dierenoffers. <ol><li> Op dag 28, aan het einde van de follow-up periode, voert het dier offeren. Terwijl het dier nog onder narcose injecteren 100 mg / kg intraveneus fenobarbital. Zorg ervoor dat dieren dood met behulp van klinisch onderzoek voor de afwezigheid van een hartslag en de ademhaling beweging. </li><li> Na een sternotomie en orgel blootstelling, verwijder de slokdarm uit elk opgeofferd dier (met 10% gebufferde formaline fixatie, inbedden in paraffine, en 4 urn dikke secties). Vlekken op de dia&#39;smet Hematoxylin en saffraan 15. Digitaliseren van de dia&#39;s voor geautomatiseerde analyse en vergelijk de diergroepen 15. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Ono, S., Fujishiro, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+outcomes+of+endoscopic+submucosal+dissection+for+superficial+esophageal+squamous+cell+neoplasms%5BTitle%5D)+AND+%22Gastrointestinal+endoscopy%22%5BJournal%5D)">Long-term outcomes of endoscopic submucosal dissection for superficial esophageal squamous cell neoplasms.</a> Gastrointestinal endoscopy. 70 (5), 860-866 (2009).</li>
<li>Pech, O., May, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+efficacy+and+safety+of+endoscopic+resection+for+patients+with+mucosal+adenocarcinoma+of+the+esophagus%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Long-term efficacy and safety of endoscopic resection for patients with mucosal adenocarcinoma of the esophagus.</a> Gastroenterology. 146 (3), 652-660 (2014).</li>
<li>Yahagi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Is+esophageal+endoscopic+submucosal+dissection+an+extreme+treatment+modality%2C+or+can+it+be+a+standard+treatment+modality%5BTitle%5D)+AND+%22Gastrointestinal+Endoscopy%22%5BJournal%5D)">Is esophageal endoscopic submucosal dissection an extreme treatment modality, or can it be a standard treatment modality.</a> Gastrointestinal Endoscopy. 68 (6), 1073-1075 (2008).</li>
<li>Rösch, T., Sarbia, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Attempted+endoscopic+en+bloc+resection+of+mucosal+and+submucosal+tumors+using+insulated-tip+knives%3A+a+pilot+series%5BTitle%5D)+AND+%22Endoscopy%22%5BJournal%5D)">Attempted endoscopic en bloc resection of mucosal and submucosal tumors using insulated-tip knives: a pilot series.</a> Endoscopy. 36 (9), 788-801 (2004).</li>
<li>Chennat, J., Ross, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advanced+pathology+under+squamous+epithelium+on+initial+EMR+specimens+in+patients+with+Barrett%27s+esophagus+and+high-grade+dysplasia+or+intramucosal+carcinoma%3A+implications+for+surveillance+and+endotherapy+management%5BTitle%5D)+AND+%22Gastrointestinal+endoscopy%22%5BJournal%5D)">Advanced pathology under squamous epithelium on initial EMR specimens in patients with Barrett's esophagus and high-grade dysplasia or intramucosal carcinoma: implications for surveillance and endotherapy management.</a> Gastrointestinal endoscopy. 70 (3), 417-421 (2009).</li>
<li>Oyama, T., Tomori, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endoscopic+submucosal+dissection+of+early+esophageal+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+gastroenterology+and+hepatology%3A+the+official+clinical+practice+journal+of+the+American+Gastroenterological+Association%22%5BJournal%5D)">Endoscopic submucosal dissection of early esophageal cancer.</a> Clinical gastroenterology and hepatology: the official clinical practice journal of the American Gastroenterological Association. 3 (7), Suppl 1 67-70 (2005).</li>
<li>Werner, S., Krieg, T., Smola, H. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17435785">Keratinocyte-fibroblast interactions in wound healing.</a> The Journal of Investigative Dermatology. 127 (5), 998-1008 (2007).</li>
<li>Yamaguchi, N., Isomoto, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+oral+prednisolone+on+esophageal+stricture+after+complete+circular+endoscopic+submucosal+dissection+for+superficial+esophageal+squamous+cell+carcinoma%3A+a+case+report%5BTitle%5D)+AND+%22Digestion%22%5BJournal%5D)">Effect of oral prednisolone on esophageal stricture after complete circular endoscopic submucosal dissection for superficial esophageal squamous cell carcinoma: a case report.</a> Digestion. 83 (4), 291-295 (2011).</li>
<li>Hanaoka, N., Ishihara, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intralesional+steroid+injection+to+prevent+stricture+after+endoscopic+submucosal+dissection+for+esophageal+cancer%3A+a+controlled+prospective+study%5BTitle%5D)+AND+%22Endoscopy%22%5BJournal%5D)">Intralesional steroid injection to prevent stricture after endoscopic submucosal dissection for esophageal cancer: a controlled prospective study.</a> Endoscopy. 44 (11), 1007-1011 (2012).</li>
<li>Ohki, T., Yamato, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+of+oesophageal+ulcerations+using+endoscopic+transplantation+of+tissue-engineered+autologous+oral+mucosal+epithelial+cell+sheets+in+a+canine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">Treatment of oesophageal ulcerations using endoscopic transplantation of tissue-engineered autologous oral mucosal epithelial cell sheets in a canine model.</a> Gut. 55 (12), 1704-1710 (2006).</li>
<li>Ohki, T., Yamato, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+of+esophageal+stricture+after+endoscopic+submucosal+dissection+using+tissue-engineered+cell+sheets%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Prevention of esophageal stricture after endoscopic submucosal dissection using tissue-engineered cell sheets.</a> Gastroenterology. 143 (3), 582-588 (2012).</li>
<li>García-Gómez, I., Elvira, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cells%3A+biological+properties+and+clinical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+opinion+on+biological+therapy%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cells: biological properties and clinical applications.</a> Expert opinion on biological therapy. 10 (10), 1453-1468 (2010).</li>
<li>Jorgensen, C., Noël, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cells+in+osteoarticular+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Regenerative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cells in osteoarticular diseases.</a> Regenerative Medicine. 6 (6), Suppl 44-51 (2011).</li>
<li>Antonic, A., Sena, E. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+cell+transplantation+in+traumatic+spinal+cord+injury%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis+of+animal+studies%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+biology%22%5BJournal%5D)">Stem cell transplantation in traumatic spinal cord injury: a systematic review and meta-analysis of animal studies.</a> PLoS biology. 11 (12), 1001738(2013).</li>
<li>Perrod, G., Rahmi, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+Sheet+Transplantation+for+Esophageal+Stricture+Prevention+after+Endoscopic+Submucosal+Dissection+in+a+Porcine+Model%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+ONE%22%5BJournal%5D)">Cell Sheet Transplantation for Esophageal Stricture Prevention after Endoscopic Submucosal Dissection in a Porcine Model.</a> PLOS ONE. 11 (3), 0148249(2016).</li>
<li>Mellow, M. H., Pinkas, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endoscopic+laser+therapy+for+malignancies+affecting+the+esophagus+and+gastroesophageal+junction.+Analysis+of+technical+and+functional+efficacy%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Internal+Medicine%22%5BJournal%5D)">Endoscopic laser therapy for malignancies affecting the esophagus and gastroesophageal junction. Analysis of technical and functional efficacy.</a> Archives of Internal Medicine. 145 (8), 1443-1446 (1985).</li>
<li>N.A.S.C.E.T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beneficial+effect+of+carotid+endarterectomy+in+symptomatic+patients+with+high-grade+carotid+stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Beneficial effect of carotid endarterectomy in symptomatic patients with high-grade carotid stenosis.</a> The New England Journal of Medicine. 325 (7), 445-453 (1991).</li>
<li><a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Randomised+trial+of+endarterectomy+for+recently+symptomatic+carotid+stenosis%3A+final+results+of+the+MRC+European+Carotid+Surgery+Trial+%28ECST%29%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Randomised trial of endarterectomy for recently symptomatic carotid stenosis: final results of the MRC European Carotid Surgery Trial (ECST).</a> Lancet. 351 (9113), 1379-1387 (1998).</li>
<li>Kanai, N., Yamato, M., Ohki, T., Yamamoto, M., Okano, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fabricated+autologous+epidermal+cell+sheets+for+the+prevention+of+esophageal+stricture+after+circumferential+ESD+in+a+porcine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Gastrointestinal+Endoscopy%22%5BJournal%5D)">Fabricated autologous epidermal cell sheets for the prevention of esophageal stricture after circumferential ESD in a porcine model.</a> Gastrointestinal Endoscopy. 76 (4), 873-881 (2012).</li>
<li>Aggarwal, S., Pittenger, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+mesenchymal+stem+cells+modulate+allogeneic+immune+cell+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Human mesenchymal stem cells modulate allogeneic immune cell responses.</a> Blood. 105 (4), 1815-1822 (2005).</li>
<li>Maeda, M., Kanai, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endoscopic+cell+sheet+transplantation+device+developed+by+using+a+3-dimensional+printer+and+its+feasibility+evaluation+in+a+porcine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Gastrointestinal+Endoscopy%22%5BJournal%5D)">Endoscopic cell sheet transplantation device developed by using a 3-dimensional printer and its feasibility evaluation in a porcine model.</a> Gastrointestinal Endoscopy. , (2015).</li>
<li>Haraguchi, Y., Shimizu, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fabrication+of+functional+three-dimensional+tissues+by+stacking+cell+sheets+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Fabrication of functional three-dimensional tissues by stacking cell sheets in vitro.</a> Nature Protocols. 7 (5), 850-858 (2012).</li>
<li>Nishida, K., Yamato, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corneal+reconstruction+with+tissue-engineered+cell+sheets+composed+of+autologous+oral+mucosal+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Corneal reconstruction with tissue-engineered cell sheets composed of autologous oral mucosal epithelium.</a> The New England Journal of Medicine. 351 (12), 1187-1196 (2004).</li>
<li>Napoléon, B., Lemaistre, A. -I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+approach+to+the+diagnosis+of+pancreatic+serous+cystadenoma%3A+needle-based+confocal+laser+endomicroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Endoscopy%22%5BJournal%5D)">A novel approach to the diagnosis of pancreatic serous cystadenoma: needle-based confocal laser endomicroscopy.</a> Endoscopy. 47 (1), 26-32 (2015).</li>
<li>Gabbani, T., Manetti, N., Bonanomi, A. G., Annese, A. L., Annese, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+endoscopic+imaging+techniques+in+surveillance+of+inflammatory+bowel+disease%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Gastrointestinal+Endoscopy%22%5BJournal%5D)">New endoscopic imaging techniques in surveillance of inflammatory bowel disease.</a> World Journal of Gastrointestinal Endoscopy. 7 (3), 230-236 (2015).</li>
<li>Nagyova, M., Slovinska, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparative+study+of+PKH67%2C+DiI%2C+and+BrdU+labeling+techniques+for+tracing+rat+mesenchymal+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22In+Vitro+Cellular+%26+Developmental+Biology.+Animal%22%5BJournal%5D)">A comparative study of PKH67, DiI, and BrdU labeling techniques for tracing rat mesenchymal stem cells.</a> In Vitro Cellular & Developmental Biology. Animal. 50 (7), 656-663 (2014).</li>
<li>Jain, D., Singhal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Esophageal+Stricture+Prevention+after+Endoscopic+Submucosal+Dissection%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Endoscopy%22%5BJournal%5D)">Esophageal Stricture Prevention after Endoscopic Submucosal Dissection.</a> Clinical Endoscopy. 49 (3), 241-256 (2016).</li>
<li>Lua, G. W., Tang, J., Liu, F., Li, Z. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+of+Esophageal+Strictures+After+Endoscopic+Submucosal+Dissection%3A+A+Promising+Therapy+Using+Carboxymethyl+Cellulose+Sheets%5BTitle%5D)+AND+%22Digestive+Diseases+and+Sciences%22%5BJournal%5D)">Prevention of Esophageal Strictures After Endoscopic Submucosal Dissection: A Promising Therapy Using Carboxymethyl Cellulose Sheets.</a> Digestive Diseases and Sciences. 61 (6), 1763-1769 (2016).</li>
<li>Sakaguchi, Y., Tsuji, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Triamcinolone+Injection+and+Shielding+with+Polyglycolic+Acid+Sheets+and+Fibrin+Glue+for+Postoperative+Stricture+Prevention+after+Esophageal+Endoscopic+Resection%3A+A+Pilot+Study%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Triamcinolone Injection and Shielding with Polyglycolic Acid Sheets and Fibrin Glue for Postoperative Stricture Prevention after Esophageal Endoscopic Resection: A Pilot Study.</a> The American Journal of Gastroenterology. 111 (4), 581-583 (2016).</li>
<li>Sakurai, T., Miyazaki, S., Miyata, G., Satomi, S., Hori, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autologous+buccal+keratinocyte+implantation+for+the+prevention+of+stenosis+after+EMR+of+the+esophagus%5BTitle%5D)+AND+%22Gastrointestinal+endoscopy%22%5BJournal%5D)">Autologous buccal keratinocyte implantation for the prevention of stenosis after EMR of the esophagus.</a> Gastrointestinal endoscopy. 66 (1), 167-173 (2007).</li>
<li>Nieponice, A., McGrath, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+extracellular+matrix+scaffold+for+esophageal+stricture+prevention+after+circumferential+EMR%5BTitle%5D)+AND+%22Gastrointestinal+Endoscopy%22%5BJournal%5D)">An extracellular matrix scaffold for esophageal stricture prevention after circumferential EMR.</a> Gastrointestinal Endoscopy. 69 (2), 289-296 (2009).</li>
<li>Honda, M., Hori, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+adipose+tissue-derived+stromal+cells+for+prevention+of+esophageal+stricture+after+circumferential+EMR+in+a+canine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Gastrointestinal+endoscopy%22%5BJournal%5D)">Use of adipose tissue-derived stromal cells for prevention of esophageal stricture after circumferential EMR in a canine model.</a> Gastrointestinal endoscopy. 73 (4), 777-784 (2011).</li>
<li>Barret, M., Pratico, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amniotic+membrane+grafts+for+the+prevention+of+esophageal+stricture+after+circumferential+endoscopic+submucosal+dissection%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Amniotic membrane grafts for the prevention of esophageal stricture after circumferential endoscopic submucosal dissection.</a> PloS One. 9 (7), 100236(2014).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

In dit varken model, de ADSC vel transplantatie was technisch succesvol, en de in vivo PCLE evaluatie toegestaan cel innesteling monitoring. Klinische, endoscopische, radiologische en histologische evaluatie getoond van de werkzaamheid van de endoscopische ADSC vel oesofageale vernauwing voorkomen na langdurig ESD. De endoscopische transplantatie van een ADSC glycerol oplossing die een indigokarmijn kleurstof sheet is een innovatieve aanpak in de regeneratieve geneeskunde. Ohki ...

De behandeling van oppervlakkige oesofageale tumoren veranderd met de ontwikkeling van nieuwe endoscopische technieken. Tegenwoordig endoscopische resectie is de eerste-lijnsbehandeling. Het is inderdaad geassocieerd met een lagere morbiditeit en mortaliteit dan chirurgie met gelijke oncologische resultaten 1, 2, 3. Endoscopische mucosale resectie (EMR) en endoscopische submucosale resectie (ESD) zijn de meest gebruikte technieken. Bij langere oppervlakkige tumor is ESD voorkeur. Vergeleken met EMR, ESD maakt en bloc resectioning, ongeacht de laesie en maat 4, 5, 6. De belangrijkste complicatie van vertraagde ESD oesofageale vernauwing, die meestal optreedt tussen een en twee weken na resectie. Recent gepubliceerde studies hebben aangetoond dat de vorming strictuur houdt verband met degrootte van de resectie. De Japanse Endoscopische Society beveelt het vermijden van ESD maten groter dan ¾ van de slokdarm omtrek, omdat ze worden geassocieerd met vernauwing ontwikkeling in meer dan 90% van de gevallen en zijn verantwoordelijk voor ernstige voeden problemen en grote verslechtering van de kwaliteit van leven. Het voorkomen van slokdarmkanker strictuur blijft uitdagend. Mechanismen betrokken bij de vorming van vernauwing slechts gedeeltelijk bekend. Vernauwing formaties lijkt voort te vloeien uit de vereniging van twee verschillende mechanismen: (1) pro-inflammatoire cellulaire werving en (2) excessieve ontwikkeling fibrose 7. Verscheidene preventieve behandelingen zijn voorgesteld. Echter, de resultaten waren onbevredigend, met weinig voordeel en ernstige bijwerkingen 8, 9. Onlangs heeft een Japans team, Ohki et al. , Voorgesteld om een ​​single-layer cellaag in autologe mondslijmvlies cellen te transplanteren naar de esophageal litteken. Transplantatie werd onmiddellijk na ESD 10, 11. Zij toonden de doeltreffendheid van deze innovatieve aanpak, eerst in een hondenmodel en bij patiënten. Vetweefsel afgeleide stromale cellen (ADSCs) zijn veelbelovend in de regeneratieve geneeskunde. De toepassing ervan op verschillende gebieden heeft aangetoond interessante resultaten, vooral in het wondgenezingsproces. ADSC therapie biedt verschillende voordelen, omdat de cellen eenvoudig geïsoleerd en worden geassocieerd met anti-inflammatoire eigenschappen, lokale immunomodulerende effecten, neovascularisatie inductie en differentiatie vaardigheden in mesenchymale en niet-mesenchymale lijnen 12, 13, 14. In een eerdere studie, het team aangetoond dat de effectiviteit van de dubbele ADSC-sheet endoscopische transplantatie voor oesofageale vernauwing prevention na langdurig EDO in een varkens model 15. In dit artikel worden meldingen van ADSC-sheet bouw en endoscopische transplantatie techniek gepresenteerd.

<table><tbody><tr><td>Transparent endoscopic cap Q180 compatible</td><td>Olympus Optical Co</td><td></td><td></td></tr><tr><td>GIF-Q180 gastroscope&nbsp;</td><td>Olympus Optical Co</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Videoscope System Exera II&nbsp;</td><td>Olympus Optical Co</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Injection needle 18 G</td><td>Olympus Optical Co</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Electrosurgery unit ERBE ICC 350&nbsp;</td><td>ERBE Technology</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Indigo carmin 1%</td><td>Life</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Endoscopic hybrid knife</td><td>Life</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Minisonde Z pCLE green probe</td><td>Mauna Kea Technology</td><td></td><td>Je moet leren hoe je de sonde moet gebruiken. De manipulatie kan moeilijk zijn.</td></tr><tr><td>Fetal bovine serum</td><td>Sigma Aldrich</td><td>12105C</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin</td><td>Sigma Aldrich</td><td>T146</td><td></td></tr><tr><td>Alpha minimum essential medium</td><td>Thermo Fisher</td><td>22561-021</td><td></td></tr><tr><td>Phosphate-Buffered Salines</td><td>Thermo Fisher</td><td>10010-023</td><td></td></tr><tr><td>PKH67 dye kit</td><td>Sigma Aldrich</td><td>Mini67-KT</td><td></td></tr><tr><td>12-well temperature responsive cell culture dish</td><td>Upcell Thermo Scientific</td><td>174900</td><td>Voel de weel met 4 mL standaard mediumcultuur 30 min voor het zaaien van cellen</td></tr><tr><td>Esomeprazole 40 mg&nbsp;</td><td>Biogaran</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Moprhine sulfate 50 mg/mL</td><td>Lavoisier</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Amoxicilline 1 g</td><td>Biogaran</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ketamine 250 mg/5 mL</td><td>Panpharma</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Propofol 10 mg/mL</td><td>Fresenius</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hydrophobic paper</td><td>Carrefour</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

adsc-sheet transplantatie ter voorkoming strictuur na extended slokdarmkanker endoscopische submucosale dissection

ADSC-sheet Transplantation to Prevent Stricture after Extended Esophageal Endoscopic Submucosal Dissection

In de afgelopen jaren, heeft de cel-sheet construct brede interesse in de regeneratieve geneeskunde gestimuleerd, in het bijzonder voor reconstructieve chirurgie procedures. De ontwikkeling van gediversifieerde technologieën combineren vetweefsel afgeleide stromacellen (ADSCs) met verschillende biomaterialen heeft geleid tot de bouw van talrijke soorten weefselengineering substituten, zoals bot, kraakbeen en vetweefsel van knaagdieren, varkens of menselijke ADSCs. Extended slokdarm endoscopische submucosale dissectie (ESD) is verantwoordelijk voor de slokdarm strictuurvorming. Vernauwing preventie blijft uitdagend, zonder efficiënte behandelingen beschikbaar. Vorige studies de effectiviteit van mucosale cel vel transplantatie in een hond model en bij mensen. ADSCs toegeschreven anti-inflammatoire eigenschappen, lokale immuunmodulerende effecten, neovascularisatie inductie en differentiatie vaardigheden in mesenchymale en niet-mesenchymale lineages. Deze originele studie beschrijft de endoscopische transplantation van een ADSC-tissue engineered construct oesofageale vernauwing in een varkens model te voorkomen. De ADSC construct bestond uit twee allogene ADSC bladen lagen op elkaar op een papieren drager membraan. De ADSCs werden gelabeld met de PKH67 fluorofoor to-probe gebaseerde confocale laser endomicroscopy (PCLE) controle mogelijk te maken. Op de dag van transplantatie, een 5-cm en hemi-omtrek ESD bekend oesofageale vernauwing te induceren werd uitgevoerd. Dieren werden onmiddellijk endoscopisch getransplanteerd met 4 ADSC constructen. De volledige hechting van de ADSC constructen werd verkregen na 10 min zachte toepassing. Dieren werden opgeofferd op dag 28. Alle dieren werden met succes getransplanteerd. Transplantatie werd bevestigd op dag 3 met een positieve PCLE evalueren. Vergeleken met getransplanteerde dieren, controle dieren ontwikkelde ernstige vernauwingen, met de belangrijkste fibrotisch weefsel ontwikkeling, vaker voedings- problemen, en verminderde gewichtstoename. In ons model, de transplantatie van allogenic ADSCs, georganiseerd in de dubbele cel vellen, na langere ESD was succesvol en sterk geassocieerd met een lagere oesofageale vernauwing tarief.

De cultuur van ADSCs en de procedure voor de ADSC vel te verkrijgen wordt getoond in figuur 1. Figuur 2 toont de constructie van het implantaat, bestaande uit twee bladen ADSC lagen op elkaar uit papier dragermembraan. ADSCs waren eerder gemerkt met de PKH67 fluorofoor om in vivo graft toezicht met PCLE. Figuur 3 toont de verschillende stappen van uitgebreide slokdarm endoscopische submucosale dissectie, wat resulteert in een 5 ...

Deze studie meldt een succesvolle methode van endoscopische vetweefsel afgeleide stromale cellen (ADSC)-plaat transplantatie voor oesofageale vernauwing preventie na een verlengde endoscopische submucosale dissectie (ESD) in een varkens model.

ADSC-sheet transplantatie ter voorkoming Strictuur na Extended slokdarmkanker Endoscopische Submucosale Dissection

In past years, the cell-sheet construct has spurred wide interest in regenerative medicine, especially for reconstructive surgery procedures. The ...

In de klinische praktijk is het voorkomen van slokdarmstrictuur een belangrijke beperking voor uitgebreide endoscopische resectie van oppervlakkige neoplasie van de slokdarm. Deze video presenteert een ADSC-sheet-transplantatietechniek die dergelijke stricturen voorkomt, waardoor uitgebreide endoscopische resectie mogelijk wordt in een varkensmodel. Deze methode kan een belangrijke vraag in het veld van slokdarmstrictuurpreventie na endoscopische uitgebreide resectie beantwoorden.Het grote voordeel van deze techniek is dat endoscopische ADSC-sheet-transplantatie betekenisvol, effectief en niet tijdrovend is om dergelijke slokdarmstrictuur te voorkomen. Het demonstreren van deze procedure zullen Gabriel Rahmi, een arts uit mijn laboratorium, en ikzelf zijn. Verzamel ongeveer 24 miljoen ADSC's per varken met behulp van standaard celexpansieprocedures en T150-kweekflacons.Verzamel de ADSC's met behulp van 10 milliliter standaard trypsinoplossing per fles. Tel vervolgens de cellen met behulp van een automatische cytometer. Laad 1,5 miljoen cellen in elke put van een 12-puts temperatuurresponsief celkweekschaal.Vul nu elke put aan tot vier milliliter met kweekmedium. Bewaar vervolgens de schalen gedurende 12 uur 's nachts voor de transplantatie op de volgende dag. Op de dag van de transplantatie, los de confluente cellagen in de putjes van de schaal op door ze 30 minuten op kamertemperatuur te incuberen.Na een half uur, pipet zachtjes een ADSC-sheet en leg deze op een hydrofobe papier van 1,5 centimeter diameter in een plastic schaal. Gebruik dit papier als ondersteunende membraan. Wees geduldig en voorzichtig bij het hanteren van de ADSC-sheets.Ze zijn erg kwetsbaar. Pak vervolgens een ADSC-sheet en leg deze voorzichtig op een andere om een dubbellaags constructie te maken. Maak vier dubbele laags constructies per dier.Onder algemene anesthesie, voer een ESD uit op het varken. Gebruik een videogastroscoop en een elektrochirurgie-eenheid. Maak eerst, met behulp van een endoscopisch mes met zachte coagulatie, hemicircumferentiële witte markeringen op 40 tot 45 centimeter dorsaal van de tandboog om een virtuele lesie te creëren.Vervolgens scheidt u de mucosale laag van de spierlaag door glyceroloplossing met indigokarmijnkleurstof in de submucosale laag te injecteren. Maak nu een circumferentiële incisie van de mucosale laag rond de dorsale markeringen, met behulp van een endoscopisch mes met gedwongen coagulatiemodus. Voer vervolgens de submucosale dissectie uit van de proximale incisie tot de distale incisie.Voltooi vervolgens de resectie door ESD, een hemicircumferentiële, vijf centimeter lange slokdarmlitteken die de spierlaag blootlegt. Transplanteer endoscopisch de vier dubbele ADSC-sheetconstructies. Grijp de constructie met endoscopische forceps en bedek deze met een groot transparant endoscopisch kapje om deze tijdens het transport naar de wondplaats te beschermen.Spreid vervolgens het hele oppervlak van de ADSC-sheetconstructie uit over de ulcusbodem. Houd het transplantaat 10 minuten op zijn plaats om een volledige en stabiele aanplant te garanderen. Blijf de ADSC-sheets aanbrengen zodat de vier ongeveer de helft van het gewonde gebied bedekken.Transport kan moeilijk zijn bij een dier onder algemene anesthesie dat ademt en slikt, dus wees voorzichtig om de sheets niet te beschadigen. Na het uitvoeren van de beschreven procedure op verschillende dieren, werd drie dagen later een PCLE-evaluatie uitgevoerd. De positieve resultaten bevestigden het succes van de transplantaties.De follow-up-periode maakte een multimodaal onderzoek mogelijk. In vergelijking met controledieren vertoonde de getransplanteerde diergroep minder frequente voedingsproblemen en een grotere gewichtstoename op dag 28. Endoscopische en radiologische bevindingen aan het einde van de follow-up-periode onthulden één dier uit de getransplanteerde groep dat wel een ernstige slokdarmstrictuur ontwikkelde.Histologische analyse toonde aan dat in vergelijking met de getransplanteerde dieren, de controledieren significante fibrotisch weefsel ontwikkelden. We tonen aan dat een ESD gevolgd door ADSC-sheet-transplantatie kan worden uitgevoerd in ongeveer anderhalf uur. Bij het uitvoeren van deze procedure is het belangrijk om te onthouden dat ADSC-sheets kwetsbaar zijn en voorzichtig moeten worden gehanteerd.Het succes ligt in het nemen van de nodige tijd voor elke stap van de procedure. Na demonstratie, baant deze techniek de weg voor onderzoek dat het veld van cellulaire therapie laat zien om endoscopisch andere spijsverteringsziekten te behandelen.

adsc-sheet-transplantation-to-prevent-stricture-after-extended

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

De voorbereiding en de transplantatie van vetweefsel afgeleid cel van de stam (ASC) bladen op onvoldoende ingehecht colorectal anastomoses in een rat-model wordt gepresenteerd. Deze nieuwe aanvraag blijkt dat ASC bladen colorectal wapendrager lekkage kunnen verminderen.

Transplantatie van stamcellen adipeus weefsel afkomstige blad om lekkage na gedeeltelijke Colectomy in een Rat-Model

We beschrijven een nieuwe intrathoracale oerge-anastomotic techniek die is ontworpen om een anastomose met een grote diameter te creëren en tegelijkertijd de bloedtoevoer van de leiding te handhaven om de incidentie van anastomotic lekken en vernauwingen te minimaliseren. Constructie en oriëntatie van de maagleiding ontworpen om de bovenste maag-darmkanaal functie te optimaliseren wordt ook beschreven.

Een Ivor Lewis slokdarmectomie ontworpen om anastomotic complicaties te minimaliseren en de conduitfunctie te optimaliseren

Slokdarmreconstructie is een uitdagende procedure, en de ontwikkeling van een weefsel-engineered slokdarm die regeneratie van slokdarmslijmvlies en spier mogelijk maakt en die kan worden geïmplanteerd als een kunstmatige graft is noodzakelijk. Hier presenteren we ons protocol om een kunstmatige slokdarm te genereren, inclusief steigerproductie, bioreactorteelt en verschillende chirurgische technieken.

Tissue-Engineered Graft voor circumferential slokdarmreconstructie bij ratten

Hier presenteren we een protocol voor endoscopische vacuümtherapie (EVT) bij de behandeling van anastomoselekken na totale gastrectomie met oesofagojejunostomie.

Endoscopische vacuümtherapie voor de behandeling van anastomoselekkage na totale gastrectomie met oesofagojejunostomie

Dit protocol beschrijft longitudinale incisie endoscopische submucosale excavation, een techniek die is ontworpen om de resectie en defectsluiting van gastrische subepitheliale laesies te vergemakkelijken.

Evaluatie van de effectiviteit van longitudinale incisie voor endoscopische submucosale uitgraving van gastrische subepitheliale laesies

Deze studie beschrijft een gestandaardiseerd PCM-ESD-protocol voor het verwijderen van grote rectale LST's, met als doel de dissectiesnelheid te verbeteren en transmurale perforatie via submucosale tunneling te voorkomen.

De zakcreatieprocedure van endoscopische submucosale dissectie voor grote rectale lateraal verspreidende tumoren

Dit protocol beschrijft een zelfgemaakte multiring-draadmethode om gecontroleerde interne tractie te bieden tijdens gastrische endoscopische submucosale dissectie. De techniek faciliteert effectieve tractie van de mucosale flap in gewenste richtingen en krachten, waardoor een eenvoudige, veilige en kosteneffectieve dissectie mogelijk is.

Zelfgemaakte interne tractiemethode voor endoscopische submucosale dissectie van vroege maagkanker

Overlevenden van acute respiratory distress syndrome (ARDS) en kritieke ziekte ontwikkelen vaak langdurige spierzwakte. Manuele spiertesten (MMT) is een gestandaardiseerd klinisch onderzoek vaak gebruikt om de kracht van de perifere skeletspieren groepen te meten. Deze video demonstreert MMT met de 6-punts Medical Research Council schaal.

Manuele spiertesten: een methode van meten Extremity spierkracht Toegepast op kritisch zieke patiënten

We presenteren hier een rat niertransplantatie model om niet-invasief te beoordelen acute transplantaatafstoting met behulp van positron emissie tomografie met 18F-fluorodeoxyglucose.

Niet-invasieve beeldvorming van acute transplantaatafstoting na Rat niertransplantatie gebruiken<sup&gt; 18</sup&gt; F-FDG PET

We hebben een protocol voor het uitvoeren van gedeeltelijke hepatectomy (PHx) en cel transplantatie via milt in KNIPOOG beschreven. SCID (NOD. CB17-Prkdcscid/j) muizen. In dit protocol wordt een incisie gemaakt bloot en resect de linker kwab van de lever, gevolgd door een andere snede voor intrasplenic transplantatie van cellen.

Intrasplenic transplantatie van hepatocyten na gedeeltelijke Hepatectomy in KNIPOOG. SCID muizen

Leer ADSC-sheet transplantatie ter voorkoming van slokdarmstrictuur na uitgebreide endoscopische submucosale dissectie in een varkensmodel. Deze celtherapie verbetert weefselherstel en vermindert fibrose.

ADSC-sheet transplantatie ter voorkoming Strictuur na Extended slokdarmkanker Endoscopische Submucosale Dissection

Meer video's verkennen