4 juni 2017
Dit werk beschrijft een protocol dat gebruik maakt van een component-opgeloste aanpak om sensibilisatie te bestuderen bij grasspollenallergene in een cohort van patiënten uit zuidelijk China met allergische rhinitis en / of astma.
Het algemene doel van dit experiment is om de gevoeligheid voor verschillende graspollen allergene componenten in Zuid-China te onderzoeken. Dit med kan helpen bij het beantwoorden van sleutelvragen op het gebied van energie over hoe individuen gevoelig worden voor graspollen. Het belangrijkste voordeel van deze techniek is het gebruik van recombinante of gezuiverde allergene moleculen.
Kan ook de voorkomen van verwarrende huiduitslag weergeven, waardoor een betere testnauwkeurigheid wordt geboden. De implicatie van deze techniek is dan om de diagnose van allergie, rhinitis en astma te dwarsbomen. Aangezien veel van deze patiënten gevoelig zijn voor veelvoorkomende detecteerbare allergenen.
Hoewel deze methode inzicht kan geven in allergie luchtwegaandoeningen, kan het ook een toepassing hebben voor andere soorten allergieën zoals voedselallergieën. We hadden voor het eerst het idee voor deze methode toen we of CID voor Chinese vonden. Het demonstreren van de procedure zal Nili Wei zijn, een van mijn lab. Na het ophalen van de serummonsters van in aanmerking komende patiënten uit de biobank.
Schakel de volledig geautomatiseerde immuno-assay-analyzer en de ingebouwde informatie-gegevensbeheercomputer in. Met de primaire stroom aan, schakel het apparaat over naar de systeemvoeding en wacht drie minuten tot de ingebouwde software start. Voeg vervolgens 140 microliter serum toe aan één phiol per allergeen en of allergene component test.
En label elke phiol serum met een identificatienummer uniek voor elke patiënt. Open vanuit de informatiegegevensbeheerinterface het aanvraagvenster om te bevestigen dat serum IGE de gekozen testmethode is. Laad vervolgens de monsterbuizen in de monsterrekken.
En de met barcode gelabelde kwaliteitscontrolebuizen in de kwaliteitscontrolerekken. Selecteer in het menu voor de assayverwerking, laad reagentia om het laden van de monster- en kwaliteitscontrolerekken te voltooien, ontwikkelingsoplossing, conjugaat, calibratiemiddelen, drager, pipettentips, stopoplossing en wasoplossing, volgens de laadlijst. Klik op laad spoel oplossing en laad wasoplossing.
Wanneer alle materialen zijn geladen, selecteer laad en start en klik op oké. Aan het einde van de meting verschijnen de resultaten in de informatiegegevensbeheerinterface. Selecteer de gegevens die moeten worden geanalyseerd en klik op menu, goedkeuren en opslaan als om de serum IGE-meetresultaten als een spreadsheetbestand te exporteren.
Importeer vervolgens het spreadsheetbestand in een geschikt statistisch softwareprogramma. En gebruik een specifieke module voor Spearman's coëfficiënt om de correlaties in gevoeligheid tussen de graspollen en de pollencomponenten te analyseren. Van de 258 respiratoir allergische patiënten die in dit experiment werden onderzocht, testte 22,5 procent positief op Bermuda gras, 13,6 procent op Timothy gras en zeven procent op Hummulus scandens.
Interessant is dat patiënten met allergische rhinitis en of astma een opmerkelijk hogere gevoeligheidsgraad voor Bermuda gras vertoonden dan patiënten met andere allergieën. Onder de patiënten met Bermuda gras klasse één serum IGE-reactiviteit, was de kans op positieve testen voor Cyn d 1, Timothy gras of Humulus scandens allergenen of kruisreactieve koolhydraatdeterminanten lager dan 30 procent. Daarentegen vertoonde patiënten met klasse vier Bermuda gras SIGE-reactiviteit een kans van 67 tot 100 procent op gelijktijdige positiviteit voor deze grascomponenten.
Onder de 35 Timothy gras positieve patiënten, was het meest frequent gedetecteerde allergene component Phl p vier gevolgd door Phl p een. Drie patiënten waren elk positief voor een van Phl p vijf, zes, zeven, 11 of 12. Serum Phl P vier SIGE-niveaus correleerden sterk met totaal Timothy gras allergeen en kruisreactieve koolhydraatdeterminanten SIGE-niveaus.
41,4 procent van Bermuda gras positieve patiënten en 68,6 procent van Timothy gras gesensibiliseerde patiënten waren ook SIGE positief voor kruisreactieve koolhydraatdeterminanten. Met Spearman's rangcorrelatieanalyses die een significante associatie aantoonden in gevoeligheid tussen kruisreactieve koolhydraatdeterminanten en andere kruisallergenen. Na deze procedure zijn de methoden zoals de van immuno-assay-analyzers uit te voeren om aanvullende vragen te beantwoorden over gevoeligheid voor graspollenallergie in het centrum of landelijke studie.
Tijdens het bijwonen van deze procedure, is het belangrijk om te onthouden om te verzekeren dat de juiste en correcte kalibratie in het systeem is ingesteld. En dit is essentieel voor nauwkeurige testresultaten. Na het bekijken van deze video, zou u een goed begrip moeten hebben van hoe u de gevoeligheid van patiënten voor componenten van graspollenallergieën kunt onderzoeken.
Vergeet niet dat het werken met humane serummonsters buitengewoon gevaarlijk kan zijn. En passende voorzorgsmaatregelen tegen pathogene infecties moeten altijd worden genomen bij het uitvoeren van deze procedure.
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's
Deze studie onderzoekt de sensibilisatie voor allergenencomponenten van grassenpollen bij patiënten met allergische rinitis en/of astma in Zuid-China. Door gebruik te maken van een volledig geautomatiseerde immunoassay-analyzer als instrument voor component-opgeloste diagnostiek (CRD), biedt het onderzoek nieuwe inzichten in de prevalentie en patronen van grassenpollensensibilisatie in de regio Groot Guangzhou. De resultaten benadrukken het belang van gestandaardiseerde, componentgebaseerde allergiediagnostiek in regio's waar traditionele methoden onbetrouwbaar kunnen zijn.
Component-opgeloste diagnostiek (CRD) met behulp van volledig geautomatiseerde immunoassay-analyzers maakt een precieze kwantificering van allergeen-specifieke IgE mogelijk, waardoor de beperkingen van tests op basis van ruwe extracten in allergieonderzoek worden weggenomen. Deze benadering verhoogt de voorspellende zekerheid bij het onderscheiden van werkelijke sensibilisatie versus kruisreactiviteit, wat bijdraagt aan een beter onderbouwde target-validatie en risicobeoordeling in translationele allergie-R&D. Gestandaardiseerde, kwantitatieve resultaten vergemakkelijken de vergelijkbaarheid tussen verschillende locaties en de besluitvorming op portfolioniveau voor biomarker-gestuurde studies.
Deze CRD-workflow integreert van vroege ontdekking tot translationeel onderzoek en ondersteunt de identificatie van lead-verbindingen en biomarker-validatie in pijplijnen voor allergie en immunologie.