Name: Toepassing en methodologie van de niet-destructieve 19F tijdsdomein NMR techniek voor het meten van de inhoud in fluor-bevattende geneesmiddelen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-08-22T12:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 24 s
Description: Leer een niet-destructieve 19F tijdsdomein NMR-methode om fluor-bevattende geneesmiddelen in tabletten en capsules te kwantificeren. Deze techniek biedt een sneller alternatief voor conventionele analysemethoden.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit manuscript is gebaseerd op een eerder gepubliceerd artikel5. Herdruk van5, copyright 2015, met toestemming van John Wiley &amp; Sons.
Wij zijn dankbaar aan ons management, Dr. Janet Cheetham, Dr. Francisco Alvarez, Dr. Arwinder Nagi en Dr. David Semin, voor hun steun, interesse en aanmoediging voor het uitvoeren van dit onderzoeksproject, en Dr. Minhui Ma en Mr. Robert Munger, voor het verstrekken van ons met cinacalcet HCl, haar geformuleerde tabletten, en informatie over de drug. We willen ook Dr. Michael Bernstein, Dr. Manuel Perez en Dr Santiago Dominguez bedanken voor hun constructieve steun en de discussies over de ontwikkeling van de huidige commerciële versie van de Mnova-software zoals deze wordt toegepast op de kwantificatie van de TD-NMR-gegevens. Bovendien, tabletten een speciale dank aan Mr. Regnar L. Madarang F.N.P. voor het verstrekken van ons met generieke cipro te voeren onze studies.

Let op: Raadpleeg alle relevante veiligheidsinformatiebladen (VIB) voor het gebruik van alle chemische stoffen. Drug stoffen in het algemeen zijn giftig en moeten worden behandeld met de juiste persoonlijke beschermingsmiddelen (PBM; BV, handschoenen, veiligheidsbril, laboratoriumjas, full-length broek en schoenen van gesloten-teen), met speciale voorzichtig met een gewicht van poeder materialen. Het is aanbevolen om gebruik van een evenwicht in een kap met goede luchtstroom geplaatst om te minimaliseren van het poeder uit stevige materialen verspreiding van uit de omgeving van het saldo.
 Opmerking: de software-instructies zijn specifiek voor RINMR, RI kalibratie en Mnova. Voor de andere instrumenten van de leverancier van de TD-NMR en softwarepakketten, de instructies zal variëren.
 1. bereiding van de monsters voorafgaand aan de 19 F TD-NMR meting <ol><li>wegen de monsters voor kalibratie (poeder drug stof of actieve farmaceutische ingrediënten (API)) in de juiste NMR buizen (2,5 - 3-, 5-, 10-, 18- en 25-mm OD NMR buizen) totdat de lijn van de markering (hoogte van de spoel voor de NMR-sonde), of ongeveer 30 mm hoogte. Bericht dat de hoogte van de sonde afhangen kan. 
	Opmerking: Cinacalcet HCl is een voorbeeld van een API gebruiken voor kalibratie om te bepalen van de inhoud van de drug in cinacalcet commerciële tabletten. Het gewicht hangt af van de dichtheid van het poeder. In het geval van cinacalcet HCl, de gewichten van de API zijn rond 7.2, 3.5, 1.0, 0.3, 0.1 en 0,07 g bij het invullen van de hoogte van de spoel voor het 25-, 18 - 10-, 5-, 3- en 2,5-mm NMR buizen, respectievelijk.</li>
	<li>Wegen de productmonsters geformuleerde drugs (tabletten of capsules) in de juiste NMR buizen tot de lijn van de markering (hoogte van de spoel voor de NMR-sonde), of ongeveer 30 mm in hoogte, zoals hierboven aangegeven. 
	Let op: 25 - of 18-mm buizen zijn geschikt voor grote en middelgrote tabletten/capsules of wanneer genoeg geformuleerd drug-product beschikbaar is. Gebruik voor kleinere tabletten/capsule of wanneer niet genoeg geformuleerd drug-product beschikbaar is maar de signal-to-noise verhouding kan nog steeds voldoende voor meting, 10-mm buizen. Direct meten van de tabletten of verpletteren indien gewenst. Geen waarneming van variaties in hun metingen zijn hier waargenomen zoals vermeld in de discussie.
	<ol><li>Als voorbereiding commerciële tabletten van cinacalcet, wegen ongeveer vijftien 90-mg tabletten in de 25-mm NMR buis (rond 9.2 g), vijftig 30-mg tabletten in de 25-mm NMR buis (rond 9,6 g), tweeëntwintig-30-mg tabletten in de NMR 18-mm buis (rond 4,2 g) , en drieëntwintig 60-mg tabletten in de 25-mm NMR buis (rond 8.8 g).</li>
	</ol></li></ol> 2. Voorbereiding van de NMR-Instrument voor meting instrument <ol><li>Tuning de NMR instrument tot en met 19 F <ol><li>Carry alle metingen op de temperatuur van de permanente magneet in de NMR. Hier, gebruik maken van 40 ° C; geen temperatuurcontrole is beschikbaar voor de 26 mm 19 F NMR sonde gebruikt hier. Alle metingen met een frequentie van 22.0 MHz voor 19 F met behulp van het instrument van de NMR 23-MHz (voor 1 H) verrichten.</li>
		<li>Plaats van de Teflon standaardmonster binnen een 25 of 26 mm NMR buis en leg deze in de sonde binnen de magneet. Toestaan voor de equilibratietijd voor ongeveer 5-10 min en het instrument tot en met 19 F. Selecteer stemmen &#34; Auto O1 &#34; onder de &#34; opdrachten &#34; menu in de software van de RINMR. Herhaal de meting ten minste 3 keer en neem de laatste waarde van de O 1 parameter (frequentie offset).</li>
	</ol></li> <li>Kalibratie van de 19 F 90 graden pols <ol><li>kalibreren van de pols 90 graden voor F-19 met het standaardmonster van Teflon met behulp van de standaard automatische kalibratie reeks beschikbaar in het instrument. Selecteer &#34; Auto P90 &#34; onder de &#34; opdrachten &#34; menu in de software RINMR. 
		Opmerking: Normaal, de 90 graden pols hoeft niet te vaak worden gemeten, tenzij het instrument niet uitvoeren is of de sonde niet is gebruikt voor enige tijd. De waarde van de 90 graden verkregen voor Teflon met de 26-mm 19 F NMR-sonde gebruikt hier 7.05 µs was.</li>
	</ol></li></ol> 3. Meting van de T 1 of de longitudinale ontspanning tijd voor standaard Pure API monsters <ol><li>voor een betere signaal-ruisverhouding, plaatst u de API monster in de buis van de NMR 25-mm binnen de F-19 sonde geïnstalleerd in de magneet voorbereid en laat het equilibreer gedurende ten minste 10 min.</li>
	<li>Meten de tijd T 1 ontspanning, volgens de instructies van de handleiding van de instrument, voor elk API monster met behulp van een standaard experiment voor inversie-recuperatie door de software van RINMR. 
	Opmerking: De aanbevolen experimentele parameters zijn 16 scans verzameld met een Nadruktijd 0.1-µs; 8 gegevenspunten; een 90-graden-puls, als bovengenoemde; en een dode tijd van 10 μs voor de F-19 26-mm sonde. Een matrix van vertragingen van 100 µs 8 s (bijvoorbeeld 100 µs, 500 µs, 10 ms, ms 100, 300 ms, 700 ms, 1 s, 2 s, 5 s, en 8 s) voor drugs met CF 3 en vertragingen van 100 µs tot 20 s (bv 100 µs, 500 µs, 1 ms, 100 ms, 500 ms, 1 s, 5 s, 10 s, 15 s, en 20 s) voor drugs met één groep van fluor aan de aromatische ring gekoppeld zijn aan te bevelen.
	<ol><li>In the RINMR software, load de &#34; invrec.exe &#34; pulse volgorde door het selecteren van &#34; laden &#34; onder &#34; reeks &#34; en te klikken op &#34; Open. &#34; controleren dat de fundamentele parameters hebben de juiste waarden door te klikken op &#34; A &#34; of selecteren &#34; Overname &#34; onder de &#34; Parameters &#34; menu.</li>
		<li>Selecteer &#34; Scripts &#34; onder de &#34; Tools &#34; menu; een venster zal verschijnen. Selecteer de &#34; T1.ris &#34; tab en klik op de groene pijl; een venster zal verschijnen. Selecteer het bestand met de vertraging-lijst met passende vertragingen of maak de lijst na het klikken op &#34; Open. &#34; zodra de lijst vertraging bevredigend is, klik op &#34; OK. &#34; Opmerking: een venster verschijnt een prompt voor de oprichting van een bestand voor alle spectra die zullen worden verzameld in om met het berekenen van de waarde van de T 1. De locatie en de namen van de mappen en bestanden worden aan de gebruiker.</li>
		<li>Klik op &#34; opslaan &#34; voor het instrument om te beginnen het verwerven van de gegevens en het automatisch opslaan van de bestanden voor de vertragingen in de geselecteerde map. 
		Opmerking: De RIMNR-software het T 1 ontspanning curven maken en berekenen van de T 1 ontspanning tijden voor elk geval. Een venster zal verschijnen met de T 1 ontspanning curve en de tijdconstante of T 1 waarde . Hier was de waarde van T1 voor cinacalcet HCl 2.4 s.</li>
	</ol></li></ol> 4. Meten van kalibratie monsters met Pure API <ol><li>voor het meten van de API monsters om te bouwen van de kalibratiekromme <ol><li>een kalibratie monster in de magneet voor een specifieke API. De monsters voor een minimum van 5 min voor de kleinere buizen en 10 min voor de grotere buizen equilibreer.</li>
		<li>Een gratis ophaal inductie verval (FID) of vaste (90 x-90y FID) experiment met de juiste parameters volgens de instructies in de handleiding van het instrument. Laden in de software van de RINMR, de &#34; solid.exe &#34; (of &#34; fid.exe &#34;) pulse volgorde door het selecteren van &#34; laden &#34; onder &#34; reeks &#34; en te klikken op &#34; Open. &#34; Opmerking: de aanbevolen experiment is SOLID voor vaste stoffen die zijn snel-ontspannen met korte T 2 s (transversale ontspanning keer). De aanbevolen experimentele parameters zijn 128 scans verzameld, met een 0.1 µs nadruktijd, 1024 gegevenspunten, een puls van 90 graden (7.05 µs in dit geval, calibrated met Teflon), en een dode tijd van 10 μs voor de 19 F 26-mm sonde. Een recycle vertraging van 7.5 s voor drugs met de groep van de CF-3 en 20 s voor drugs met de F-groep gekoppeld aan een aromatische (als gevolg van langere T 1 ontspanning keer) zijn gebruikt voor de gevallen die hier gepresenteerd op basis van hun T 1 metingen.</li>
		<li>Meten alle monsters voorbereid voor elke API nadat ze zijn geëquilibreerd tot de temperatuur van de magneet voor 5-10 min voor het genereren van de kalibratiekrommen van elk monster API. De gegevens opslaan in een map, een andere naam geven aan elke experimentele run.</li>
		<li>Bereken het percentage van het gewicht van de monsters die zijn gebaseerd op het bedrag in elke buis en gezien de zuiverheid van het monster van de API in de grootste buis.</li>
	</ol></li></ol> 5. Meting van de drug product monsters als tabletten <ol><li>plaats het reeds voorbereide productmonsters drugs (tabletten of capsules) in de magneet te meten ze een geformuleerd op een moment. Het monster gedurende 5 min. voor kleine NMR buizen of voor 10 min voor de monsters in de grotere NMR buizen equilibreer.</li>
	<li>Verwerven hetzelfde NMR experiment (d.w.z., SOLID) met dezelfde voorwaarden wat betreft de geijkte monsters voor elke specifieke API.</li>
</ol> 6. Generatie van de kalibratie buigt met zuivere API monsters en het toevoegen van de gegevens van de drug productmonsters als tabletten in de kalibratiekrommen <ol><li>In deze gevallen, selecteert u de regio van de SOLID experimenteren van 5 tot 300 punten maken de kalibratiekrommen. De gegevens kunnen worden geanalyseerd op drie verschillende manieren, zoals hieronder aangegeven.</li>
	<li>De RI kalibratie software niet openen. Herinner me alle vaste gegevens door te klikken op het symbool van de clip naar de FID of solide bestanden openen vanuit een specifieke API. Voor alle monsters gemeten, voert u de percentages gewicht onder de &#8220; Conc &#8221; kolom en de gewichten onder de &#8220; massa &#8221; kolom. Selecteer de juiste regio (5-300 punten) met behulp van de gemiddelde methode om te bouwen van de ijkcurve (open het pictogram van &#8220; Display NMR-gegevens &#8221; selecteert u het bereik van de punten voor de berekening). Opslaan van de kalibratiekromme. 
	Opmerking: De Cal-kolom geeft het percentage van de drug in de monsters gemeten.</li>
	<li>In the RI kalibratiesoftware met dezelfde geselecteerde regio (5-300 punten), de fit methode gebruiken om te bouwen van de kalibratiekromme. Sla de kalibratiekromme. Volg dezelfde instructies zoals in stap 4.2.2.</li>
	<li>Open de software (bijvoorbeeld Mnova). Sleep alle vaste gegevens van een bepaalde API en voer de percentages van het gewicht van de standaard monsters; handmatige instructies kunt u vinden door te klikken op &#8220; Content &#8221; onder de &#8220; Help &#8221; menu. In de &#8220; Geavanceerd &#8221; menu, select &#8220; tijdsdomein &#8221; en vervolgens &#8220; Quantitation; &#8221; een venster zal verschijnen. Klik op het blauw plus-teken om het gebied van integratie te selecteren. Integreren de juiste regio (5-300 punten) met behulp van de omvang-modus om te bouwen van de kalibratiekromme.</li>
	<li>Sla de kalibratiekromme. Voer in de tabel, de percentages van drugs per monster alleen voor de normen onder de &#8220; concentratie (x) &#8221; kolom en de gewichten voor alle monsters onder de &#8220; massa (m) &#8221; kolom; kalibratie monsters moeten worden in het rood (gecontroleerd). Zorg ervoor dat de &#8220; signaalfunctie &#8221; is &#8220; y = s/m &#8221; (om te normaliseren tot signaal/massa).</li>
	<li>Voor reproduceerbaarheid en herhaalbaarheid, meten elk proef 3 keer op verschillende dagen en bouwen van de kalibratiekromme in beide softwarepakketten. De kalibratie curve opslaan.</li>
</ol> 7. Berekening van de gefluoreerde API Drug gewicht in de geformuleerd Drug Product met behulp van de kalibratiekrommen <ol><li>berekening van het bedrag van de gewicht percentage en de gemiddelde de dosering per tablet/capsule van gefluoreerde API drug in de geformuleerde drug product <ol><li>gebruik het bestand voor de kalibratiekromme van het RI calibratie software en het gemiddelde methode. De NMR-gegevens lezen uit de gemeten tabletten (of capsules) en geef hun gewichten om te bepalen van het percentage van het gewicht van gefluoreerde API in de geformuleerde tabletten of capsules van de ijkcurve. 
		Opmerking: De &#8220; Cal &#8221; kolom geeft het percentage van de drug in de gemeten monsters (kalibratie en commerciële tabletten of onbekenden). Merk op dat de O1-parameter hetzelfde zijn voor de monsters van de kalibratie en de tabletten of capsules voor de RI-kalibratiesoftware moet.</li>
		<li>Gebruiken het bestand voor de kalibratiekromme van het RI-kalibratiesoftware met de fit, methode Lees de NMR-gegevens uit de tabletten (of capsules) gemeten en hun gewichten om te bepalen van het percentage van het gewicht van gefluoreerde API in de geformuleerde tabletten of capsules van de ijkcurve invoeren. Volg dezelfde instructies zoals in stap 5.2.1. Merk op dat de O 1 parameter hetzelfde zijn voor de monsters van de kalibratie en de tabletten of capsules voor de RI-kalibratiesoftware moet.</li>
		<li>Gebruik van het bestand Mnova en sleep de verworven NMR-gegevens voor de geformuleerde API (of meten ze allemaal op dezelfde dag). Volg de instructies in stap 4.2.4. Voer de gewichten om te bepalen van het percentage van het gewicht van de gefluoreerde API in de geformuleerde tabletten of capsules van de ijkcurve. 
		Opmerking: In de tabel, de kalibratie monsters worden in rood (gecontroleerd) en de onbekende of commerciële tabletten/capsules in blauw (selectievakje is uitgeschakeld). De &#8220; concentratie (x) &#8221; kolom verschijnt de berekende waarden voor de commerciële tabletten van onbekende monsters in blauw op basis van de waarden van de kalibratie monsters in het rood. Bericht dat de software niet het gebruik van de dezelfde O1-parameter voor de berekening van het percentage van het gewicht vereist.</li>
		<li>Berekent het bedrag van gefluoreerde drug per tablet of capsule als de gemiddelde waarde van de onderstaande vergelijking (D = dosis van API in mg, W NMR = gewicht percentage van API verkregen van de kalibratiecurve, w = totaalgewicht van geformuleerd product van het gewicht van de geformuleerde drug afkomstig uit de gemeten tabletten of capsules, en N = aantal geformuleerde tabletten of capsules gebruikt voor de meting) en te vergelijken met de waarden die zijn berekend door de software op basis van de kalibratiekrommen: <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/55850/55850eq1.jpg" /></li></ol></li></ol>

<ol><li>El-Yazigi, A., Wahab, F. A., Afrane, B. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/002196739400897I">Stability Study and Content Uniformity of Prochloroperazine in Pharmaceutical Preparations by Liquid Chromatography.</a> J Chromatogr A. 690, 71-76 (1995).</li>
<li>Takeuchi, Y., Yoshida, M., Ito, A., Sunada, H. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1773224709500196">Uniformity of Drug Content During Pharmaceutical Dry Granulation by Roller Compaction and Tableting Processes.</a> J Drug Del Sci Tech. 19 (2), 119-124 (2009).</li>
<li>Toro, I., Dulsat, J. F., Fábregas, J. L., Claramunt, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+Validation+of+a+Fully+Automated+method+of+the+Chromatographic+Determination+of+Content+Uniformity+of+Drug+Tablets%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharm+Biomed+Anal%22%5BJournal%5D)">Development and Validation of a Fully Automated method of the Chromatographic Determination of Content Uniformity of Drug Tablets.</a> J Pharm Biomed Anal. 36, 57-63 (2004).</li>
<li>Shi, Z., Hermiller, J. G., Gunter, T. Z., Zhang, X., Reed, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Novel+Sample+Selection+Strategy+by+Near-Infrared+Spectroscopy-Based+High+Throughput+Tablet+Tester+for+Content+Uniformity+in+Early-Phae+Pharmaceutical+Product+Development%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharm+Sci%22%5BJournal%5D)">A Novel Sample Selection Strategy by Near-Infrared Spectroscopy-Based High Throughput Tablet Tester for Content Uniformity in Early-Phae Pharmaceutical Product Development.</a> J Pharm Sci. 101 (7), 2502-2511 (2012).</li>
<li>Silva Elipe, M. V., et al. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/mrc.4223/abstract">Applications of 19F Time-Domain NMR to Measure Content in Fluorine-Containing Drug Products.</a> Magn Reson Chem. 54 (6), 531-538 (2015).</li>
<li>Wang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorine+in+Pharmaceutical+Industry%3A+Fluorine-Containing+Drugs+Introduced+to+the+Market+in+the+Last+Decade+%282001-2011%29%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Rev%22%5BJournal%5D)">Fluorine in Pharmaceutical Industry: Fluorine-Containing Drugs Introduced to the Market in the Last Decade (2001-2011).</a> Chem Rev. 114, 2432-2506 (2014).</li>
<li>Dolbier, W. R. Jr <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDolbier%2C+WR+%22Guide+to+Fluorine+NMR+for+Organic+Chemists%22">Guide to Fluorine NMR for Organic Chemists</a>. , John Wiley & Sons, Inc. Hoboken, NJ. (2009).</li>
<li>Barman, J. A., Scott, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cinacalcet+Hydrochloride%5BTitle%5D)+AND+%22Drugs%22%5BJournal%5D)">Cinacalcet Hydrochloride.</a> Drugs. 65 (2), 271-282 (2005).</li>
<li>Horn, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Proton-Pump+Inhibitors%3A+Similarities+and+Differences%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Ther%22%5BJournal%5D)">The Proton-Pump Inhibitors: Similarities and Differences.</a> Clin Ther. 22 (3), 266-280 (2000).</li>
<li>LeBel, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ciprofloxacin%3A+Chemistry%2C+Mechanism+of+Action%2C+Resistance%2C+Antimicrobial+Spectrum%2C+Pharmacokinetics%2C+Clinical+Trials%2C+and+Adverse+Reactions%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacotherapy%22%5BJournal%5D)">Ciprofloxacin: Chemistry, Mechanism of Action, Resistance, Antimicrobial Spectrum, Pharmacokinetics, Clinical Trials, and Adverse Reactions.</a> Pharmacotherapy. 8 (1), 3-30 (1988).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Naarmate meer gefluoreerde drugs zijn beschikbaar in de markt, hebben wij een specifieke en eenvoudige methode voor het meten van de gemiddelde drug inhoud van gefluoreerde geneesmiddelen met behulp van lage-veld 19F TD-NMR5ontwikkeld. We testten deze methode op drie commerciële geneesmiddelen: tabletten met cinacalcet HCl, capsules met Lansoprazol en tabletten met ciprofloxacine HCl monohydraat. De voordelen van deze methode zijn de specificiteit als gevolg van het ontbreken van fluor ...

In de farmaceutische industrie moet het gehalte aan drug stoffen in hun eenheid-van-dosering vormen (bijvoorbeeld tabletten en capsules) binnen het bereik op de vordering van de label aan kwaliteitscontrole en prestaties richtsnoeren. Krachtige vloeibare chromatografie (HPLC) is de conventionele analytische techniek gebruikt om te meten de inhoud uniformiteit van drugs in hun samengestelde vormen. De methode is echter lang en destructieve, waarbij de ontbinding van de drug in zijn samengestelde vorm met behulp van de geschikte oplosmiddelen vóór de analyse. Zelfs met automatisering, kan het proces duren 1-3 h per monster, afhankelijk van de ontwikkeling van de passende analytische methode1,2,3. Naast HPLC, is nabij-infrarood (NIR) gebruikt voor hetzelfde doel en als een PAT tool, met het voorbehoud om te eisen dat de chemometric analyse van de gegevens, waardoor de implementatie langdurig en complexere4. Beide technieken zijn destructieve, met de geformuleerde drug weggegooid na analyse.
In dit manuscript, beschrijven we de stapsgewijze protocol van een methodologie die eerder gepubliceerd door onze groep5 voor het meten van de gemiddelde inhoud van gefluoreerde drugs in hun doseringsvormen (bijvoorbeeld tabletten en capsules) met behulp van lage-veld 19F NMR. Door de jaren heen, is het percentage van gefluoreerde drugs op de markt goedgekeurd door wereldwijd regelgevende agentschappen als geformuleerde geneesmiddelen gestegen van 2% in 1970 tot 25% in 20136. Wij vinden daarom dat er een vraag een eenvoudiger maar meer specifieke methode dan de momenteel beschikbare methoden voor de controle op de kwaliteit van de inhoud van gefluoreerde drugs in hun geformuleerde formulieren te ontwikkelen.
Geneesmiddelen met fluor-19 (19F) in hun structuren hebben het voordeel van gemakkelijk worden gedetecteerd door 19F NMR als gevolg van haar 100% overvloed en 83% gevoeligheid ten opzichte van protonen7. Directe meting door 1H TD-NMR is niet nuttig omdat zowel excipiënten en API protonen, en de totale proton signaal uit alle onderdelen van het product van de drug komt, waardoor het onpraktisch voor het meten van de inhoud van de API in geneesmiddelen die met behulp van 1 H TD-NMR. Het meten van de inhoud van de drug van gefluoreerde geneesmiddelen met behulp van 19F TD-NMR heeft dus het voordeel van geen interferentie met hulpstoffen als gevolg van het ontbreken van fluor. Wij hebben gekozen om aan te tonen onze methodologie van het meten van de gemiddelde drug inhoud van gefluoreerde geneesmiddelen, drie commercieel geformuleerde geneesmiddelen met fluor in verschillende dosis bereiken. Figuur 1 toont de structuren van de drugs geselecteerd, waar twee van hen - cinacalcet HCl8 en Lansoprazol9-een trifluormethylgroep (CF3) hebben in hun structuren met doses variërend van 15 tot 90 mg, en de derde een - ciprofloxacine HCl monohydraat10 - bevat een fluor-atoom gekoppeld aan een aromatische ring, met een dosis van 500 mg.
Hier tonen we de methodologie hebben we5 om te kwantificeren van de inhoud van de gemiddelde drug van gefluoreerde geneesmiddelen met behulp van een lage-veld benchtop TD-NMR instrument (23.4 MHz voor 1H en 22.0 MHz voor 19F). Ook vergelijken we twee softwarepakketten (RI kalibratie en Mnova software), die kunnen worden gebruikt om het verslag van de resultaten.

<table><tbody><tr><td>MQC-23</td><td>Oxford Instruments</td><td>52-AM4044</td><td>23.4 MHz voor 1H en 22.0 MHz voor 19F</td></tr><tr><td>26 mm Probe (19F)</td><td>Oxford Instruments</td><td>52-AM4061</td><td>19F NMR probe</td></tr><tr><td>Cinacalcet HCl</td><td>Amgen</td><td>Lot 005002 M</td><td>Zuiverheid 99,8%</td></tr><tr><td>Cinacalcet commerciële tabletten</td><td>Amgen</td><td>Lot 0010021308</td><td>30 mg tabletten</td></tr><tr><td>Cinacalcet commerciële tabletten</td><td>Amgen</td><td>Lot D1026396</td><td>30 mg tabletten</td></tr><tr><td>Cinacalcet commerciële tabletten</td><td>Amgen</td><td>Lot D118714</td><td>30 mg tabletten</td></tr><tr><td>Cinacalcet commerciële tabletten</td><td>Amgen</td><td>Lot D061829</td><td>60 mg tabletten</td></tr><tr><td>Cinacalcet commerciële tabletten</td><td>Amgen</td><td>Lot 00100213</td><td>90 mg tabletten</td></tr><tr><td>Cinacalcet commerciële tabletten</td><td>Amgen</td><td>Lot D064074</td><td>90 mg tabletten</td></tr><tr><td>Cinacalcet commerciële tabletten</td><td>Amgen</td><td>Lot 1026356</td><td>90 mg tabletten</td></tr><tr><td>Lansoprazol</td><td>Fluka</td><td>Lot LRAA1897</td><td>Zuiverheid 99,7%</td></tr><tr><td>Merknaam Lansoprazol</td><td>Novartis</td><td>Lot DV1891</td><td>15 mg capsules</td></tr><tr><td>Generiek Lansoprazol</td><td>SUPERVALUE INC</td><td>Lot 2GE2027</td><td>15 mg capsules</td></tr><tr><td>Ciprofloxacin vrije base</td><td>Fluka</td><td>Lot BCBM7969V</td><td>99,9% zuiverheid</td></tr><tr><td>Ciprofloxacin HCl monohydraat</td><td>Fluka</td><td>Lot P500044</td><td>94% zuiverheid als HCl-zout</td></tr><tr><td>Generiek Cipro</td><td>Pack Pharmaceuticals</td><td>Lot PUB3033</td><td>500 mg tabletten</td></tr><tr><td>25 mm NMR buis</td><td>New Era Enterprises</td><td>NE-25TD-200-FB</td><td></td></tr><tr><td>18 mm NMR buis</td><td>New Era Enterprises</td><td>NE-18TD-200-FB</td><td></td></tr><tr><td>10 mm NMR buis</td><td>New Era Enterprises</td><td>NE-10TD-200-FB</td><td></td></tr><tr><td>5 mm NMR buis</td><td>New Era Enterprises</td><td>NE-HL5-7</td><td></td></tr><tr><td>3 mm NMR buis</td><td>New Era Enterprises</td><td>NE-H3-7</td><td></td></tr><tr><td>2.5 mm NMR buis</td><td>New Era Enterprises</td><td>NE-H5/2.5</td><td></td></tr></tbody></table>

toepassing en methodologie van de niet-destructieve 19f tijdsdomein nmr techniek voor het meten van de inhoud in fluor-bevattende geneesmiddelen

Application and Methodology of the Non-destructive 19F Time-domain NMR Technique to Measure the Content in Fluorine-containing Drug Products

Hier beschrijven we een protocol ontwikkeld door onze fractie die gebruikmaakt van lage-veld fluor-19 (19F) tijdsdomein (TD) nucleaire magnetische resonantie (NMR) voor het meten van de gemiddelde inhoud van gefluoreerde drugs in hun geformuleerde drug product vormen: tabletten of capsules. Deze methode is specifiek voor gefluoreerde drugs omdat het detecteert alleen de inhoud van fluor, interferentie van de excipiënten die geen fluor. De voordelen van het meten van de actieve inhoud van gefluoreerde drugs met behulp van lage-veld 19F TD-NMR versus Hoogveld 19F solid-state (SS) NMR zijn de eenvoud van de methode; de lage kosten; en de niet-destructieve aard van de techniek, met alle monsters terugwinning in intact vormen (bijvoorbeeld poeder, tabletten en capsules), waardoor deze techniek betaalbaar voor elk laboratorium.
Wij hebben de methode met drie gefluoreerde geneesmiddelen beschikbaar op de markt - cinacalcet, Lansoprazol en ciprofloxacine - getest met doses variërend van 15 tot 500 mg. De resultaten van de analyses, afgemeten aan de lage-veld 19F TD-NMR, ondersteund de gerapporteerde etiket voor de gemiddelde drug-inhoud.
Gebaseerd op de eenvoud en de reproduceerbaarheid van de analyse, voorzien wij deze methodologie wordt uitgevoerd in een laboratorium, met inbegrip van productielocaties, als een proces analytische technologie (PAT) instrument in de farmaceutische industrie.

We hebben lage-veld 19F TD-NMR met drie commerciële geneesmiddelen (cinacalcet, Lansoprazol en ciprofloxacine) voor het meten van de gemiddelde drug-inhoud van de gefluoreerde drug producten getest. Figuur 1 toont de structuren van de geteste drugs, weergeven van de locaties van de fluor atomen.
We testten verschillende percelen en doseringsvormen (dat wil zeggen, 30, 60 en 90 mg...

Een eenvoudig en niet-destructieve techniek, die maatregelen het gemiddelde gehalte aan drug stoffen in geformuleerde geneesmiddelen met fluor met behulp van lage-veld fluor-19 (19F) tijdsdomein (TD) nucleaire magnetische resonantie (NMR) wordt hier gepresenteerd. De techniek kan worden toegepast voor de ontwikkeling en productie van drugs in de farmaceutische industrie.

Toepassing en methodologie van de niet-destructieve 19F tijdsdomein NMR techniek voor het meten van de inhoud in fluor-bevattende geneesmiddelen

Here, we describe a protocol developed by our group that uses low-field fluorine-19 (19F) time-domain (TD) nuclear magnetic resonance (NMR) to measure the ...

Het algemene doel van deze methodologie voor nucleaire magnetische resonantie in het tijdsdomein met Fluor 19 bij een laag veld, is het bepalen van het gemiddelde gehalte aan gefluoreerde geneesmiddelen in geformuleerde geneesmiddelenproducten. Dit is een niet-destructieve techniek voor de ontwikkeling en productie van geneesmiddelen in de farmaceutische industrie. Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van kernvragen binnen het veld van de farmaceutica, tijdens het proces van het formuleren van geneesmiddelen en geneesmiddelenproducten.Bepaal de gemiddelde hoeveelheid geneesmiddelen in tabletten en capsules. Het belangrijkste voordeel van deze techniek is dat deze niet-destructief is en sneller verloopt dan conventionele methoden, zoals hogedrukvloeistofchromatografie, bij het meten van de gemiddelde hoeveelheid geneesmiddelen in geneesmiddelenproducten. Weeg de monsters voor kalibratie in de juiste NMR-buizen tot aan de markeringslijn, of tot een hoogte van ongeveer 30 millimeter.Weeg daarnaast de monsters van het geformuleerde geneesmiddelproduct af in de geschikte NMR-buisjes tot aan de markeringslijn of tot een hoogte van ongeveer 30 millimeter. Plaats vervolgens het Teflon-standaardmonster in een NMR-buisje van 25 of 26 millimeter. Plaats het NMR-buisje in de probe binnenin de magneet.Laat de buis vijf tot 10 minuten equilibreren voordat het instrument wordt afgestemd op f 19. Selecteer auto o one onder het commando'smenu in de RINMR-software. Herhaal de meting minstens drie keer.Neem vervolgens de laatste waarde van de o1-parameter. Navigeer naar het opdrachtenmenu in de RINMR-software en selecteer auto p 90 om de 90-gradenpuls voor f 19 te kalibreren met het standaard Teflon-monster, gebruikmakend van de standaard geautomatiseerde kalibratievolgorde van het instrument. Voor een betere signaal-ruisverhouding plaatst u het API-monster, voorbereid in de 25 millimeter NMR-buis, in de f 19-probe die in de magneet is geïnstalleerd en laat u dit ten minste 10 minuten equilibreren.Meet de t1-relaxatietijd voor elk API-monster volgens de instructies in de handleiding van het instrument, met behulp van het standaardexperiment voor inversieherstel uit de RINMR-software. Om de relaxatietijd te meten, navigeert u naar 'sequence' en selecteert u 'load' in de RINMR-software. Selecteer vervolgens de inversieherstel-pulssequentie en klik op 'open'.Controleer of de basisparameters de juiste waarden hebben door op het tabblad te klikken. Selecteer onder het menu tools de optie scripts, waarna er een venster verschijnt. Selecteer vervolgens het tabblad voor t één en klik op de groene pijl.Er verschijnt een ander venster. Selecteer het bestand met de vertragingslijst met de juiste vertragingen. Of maak de lijst aan nadat u op openen heeft geklikt.Zodra de vertragingslijst naar wens is, klikt u op ok. Er verschijnt een venster met een prompt voor het aanmaken van een bestand voor alle spectra die verzameld zullen worden, om de t1-waarde te berekenen. Klik op opslaan zodat het instrument kan beginnen met het verzamelen van de gegevens.Sla de bestanden vervolgens automatisch op in de geselecteerde map. Er verschijnt een venster met de T1-relaxatiecurve en de tijdconstante of T1-waarde. Om de kalibratiecurve op te stellen, plaatst u eerst één kalibratiemonster van een specifieke API in de magneet.Equilibreer de monsters gedurende minimaal vijf minuten voor de kleinere buizen en 10 minuten voor de grotere buizen. Voer een free induction decay- of solid-experiment uit met de juiste parameters, volgens de instructies in de handleiding van het instrument. Laad in het tabblad sequence van de RINMR-software de pulssequentie door de sequentie te selecteren en op open te klikken.Controleer of de basisparameters de juiste waarden hebben. Meet alle monsters, die voor elke API zijn voorbereid, nadat ze vijf tot 10 minuten lang zijn geëquilibreerd naar de temperatuur van de magneet, om de kalibratiecurves voor elk API-monster te genereren. Sla de gegevens op in een map en geef elke experimentele run een unieke naam.Bereken het gewichtspercentage van de monsters, gebaseerd op de hoeveelheid in elke buis. Houd hierbij rekening met de zuiverheid van het API-monster in de grootste buis. Plaats de reeds bereide monsters van het geformuleerde geneesmiddel in de magneet om deze één voor één te meten.Laat de monsters vijf minuten equilibreren voor kleine NMR-buisjes of 10 minuten voor de monsters in de grotere NMR-buisjes. Voer hetzelfde NMR-experiment uit, onder dezelfde condities, als voor de gekalibreerde monsters voor elke API. Open de RI-kalibratiesoftware.Roep alle vaste gegevens op door op het klem-symbool te klikken om de FID- of vaste bestanden van een specifieke API en de bijbehorende geneesmiddelproductmonsters als tabletten te openen. Voer voor alle gemeten monsters de gewichtspercentages in onder de concentratiekolom en de gewichten onder de massakolom. Selecteer de juiste regio en gebruik de gemiddelde methode om de kalibratiecurve op te stellen.Sla de kalibratiecurve op. Selecteer vervolgens het gebied van het vaste experiment van vijf tot 300 punten om de kalibratiecurves te maken. De resultaten van de kalibratie, met gebruik van de gemiddelde methode, verschijnen in tabelvorm.Gebruik als tweede kalibratiemethode de Fit-methode in de RI-kalibratiesoftware om de kalibratiecurve te bouwen met dezelfde geselecteerde regio. Sla de kalibratiecurve op. De resultaten van de kalibratie met gebruik van de Fit-methode worden in tabelvorm weergegeven.Open als derde kalibratiemethode de Mnova-software. Sleep alle vaste data van een specifieke API erin en voer de gewichtsprocenten van de monsters in.Selecteer in het geavanceerde menu tijddomein en vervolgens kwantificering. Er verschijnt een venster. Klik op het blauwe plusteken om het integratiegebied te selecteren.Integreer vervolgens de juiste regio met de magnitudemodus om de kalibratiecurve op te stellen. Sla de kalibratiecurve op. Voer in de tabel de percentages geneesmiddelen per monster in de concentratiekolom alleen in voor de standaarden.En de gewichten voor alle monsters onder de kolom massa. De kalibratiemonsters moeten in het rood staan. Zorg ervoor dat de signaalfunctie y gelijk is aan s gedeeld door m, om het signaal te normaliseren ten opzichte van de massa.Voor reproduceerbaarheid en herhaalbaarheid moet elk monster drie keer op verschillende dagen worden gemeten en moet in beide softwarepakketten een ijklijn worden opgesteld. Zorg ervoor dat de bestanden van de ijklijn worden opgeslagen. Lees de NMR-gegevens van de gemeten monsters uit en voer hun gewichten in om het gewichtspercentage van gefluoreerde API in de geformuleerde tabletten of capsules te bepalen.Gebruik de kalibratiecurves die zijn verkregen uit elk van de drie verschillende kalibratiemethoden. Bereken tot slot de hoeveelheid gefluoreerd geneesmiddel per tablet of capsule als de gemiddelde waarde, met behulp van de vergelijking uit het tekstprotocol. Vergelijk dit met de waarden die door de software zijn berekend op basis van de kalibratiecurves.Hier worden representatieve resultaten getoond van de kalibratiecurve van Cinacalcet HCL, berekend als vrije base en in drievoud gemeten. Hierbij is RI-kalibratiesoftware in de gemiddelde modus gebruikt. Gebruik van de RI-kalibratiesoftware in de Fit-modus resulteert in een vergelijkbare kalibratiecurve van Cinacalcet HCL bij metingen in drievoud.De kalibratiecurve van Cinacalcet HCL in drievoudige metingen, waarbij de gebiedsmethode van de Mnova-software in de magnitudemodus is gebruikt, levert vergelijkbare resultaten op. Hier wordt een tabel met resultaten getoond voor de berekende doses Cinacalcet vrije base in commerciële tabletten. Hierbij zijn de statistieken weergegeven via RI-kalibratiesoftware met gebruik van de gemiddelde- en fit-methoden, evenals de Mnova-software.Zodra deze techniek onder de knie is, kan deze in 15 tot 20 minuten worden uitgevoerd. De kalibratie-monsters kunnen bijvoorbeeld een uur in beslag nemen. Indien dit correct wordt uitgevoerd, hoeft dit slechts eenmaal te gebeuren.Na het bekijken van deze video zou u een goed begrip moeten hebben van hoe u de gemiddelde hoeveelheid gefluoreerde geneesmiddelen in geformuleerde geneesmiddelenproducten kunt kwantificeren met de niet-destructieve techniek van lage-veld Fluorine 19 TD NMR. Vergeet niet dat het werken met geneesmiddelen en NMR-instrumenten uiterst gevaarlijk kan zijn en dat er tijdens het uitvoeren van deze procedure altijd voorzorgsmaatregelen moeten worden genomen, zoals het gebruik van persoonlijke beschermingsmiddelen en het vermijden van metalen voorwerpen in de nabijheid van de magneet.

application-methodology-non-destructive-19f-time-domain-nmr-technique

Research

JoVE Journal

Chemistry

Scheikunde

Een gemakkelijke, een-pot-synthese van...

Microgolf-geassisteerde Een-pot Synthese van N-Succinimidyl-4-[ 18 F] fluorobenzoate ([ 18 F] SFB)

Het volgen van cellen met behulp van MRI heeft opgedaan opmerkelijke aandacht in de afgelopen jaren. Dit protocol beschrijft de etikettering van dendritische cellen met fluor...

Monitoring Dendritische cel-migratie met behulp van<sup&gt; 19</sup&gt; F /<sup&gt; 1</sup&gt; H Magnetic Resonance Imaging

We beschrijven een algemeen protocol voor in vivo cell tracking met MRI in een muismodel met ex vivo gemerkte cellen. Een typische protocol voor mobiele etikettering, beeldaanwinst verwerking en kwantificering is inbegrepen.

In vivo 19 F MRI voor mobiele Tracking

We demonstreren de semi-geautomatiseerde radiochemische synthese van [ 18 F] 3F4AP en kwaliteitscontroles.

Geautomatiseerde Radiochemische Synthese van [<sup&gt; 18</sup&gt; F] 3F4AP: Een nieuwe PET Tracer voor het imiteren van demyeliniserende ziekten

Een roman en een eenvoudige variant van de schudflesmethode werd ontwikkeld voor nauwkeurige lipofiel meting van gefluoreerde verbindingen door 19F NMR spectroscopie.

Een nieuwe eenvoudige methode voor lipofiele (logP) meting met behulp van 19F NMR-spectroscopie

[18F]-fluorodeoxyglucose (FDG) positron emissie tomografie-berekend tomografie is handig voor het glucose metabolisme aan hersenfunctie gerelateerde studie. Hier presenteren we een protocol voor een [18F] FDG tracer set-up en semikwantitatieve beoordeling van de regio-of-interest-analyse voor gerichte hersengebieden klinische verschijnselen bij patiënten met ernstig traumatisch hersenletsel is gekoppeld.

Semi-kwantitatieve beoordeling [18F] FDG Tracer gebruiken bij patiënten met ernstige hersenletsel

De synthese van fluor-18 (18F) gelabelde radiofarmaceutica voor positron emissie tomografie vereist meestal maanden ervaring. Wanneer de siliconen-fluoride acceptor (SiFA) in een radio Tracer wordt verwerkt, is een eenvoudig 18F-labeling protocol mogelijk dat onafhankelijk is van kostbare apparatuur en voorbereidende training, terwijl de precursor hoeveelheid die nodig is en mildere reactie condities worden verminderd.

18 F-labeling van Radiotracers Functionaliseerde met een Siliciumfluoride acceptor (SiFA) voor positron emissie tomografie

Fragmentgebaseerde screening door NMR is een robuuste methode om snel kleine molecuulbinders voor biomacromoleculen (DNA, RNA of eiwitten) te identificeren. Protocollen die op automatisering gebaseerde monstervoorbereiding, NMR-experimenten en acquisitievoorwaarden en analyseworkflows beschrijven, worden gepresenteerd. De techniek maakt een optimale benutting van zowel 1H als 19F NMR-actieve kernen mogelijk voor detectie.

NMR-gebaseerde fragmentscreening in een minimale steekproef maar maximale automatiseringsmodus

Hier beschrijven we de radiosynthese van 1-(2-[18F]Fluoroethyl)-L-tryptofaan, een positronemissietomografiebeeldvormingsmiddel voor het bestuderen van tryptofaanmetabolisme, met behulp van een eenpotstrategie in twee stappen in een radiochemisch synthesesysteem met goede radiochemische opbrengsten, hoge enantiomeerovermaat en hoge betrouwbaarheid.

Radiosynthese van 1-(2-[18F]Fluoroethyl)-L-tryptofaan met behulp van een eenpot, tweestapsprotocol

Een methode voor het screenen van fentanyl-analogen op basis van hun retentietijd, mobiliteit en fragmentatiepatroon van massaspectrometrie.

Fentanyl analoge screening met behulp van LC-TIMS-TOF MS/MS

Leer een niet-destructieve 19F tijdsdomein NMR-methode om fluor-bevattende geneesmiddelen in tabletten en capsules te kwantificeren. Deze techniek biedt een sneller alternatief voor conventionele analysemethoden.

Toepassing en methodologie van de niet-destructieve 19F tijdsdomein NMR techniek voor het meten van de inhoud in fluor-bevattende geneesmiddelen (Video) | JoVE Journal

Toepassing en methodologie van de niet-destructieve ¹⁹F tijdsdomein NMR techniek voor het meten van de inhoud in fluor-bevattende geneesmiddelen

Meer video's verkennen