Name: Een eenvoudige en goedkope Assay voor het meten van Ambulation in muismodellen van spierdystrofie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-12-29T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 54 s
Description: Leer een eenvoudige, goedkope methode om ambulatie te meten in muismodellen van spierdystrofie. Deze niet-invasieve techniek biedt reproduceerbare resultaten voor het evalueren van therapeutische effectiviteit.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Dit werk werd gesteund door subsidies van de National Institutes of Health [R01 AR048179 en R01 HL126204 R.C.W, T32 AR059033 en F32 AR069469to E.M.G] en de spierdystrofie vereniging VS [274143 en 416364 naar R.C.W.].

De hier beschreven methoden werden goedgekeurd door het institutionele Animal Care en gebruik Comité bij de University of California, Los Angeles. Wild-type (C57BL/6J) en mdx muizen (C57Bl/10ScSn achtergrond) werden gekocht van een commerciële bron. MDX: utrophin-Tg muizen waren een geschenk van James Ervasti, met toestemming van Kay Davies, en werden onderhouden op de mdx -achtergrond. Ambulation tests werden uitgevoerd op mannelijke muizen op 6 maanden oud. Muizen werden onderhouden in het Terasaki Life Sciences Vivarium na door de institutionele Animal Care vastgestelde richtsnoeren en gebruik Comité bij de Universiteit van Californië, Los Angeles (goedkeuring #2000-029-43) en goedkeuring voor deze studies werd verleend door de UCLA Animal Welfare Assurance (goedkeuring #A3196-01).
1. voorbereiding van de kamer
<ol>
	<li>Verzamelen van gegevens in een rustige, temperatuur gecontroleerde kamer in een consistente tijd van dag9uitvoeren Voer de tests verblind tot het genotype en de behandeling van de muis wordt getest.</li>
	<li>Aanpassen elk open veld kamer systeem voor deze analyse. Opmerking: In deze studie gebruiken we een goedkoop en gemakkelijk te vervoeren opname kamer opgebouwd uit een grote prullenbak. De arena van het open veld is een lade instellen op een kooi of soortgelijke verhoogde platform.</li>
	<li>Plaats de camera op een gaas boven de kamer opnemen over de volledige arena.</li>
	<li>Reinig de zaal van de opname met een ontsmettingsmiddel voor elk afzonderlijk experiment.</li>
</ol>
2. vooraf oefening Protocol en gegevensverzameling
<ol>
	<li>U kunt desgewenst onmiddellijk voorafgaand aan de opname van de activiteit, daag elke muis met een spier activering protocol. Opmerking: Dit is optioneel maar aanbevolen in experimenten met mdx muizen.<ol>
		<li>Laat de muis greep de pull-bar van een digitale kracht meten en trek voorzichtig terug tot de pull-bar wordt vrijgegeven. Herhaal deze procedure vijfmaal per proef.</li>
		<li>Record piek spanning (N) voor elk afzonderlijk experiment. Opmerking: Naast de uitdaging van een oefening voor de ambulation assay bijeenkomen, de kracht uitgeoefend door het behandelde dier tijdens deze greep kracht test kan worden gebruikt als een extra functionele uitkomst maatregel2,10.</li>
		<li>Vijf totale proeven voor elke muis met 1 min van rust tussen elke proef uitvoeren.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Onmiddellijk na de bepaling van de sterkte greep of andere oefening protocol, plaatst u de muisaanwijzer in de zaal van de activiteit.</li>
	<li>Start de video-opname van alle bewegingen van de muis in de arena van de kamer. Laat de muis om te vrij verkennen voor 6 min.</li>
	<li>Stop de opname op 6 min en de muis terug naar haar kooi.</li>
</ol>
3. video-analyse
<ol>
	<li>U kunt desgewenst voorbereiden video analyse door het verminderen van de framerate. Ter beperking van de framesnelheid voor het bijhouden van de analyse, het volgende protocol gebruiken in een video-editing software (b.v., iMovie of een soortgelijk programma) te decimeren de videoframesnelheid met een factor 2. Opmerking: Afhankelijk van de lengte en de frame rate van de video, het wellicht nuttig om de video framerate vóór de analyse. In deze studie, werd video opgenomen op 30 frames/s (6 min opnemen, ongeveer 10,800 frames totaal).<ol>
		<li>Het laden van de video in de software.</li>
		<li>Selecteer onder het menu 'Speed', ' snelheid: snel ' en zet snelheid naar 2 x.</li>
		<li>Exporteer de gedecimeerd video in MP4-indeling voor het bijhouden van de analyse.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Open de video voor analyse in het softwareprogramma. Stel de kalibratie voor de video-opname met behulp van het hulpmiddel lijn. Teken een lijn langs een kant van de kamer. Klik met de rechtermuisknop op de regel en selecteer "Kalibreren maatregel..." Geef de werkelijke grootte van de kant van de kamer in centimeters.</li>
	<li>Om te beginnen met semi-automatische bijhouden van de muispositie, klik op de 'move'-cursor. Vanaf het eerste frame in de video, klik met de rechtermuisknop op het punt worden bijgehouden; het punt van de tracking is gemarkeerd met een blauwe cirkel. Opmerking: In de huidige studie, de positie van elk dier werd gevolgd door het traceren van de basis van de staart.</li>
	<li>Verder het frame door te klikken op de pijl-rechts op het toetsenbord; het bijhouden van punt moet automatisch worden verplaatst op basis betreffende de positie van de staart base.<ol>
		<li>Als de positie van de tracking is niet afgestemd op het punt van belang in een bepaald frame, handmatig uitlijnen de blauwe cirkel aan de basis van de staart. Opmerking: Afhankelijk van de kwaliteit van de video en de snelheid van de muis, de tracking kan vereisen verschillende niveaus van de input van de gebruiker om de aanpassing aan het punt van belang. Het pad van de muis moet gaan doorheen de cursus van de video.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Wanneer volgen van de volledige video voltooid is, slaat u de video- en tracing-overlay. Exporteer de positionele gegevens van de tracering door het selectievakje 'Exporteren naar werkblad'.</li>
</ol>
4. de gegevensanalyse
<ol>
	<li>De positionele gegevens openen in een spreadsheetprogramma van de software. De software van de analyse van het verkeer meldt dat de X, Y-coördinaat van de positie van de muis in elk frame.</li>
	<li>Wilt berekenen afstand reisde door frame, gebruikt u de volgende vergelijking (waar positie in frame een is x1, y1 en frame twee is x2, y2): 
	<img alt="Equation" src="/files/ftp_upload/56772/56772eq1.jpg"> Opmerking: Cumulatieve afstand na verloop van tijd kan worden berekend door de afgelegde tussen elk frame toe te voegen.</li>
</ol>

<ol><li>Nagaraju, K., Carlson, G., De Luca, A. <a target="_blank" href="http://www.treat-nmd.eu/downloads/file/sops/dmd/MDX/DMD_M.2.1_002.pdf">Behavioral and locomotor measurements using open field animal activity monitoring system.</a> TREAT-NMD SOP Number M2.1.002. 2. 2, (2010).</li>
<li>Tatem, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+and+locomotor+measurements+using+an+open+field+activity+monitoring+system+for+skeletal+muscle+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Behavioral and locomotor measurements using an open field activity monitoring system for skeletal muscle diseases.</a> J Vis Exp. (91), e51785(2014).</li>
<li>Kobayashi, Y. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sarcolemma-localized+nNOS+is+required+to+maintain+activity+after+mild+exercise%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Sarcolemma-localized nNOS is required to maintain activity after mild exercise.</a> Nature. 456 (7221), 511-515 (2008).</li>
<li>Belanto, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microtubule+binding+distinguishes+dystrophin+from+utrophin%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Microtubule binding distinguishes dystrophin from utrophin.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 111 (15), 5723-5728 (2014).</li>
<li>McDonald, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+6-minute+walk+test+in+Duchenne%2FBecker+muscular+dystrophy%3A+longitudinal+observations%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">The 6-minute walk test in Duchenne/Becker muscular dystrophy: longitudinal observations.</a> Muscle Nerve. 42 (6), 966-974 (2010).</li>
<li>Mazzone, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Star+Ambulatory+Assessment%2C+6-minute+walk+test+and+timed+items+in+ambulant+boys+with+Duchenne+muscular+dystrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Neuromuscul+Disord%22%5BJournal%5D)">Star Ambulatory Assessment, 6-minute walk test and timed items in ambulant boys with Duchenne muscular dystrophy.</a> Neuromuscul Disord. 20 (11), 712-716 (2010).</li>
<li>Kobayashi, Y. M., Rader, E. P., Crawford, R. W., Campbell, K. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endpoint+measures+in+the+mdx+mouse+relevant+for+muscular+dystrophy+pre-clinical+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Neuromuscul+Disord%22%5BJournal%5D)">Endpoint measures in the mdx mouse relevant for muscular dystrophy pre-clinical studies.</a> Neuromuscul Disord. 22 (1), 34-42 (2012).</li>
<li>Acosta, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+the+six-minute+walk+test+to+characterize+golden+retriever+muscular+dystrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Neuromuscul+Disord%22%5BJournal%5D)">Use of the six-minute walk test to characterize golden retriever muscular dystrophy.</a> Neuromuscul Disord. 26 (12), 865-872 (2016).</li>
<li>Sousa, N., Almeida, O. F., Wotjak, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+hitchhiker%27s+guide+to+behavioral+analysis+in+laboratory+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">A hitchhiker's guide to behavioral analysis in laboratory rodents.</a> Genes Brain Behav. 5, Suppl 2. 5-24 (2006).</li>
<li>Gibbs, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+levels+of+sarcospan+are+well+tolerated+and+act+as+a+sarcolemmal+stabilizer+to+address+skeletal+muscle+and+pulmonary+dysfunction+in+DMD%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Mol+Genet%22%5BJournal%5D)">High levels of sarcospan are well tolerated and act as a sarcolemmal stabilizer to address skeletal muscle and pulmonary dysfunction in DMD.</a> Hum Mol Genet. 25 (24), 5395-5406 (2016).</li>
<li>Gillis, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multivariate+evaluation+of+the+functional+recovery+obtained+by+the+overexpression+of+utrophin+in+skeletal+muscles+of+the+mdx+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Neuromuscul+Disord%22%5BJournal%5D)">Multivariate evaluation of the functional recovery obtained by the overexpression of utrophin in skeletal muscles of the mdx mouse.</a> Neuromuscul Disord. 12, Suppl 1. S90-S94 (2002).</li>
<li>Tinsley, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+full-length+utrophin+prevents+muscular+dystrophy+in+mdx+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Expression of full-length utrophin prevents muscular dystrophy in mdx mice.</a> Nat Med. 4 (12), 1441-1444 (1998).</li>
<li>Song, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suite+of+clinically+relevant+functional+assays+to+address+therapeutic+efficacy+and+disease+mechanism+in+the+dystrophic+mdx+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Suite of clinically relevant functional assays to address therapeutic efficacy and disease mechanism in the dystrophic mdx mouse.</a> J Appl Physiol. 122 (3), 593-602 (2017).</li>
<li>Bolivar, V. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrasession+and+intersession+habituation+in+mice%3A+from+inbred+strain+variability+to+linkage+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Learn+Mem%22%5BJournal%5D)">Intrasession and intersession habituation in mice: from inbred strain variability to linkage analysis.</a> Neurobiol Learn Mem. 92 (2), 206-214 (2009).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Het open veld assay biedt een effectieve en niet-invasieve manier om te testen motor functie in muismodellen van spier ziekte, en variaties van deze bepaling kunnen dienen als een waardevolle eindpunt maatregel voor pre-klinische studies. Een belangrijke beperking met dit type van test is de hoge kosten en beperkte toegankelijkheid van activiteit bewakingssystemen. In deze studie tonen we een systeem van de goedkope p.a. open veld activiteit die vergelijkbare resultaten aan bestaande commerciële software en apparatuur ku...

Betrouwbare en reproduceerbare metingen van spier functie zijn van cruciaal belang voor de beoordeling van de werkzaamheid van potentiële therapieën voor DMD. DMD is een genetische aandoening veroorzaakt door mutaties in het Dystrofine-gen, leidt tot progressieve spierzwakte, verlies van ambulation, en uiteindelijke Cardiorespiratoire mislukking. De meest gebruikte diermodel van DMD is het Dystrofine-lege mdx -muis. Een batterij van functionele tests opgedoken als routine tests voor de beoordeling van de progressie van de ziekte in de mdx -muis zo goed zoals in soortgelijke dierlijke modellen van andere dystrophie en myopathieën. Veelgebruikte in vivo tests omvatten metingen van de voorpoot grijpkracht, draad, tijd, rotarod maximum, tijd opknoping aan uitputting tijdens loopband uitgevoerd, en motorische activiteit bijhouden. Er is een aanzienlijke inspanning op het gebied op de standaardisering van deze tests, met als doel vermindering van de variabiliteit tussen de preklinische studies en verhogen het translationeel potentieel van therapeutics getest in muizen1,2.
Een belangrijke categorie van preklinische testen is het meten van vrijwillige beweging, een parameter die vaak wordt gewijzigd in lymfkliertest modellen van spierdystrofie. Dit wordt meestal getest door te testen op basis van het open veld Activiteitencontrole, en kan horizontaal (lopen) of verticale (kweek) bewegingen in een loop van minuten of uren2,3,4te evalueren. Een aantal studies is gebleken dat vrijwillige beweging moet worden gewijzigd in mdx muizen, vooral na het sporten, en deze metingen is gebleken te zijn gevoelig voor behandeling en ziekte progressie van de drug. Een belangrijke beperking bij het uitvoeren van deze tests is de behoefte aan gespecialiseerde, hoge kosten apparatuur. Hier, wordt een goedkope methode die tracks muis ambulation met behulp van gemakkelijk beschikbare middelen gepresenteerd.
De 6 minuten lopen afstand is een statistiek die vaak gebruikt als een instrument van de klinische beoordeling bij personen met Duchenne spierdystrofie5,6. Wijzigingen van deze maatregel hebben zijn gebruikt ter beoordeling van de resultaten in diermodellen voor Duchenne, met inbegrip van mdx muizen7 en golden retriever spierdystrofie (GRMD) honden8. In deze studie registreren wij vrijwillige open veld beweging in de 6 minuten direct na een milde oefening uitdaging. Ambulation afstand werd vervolgens berekend op basis van vrije open-source software voor het meten van horizontale beweging na verloop van tijd.
Het belangrijkste voordeel van deze methode is dat de dieren kunnen worden getest in een scala aan instellingen zonder speciale apparatuur of hoge kosten commerciële software voor analyse. Een belangrijk aspect van deze analyse is dat het kan worden uitgevoerd in een omgeving van basic Labor zonder te verplaatsen of muizen uit de vivarium overbrengen in een gespecialiseerde core-faciliteit. Het protocol van de video-tracking hier beschreven kan is geschikt voor de beoordeling van de ambulation gedurende een relatief korte tijd-periode en detecteren activiteit verschillen tussen wild-type en mdx muizen, evenals onthullen functionele verbetering in een redding model van DMD.

<table><tbody><tr><td>Videocamera</td><td>Apple Inc.</td><td>ME553LL/A</td><td>Voor het opnemen van ambulatievideo, iPhone 5S Plus (of gelijkwaardig)</td></tr><tr><td>Kinovea software (versie 0.8.15)</td><td>Kinovea Association</td><td></td><td>Open source video-analysesoftware. Gratis te downloaden, compatibel met pc (versie 0.8.15, www.kinovea.org)</td></tr><tr><td>iMovie (versie 10.0.6)</td><td>Apple Inc.</td><td></td><td>Elke vergelijkbare software kan worden gebruikt om de framesnelheid van video te verlagen (optioneel)</td></tr><tr><td>Roughneck 32 Gallon Black Ronde Vuilnisbak (Open veldkamer)</td><td>Rubbermaid</td><td># 1778013</td><td>Elk open veldkamersysteem kan worden aangepast voor opname. Dit onderzoek gebruikt een opnamekamer gebouwd uit een bak op een platform, op de bodem van een grote vuilnisbak.</td></tr><tr><td>Avant Wit Plastic Bak 15"B x 10"D x 1.45"H (Open veldkamer)</td><td>US Acrylic, LLC</td><td></td><td>Elk open veldkamersysteem kan worden aangepast voor opname. Dit onderzoek gebruikt een opnamekamer gebouwd uit een bak op een platform, op de bodem van een grote vuilnisbak.</td></tr><tr><td>C57BL/6J</td><td>Jackson Laboratory</td><td>#000664</td><td>Mannelijke 6 maanden oude muizen</td></tr><tr><td>C57BL/10ScSn-Dmd/J (mdx)</td><td>Jackson Laboratory</td><td>#001801</td><td>Mannelijke 6 maanden oude muizen</td></tr><tr><td>mdx: utrophin-Tg (fiona)</td><td>Gift van James Ervasti, met toestemming van Kay Davies</td><td></td><td>Mannelijke 6 maanden oude muizen</td></tr></tbody></table>

een eenvoudige en goedkope assay voor het meten van ambulation in muismodellen van spierdystrofie

A Simple and Low-cost Assay for Measuring Ambulation in Mouse Models of Muscular Dystrophy

Het meten van functionele resultaten bij de behandeling van spierdystrofie is een wezenlijk aspect van de preklinische testen. De beoordeling van vrijwillige ambulation in muismodellen is een niet-invasieve en reproduceerbare activiteit-test die is direct analoog aan maatregelen van patiënt ambulation zoals de 6-minuten-test en gerelateerde mobiliteit scores. Vele gemeenschappelijke methoden voor het testen van de muis ambulation snelheid en afstand zijn gebaseerd op het open veldtest, waar het dier vrij verkeer binnen een arena wordt gemeten na verloop van tijd. Een groot nadeel aan deze benadering is dat commerciële software en apparatuur voor hoge resolutie volgen van beweging is duur en mogelijk overbrengen van muizen tot gespecialiseerde faciliteiten voor het testen. Hier beschrijven we een goedkope, video-gebaseerd systeem voor het meten van de muis ambulation dat gebruik maakt van gratis en open-source software. Met behulp van dit protocol, we laten zien dat vrijwillige ambulation in het Dystrofine-lege mdx -muismodel voor Duchenne muscular dystrophy (DMD) is gedaald ten opzichte van de wild-type muis activiteit. In mdx uiting geven aan de utrophin transgenic muizen deze activiteit tekorten niet worden nageleefd en de totale afgelegde afstand is niet te onderscheiden van muizen wild-type. Deze methode is effectief voor het meten van veranderingen in vrijwillige ambulation Dystrofe pathologie is gekoppeld, en biedt een veelzijdig platform dat gemakkelijk kan worden aangepast aan uiteenlopende onderzoek instellingen.

Variaties van het open veld test is gebleken dat een effectieve methode voor het testen van de progressie van de ziekte in modellen van spierdystrofie. Hier tonen we een veelzijdige video tracking methode voor de analyse van tweedimensionale muisbeweging met behulp van gemakkelijk beschikbare opname-apparatuur en open bronsoftware (figuur 1A-B). Consistent met resultaten gemeld uit soortgelijke testen, we laten zien dat m...

Dit protocol beschrijft een flexibele, voordelige systeem voor het meten van de muis ambulation in een open veld activiteit assay. We laten zien dat een bepaling van de 6 minuten durende ambulation op basis van dit systeem een afname van de vrijwillige beweging in mdx muizen detecteert en nauwkeurig verbetering in een spier-specifieke redding van deze dieren onderscheidt.

Een eenvoudige en goedkope Assay voor het meten van Ambulation in muismodellen van spierdystrofie

Measuring functional outcomes in the treatment of muscular dystrophy is an essential aspect of preclinical testing. The assessment of voluntary ambulation ...

Het algemene doel van deze assay is het meten van vrijwillige ambulatie in muismodellen voor spierdystrofie. Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van kernvragen binnen het vakgebied van spierdystrofie over de progressie van spierzwakte in muismodellen voor spierdystrofie en de effectiviteit van potentiële therapeutica. Het belangrijkste voordeel van deze techniek is dat het een niet-invasieve en reproduceerbare meting van de activiteit van het dier biedt die eenvoudig kan worden aangepast aan veel verschillende onderzoekssituaties.Plaats in een rustige, temperatuurgecontroleerde ruimte op een vast tijdstip van de dag een camera op een gaasnet boven de activiteitskamer om opname van de gehele arena mogelijk te maken en reinig de kamer met desinfectiemiddel. Laat de muis vlak voor de activiteitsmeting de poolstang van een digitale krachtmeter vastgrijpen en trek deze voorzichtig naar achteren tot de poolstang wordt losgelaten. Registreer de piekspanning in Newtons voor elke trial.Met één minuut rust tussen de trials. Plaats de muis direct na de grijpkrachtmeting in de kamer en start de video-opname, waarbij de muis vrij mag verkennen. Stop de opname na zes minuten en plaats d

a-simple-low-cost-assay-for-measuring-ambulation-mouse-models

Research

JoVE Journal

Behavior

Gedrag

Spierfunctie metingen bijdragen tot de evaluatie van potentiële therapeutische middelen voor spier pathologie, evenals de bepaling van mechanismen fysiologie van dit weefsel. We zullen aantonen de voorbereiding van de m. extensor digitorum longus en het middenrif spieren voor functionele testen. Protocollen voor isometrische en excentrische contracties zal worden getoond, evenals de verschillen in resultaten tussen dystrofische spieren, wat neerkomt op een pathologische toestand, en wildtype...

Isometrische en Excentrische troepenmacht Beoordeling van skeletspieren Geïsoleerd van muizenmodellen van spierdystrofieën

De ziekte van Parkinson en bewegingsstoornissen in het algemeen, gevoelig en betrouwbaar gedrag assays zijn essentieel voor het testen van nieuwe potentiële geneesmiddelen. We beschrijven hier een beheersbare batterij sensorimotorische tests voor muizen die gevoelig zijn voor verschillende mate van schade aan het nigrostriatale systeem en nuttig voor preklinische studies.

Beoordeling van Sensorimotor Functie in muismodellen van de ziekte van Parkinson

Open veld activiteit niveaus worden gebruikt om de locomotief en gedragsmatige activiteit beoordelen. Dit protocol voorziet in een goed ontworpen, gestandaardiseerd protocol te gebruiken in preklinische studies voor neuromusculaire aandoeningen.

Gedrags-en bewegingsapparaat metingen met behulp van een open veld Activity Monitoring Systeem voor Skeletal Muscle Ziekten

De meting van de geleiding van de zenuwen is een nuttig instrument om te beoordelen Muismodellen van neurodegeneratie maar wel vaak alleen toegepast ter stimulering van de nervus ischiadicus in hindlimbs. Hier beschrijven we een techniek voor het meten van samengestelde spier actiepotentiaal (CMAP) in vivo in de muis voorpoot spieren geïnnerveerd door de plexus brachialis.

In Vivo Elektrofysiologische meting van samengestelde spier actiepotentiaal van de voorpoten in muismodellen van Motor Neuron degeneratie

In deze studie tonen wij het gebruik van kinematische ganganalyse, gebaseerd op het ventrale vliegtuig imaging als u wilt controleren de subtiele veranderingen in motorische coördinatie alsmede de progressie van neurodegeneratie met het bevorderen van leeftijd in muismodellen (bijvoorbeeld endophilin mutant muis lijnen).

Ganganalyse leeftijd-afhankelijke Motor bijzondere waardeverminderingen in muizen met neurodegeneratie

Meting van knaagdier skeletspieren contractiele functie is een nuttig instrument dat kan worden gebruikt voor het bijhouden van de progressie van de ziekte, alsmede de werkzaamheid van de therapeutische interventie. Hier beschrijven we de niet-invasieve, in vivo beoordelingvan de releveurs spieren die na verloop van tijd in de dezelfde muis kan worden herhaald.

Niet-invasieve beoordelingvan releveurs spier functie in muizen

Het protocol van het goedkope bestaande uit voetafdruk analyse en opknoping vak test nadat terughoudendheid stress handig is voor het evalueren van de bewegingsstoornissen van muismodel.

Low-cost Protocol van voetafdruk analyse en opknoping vak Test voor muizen toegepast de terughoudendheid van de chronische Stress

Dit innovatieve apparaat maakt gebruik van Magneto-inertiële sensoren om gang-en activiteitsanalyse in ongecontroleerde omgevingen mogelijk te maken. Momenteel in het kwalificatieproces als een uitkomstmaat in het Europees medisch Agentschap, een van de toepassingen zal zijn om te dienen als een klinisch eindpunt in klinische proeven in neuromusculaire ziekten.

Home-based monitor voor gait en activity analyse

Footprint Analysis is een voordelig alternatief voor gedigitaliseerde gang analyseprogramma's voor onderzoekers die bewegings afwijkingen bij muizen kwantificeren. Door zijn snelheid, eenvoud en longitudinale potentiaal is het ideaal voor het gedragsfenotypen van Muismodellen.

Voordelige Gait-analyse voor Gedragsfenotypen van Muismodellen van neuromusculaire ziekte

Een experimentele pijplijn om het bewegingspatroon van vrij lopende muizen kwantitatief te beschrijven met behulp van de MouseWalker (MW) toolbox wordt geleverd, variërend van initiële video-opnames en tracking tot post-kwantificeringsanalyse. Een dwarslaesiemodel bij muizen wordt gebruikt om het nut van het MW-systeem aan te tonen.

De MouseWalker gebruiken om locomotorische disfunctie te kwantificeren in een muismodel van dwarslaesie

We presenteren een goedkope, markerloze workflow met DeepLabCut om spontane gang en voortbeweging bij vrij bewegende muizen te kwantificeren. Dit protocol integreert single-camera video-opname, markerloze tracking van anatomische herkenningspunten en het extraheren van ruimtelijke temporale locomotorische parameters, waardoor een niet-invasief en toegankelijk kader wordt geboden voor motorische gedragsanalyse zonder gespecialiseerde apparatuur.

Een goedkope, markerloze DeepLabCut-gebaseerde workflow voor spontane loop- en bewegingsanalyse bij vrij bewegende muizen

Leer een eenvoudige, goedkope methode om ambulatie te meten in muismodellen van spierdystrofie. Deze niet-invasieve techniek biedt reproduceerbare resultaten voor het evalueren van therapeutische effectiviteit.

Een eenvoudige en goedkope Assay voor het meten van Ambulation in muismodellen van spierdystrofie

Meer video's verkennen