Cavernous zenuwstimulatie en opname van Intracavernous druk in een Rat

De algemene doelen van deze methode zijn om een vereenvoudigde chirurgische techniek te beschrijven van canuleringstechniek van het peniscrus voor intracaverneuze drukregistratie en de dissectie en isolatie van de caverneuze zenuw voor elektrostimulaties. Dit experimentele protocol kan worden gebruikt om de pathofysiologie van erectiestoornissen te bestuderen en nieuwe therapieën te testen. Het grote voordeel van deze techniek is dat het reproduceerbaar, snel en betrouwbaar is.

Er zijn grote valkuilen aangepakt en geëlimineerd die in deze tutorial zijn beschreven. Hoewel deze methode inzicht kan geven in erectiestoornissen, is de isolatie van het zenuwelektrodencomplex met biocompatibele siliconenlijm toepasbaar voor elektrostimulaties van elke perifere zenuw, waardoor fysiologisch onderzoek van andere organen mogelijk is. Om met deze procedure te beginnen, scheer na het verdoven van het dier de onderste helft van zijn buik en perineum.

Wreef het dier met 70%alcohol en povidonjodium drie keer afwisselend. Plaats daarna de rat op een verwarmd chirurgisch kussen in een liggende positie. Breng zalf op de ogen aan en houd de rat verdofd via een neuskoker met 2,5%isofluraan.

Voer vervolgens de gehele chirurgische procedure uit onder een operatiemicroscoop op een laken. Maak vervolgens een centimeter lange huidincisievlak onder de middenlijn, beginnend op het niveau van de basis van de penis en zich naar beneden uitstrekkend. Gebruik een wattenstaafje om voorzichtig de fascia zijdelings van het scrotum te scheiden.

Na het dissekeren van de fascia, gebruik een paar retractoren om de huidranden en het testikel naar achteren te trekken en de ischiaal tuberositeit te lokaliseren door middel van palpatie met een wattenstaafje. Dissecteer door het vetweefsel mediaal totdat de ischiocavernosus-spier zichtbaar wordt. Gebruik een paar forceps om de spier longitudinaal te scheiden en de tunica albuginea bloot te leggen.

De tunica albuginea zal verschijnen als een felwitte structuur. Na kalibratie van de systeeminstellingen, breng slangen aan door de huid van het perineum, zorg ervoor dat deze parallel loopt aan het peniscrus. Laat vervolgens de lijn op zijn plaats en houd de incisie vochtig met zoutoplossing.

Maak bij deze procedure een twee centimeter lange middenlijnbuikincisievlak door de huid. Maak een bijpassende incisie door de fascia langs de linea alba om de blaas en de prostaat bloot te leggen. Gebruik de retractoren om een goede zichtbaarheid te krijgen.

Gebruik vervolgens wattenstaafjes om de prostaat van het vetweefsel te scheiden. Pas de retractoren aan en voltooi de dissectie totdat u een duidelijke visualisatie van de MPG en CN krijgt die op de dorsale laterale aspect van de prostaat lopen. Na het lokaliseren van de MPG en CN, snijdt u voorzichtig de fascia die de zenuw bedekt twee tot vijf millimeter distaal van de MPG.

Vervolgens verspreidt u het weefsel aan elke kant van de zenuw en eronder om een vier millimeter lang gedeelte vrij te maken en vervolgens een naald onder de zenuw te schuiven. Verhoog de zenuw lichtjes met behulp van de naald om het plaatsen van de haken van de bipolaire elektrode rond de zenuw te vergemakkelijken. Laat een assistent de twee componenten van de siliconenlijm vijf seconden met de punt van een insulinenaad mengen.

Droog de zenuw en breng de lijm aan op het gebied rond de haken en de zenuw. Houd de zenuw verhoogd door ongeveer een minuut lichtjes aan de elektrode te trekken om de lijm te laten drogen. Verwijder vervolgens de retractoren, behalve de retractoren aan de rechterkant om enig trekken of draaien van de elektrode te voorkomen.

Bevochtig vervolgens de blootgestelde organen met zoutoplossing en leg gaas gedrenkt in zoutoplossing over de incisie. Herstel bij deze procedure de zichtbaarheid van de tunica albuginea met behulp van retractoren. Zorg ervoor dat u de retractoren niet aan de ischiocavernosus-spier bevestigt, omdat dit het crus zal vervormen.

Bevestig vervolgens de naald aan PE50-slangwerk en spoel de slang met geheparineerde zoutoplossing voordat u deze in de tunica albuginea introduceert. Houd de tunica albuginea uitgerekt en houd het overliggende spierweefsel distaal van het inbrengpunt met uw dominante hand vast. Houd vervolgens de naald in uw niet-dominante hand en breng deze in het caverneuze lichaam in.

Spuit de slang door om de juiste plaatsing in de caverneuze lichamen zonder lekkage te bevestigen. Het inbrengen van de naald in het caverneuze lichaam voor drukregistratie is een kritisch punt. Bij het inbrengen van de naald in het crus is het belangrijk dat het crus wordt uitgerekt en de naald parallel aan het traject wordt ingebracht.

Spuit de slang door en druk op het crus om de slang te testen. Zorg ervoor dat er geen lekken zijn. Bevestig vervolgens de slang aan de tafel met tape om per ongeluk trekken aan de slang te voorkomen.

Verwijder vervolgens de retractoren. Stel de parameters in op een stimulator en breng stimulatie aan gedurende 50 seconden met minimaal een minuut rust tussen de stimulaties. Deze figuur toont een verminderde eerste respons met een stimulatie van 50 millimeter kwik, gevolgd door de tweede en derde stimulatie van 66 millimeter kwik.

Vervolgens werden de daaropvolgende metingen op het normale niveau van 73 millimeter kwik geregistreerd. Hier wordt de stabiliteit van de resultaten getoond met dit protocol met 10 opeenvolgende stimulaties tussen 75 en 78 millimeter kwik. Deze figuur toont de effectieve anesthesiegebruiken op intracaverneuze druk.

De afname en fluctuatie van de respons bij toenemend isofluraan in vergelijking met de stabiele respons bij 2% in de eerste twee en de laatste drie stimulaties werd waargenomen. De blauwe lijn bovenaan toont de constante hoofdarterige druk. Deze figuur toont het effect van het type anesthesie op intracaverneuze druk.

De initiële stimulaties die onder isofluraan-anesthesie werden uitgevoerd, vertoonden een drukgrootte van 80 millimeter kwik. Nadat fentanyl midazolam werd toegediend, was er een toename van de respons tot 110 millimeter kwik. Deze figuur toont het effect van zuurstoftoediening via