15 juni 2018
Het doel van dit protocol is bedoeld als een dierlijk model van cochleaire implantatie, die kan worden gebruikt om aan te pakken van een veelheid van onderzoeksvragen. Mogelijke toepassingen zijn onder andere de evaluatie van farmaceutische interventies of elektrische stimulatie voor gunstige effecten op de hoorzitting drempels of elektrode impedances.
Het algemene doel van deze chirurgische procedure is om een betrouwbaar en veelzijdig diermodel van cochleair implantaat te bieden met behulp van de cavia. Deze methode kan helpen om belangrijke vragen op het gebied van cochleaire implantaten te beantwoorden, zoals of farmaceutische interventies of nieuw ontwikkelde elektroden gunstige effecten hebben op het behoud van resterend gehoor of op de impedantie van elektroden. Het grote voordeel van de cavia is de snelle toegang tot het relatief grote binnenoor, wat resulteert in een veilig, betrouwbaar en veelzijdig diermodel van cochleair implantaat.
Voor deze procedure is het belangrijk om een chirurgisch microscoop, een boor, een verwarmingsplaat en een pulsoximeter om de experimentator heen te plaatsen voor gemakkelijk gebruik tijdens de operatie. Stel de verwarmingsplaat in op 38 graden Celsius. Volg een steriele techniek.
Draag een hoed, een masker en handschoenen. Leg vervolgens de gesteriliseerde chirurgische instrumenten voor de cochleaire implantatie neer. Bereid vervolgens een 3,5 centimeter lang stuk Teflon geïsoleerde gouddraad voor door voorzichtig drie millimeter isolatie van het ene uiteinde en vijf millimeter isolatie van het andere uiteinde te verwijderen.
Snij vervolgens een tweede stuk gouddraad van 2,5 centimeter lang en verwijder vijf millimeter isolatie van beide uiteinden. Steriliseer vervolgens beide draden met alcohol. Anesthesieer vervolgens een cavia met behulp van een anesthesiecocktail zoals aangegeven in het tekstprotocol.
Scheer vervolgens zijn hoofd en plaats het buikligging op de verwarmingsplaat. Open vervolgens voorzichtig de mond van de cavia met een kleine laryngoscope en verwijder alle voedselresten uit de mondholte met behulp van aspiratie. Plaats vervolgens voorzichtig een maagsonde in de slokdarm door langzaam naar de maag te duwen tot weerstand wordt gevoeld.
Controleer de zuurstofverzadigingsniveaus om zeker te weten dat de sonde niet in de luchtpijp zit. Injecteer vervolgens een mengsel van fysiologische zoutoplossing, 5% glucose en enrofloxacine in de nekvetlaag met behulp van een naald van 23 gauge. Bereid het operatieveld voor door afwisselend povidone-jood en 70% ethanol te gebruiken en wikkel vervolgens het dier in.
Gebruik voor een pijnstiller lidocaine en geef het dier zo nodig opnieuw anesthesie. Begin de operatie met een huidsnede van twee tot drie centimeter, drie tot vijf millimeter achter de oorschelp, met behulp van een scalpel. Gebruik voor het behandelen van bloedingen bipolaire cauterisatie.
Palpeer vervolgens voor de prominentie van de auditieve bulla en gebruik een chirurgisch scalpel nummer 15 of chirurgische schaar om voorzichtig de spieren in het retroauriculair gebied door te snijden. Om de spieren van de bulla te scheiden, duwt u de spieren voorzichtig opzij en gebruikt u een retractor om de volledige lengte van de incisie bloot te leggen voor ongehinderde toegang tot de bulla. Gebruik nu de punt van het scalpel nummer 15 om een gat in de bulla te maken.
Wanneer het bot geperforeerd is, vergroot u het gat zoals nodig is om de middenoorstructuren te inspecteren. Plaats het dier in de inflectiepositie en inspecteer de opening. De basale draai van de cochlea en de ronde venster nis moeten zichtbaar zijn.
Houd de zuurstofniveaus van het dier in de gaten terwijl het in de inflectiepositie ligt. Om verder te gaan, plaatst u het dier weer in buikligging en legt u de vertex bloot met behulp van een rechthoekige incisie. Verwijder vervolgens de uitgesneden huid, snijd het periosteum los en maak het periosteum schoon met behulp van een scalpel.
Maak vervolgens een kleine haak op het drie millimeter blootgestelde uiteinde van de 3,5 centimeter draad. Leid vervolgens het andere uiteinde van de gouddraad subcutaan naar de vertex. Gebruik hiervoor een perifere veneuze katheter van 18 gauge met behulp van een micro forceps.
Gebruik een tweede paar micro forceps om het gehaakte uiteinde van de draad voorzichtig in het middenoor te positioneren. Draai vervolgens het hoofd van het dier om het gebied van de ronde venster nis via de bullostomie te visualiseren en haak de gouddraad aan de beenachtige prominentie met behulp van micro forceps. Houd nu, terwijl u zachte spanning op de gouddraad handhaaft, deze vast aan de schedelrand van de bullostomie met 10 tot 15 microliters cyanoacrylaat dat wordt afgegeven vanuit een naald van 27 gauge.
Basislijnmetingen kunnen nu worden genomen van de gouddraad. Om de elektrode te monteren, plaatst u het dier in buikligging. Gebruik een boor van een millimeter om twee gaten te maken, één millimeter voor de lambda-naad.
Schaad de dura niet. Implanteer vervolgens schroeven in de gaten om de elektrodenconnector vast te zetten. Gebruik nu een perifere veneuze katheter van 18 gauge om de elektrode van de connector naar de bulla te leiden in een weefsellaag zo dicht mogelijk bij de schedel.
Pak vervolgens 0,5 tot 0,7 milliliter half vloeibaar tandheelkundig cement tussen de schroeven met behulp van een spatel en plaats de elektrodenconnector tussen de schroeven. Houd de connector stabiel terwijl het tandheelkundig cement hard wordt. Draai het dier opzij en boren u voorzichtig de cochleostomie een millimeter van het ronde venster af.
Boor met behulp van een diamantboor van 0,5 millimeter op 5000 tpm. Plaats vervolgens voorzichtig de elektrode vier millimeter in de scala tympani. Trek vervolgens de elektrode terug en herhaal de inbrenging.
Breng vervolgens cyanoacrylaat aan om de elektrode te bevestigen. Een stabiele implantatie zal zorgen voor meer gehoordrempelverschuiving. Het is dus belangrijk om de arm die wordt gebruikt om de elektrode in te brengen tegen de tafel te stabiliseren om de kans op ongewenste schokkende bewegingen te minimaliseren.
Sluit vervolgens de bullostomie met ongeveer 0,3 milliliter tandheelkundig cement. En vermijd dat tandheelkundig cement in de bulla terechtkomt. Sluit vervolgens de retroauriculair incisie met behulp van 5-0 absorberbare hechtingen.
Keer vervolgens het die
Dit protocol beschrijft een chirurgische procedure om een betrouwbaar diermodel voor cochleair implanteren bij cavia's te creëren. Het doel is om onderzoek naar farmaceutische interventies en de prestaties van elektroden bij het behoud van gehoordrempels te faciliteren.
Betrouwbare diermodellen zijn essentieel om de risico's van innovaties in cochleaire implantaten te verminderen en om interventies te evalueren die het gehoor behouden en de prestaties van de elektroden optimaliseren. Het model voor cochleaire implantatie bij cavia's maakt systematisch onderzoek mogelijk naar interacties tussen apparaat en weefsel, farmaceutische toediening en elektrode-impedantie, wat de translationele continuïteit ondersteunt van ontdekking tot preklinische validatie. Dit model vormt de basis voor portfoliobeslissingen met betrekking tot gehoorprotheses van de volgende generatie en strategieën voor gehoorbehoud.
Dit caviamodel slaat een brug tussen vroege ontdekking, lead-identificatie en preklinische validatie voor onderzoek naar cochleaire implantaten en gehoorbehoud.