Name: Een cardiopulmonale Bypass herstelmodel zonder transfusie of inotrope agenten bij ratten (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-03-23T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 54 s
Description: Leer een cardiopulmonale bypass herstelmethode bij ratten zonder transfusie of inotrope middelen. Dit model onderzoekt langetermijnorgaancomplicaties en helpt strategieën te ontwikkelen om complicaties bij hartlongchirurgie te voorkomen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Waardering is uitgebreid tot Dr. T. Taki en Dr. M. Funamoto voor hun technische ondersteuning.

Voorafgaand aan het experiment, alle ratten verdient een week om te acclimatiseren. Alle chirurgische ingrepen op dieren moeten worden uitgevoerd volgens de richtsnoeren voor de zorg en het gebruik van proefdieren (www.nap.edu/catalog/5140.html) of andere passende ethische richtsnoeren. Protocollen moeten worden goedgekeurd door het Comité van het welzijn van dieren op de juiste instelling voordat u verdergaat. Alle daaropvolgende procedures moeten worden uitgevoerd onder aseptische condities.
1. voorbereiding van de CPB-Circuit
Opmerking: Draag persoonlijke beschermende uitrusting, zoals handschoenen, brillen, en een schone jas of wegwerp toga.
<ol><li>Set-up van CPB circuit<ol>
<li>Polyvinylchloride buizen verbinden met een veneuze reservoir, vooraf gedefinieerd voor circuit van het CPB, en een gemodificeerde neonatale membraan oxygenator zoals afgebeeld in Figuur 1. Alle verbindingen zijn strak en niet lekt water zorgen.</li>
		<li>Stel een CPB circuit op de roller pomp apparaat volgens de protocollen van de fabrikant.</li>
		<li>Houden van de roller pomp op een in hoogte verstelbare tafel en aanpassen van de tabel hoogte tot 10 cm onder de experimentele desk.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Priming van CPB circuit<ol>
<li>Mix 12 mL hydroxyethyl-zetmeel oplossing met 0,1 mL van heparine en 0,5 mL van 7% natriumbicarbonaat oplossing voor priming CPB circuit.</li>
		<li>Prime het circuit met 11 mL van de instructieoplossing, met de roller van de pomp rustig ronddraaiende. Een 18-gauge ontluchting naald gestoken in het reservoir voor de ontluchting van de lucht.</li>
		<li>Hit de membraan oxygenator meerdere malen aan het deair, met de oxygenator kantelen. Lucht moet volledig worden verborgen om te voorkomen dat de lucht longembolie en onvoldoende zuurstoftoevoer. Tijdens de priming circuit, verwarm het circuit door een elektrische warmte lamp aangezet het reservoir.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. de procedure voor CPB
Opmerking: Het chirurgische gebied en apparaten moeten worden ontsmet door 70% alcohol of een quaternaire ammonium compound vóór gebruik.
<ol><li>Narcose en dierlijke instelling<ol>
<li>Anesthetize van een rat met 3,0% Isofluraan-gemengde lucht inademen in een vaporizer. Stel de rat op een werk-stand en intubate van een 16-gauge canule in de luchtpijp. Volg uw lokale dierenverzorgers-richtsnoeren met betrekking tot analgesie dosering en frequentie (b.v. buprenorfine 0,005 mg/kg s.c.) Opmerking: Ratten moeten worden bij diepe anesthesie en verliezen reflexen. De ademhaling moet ritmische maar niet worden gearresteerd.</li>
		<li>De rat overbrengen op een operatietafel uitgerust met een elektrische verwarming pad. Start de mechanische ventilatie met 8 mL/kg ademhalingsvolume, een respiratoire snelheid van 70 cycli/min, en 30% van geïnspireerd zuurstof breuk gecontroleerd door de zuurstofsensor.</li>
		<li>Het handhaven van de narcose met 1,5-2,0% Isofluraan, en met een extra toediening van ketamine/xylazine bij aanvang van het CPB.</li>
		<li>Monitor de rectale temperatuur met behulp van de rectale sonde. Handhaven normothermic lichaamstemperatuur van 37 ° C door aanpassing van de temperatuur van de warmte pad en plaatsen van het circuit over de warmte lamp.</li>
		<li>Stel de rat in liggende positie en rekken van de vier ledematen door bevestiging met naalden. Bewaken de hartslag door de ECG elektrode naald op de bilaterale schouder en buik links. Plaats van een vochtig gaas of ophthalmic zalf van toepassing op de ogen om te voorkomen dat droogte.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Cannulation<ol>
<li>Na de ontsmetting van het oppervlak van het gehele lichaam door sprayingby scheren spuiten 70% ethanol of een andere antiseptische oplossing, van het haar door een scheermes op de bilaterale inguïnale en rechts cervicale regio. Lokale anesthetica (zoals lidocaïne) moet worden gebruikt alvorens de huid incisie. Opmerking: als alternatief een chirurgische scrub van de incisie-site kan worden gebruikt in plaats van het hele lichaam spuiten van 70% ethanol om te voorkomen dat een daling van de lichaamstemperatuur.</li>
		<li>Incise van de huid (ongeveer 5 mm) op de bilaterale inguïnale Regio'sen rechts cervicale regio door schaar en bot ontleden de weefsels om de juiste belangrijkste femorale slagader bloot te stellen. Scheid zorgvuldig de slagader van de ader en de zenuw in de buurt. Aan het einde van gemeenschappelijke femorale slagader afbinden door zijde en de blootstelling van de 4-0 door spanning.</li>
		<li>Snij de arteriële muur (ongeveer 1 mm) van right admin femorale slagader door micro schaar in loodrechte richting de slagader en zorgvuldig cannulate een 24-gauge intraveneuze katheter uit de incisie tot een diepte van 1 cm voor het toezicht op de systemische arterial druk en analyseren van partiële gasdruk in arterieel bloed.</li>
		<li>Beheren van heparine natrium (500 IU/kg) van de katheter.</li>
		<li>Stappen 2.2.2 en 2.2.3 te cannulate een 24-gauge intraveneuze katheter in de linker gemeenschappelijk femorale slagader als een arteriële infusie-lijn voor de CPB-circuit.</li>
		<li>Een 17-gauge multi opening angiocatheter invoegen met de juiste interne halsslagader en het vooraf in de juiste atrium en de vena cava inferior (IVC). Duw de katheter niet ongeveer zoals het schip kan gemakkelijk breken. De katheter verbinden met het CPB circuit voor veneuze drainage.</li>
		<li>Dekking van elke gecanuleerde regio met een vochtig gaas om verontreiniging te voorkomen.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. procedure tijdens CPB
<ol><li>Leveren van 100% zuurstof gas aan de oxygenator op 0.8 L/min tijdens CPB en afnemen van de respiratoire rate tot 30 cycli/min. De arteriële zuurstof gedeeltelijke druk is een vereiste van 200 tot 400 mmHg.</li>
	<li>Aan het begin van het CPB, verhogen de temperatuur instelling voor de pad van de warmte aan de maximum 42 ° C, ter beperking van de onmiddellijke daling van de lichaamstemperatuur na CPB inleiding. Aanpassen van de temperatuur van de instelling tot 37 ° C wanneer de lichaamstemperatuur keert terug naar 36 ° C.</li>
	<li>Zorgvuldig de CPB-stroom start en houd een oogje op het volume van het bloed in het reservoir. Een lege reservoir kan lucht longembolie veroorzaken. Als het volume van het bloed in het reservoir afneemt, verlaagt u het pompdebiet door de hoogte van de tabel aan te passen of te wijzigen van de positie van de drainage katheter. Zet de veneuze drainage katheter, die gemakkelijk leiden perforatie van de juiste atrium en/of aritmie tot kan niet opnieuw.</li>
	<li>Verhogen en houden het pompdebiet 100 mL/kg/min, terwijl de gemiddelde bloeddruk wordt gehandhaafd op 70 mmHg. Wanneer de juiste bloeddruk wordt gehandhaafd, is een klein volume van ten minste 1 mL in het reservoir aanvaardbaar. Als er minder dan 1 mL van het bloed in het reservoir, kan het een longembolie lucht in organen veroorzaken.</li>
	<li>Als de bloeddruk instabiel is, 2-3 mL van de instructieoplossing aan het circuit (het kan bloedarmoede veroorzaken na het CPB) toevoegen.</li>
</ol>4. procedure na CPB
<ol><li>Klem de veneuze drainage buis en verwijder deze uit het circuit. Infundeer het resterende bloed in het circuit geleidelijk met de slagader te handhaven van de bloeddruk.</li>
	<li>De hogere luchtwegen waarde aan 70 cycli/min.</li>
	<li>Verwijder de veneuze drainage katheter en de linker arteriële katheter en afbinden van het vaartuig in de proximale en distale site.</li>
	<li>Verwijder de arteriële lijn uit de juiste femorale slagader 60 min na het einde van het CPB.</li>
	<li>Elke wond met zoutoplossing schoon en sluit de wond met hechtingen.</li>
	<li>De narcose en extubate de buis intratracheale eindigen na het controleren van de spontane ademhaling van het dier.</li>
	<li>Verwarmde steriele isotone vloeistoffen beheren en gebruiken van een warmte-mat en elektrische warmte lamp de dieren om warm te houden. Controleer de voorwaarden van het dier vaak tot herstel van de verdoving. Respiratoire ondersteuning wanneer nodig. Opmerking: Zodra het dier begint met bewegen, de warmtebron moet worden verwijderd uit deel van de kooi zodat het dier om te kiezen van de warme of koele kant.</li>
	<li>Houd het dier afgezien van het gezelschap van andere dieren tot de ademhaling volledig terugkrijgt. Terug het dier niet aan de onderneming tot volledig herstel.</li>
	<li>Controleer de inname van voedsel en water na het herstel van anesthesie en verlening van voldoende nutritionele ondersteuning. Analgetica beheren en controleren op tekenen van ongemak of pijn.</li>
</ol>

<ol><li>Gibbon, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+a+mechanical+heart+and+lung+apparatus+to+cardiac+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Minn+Med%22%5BJournal%5D)">Application of a mechanical heart and lung apparatus to cardiac surgery.</a> Minn Med. 37 (3), 171-185 (1954).</li>
<li>Apostolakis, E., Filos, K. S., Koletsis, E., Dougenis, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+dysfunction+following+cardiopulmonary+bypass%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cardiac+Surg%22%5BJournal%5D)">Lung dysfunction following cardiopulmonary bypass.</a> J Cardiac Surg. 25 (1), 47-55 (2010).</li>
<li>Popovic, P., Horecky, J., Popovic, V. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Instrumental+responses+in+rats+after+hypothermic+cardiopulmonary+by-pass%5BTitle%5D)+AND+%22P+Soc+Exp+Biol+Med%22%5BJournal%5D)">Instrumental responses in rats after hypothermic cardiopulmonary by-pass.</a> P Soc Exp Biol Med. 126 (1), 225-228 (1967).</li>
<li>Fabre, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+recovery+model+of+partial+cardiopulmonary+bypass+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Perfusion%22%5BJournal%5D)">A recovery model of partial cardiopulmonary bypass in the rat.</a> Perfusion. 16 (3), 215-220 (2001).</li>
<li>Hirao, S., Masumoto, H., Minatoya, K. <a target="_blank" href="https://www.clinicsinsurgery.com/pdfs_folder/cis-v2-id1509.pdf">Rat cardiopulmonary bypass models to Investigate multi-organ injury.</a> Clin Surg. 2, 1-6 (2017).</li>
<li>Jungwirth, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurologic+outcome+after+cardiopulmonary+bypass+with+deep+hypothermic+circulatory+arrest+in+rats%3A+description+of+a+new+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thorac+Cardiov+Sur%22%5BJournal%5D)">Neurologic outcome after cardiopulmonary bypass with deep hypothermic circulatory arrest in rats: description of a new model.</a> J Thorac Cardiov Sur. 131 (4), 805-812 (2006).</li>
<li>de Lange, F., Yoshitani, K., Podgoreanu, M. V., Grocott, H. P., Mackensen, G. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+survival+model+of+cardioplegic+arrest+and+cardiopulmonary+bypass+in+rats%3A+a+methodology+paper%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cardiothorac+Surg%22%5BJournal%5D)">A novel survival model of cardioplegic arrest and cardiopulmonary bypass in rats: a methodology paper.</a> J Cardiothorac Surg. 3, 51(2008).</li>
<li>Peters, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+experimental+model+of+myocardial+infarction+and+controlled+reperfusion+using+a+miniaturized+cardiopulmonary+bypass+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Interact+Cardiovasc+Th%22%5BJournal%5D)">An experimental model of myocardial infarction and controlled reperfusion using a miniaturized cardiopulmonary bypass in rats.</a> Interact Cardiovasc Th. 19 (4), 561-564 (2014).</li>
<li>Engels, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+cardiopulmonary+bypass+with+deep+hypothermic+circulatory+arrest+rat+model+for+the+investigation+of+the+systemic+inflammation+response+and+induced+organ+damage%5BTitle%5D)+AND+%22J+Inflamm%22%5BJournal%5D)">A cardiopulmonary bypass with deep hypothermic circulatory arrest rat model for the investigation of the systemic inflammation response and induced organ damage.</a> J Inflamm. 11 (26), (2014).</li>
<li>Pinto, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+extracellular+isoform+of+superoxide+dismutase+has+a+significant+impact+on+cardiovascular+ischaemia+and+reperfusion+injury+during+cardiopulmonary+bypass%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Cardio-Thorac%22%5BJournal%5D)">The extracellular isoform of superoxide dismutase has a significant impact on cardiovascular ischaemia and reperfusion injury during cardiopulmonary bypass.</a> Eur J Cardio-Thorac. 50 (6), 1035-1044 (2016).</li>
<li>Zhang, Z., Wu, Y., Zhao, Y., Xiao, X., Liu, J., Zhou, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+changes+in+HMGB1+levels+correlate+with+inflammatory+responses+during+cardiopulmonary+bypass%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Ther+Med%22%5BJournal%5D)">Dynamic changes in HMGB1 levels correlate with inflammatory responses during cardiopulmonary bypass.</a> Exp Ther Med. 5 (5), 1523-1527 (2013).</li>
<li>Kohno, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+serum+high-mobility+group+box+1+protein+elevation+on+oxygenation+impairment+after+thoracic+aortic+aneurysm+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+Vessels%22%5BJournal%5D)">Impact of serum high-mobility group box 1 protein elevation on oxygenation impairment after thoracic aortic aneurysm repair.</a> Heart Vessels. 26 (3), 306-312 (2011).</li>
<li>Tseng, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+serum+biomarkers+and+clinical+factors+on+intensive+care+unit+mortality+and+6-month+outcome+in+relatively+healthy+patients+with+severe+pneumonia+and+acute+respiratory+distress+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Dis+Markers%22%5BJournal%5D)">Impact of serum biomarkers and clinical factors on intensive care unit mortality and 6-month outcome in relatively healthy patients with severe pneumonia and acute respiratory distress syndrome.</a> Dis Markers. 2014, (2014).</li>
<li>Paparella, D., Yau, T. M., Young, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiopulmonary+bypass+induced+inflammation%3A+pathophysiology+and+treatment.+An+update%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Cardio-Thorac%22%5BJournal%5D)">Cardiopulmonary bypass induced inflammation: pathophysiology and treatment. An update.</a> Eur J Cardio-Thorac. 21 (2), 232-244 (2002).</li>
<li>Hirao, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recombinant+human+soluble+thrombomodulin+prevents+acute+lung+injury+in+a+rat+cardiopulmonary+bypass+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thorac+Cardiov+Sur%22%5BJournal%5D)">Recombinant human soluble thrombomodulin prevents acute lung injury in a rat cardiopulmonary bypass model.</a> J Thorac Cardiov Sur. , In Press. (2017).</li>
<li>Yamazaki, S., Inamori, S., Nakatani, T., Suga, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activated+protein+C+attenuates+cardiopulmonary+bypass-induced+acute+lung+injury+through+the+regulation+of+neutrophil+activation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thorac+Cardiov+Sur%22%5BJournal%5D)">Activated protein C attenuates cardiopulmonary bypass-induced acute lung injury through the regulation of neutrophil activation.</a> J Thorac Cardiov Sur. 141 (5), 1246-1252 (2011).</li>
<li>Wang, C. T., Zhang, L., Wu, H. W., Wei, L., Xu, B., Li, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Doxycycline+attenuates+acute+lung+injury+following+cardiopulmonary+bypass%3A+involvement+of+matrix+metalloproteinases%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Clin+Exp+Patho%22%5BJournal%5D)">Doxycycline attenuates acute lung injury following cardiopulmonary bypass: involvement of matrix metalloproteinases.</a> Int J Clin Exp Patho. 7 (11), 7460-7468 (2014).</li>
<li>Liu, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Curcumin+attenuates+cardiopulmonary+bypass-induced+lung+oxidative+damage+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cardiovasc+Pharm+T%22%5BJournal%5D)">Curcumin attenuates cardiopulmonary bypass-induced lung oxidative damage in rats.</a> J Cardiovasc Pharm T. 17 (4), 395-402 (2012).</li>
<li>Taki, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fetal+mesenchymal+stem+cells+ameliorate+acute+lung+injury+in+a+rat+cardiopulmonary+bypass+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thorac+Cardiov+S%22%5BJournal%5D)">Fetal mesenchymal stem cells ameliorate acute lung injury in a rat cardiopulmonary bypass model.</a> J Thorac Cardiov S. 153 (3), 726-734 (2017).</li>
<li>Zhu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+a+novel+rat+model+without+blood+priming+during+normothermic+cardiopulmonary+bypass%5BTitle%5D)+AND+%22Perfusion%22%5BJournal%5D)">Establishment of a novel rat model without blood priming during normothermic cardiopulmonary bypass.</a> Perfusion. 29, 63-69 (2014).</li>
<li>Inoue, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deep+anesthesia+worsens+outcome+of+rats+with+inflammatory+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Inflamm+Res%22%5BJournal%5D)">Deep anesthesia worsens outcome of rats with inflammatory responses.</a> Inflamm Res. 65 (7), 563-571 (2016).</li>
<li>Bradfield, J. F., Schachtman, T. R., McLaughlin, R. M., Steffen, E. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+and+physiologic+effects+of+inapparent+wound+infection+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim+Sci%22%5BJournal%5D)">Behavioral and physiologic effects of inapparent wound infection in rats.</a> Lab Anim Sci. 42 (6), 572-578 (1992).</li>
</ol>

Alle auteurs hebben niets te verstrekken met betrekking tot de commerciële ondersteuning.

In dit model rat CPB de serum- en longkanker expressie niveaus van inflammatoire cytokines en HMGB-1, een belangrijke transcriptiefactor regulering van de inflammatoire reacties, dramatisch toegenomen na CPB. Vorige klinische studies is gebleken dat de afscheiding van het serum van HMGB-1-niveau is verheven in patiënten die een cardiovasculaire chirurgie11, en de piek serum HMGB-1 niveau tijdens CPB werd geassocieerd met meer ernstige systemische inflammatoire respons syndroom en longkanker oxygen...

In 1953, Dr. John H. Gibbon Jr. uitgevoerd met succes de eerste Cardiale Heelkunde met CPB-1en werd het vervolgens een essentiële modaliteit in cardiovasculaire chirurgie. Terwijl de technieken en apparaten aanzienlijk verfijnd zijn, multi organ complicaties aan CPB gerelateerde nog steeds het resultaat van cardiovasculaire chirurgie in gevaar brengen, en postoperatieve morbiditeit en mortaliteit2kunnen beïnvloeden. CPB-gerelateerde orgel schade wordt veroorzaakt door de activering van het immuunsysteem en synthese van proinflammatoire cytokines, compliment activering en productie van zuurstof vrije radicalen2. De pathofysiologie, echter heeft niet zijn volledig opgehelderd.
Dierlijke modellen Recapitulerend het klinische gebruik van CPB inschakelen de verduidelijking van de pathofysiologische processen tijdens en na de CPB; Dit kan het vergemakkelijken van pre-klinische studies bij de ontwikkeling van strategieën om deze complicaties te vermijden. Sinds Popovic et al. eerst gemeld een rat CPB model in 19673, rat CPB modellen hebben verfijnd, en hebben geleidelijk de plaats ingenomen van groot-dier modellen te wijten aan de grotere kosteneffectiviteit, handige experimentele processen en een overvloed van testmethoden in genetische en eiwitniveaus. Bovendien kunnen ingeteelde ratten genetisch identiek, vermindering van de mogelijke biologische vooroordelen.
Fabre et al. eerst een herstelmodel waardoor de studie van de lange termijn meerdere orgel gevolgen van CPB4tot stand gebracht. De voordelen van dit eenvoudige voortbestaan model zijn de flexibiliteit (CPB stroom en duur), stabiele vitale toestand en reproduceerbaarheid in systemische ontstekingen. Rat CPB modellen zijn cruciaal voor het onderzoek van therapeutische strategieën die gericht zijn op het voorkomen van meerdere orgel blessures tijdens CPB5, geworden en verschillende modellen voor het simuleren van de klinische situaties tijdens CPB zijn onlangs ontwikkeld. De Lange et al. een hartstilstand model, die kan worden gebruikt voor het karakteriseren van de enzymatische, genetische en histologische reacties aan myocardiale letsel7gerelateerde ontwikkeld. Peters et al. geregeld myocardiaal infarct en gecontroleerde reperfusie met behulp van een verkleinde CPB-model voor het analyseren van hart disfunction via de focal ischemie en reperfusie letsel8. Jungwirth et al. eerst een diep hypothermic bloedsomloop arrestatie (DHCA)-model, dat de globale ischemie en reperfusie schade door DHCA en ondersteunt potentiële neuroprotectieve strategieën6 verhelderen kantot stand gebracht. Studies met DHCA onderzoeken de invloed van hypothermie, reperfusie en/of hemolyse geactiveerd signalering gebeurtenissen9. Diepe hypothermie invloed kan zijn op de activering en de inactivatie van verschillende enzymen en trajecten en de mechanismen blijven onbekend10. Aan de andere kant, moeten hartstilstand modellen of hart ischemie modellen worden gebruikt om te onderzoeken ischemie en reperfusie hart schade. Deze verschillende rat CPB modellen die zeer menselijke CPB recapituleren kunnen onthullen aan CPB gerelateerde ziekteprocessen en helpen verzachten CPB-gerelateerde complicaties.
Dit protocol demonstreert een eenvoudig model van het CPB zonder transfusie of inotrope agenten in een rat. Dit model zorgt voor de studie van lange termijn meerdere orgel gevolgen van het CPB.

<table><tbody><tr><td>Rodent Ventilator 7025</td><td>Ugo Basile</td><td>7025</td><td>Ventilator</td></tr><tr><td>OxiQuant B</td><td>ENVITEC</td><td>46-00-0023</td><td>Zuurstof Sensor</td></tr><tr><td>CMA 450 Temperatuurregelaar</td><td>CMA</td><td>8003759</td><td>Temperatuurregelaar</td></tr><tr><td>CMA 450 Verwarmingspad</td><td>CMA</td><td>8003763</td><td></td></tr><tr><td>CMA 450 Rectale Sonde</td><td>CMA</td><td>8003761</td><td></td></tr><tr><td>DIN(8) naar Wegwerp BP Transducer</td><td>ADInstruments</td><td>MLAC06</td><td></td></tr><tr><td>Wegwerp BP Transducer</td><td>ADInstruments</td><td>MLT0670</td><td></td></tr><tr><td>IX-214 Data Recorder</td><td>iWorx Systems</td><td>IWX-214</td><td>versterker</td></tr><tr><td>LabScribe software</td><td>iWorx Systems</td><td></td><td>software</td></tr><tr><td>Roller pomp</td><td>Furue Science</td><td>Model RP-VT</td><td>pomp</td></tr><tr><td>Happy Cath</td><td>Medikit</td><td>EB 19G 4HCLs PP</td><td>17-gauge multiorifice angiocatheter</td></tr><tr><td>SURFLO ETFE I.V. Catheter</td><td>Terumo</td><td>SR-OX2419CA</td><td>24-gauge angiocatheter</td></tr><tr><td>Oxygenator</td><td>Mera</td><td>HPO-002</td><td></td></tr><tr><td>CPB circuit</td><td>Mera</td><td>op maat gemaakt</td><td></td></tr><tr><td>Hespander vloeistofoplossing</td><td>Fresenius Kabi</td><td>3319547A4035</td><td>Hydroxyethylzetmeel</td></tr></tbody></table>

een cardiopulmonale bypass herstelmodel zonder transfusie of inotrope agenten bij ratten

A Recovery Cardiopulmonary Bypass Model Without Transfusion or Inotropic Agents in Rats

Cardiopulmonale bypass (CPB) is onmisbaar in de cardiovasculaire chirurgie. Ondanks de dramatische elegantie van de CPB techniek en apparaten, multi organ complicaties gerelateerd aan langdurige CPB nog compromissen van de uitkomst van cardiovasculaire chirurgie en postoperatieve morbiditeit en mortaliteit kan verergeren. Diermodellen Recapitulerend het klinische gebruik van CPB kunnen de verduidelijking van de pathofysiologische processen die zich tijdens CPB voordoen en vergemakkelijken van pre-klinische studies voor de ontwikkeling van strategieën te beschermen tegen deze complicaties. Rat CPB modellen zijn voordelig vanwege hun grotere kosteneffectiviteit, handige experimentele processen overvloedig testmethoden op de genetische of eiwitniveaus en genetische consistentie. Ze kunnen worden gebruikt voor het onderzoeken van de activering van het immuunsysteem en de synthese van proinflammatoire cytokines, compliment activering en productie van zuurstof vrije radicalen. De rat modellen hebben verfijnd en hebben geleidelijk de plaats ingenomen van groot-dierlijke modellen. Hier beschrijven we een eenvoudig model van het CPB zonder transfusie en/of inotrope agenten in een rat. Dit herstelmodel kan de studie van de lange termijn meerdere orgel gevolgen van het CPB.

Figuur 1 toont de gehele CPB-circuit. De fysiologische variabelen in dit model worden weergegeven in Figuur 2, en rectale temperatuur opnemen, bedoel arteriële bloeddruk en hartslag. Figuur 3 toont de gasanalyses arteriële bloed tijdens CPB, met inbegrip van gedeeltelijke druk van arteriële zuurstof, gedeeltelijke druk van arteriële CO2-hematocriet, basis overmaat, serum expressie van kalium, en het ...

Hier presenteren we een protocol om te beschrijven van een eenvoudige herstelmodel voor cardiopulmonale bypass zonder transfusie of inotrope agenten in een rat. Dit model kunnen de studie van de lange termijn meerdere orgel gevolgen van cardiopulmonale bypass.

Een cardiopulmonale Bypass herstelmodel zonder transfusie of inotrope agenten bij ratten

Cardiopulmonary bypass (CPB) is indispensable in cardiovascular surgery. Despite the dramatic refinement of CPB technique and devices, multi-organ ...

Het algemene doel van deze procedure is om meerdere orgaancomplicaties gerelateerd aan cardiopulmonale bypass bij een knaagdiermodel te onderzoeken zonder het gebruik van transfusie of inotrope middelen. Deze methode voor CPB in een klein dier kan helpen bij het verbeteren van belangrijke operaties in de cardiovasculaire cellulaire voeding. Uiteindelijk zal het gebruik van deze techniek helpen bij het ontwikkelen van strategieën om bescherming te bieden tegen complicaties die worden aangetroffen bij cardiopulmonale bypass-operaties.Stel eerst de cardiopulmonaire bypass-circuit op, verbind de polyvinylchloride buizen met de veneuze reservoir die vooraf ontworpen is voor de CPB-circuit en verbind de buizen met een gemodificeerde neonatale membraanoxygenator. Zorg er vervolgens voor dat alle verbindingen strak zitten en niet lekken. Vervolgens, op een in hoogte verstelbare tafel, bevestig de circuit aan een rolpomp.Stel vervolgens de hoogte van de tafel in op 10 centimeter onder het vlak van het experiment. Prime nu de circuit met 11 milliliter van de prime-oplossing en laat de pomproler zachtjes gaan draaien. Plaats vervolgens een 18 gauge ventilatie-naald in het reservoir en verwarm de circuit met een lichtlamp die over het reservoir is geplaatst.Kanteel vervolgens de membraanoxygenator en activeer deze meerdere keren om de lijn te ontlucht. Deze stap is essentieel om luchtembolieën en onvoldoende oxygenatie te voorkomen. Na het anesthesieren en intuberen van de rat, breng het over naar een operatietafel uitgerust met een elektrische verwarmingsmat.Een ademhalingssnelheid van 70 cycli per minuut en met 30% van geïnspireerd zuurstof. Bewaak het zuurstofniveau met behulp van de zuurstofsensor. Om de anesthesie te onderhouden, geef 1,5 tot 2% isofluraange en toedien pentobarbital bij het begin van CPB.Stel vervolgens een rectale temperatuursensor in en houd een normale thermische lichaamstemperatuur door de temperatuur van de verwarmingsmat aan te passen en door de circuit met een lamp te verwarmen. Bewaak vervolgens de hartslag met behulp van een ECG die aan de bilaterale schouder en de linkerbuik is bevestigd. Plaats nu vochtgaas op het gezicht van de rat om de ogen te bedekken.Scherp vervolgens het haar over de bilaterale inguinale regio en de rechter cervicale regio. Desinfecteer vervolgens de huid met behulp van drie afwisselende scrubs van 70% ethanol en betadine of chloorhexidine. De rat is nu klaar om te worden gecannuleerd.Begin de operatie door een vijf millimeter snede te maken in de bilaterale inguinale regio en de rechter cervicale regio met behulp van schaar. Vervolgens dissecteer de weefsels op een platte manier om de rechter hoofdslagader bloot te leggen. Scheid vervolgens voorzichtig de slagader van de ader en zenuw.Ligatuur vervolgens het uiteinde van de gemeenschappelijke liesslagader met behulp van 4-0 zijden naald. Maak vervolgens een millimeter loodrechte insnijding in de rechter liesslagader en cannuleer deze voorzichtig met behulp van een 24 gauge intraveneuze katheter tot een diepte van één centimeter. Gebruik deze katheter om de systemische arteriële druk te bewaken en de gasgedeeltelijke druk in arterieel bloed te analyseren.Toedien vervolgens heparine-natrium met behulp van de katheter. Herhaal dit proces om de linker gemeenschappelijke liesslagader te cannuleren, en gebruik deze canule als arteriële infusielijn voor de CPB-circuit. Voer vervolgens een 17 gauge multi-orificiële angiocatheter in de rechter interne halsslagader en breng deze in de rechter atrium en inferieure vena cava.Wees voorzichtig, want de vaten kunnen gemakkelijk scheuren. Verbind vervolgens de angiocatheter met de CPB-circuit voor veneuze drainage. Bedek ten slotte elk gecannuleerde gebied met vochtig gaas om besmetting te voorkomen.Het dier is nu klaar voor CPB. Voordat u begint met CPB, begint u met het leveren van 100% zuurstofgas aan de oxygenator met 0,8 liter per minuut en verlaag de ademhalingssnelheid tot 30 cycli per minuut. Houd de arteriële zuurstofdruk tussen 200 en 400 millimeter kwik.Verhoog vervolgens de temperatuur van de verwarmingsmat tot 42 graden Celsius om de directe daling van de lichaamstemperatuur na het begin van CPB te verminderen. Start nu voorzichtig de CPB-stroom en houd het volume bloed in het reservoir in de gaten. Een leeg reservoir kan een luchtembolie veroorzaken, dus pas de pompstroom aan door de tafelhoogte aan te passen.Verplaats de veneuze drainagekatheter niet om de stroomsnelheid te veranderen. Beweging van deze katheter kan het atrium perforeren of een aritmie veroorzaken. Verhoog vervolgens de pompstroom tot 100 milliliter per kilogram per minuut.Houd nu de gemiddelde bloeddruk op 70 millimeter kwik. Wanneer de bloeddruk stabiel is, is een klein volume van één milliliter bloed in het reservoir acceptabel. Minder kan een luchtembolie veroorzaken.Als de bloeddruk niet stabiliseert, voeg twee tot drie milliliter prime-oplossing toe aan de circuit. Wanneer de lichaamstemperatuur weer normaal is, verlaag de temperatuur van de verwarmingsmat tot 37 graden Celsius. Nadat de CPB is voltooid, klem de veneuze drainagebuis en verwijder deze uit de circuit.Infundeer vervolgens geleidelijk het resterende bloed in de circuit naar de slagader om de bloeddruk te handhaven. Verhoog vervolgens de ademhalingssnelheid naar 70 cycli per minuut. Verwijder vervolgens de veneuze drainagekatheter en de linker arteriële katheter.Ligatuur vervolgens het vat in de proximale en distale locatie. Verwijder vervolgens de arteriële lijn van de rechter liesslagader. Reinig vervolgens elke wond met zoutoplossing en sluit ze met hechtingen.Zodra de spontane ademhaling begint, beëindig de anesthesie en verwijder de intratracheale buis. Toedien vervolgens verwarmde steriele isotone vloeistoffen en gebruik een verwarmingsmat en elektrische lichtlamp om het dier warm te houden totdat het herstelt van de anesthesie. Bekijk het dier zorgvuldig en bied zo nodig ademhalingsondersteuning.Arteriële bloedgasanalyses tijdens CPB omvatten de gedeelte

a-recovery-cardiopulmonary-bypass-model-without-transfusion-or

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie en Infectie

Dit artikel beschrijft een rattenmodel van elektrisch geïnduceerde ventrikelfibrillatie en reanimatie door borstcompressie, ventilatie en toediening van elektrische schokken die een episode van plotselinge hartstilstand en conventionele cardiopulmonale reanimatie simuleert. Het model maakt het mogelijk om inzichten te verzamelen over de pathofysiologie van hartstilstand en het verkennen van nieuwe reanimatiestrategieën.

Een Rat Model van ventriculaire fibrillatie en Reanimatie door conventionele Closed-borst Techniek

Dit document wordt beschreven hoe u cardiopulmonale bypass bij muizen. Dit nieuwe model zal het vergemakkelijken van het onderzoek in de moleculaire mechanismen die betrokken zijn bij orgel schade.

Cardiopulmonale Bypass in een muismodel: een nieuwe benadering

Dit protocol toont een eenvoudige en flexibele aanpak voor de evaluatie van nieuwe conditionerings agenten of-strategieën om de haalbaarheid van cardiale donatie na het overlijden van de bloedsomloop te verhogen.

Pre-klinisch model van cardiale donatie na circulatie dood

Hier presenteren we optimalisaties voor een longtransplantatiemodel bij ratten die dienen om de resultaten te verbeteren. We bieden een maattabel voor manchetten op basis van lichaamsgewicht, een meetstrategie om de 4eintercostale ruimte te bepalen en methoden voor wondsluiting en BAL (bronchoalveolaire lavage) vloeistof- en weefselverzameling.

Een rattenlongtransplantatiemodel van warme ischemie / reperfusieletsel: optimalisaties om de resultaten te verbeteren

De huidige studie demonstreert een zeer reproduceerbaar diermodel van acute regionale myocardischemie en reperfusieletsel bij konijnen met behulp van een linker mini-thoracotomie voor overlevingsgevallen of een middellijnsternotomie voor niet-overlevingsgevallen.

Model van ischemie en reperfusieletsel bij konijnen

Deze studie toont een reproduceerbare heterotope abdominale harttransplantatietechniek bij ratten die beginners kunnen leren en uitvoeren. Bovendien wordt een nieuw aorta-regurgitatiemodel bij ratten gegenereerd door heterotope abdominale harttransplantatie uit te voeren en de aortaklep van de donor te beschadigen met behulp van een geleidedraad na het oogsten.

Gemodificeerde heterotope abdominale harttransplantatie en een nieuw aorta-regurgitatiemodel bij ratten

Hier presenteren we een beoordelingsprotocol van een heterotopisch geïmplanteerd hart na normotherm ex situ behoud in het rattenmodel.

Rattenmodel van Normothermische ex-situ perfuseerde heterotope harttransplantatie

Dit protocol beschrijft een neonataal varkensmodel van cardiopulmonale bypass (CPB), met bloedsomloop en hartstilstand als hulpmiddel voor het bestuderen van ernstige hersenbeschadiging en andere complicaties secundair aan CPB.

Pediatrisch diermodel van extracorporale cardiopulmonale reanimatie na langdurige circulatiestilstand

We beschrijven een ex vivo geïsoleerd werkend rattenhartprotocol om strategieën voor het behoud van donorharten te testen. Dit artikel beschrijft het protocol voor gebruik bij statische koude opslag van knaagdierdonorharten; Het protocol kan echter ook worden gebruikt voor donorharten die zijn verkregen na donatie na dood van de bloedsomloop en hersendood.

Een geïsoleerd werkend rattenhartmodel gebruiken om strategieën voor het behoud van donorharten te testen

Hier beschrijven we de orthotope rat achterste ledematen transplantatie procedure, die lijkt te zijn de gouden...

Orthotope Hind-Limb Transplantatie bij ratten

Leer een cardiopulmonale bypass herstelmethode bij ratten zonder transfusie of inotrope middelen. Dit model onderzoekt langetermijnorgaancomplicaties en helpt strategieën te ontwikkelen om complicaties bij hartlongchirurgie te voorkomen.

Een cardiopulmonale Bypass herstelmodel zonder transfusie of inotrope agenten bij ratten

Meer video's verkennen