Een nieuwe methode voor het induceren van een depressie-achtige werking in ratten

Het algemene doel van dit model is om depressiebesmetting bij ratten vast te stellen. Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van belangrijke vragen op het gebied van gedrag, zoals het werkingsmechanisme, preventie, inperking en behandeling van besmettelijke depressie. Het grote voordeel van deze techniek is dat dit een nieuw model is voor het vaststellen van besmettelijke depressie.

De implicaties van deze techniek strekken zich uit naar de therapie van depressie omdat er op dit moment geen bestaand formaat is voor het bestuderen van besmettelijke depressie. Selecteer voor de experimentele procedure mannelijke Sprague Dawley-ratten zonder duidelijke pathologie, elk met een gewicht tussen de 300 en 350 gram. Huis drie ratten per kooi met voer en water ad libitum beschikbaar.

Laat minimaal twee weken adaptatie toe op een cyclus van 12 uur licht en duisternis. Test voorafgaand aan het begin van het experiment alle ratten op het voorkomen van depressieachtig gedrag met behulp van een sucrose-voorkeurtest van drie dagen. Om dit te doen, plaats de ratten in individuele kooien in dezelfde kamer als de huisvesting tijdens de duisterniscyclus.

Plaats een fles van 100 milliliter 1% sucrose-oplossing in elke kooi gedurende 24 uur en laat aanpassing toe. Verwijder na 24 uur de flessen en ontneem de ratten voedsel en water gedurende 12 uur. Na 12 uur plaatst u twee flessen, één met 100 milliliter 1% sucrose-oplossing en de andere met 100 milliliter leidingwater in elke kooi gedurende vier uur.

Na vier uur, noteer het volume in milliliter van de geconsumeerde sucrose-oplossing en water en bereken de affiniteit voor sucrose-voorkeur zoals getoond. Elimineer ratten die positief testen op depressie, elimineer vervolgens ratten die in dezelfde kooien waren gehuisvest als de depressieve ratten. Sluit indien nodig extra ratten willekeurig uit om de laatste groepen te creëren.

Label de ratten met genummerde stickers. Om depressie te induceren, onderwerp de 60 ratten in de groep die aan chronische onvoorspelbare stress is blootgesteld, aan twee van de volgende zeven stressoren. Gebruik in willekeurige volgorde gedurende vijf opeenvolgende weken één stressor overdag en de andere 's nachts.

Huis de ratten in grotere groepen door zes ratten in plaats van de gebruikelijke drie per kooi te plaatsen gedurende 18 uur. Plaats de ratten in een kooi die 45 graden is gekanteld langs de verticale as gedurende drie uur. Ontneem de ratten gedurende 18 uur voedsel.

Ontneem de ratten gedurende 18 uur water en laat ze na een uur blootgesteld worden aan lege waterflessen. Plaats de ratten gedurende acht uur in een kooi met nat bed tijdens de nachtcyclus. Stel de ratten gedurende 24 uur bloot aan continu licht in een omgekeerde licht-duisterniscyclus twee keer per week.

Plaats de ratten gedurende vijf minuten in een hete omgeving ingesteld op 40 graden Celsius tijdens de nachtcyclus. Bevestig na blootstelling aan de twee gekozen stressoren de ontwikkeling van depressie door de sucrose-voorkeurtest uit te voeren. Plaats eerst twee CUS-blootgestelde ratten per kooi in 30 verschillende kooien.

Voeg vervolgens één rat uit de depressiebesmettingsgroep toe aan elke kooi die twee CUS-blootgestelde ratten bevat en laat co-habitatie gedurende vijf weken onder standaardvoorwaarden toe. Onderwerp na vijf weken co-habitatie alle groepen aan de sucrose-voorkeur-, open veld- en gedwongen zwemtests. Reinig het apparaat met 5% alcohol voorafgaand aan de introductie van elk dier.

Plaats de rat in de hoek van het open veld met de rug naar de muur. Neem het gedrag van de rat gedurende vijf minuten op met een videocamera. Analyseer post-opnames van de totale afgelegde afstand, snelheid in het centrale deel van het veld en tijd doorgebracht in het centrale deel van het veld.

Voor habituatie plaats de rat in een glazen cilinder met water op kamertemperatuur voor een zwemsessie van 15 minuten. Verwijder de rat uit de cilinder, droog af met papieren handdoeken en plaats in een warme kooi gedurende 15 minuten voordat de rat naar de thuiskooi wordt teruggeplaatst. Op de volgende dag neemt u een zwemsessie van vijf minuten op videoband en analyseert u de opnames op immobiliteit, klimmen en ontlasting.

Nadat ratten gedurende vijf weken aan CUS waren blootgesteld voor de inductie van depressie en vervolgens gezonde ratten gedurende nog eens vijf weken aan de CUS-blootgestelde ratten waren blootgesteld, vertoonden beide groepen ratten aan het einde depressieachtig gedrag zoals blijkt uit een verminderde voorkeur voor sucrose. In de open veldtest hadden ratten in zowel de CUS-blootgestelde als de depressiebesmettingsgroepen verminderde totale afstanden afgelegd en verminderde gemiddelde snelheden in vergelijking met de controlegroep. De tijd die de ratten uit de controlegroep in de twee experimentele groepen in het centrum van het open veld doorbrachten, was niet significant verschillend.

Zowel CUS-blootgestelde als depressiebesmettingsratten vertoonden verlengde immobiliteit na de gedwongen zwemtest. Echter, een significant verlengde tijd van inactiviteit werd alleen geregistreerd in de CUS-blootgestelde groep in vergelijking met de controlegroep. In een andere onderzochte gedwongen zwemtestparameter, klijtijd, vertoonden beide groepen CUS-blootgestelde en besmettingsdepressie-ratten zeer beperkte klimeigenschappen in vergelijking met de controlegroep.

De beoordeling van de ontlastingssnelheid resulteerde in de registratie van hoge hoeveelheden uitwerpselen voor beide experimentele groepen in vergelijking met de controle. Bij het uitvoeren van deze procedure is het belangrijk om van tevoren te plannen voor de willekeurige rotatie van stressoren tijdens het chronische onvoorspelbare stressmodel vanwege het hoge manuele arbeidsverbruik. Volgens deze procedure kunnen andere tests zoals elevated plus maze of spiegeltest worden uitgevoerd om de gedragsveranderingen na de depressie verder te onderzoeken.